DB15T+2893-2023玉米耐盐碱鉴定与评价技术规程.pdf

ICS 65.020.01 CCS B 01 15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 28932023 玉米耐盐碱鉴定与评价技术规程 Technical code of practice for Identification and evaluation of maize tolerance to saline-Alkali in tumuan plzhain 2023-02-27 发布 2023-03-27 实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发 布 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由内蒙古自治区农业标准化技术委员会（SAM/TC 20）归口。本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院、内蒙古农业大学、内蒙古自治区农牧业生态与资源保护中心、鄂尔多斯市农牧业生态与资源保护中心。本文件主要起草人：景宇鹏、李跃进、赵举、高日平、王伟妮、红梅、刘红霞、刘宏金、张永虎、乔志刚、武岩、任永峰、张君、伊风艳、尹春艳、刘晓宇、吴雪琨、刘俊梅。玉米耐盐碱鉴定与评价技术规程 1 范围 本文件规定了玉米萌发期、苗期耐盐碱性鉴定、鉴定方法、评价标准等技术规范。本文件适用于玉米品种种质资源的耐盐碱性鉴定。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 4404.1 粮食作物种子 第1部分：禾谷类 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。耐盐碱性 saline-alkaline tolerance 作物在其生长发育和产量形成对盐碱胁迫的反应能力。盐害指数 salt injury index of seedlings 在盐碱胁迫条件下，是反映盐害率和盐害程度的指标。盐碱胁迫 saline-alkali stress treatment 植物受NaCl、Na2SO4、NaHCO3、Na2CO3等盐碱离子形成的胁迫，称为盐碱胁迫。4 鉴定方法 胁迫溶液制备 采用Na2SO4、NaCl、NaHCO3、Na2CO3 4种单盐按土壤盐分组成类型配比混合盐碱胁迫溶液；胁迫浓度设置为：0.0%、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%。采用不同浓度的1/2 Hoagland盐碱营养液胁迫处理，为了保持各处理浓度不变，每天以2倍对应处理液浇灌上次浇灌积余的盐碱离子，以1/2 Hoagland营养液为对照，每个处理4次重复。萌发期耐盐碱性鉴定 4.2.1 种子准备 玉米种子应符合GB 4404.1相关要求。4.2.2 种子处理 挑选籽粒饱满一致的种子用5%次氯酸钠浸泡15 min，用蒸馏水冲洗晾干。4.2.3 胁迫处理 在15 cm培养皿放入发芽纸注入胁迫溶液，待发芽纸吸水饱和时沥去多余溶液，将种子均匀摆放在发芽纸上，每皿10粒种子，每隔1 d用称重法补存水分，保持各处理相对浓度不变；每隔2 d重新更换一次胁迫溶液。4.2.4 发芽调查 将发芽皿放入光照培养箱中，在每24 h连续提供8 h光照条件下，25 恒温培养，分别在第1 d、3 d、5 d和7 d调查发芽种子数。4.2.5 耐盐碱率 nd=nntn 100%(1)式中：nd种子萌发率，1 nd、3 nd、5 nd、7 nd分别为第 1 d、3 d、5 d、7 d的种子萌发率；nn在特定时间内种子萌发数；tn种子总数。A=1.00 1nd+0.75 3nd+0.50 5nd+0.25 7nd(2)式中：A 萌发指数；nd种子萌发率，1 nd、3 nd、5 nd、7 nd分别为第 1 d、3 d、5 d、7 d的种子萌发率。GS=GIG0 100%(3)式中：GS萌发期耐盐碱率；GI萌发指数；G0对照下萌发指数。苗期鉴定 4.3.1 种子要求 玉米种子应符合GB4404.1相关要求。4.3.2 种子处理 挑选出籽粒饱满一致的种子用5%次氯酸钠浸泡15 min消毒后，用蒸馏水冲洗晾干后置于石英砂盆播内。4.3.3 盆栽准备 在苗温室内石英砂培养法，挑选出籽粒饱满一致的种子播于事先准备好的石英砂塑料钵（长宽、高=25 cm20 cm15 cm）中，每盆播种50粒。4.3.4 胁迫处理 采用Na2SO4、NaCl、NaHCO3、Na2CO3 4种单盐按土壤实际盐分组成类型配比混合盐碱胁迫溶液；盐碱胁迫浓度设置5个梯度，分别为：0.0%、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%。采用不同浓度的1/2 Hoagland盐碱营养液胁迫处理，为了保持各处理浓度不变每天以2 倍对应处理液浇灌上次浇灌残余的盐碱离子，以1/2 Hoagland营养液为对照，每个处理4 次重复。4.3.5 性状调查 胁迫处理18 d后观察苗情表现情况，详见下表1。表1 碱胁迫处理下单株苗情分类 苗情类别 受害症状 0 生长正常，无受害症状 1 生长基本正常，全株几乎无萎蔫或叶缘蜷曲 2 全株 1/4 叶片萎蔫或叶缘蜷曲，叶色变黄 3 全株 1/3 叶片萎蔫或叶缘卷曲，叶尖、叶缘焦枯 4 全株 1/2 叶片萎蔫或叶缘卷曲，叶枯、叶落 5 全株枯死或接近死亡 4.3.6 抗逆指标检测 4.3.6.1 生理指标 可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、丙二醛含量、游离脯氨酸含量、超氧化物歧化酶活性等指标。4.3.6.2 检测方法 参照植物生理生化实验原理和技术，从植株顶端连续向下取34片叶片。5 耐盐碱性评价 苗期耐盐碱率 SS=()5i5TN 100%(i=0，1，2，5)(4)式中：SS苗期耐盐碱率；STi苗情类别；SNi每类苗情株数；TN检测样本总株数。评价标准 根据耐盐指数对材料萌发期耐盐碱性评价，详见下表2。表2 萌发期耐盐性分级标准 耐盐性 盐害指数 耐盐级别 高耐 70.0%100%1 耐盐 60.1%70%2 中耐 50.1%60%3 敏感 40.1%50%4 高感 0.0%40%5 根据耐盐指数对材料幼苗期耐盐碱性评价，详见下表3。表3 苗期盐碱性分级标准 耐盐性 盐害指数 耐盐级别 高耐 0.0%20%1 耐盐 20.1%40%2 中耐 40.1%60%3 敏感 60.1%80%4 高感 80.1%100%5 综合评价 5.3.1 因子确定 对种子萌发期发芽率、萌发指数、耐盐碱率和苗期叶片中可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、丙二醛含量、游离脯氨酸含量、超氧化物歧化酶活性等指标进行主成分分析，确定耐盐碱性评价指标。5.3.2 评价方法 5.3.2.1 隶属度确定 运用隶属函数法对关键特征因子各指标进行标准化处理，然后计算隶属函数值。()=()()(5)反隶属函数值计算公式：()=1()()(6)式中：Xi 各指标测定值；Xmin 各测定指标的最小值；Xmax 各测定指标的最大值。当某一指标与玉米耐盐碱性成正相关时，用公式（1）；当某一指标与玉米耐盐碱性成负相关时，则用公式（2）。5.3.2.2 权重确定 采用标准差系数法，计算标准差系数，归一化后得到每个指标的权重系数。W(j)=P(j)P(j)kj=1 (j=1，2，k)(7)式中：W（j）权重；P（j）经主成分分析所得到各材料第 j 个综合指标的方差贡献率；k 提取的主成分个数。5.3.2.3 综合评级 计算各材料综合评价值，然后从大到小依次进行排序判断耐盐碱能力。Z(j)=Z(j)kj=1 W(j)(j=1，2，k)(8)式中：Z（j）综合评价值，第j个综合指标的得分值与权重乘积的和。