CST4在哈萨克族食管鳞状细胞癌中的表达及意义.pdf

年 月第 卷 第 期基础医学与临床 收稿日期：修回日期：基金项目：国家自然科学基金（）；省部共建国家重点实验室开放课题（）通信作者（）：文章编号：（）临床研究 在哈萨克族食管鳞状细胞癌中的表达及意义伊尔夏提图尔宏，张海平，卡吾力居买，李子垚，张力为，伊地力斯阿吾提，新疆医科大学第一附属医院 胸外科，新疆 乌鲁木齐；新疆医科大学 省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室，新疆 乌鲁木齐 摘要：目的 探究半胱氨酸蛋白酶抑制剂（）在哈萨克族食管鳞状细胞癌（）中的表达情况及临床意义。方法 收集 年至 年于新疆医科大学第一附属医院 例接受手术治疗的哈萨克族食管鳞状细胞癌患者的新鲜组织标本及石蜡包埋的组织标本。用 及免疫组化法检测食管癌组织与对应癌旁组织中 的表达。用检验分析 表达与患者临床病理资料之间的关系。用单因素及多因素分析 表达与患者术后生存期的关系。结果 在食管癌组织中的表达量明显高于对应癌旁组织（）。蛋白在食管癌组织中的表达率（，）明显高于对应癌旁组织（，）（，）。表达与淋巴结转移（）和 分期（）有关，高表达者淋巴结转移率更高，肿瘤 分期更晚。单因素生存分析发现，表达水平（）、肿瘤浸润深度（）和 分期（）均与患者生存率相关。进一步行多因素生存分析发现，表达水平（）、肿瘤浸润深度（）是影响哈萨克族食管鳞状细胞癌患者预后的独立危险因素。结论 基因的表达可能与哈萨克族食管鳞癌的发生、进展及预后有关。的表达可作为食管鳞癌患者病情及预后评估的指标。关键词：食管鳞状细胞癌；哈萨克族；半胱氨酸蛋白酶抑制剂；免疫组织化学中图分类号：文献标志码：，；，：（）（）（）伊尔夏提图尔宏 在哈萨克族食管鳞状细胞癌中的表达及意义 （）（，）（，）（，）（）（）（），（）（）（）（），：；食管癌（，）是常见的恶性肿瘤之一，其发病率位列世界第 位，死亡率位列世界第 位。东亚地区食管癌的发病率及死亡率最高，其中中国每年新发病例数就占全球新发病例数的 一 半 之 多，而 食 管 鳞 状 细 胞 癌（，）是中国食管癌的主要病理类型。新疆维吾尔自治区为中国食管癌的高发区，居住在新疆伊犁地区的人群中哈萨克族发病率最高。食管癌因恶性程度高，中晚期患者治疗效果差，故早期发现对改善预后很关键。（）是一种存在于多种体液及组织的外分泌型蛋白质，属于半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族（，）成员之一，由 个氨基酸组成，分子量约为 ，基因表达位点在 号染色体（）。通过免疫相关机制在哮喘、干燥综合征等疾病中发挥作用，近年来发现其在胃肠道肿瘤、卵巢癌、乳腺癌等多种恶性肿瘤中异常表达并与肿瘤的发生、进展及预后有关。这表明 参与恶性肿瘤的发生发展的过程，而 在食管癌中的表达情况及作用尚不清楚。故本研究通过 及免疫组化法检测哈萨克族食管癌患者 的表达情况，分析 基因表达与患者临床病理资料及预后之间的关系，探讨 在食管癌发生、发展及预后中的意义。材料与方法 材料 研究对象：收集 年至 年于新疆医科大学第一附属医院行根治性手术治疗的哈萨克族食管鳞状细胞癌患者 例，其中 例来自新疆维吾尔自治区，例来自哈萨克斯坦国家。收集新鲜组织标本及石蜡包埋的组织标本，包括癌组织与距离肿瘤边缘 的癌旁组织标本。手术均常规进行，术后根据第八版 食管癌分期系统进行病理学诊断，包含肿瘤分化、浸润深度、淋巴结转移以及 分期。本研究所使用的标本均经过患者或家属签署知情同意，通过新疆医科大学第一附属医院伦理委员会审核批准（审批号：）。纳入标准：）术前及术后病理均确诊为食管鳞状细胞癌；）切缘未见癌累及；）有完整的病例档案。排除标准：）术前行放射治疗和化学治疗（放化疗）；）合并其他恶性肿瘤或有恶性肿瘤个人史；）腺鳞癌等混合癌。试剂：兔抗人 多克隆抗体（公司）；兔二步法试剂盒、显色液、二抗（北京中杉金桥生物技术有限公司）；试剂（公 司）；、反转录试剂盒（公司）。方法 检测 ：将新鲜组织标本采用 法提取总，反转录合成，以 为模板进行 扩增。反应条件：预变性 ，变性，退火，延伸，循环。基因的引物序列：上游：基础医学与临床 （），下 游：。内参基因 引物序列：上游：，下游：。用 法计算 表达量。免疫组织化学法（，）检测 蛋白：切片行常规脱腊、水化、去除内源性酶、抗原修复、滴加兔抗人 多克隆抗体，冰箱孵育、加入二抗、显色、苏木精复染、脱水及封片。显微镜下观察，每张切片中随机选取 个 倍放大视野，每个视野计数 个细胞，由 名病理科医生采用双盲法独立阅片赋分。根据着色强度赋分：细胞无着色为 分，浅黄色为 分，棕黄色为 分，棕褐色为 分；根据着色细胞占比赋分：无阳性细胞为 分，阳性细胞占比 为 分，为 分，为 分，为 分。项之积 分定为高表达。统计学分析所获 数 据 均 录 入 建 立 数 据 库，采 用 软件行统计学分析。计量资料采用均数标准差（）表示，组间比较采用 检验；计数资料采用例数和百分率表示，组间比较采用；采用单因素法和 因素回归法进行生存分析；将单因素分析中发现统计学差异的指标与临床上认为影响预后的指标纳入到多因素分析中。结果 的表达情况食管鳞癌组织 表达（）显著高于对应癌旁组织（）（）。蛋白的表达情况 蛋白主要在细胞质中表达，表现为棕色或黄色颗粒在细胞质聚集。蛋白在食管鳞癌组织中的高表达率为 （），明显高于对应癌旁组织 （）（）（图）。表达与食管癌患者临床病理学特征之间的关系在食管癌组织中 高表达与淋巴结（）（）及 分期（）有关（表）。表达与患者性别、年龄、食管癌家族史、吸烟史、饮酒史、神经侵犯、脉管侵犯、分化程度及浸润深度未发现相关性。表达与食管癌患者预后之间的关系：例患者中死亡 例，存活 失访 例，中位随访时间为 个月。行 单因素分析发现，食管癌组织 表达情况（）、肿瘤浸润深度（）、肿瘤 分期（）与患者术后生存率有关。因素分析发现，基因表达情况（）、浸润（）是影 ；图 食管鳞癌组织与癌旁组织中 蛋白表达情况 伊尔夏提图尔宏 在哈萨克族食管鳞状细胞癌中的表达及意义表 蛋白表达水平与患者临床病理参数的关系 响哈萨克族食管鳞状细胞癌患者预后的独立危险因素（表，图）。图 食管癌（）患者术后 生存曲线 表 食管癌（）患者术后生存期的单因素和多因素分析 （）（）（）（）（）（）（）（）（）讨论食管癌的发生、发展由多个基因的特征性表达和相关蛋白质功能的变化调控，其具体机制尚未完全阐明。本研究结果提示，食管癌组织中 基因的表达在 水平和蛋白质水平上均明显高于癌旁组织，这与报道的在胃肠癌中的研究结果一致，表明 可能在食管癌发生的过程中发挥促癌作用。高表达与较高的区域淋巴结转移率相关，与报道的在肿瘤骨转移中的研究结果一致，提示 可能在食管癌中促进癌细胞侵袭与转移。此结论与报道的在乳腺癌中的研究结论相反。这可能与组织蛋白酶在不同肿瘤中的促癌与抑癌双重作用有关。组织蛋白酶的这种特性可能导致其抑制剂 在不同肿瘤中的表达存在差异性。进一步行生存分析发现，高表达与较短的术后生存期有关，结果与报道的在卵巢癌中的研究结果一致。单因素与多因素生存分析表明 高表达是导致患者不良预后的独立危险因素。综上所述，基因的表达在哈萨克族食管鳞癌发生、发展的过程中可能存在重要意义，有潜力成为病情及预后评估的指标。基础医学与临床 （）参考文献：，：，：左婷婷，郑荣寿，曾红梅，等 中国食管癌发病状况与趋势分析 中华肿瘤杂志，：居来提艾尼瓦尔，李德生，张力为，等 新疆 年伊犁地区食管癌患病情况调查研究 新疆医学，：，：，：，（），：，：，：，：，：，：，：，：