DB3715_T 39-2024鲁西黑头羊人工授精技术规程标准文本.docx

ICS 65.020.30CCS B 433715聊城市地方标准DB 3715/T 392023鲁西黑头羊人工授精技术规程2023 - 10 - 7 发布2023 - 11 - 7 实施聊城市市场监督管理局发 布DB 3715/T 392023前言本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本文件由聊城市农业农村局提出、归口并组织实施。本文件起草单位：聊城市东昌府区畜牧兽医事业发展中心、聊城市东昌府区兴堂牧业有限公司、聊城职业技术学院、莘县畜牧兽医事业发展中心、高唐县畜牧水产事业中心、冠县农业综合服务中心、聊城市东昌府区道口铺街道农林水综合服务中心、聊城市东昌府区闫寺街道农林水综合服务中心。本文件主要起草人：侯国生、张娅娣、曹学香、李孟燕、齐来勇、李长磊、石延国、郭广玲、许文婷、王兰天、贾国富、衣慧静、苏子明、张东福、杨雪青、张广瑞、李乐军、张瑞华、张国良、赵景龙、付崇波。IDB 3715/T 392023鲁西黑头羊人工授精技术规程1 范围本文件规定了鲁西黑头羊的术语和定义、种公羊选择与调教、采精前准备、精液品质检查、精液稀释、精液保存运输、发情母羊鉴定、输精及档案记录。本文件适用于规模化养羊场、养殖专业户、配种站点鲁西黑头羊的人工授精技术操作。2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。DB37/T 3367 鲁西黑头羊3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1鲁西黑头羊 luxi black-head sheep头颈背毛黑色，体躯背毛白色，头清秀，鼻梁隆起，耳大稍下垂，颈背部结合良好，公、母羊均无角，瘦尾。胸宽深、背腰平直、后躯丰满、结构匀称，四肢较高且粗壮，蹄质坚实，全身呈桶装结构， 肉用体型明显。4 种公羊选择与调教4.1 种公羊选择4.1.1 种公羊应符合 DB37/T 3367 要求，体型外貌、体重体尺、繁殖性能，综合评定达到一级以上。4.1.2 选择符合鲁西黑头羊种用标准，体质结实，结构匀称，生产性能高，生殖器官发育正常，有明显鲁西黑头羊品种特征，精液品质良好、健康无病的公羊作为种公羊。4.2 种公羊调教配种前 30 d 加强营养、进行调教训练，配种前 21 d 开始采精 1 次，前 14 d 每隔 3 d 采精 1 次，前 7 d每隔 1 d 采精 1 次。4.3 公羊牵引公羊牵到采精现场后，停留 3 min5 min，再让其爬跨。5 采精前准备5.1 器械洗涤和消毒85.1.1 采精前人工授精所用器械（见附录 A）：假阴道内胎、玻璃棒、温度计、金属镊子用 75%酒精棉球擦试消毒；集精杯、输精器、稀释液、生理盐水、棉球、毛巾、纱布、保存运输精液用的玻璃容器高压蒸汽消毒， 消毒温度 115 ，时间 30 min。5.1.2 输精时当连续数只母羊输精时，输精器及开膣器在为每只母羊使用后，应经 75 %酒精棉球由前向后擦拭消毒再为另一只母羊输精。5.1.3 输精后人工授精所用器械每次使用后，用洗涤剂洗刷干净。假阴道内胎、集精杯、输精器、保存运输精液用的容器等接触精液的器械，彻底消毒后，再用经灭菌的稀释液冲洗 2 次。开膣器洗涤干净消毒后，再用灭菌生理盐水棉球冲洗 2 次。假阴道内胎的油渍及输精器内残留的精液，均应彻底洗涤干净，最后再经清水和蒸馏水各冲洗 1 次并保持清洁、干燥，存放于清洁柜内。5.2 假阴道准备5.2.1 安装检查所用内胎有无损坏和沙眼，完整无损者放入沸水浸泡 3 min5 min，将内胎装入外壳，光面朝内，两头等长，一端翻套在外壳上，依同法套好另一端。注意勿使内胎有扭转情况，并使松紧适度，然后两端分别套上橡皮圈固定。5.2.2 调试用漏斗将 50 55 温水注入到假阴道夹层内，水量为外壳与内胎间容量的 1/21/3，用消毒玻璃棒蘸取润滑剂，将假阴道内胎前 1/2 段由外向内均匀涂抹一薄层，用经消毒的温度计检测假阴道内腔温度，以达 39 42 为宜，若过低、过高可用热水、冷水调节，向夹层内注入适量空气，使假阴道内腔形成一定的压力，采精口端形成三角形，用长柄镊子夹上 75 %酒精消毒内胎，从内向外旋转，勿留空白，停留 3 s5 s，酒精挥发后，用生理盐水棉球擦拭，冲洗。5.3 台羊准备选择体格大小与公羊大小相近的发情健康母羊作为台羊。假母羊为台羊时，应先经过训练，即先用真母羊为台羊，适应采精后，再改用假母羊作台羊。6 采精6.1 采精方法6.1.1 种公羊在采精之前，以湿毛巾将阴茎包皮周围擦拭干净。6.1.2 采精人员蹲于台羊右侧，右手持假阴道与地面成 35 40 角，紧靠于台羊尻部，当种公羊爬跨于台羊背上并伸出阴茎时，立即敏捷地用左手指轻托阴茎包皮，将阴茎导入假阴道内。公羊射精后， 立即将假阴道竖起，排出空气，取下集精杯，盖上集精杯盖，挂上公羊牌号送往精液处理室。6.2 采精次数种公羊宜采精 1 次2 次/d，每周宜采 5 d，休息 2 d。7 精液品质检查7.1 感官检查种公羊射精量 1 mL1.5 mL，精液乳白色，无味或略带腥味；带有腐败臭味，出现红色、褐色的精液不应用于输精。7.2 显微镜检查7.2.1 检测周期每隔 7 d14 d 测定 1 次。7.2.2 检查方法用消毒过的干净玻璃棒取原精液或用生理盐水稀释过的精液 1 滴，滴在干净的干燥载玻片上，盖上干净的盖玻片，使盖玻片与载玻片之间充满精液，避免产生气泡，然后在显微镜下放大 300 倍600 倍进行观察，观察时盖玻片、载玻片、显微镜载物台的温度30 ，室温18 。7.2.3 精子活率100 %的精子呈直线前进运动者评为 1.0；90 %的精子呈直线前进运动者评为 0.9，依此类推。7.2.4 精子密度显微镜视野内精子密集，精子间空隙小于 1 个精子长度的精液定为“密”级；精子间空隙相当于 1个精子的长度，能看到每个精子活动的定为“中”级；精子稀少，精子间空隙超过 1 个精子长度的定为“稀”级。8 精液稀释8.1 精液稀释液配制8.1.1 奶类稀释液取健康母牛、母羊的新鲜奶，92 95 水浴消毒 15 min，温度降至 40 以下，加入青霉素 100000 U/100mL200 000 U/100mL。8.1.2 葡-柠-卵稀释液葡萄糖 3 g，柠檬酸钠 1.4 g，蒸馏水加至 100 mL 后取上液 80 mL，加卵黄 20 mL，青霉素 100 000 U。8.1.3 生理盐水0.9 %氯化钠溶液。8.2 精液稀释8.2.1 稀释倍数根据精液密度、活率和选用的稀释液而定，每个输精剂 0.1 mL0.2 mL，保持有效精子数在 20 000 000 个以上。8.2.2 调整稀释液的温度与原精液温度相同。先以 1:5 作第一次稀释，放置 10 min 后再稀释至原精液的 1 倍3 倍，精液稀释后，进行精子活率评定，以检验稀释效果。8.2.3 精液瓶作好标记，注明种公羊号、采精时间、精液量及其活率评定等级。9 精液保存运输9.1 采出的精液，经精液品质检查，精子活率0.8 的精液，应迅速稀释、包装、降温。9.2 运送精液的保温瓶放入冰块，精液温度保持在 2 5 。精液瓶的温度应缓慢下降，并稳妥安置于保温瓶内。9.3 精液在运输过程中，严防剧烈振荡，尽可能缩短途中运输时间。9.4 经运输和保存的精液，经精液品质检查，精子活率0.6 的，方可用于输精。输精时从保温瓶中取出，在室温下，温水中使精液温度升高至 18 25 。10 母羊发情鉴定10.1 初配年龄鲁西黑头羊适宜的初配年龄为 7 月龄8 月龄。10.2 母羊发情表现10.2.1 鲁西黑头羊母羊每次发情持续时间一般为 26 h30 h。发情周期平均为 18 d。10.2.2 母羊发情时，兴奋不安，行为异常，尾巴频频摆动，对外界刺激反应敏感，食欲减退，外阴部松驰、充血、肿胀、阴蒂勃起；阴道充血、松驰，分泌粘液，有交配欲，主动接近公羊，在公羊追逐或爬跨时站立不动。发情终止时，拒绝公羊接近和爬跨。10.3 试情10.3.1 选择体格健壮无疫病，年龄 2 岁5 岁的公羊做试情公羊，在腰部绑系试情布，将阴茎罩住， 或做输精管结扎或阴茎移除术。10.3.2 试情公羊单圈喂养，除作试情外严禁和母羊在一起，试情公羊给予良好的饲养条件，未作手术的种公羊每隔 5 d6 d 排精或本交一次。10.3.3 试情公羊与母羊的比例为 1:401:50。试情公羊进入母羊群后，发现有站立不动并主动接近公羊或接受公羊爬跨的母羊，即为发情母羊。11 输精11.1 输精时间母羊经发情鉴定后，方可给予输精，输精时间一般在母羊发情后 12 h24 h。11.2 输精部位输精前，外阴部清洗干净，以 1/10000 高锰酸钾溶液擦拭消毒，擦干后，再以生理盐水棉球擦拭， 将经消毒的开膣器轻缓地插入阴道，打开阴道，寻找子宫颈外口，再将输精器插入子宫颈外口内，深度约 1 cm2 cm。11.3 输精量原精液0.05 mL0.1 mL，稀释后精液0.05 mL0.1 mL。11.4 输精次数早晨发现发情，当天下午输精 1 次，第 2 天早上复配 1 次；傍晚发现发情，第 2 天上、下午各输精1 次。如母羊继续发情，可再输精 1 次。12 档案记录应分别建立种公羊精液品质检查及利用记录表（见附录B）和母羊繁殖配种记录表（见附录C），各项记录应按时、准确，每月进行统计分析。AA附 录 A（资料性）人工授精所需主要器材与药品人工授精所需主要器材与药品见表A.1。表A.1 人工授精所需的主要器材与药品类别名称用途器材假阴道外壳、假阴道内胎、假阴道塞子(带气嘴)、集精杯、开膣器、输精器、试情布等。采精、输精移液器、消毒柜、恒温箱、高压灭菌消毒器、冰箱、恒温水浴锅器械消毒显微镜、血球计数板、纱布脱脂棉、离心管、载玻片、盖玻片、温度计、玻璃棒等。精液品质检查药品75%酒精、液体甘油、白凡士林、9%氯化钠、无菌脱脂牛奶、无菌脱脂羊奶、葡萄糖、柠檬酸钠、卵青霉素、链霉素等。采精、精液品质检查、器械消毒BBC附 录 B（资料性）公羊精液品质检查及利用记录种公羊精液品质检查及利用应按表B.1记录。表 B.1 种公羊精液品质检查及利用记录表品种：种公羊耳号：序号采精采精量(mL)原精液稀释精液输精量(mL)授精母羊数采精员备注月日时间次数色泽密度活率种类倍数活率CF附 录 C（资料性） 母羊繁殖配种记录母羊繁殖配种记录应按表C.1记录。表 C.1 母羊繁殖配种记录表序号母羊公羊第一次配种第二次配种第三次配种预产期输精员备注品种耳号品种耳号月 日时间月 日时间月 日时间