白菜中19种农药残留检测能力验证.pdf

76 食品安全导刊 2023年8月（下）分析检测白菜中 19 种农药残留检测能力验证曾华芳（平和县农业农村局检测中心，福建平和 363700）摘要：目的：参加福建省农业农村厅组织的 2022 年度农药残留检测能力验证项目，评价实验室白菜中农药残留定量检测能力，提高实验室检验人员检测水平。方法：根据作业指导书，参照国家标准 GB 23200.1212021 中基本操作步骤，采用液相色谱-质谱联用法对考核样进行检测，外标定量法。结果：样品空白未检出农药残留；样品白菜中吡唑醚菌酯检测值为 0.17 mgkg-1。一个月后考核结果为合格，通过能力验证。结论：参加该次能力验证活动，发现并解决了检验人员在实验过程中存在的问题，提升了检验人员的检测能力。关键词：白菜；农药残留；检测能力验证Verification of Detection Capacity of 19 Pesticide Residues in Chinese CabbageZENG Huafang(Testing Center of Pinghe County Bureau of Agriculture and Rural Affairs,Pinghe 363700,China)Abstract:Objective:To participate in the 2022 pesticide residue detection capacity verification project organized by Fujian Provincial Department of Agriculture and Rural Affairs,to evaluate the laboratorys ability to quantitatively detect pesticide residues in Chinese cabbage,and to improve the testing level of laboratory inspectors.Method:According to the operation guide,referring to the basic operation steps in the national standard GB 23200.1212021,liquid chromatography-mass spectrometry was used to test the assessment samples with external standard quantitative method.Result:No pesticide residues were detected in the sample blank;the detection value of pyraclostrobin in the sample Chinese cabbage was 0.17 mgkg-1.The result of the assessment after one month was qualified and passed the proficiency testing.Conclusion:Participating in this detection capacity verification project has identified and solved the problems of the inspectors in the experimental process,and improved the detection capacity of the inspectors.Keywords:Chinese cabbage;pesticide residues;detection capacity verification随着现代农业的高质量发展，农产品生产对农药、抗生素和激素等外源物质依赖日益加深。农药在农产品生产过程中使用量较大、农药不规范使用以及农药本身质量问题等都是农产品中农药残留超标的原因。因此农产品农药残留检测是把控农产品质量和安全的第一道关口，关乎着人们的食品安全、农业产业的发展和社会稳定1。本文依托于参加福建省农业农村厅开展的 2022 年农药残留检测能力验证项目，介绍了白菜中的农药残留量测定能力验证的整个流程2，并总结了能力验证需要注意的几点关键事项，目的在于加强交流学习，促进县级检测中心农产品农药残留检测技术和管理水平的提升。1材料与方法1.1材料与试剂能力验证实验的盲样由福建省农产品质量安全检验检测中心统一制备发放，本次盲样的基质为白菜，样品处于冷冻匀浆状态，样品包括 1 份约为 200 g 的考核样和 1 份约为 200 g 的空白样。19 种农药标准品（吡虫啉、啶虫脒、多菌灵、噻嗪酮、噻菌灵、克百威、嘧菌酯、烯酰吗啉、噻螨酮、咪鲜胺、吡唑醚菌酯、茚虫威、灭多威、3-羟基克百威、甲萘威、抗蚜威、戊唑醇、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和莠灭净），质量浓度为 100 gmL-1，坛墨质检标准物质中心；乙腈（HPLC）、甲醇（色谱纯）、冰Aug.2023 CHINA FOOD SAFETY 77分析检测乙酸（AR）和甲酸（HPLC），赛默飞有限公司。1.2仪器与设备LX50-QSight110 液相色谱质谱联用仪（美国珀金埃尔默公司）、电子天平（福州志华科学仪器有限公司）、振荡器（江苏省金坛市江南仪器厂）和漩涡仪等。1.3方法1.3.1验证项目和方法本次参加能力验证的项目共 19 种，包括吡虫啉、啶虫脒、多菌灵、噻菌灵、克百威、嘧菌酯、烯酰吗啉、咪鲜胺、吡唑醚菌酯、茚虫威、灭多威、3-羟基克百威、甲萘威、抗蚜威、戊唑醇、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、噻嗪酮、噻螨酮、莠灭净3，根据本实验室资质认定证书附表中的承检范围确定。根据实验室的实际条件，能力验证选择的方法是食品安全国家标准 植物源性食品中 331 种农药及其代谢物残留量的测定 液相色谱-质谱联用法（GB 23200.1212021）4。样品用有机溶剂乙腈进行提取，所得提取液经净化进行液质联用仪上机检测，外标法定量。1.3.2实验条件（1）液相色谱条件。色谱柱：C18柱（100 mm 2.1 mm，2.7 m）；柱 温：35；流 动 相：A 为 2 mmolL-1甲酸铵-甲酸水溶液，B 为 2 mmolL-1甲酸铵-甲酸甲醇溶液；进样量：2.0 L；流速：0.25 mLmin-1；流动相梯度洗脱见表 1。表 1梯度洗脱条件时间/minA/%B/%09731.09733.560408.0307012.029812.297315.0973（2）质谱条件。离子源类型：ESI 电喷雾离子源；正离子扫描方式；多反应监测（MRM）；电喷雾电压：5 000 V；雾化器温度：180；离子源温度：250。19 种农药及其代谢物的质谱参数见表 2。1.4能力验证测定1.4.1样品领取样品的领取是能力验证较重要的步骤之一。样品是省厅检测中心直接用顺丰冷链速运，检测人员应随时跟踪快递信息，确保及时收到样品，收到样品时应检查样品是否存在破裂撒漏等现象，若出现上述现象应立即与省厅检测中心联系。表 219 种农药及其代谢物的保留时间、离子对质谱参数序号农药名称电离方式保留时间/min去簇电压/V 离子对（m/z）离子对（m/z）碰撞能/V1啶虫脒正4.0665223.1/126.0223.1/99.028/602莠灭净正9.6290228.1/186.1228.1/96.125/353嘧菌酯正10.6080404.1/372.1404.1/344.120/344噻嗪酮正21.4360306.2/201.1306.2/116.117/225甲萘威正6.2556202.1/145.1202.1/127.115/406多菌灵正4.1080192.1/160.1192.1/132.125/417克百威正5.8370222.1/165.1222.1/123.016/2983-羟基克百威正4.0570238.1/181.1238.1/163.116/189烯酰吗啉正10.75105388.1/301.1388.1/165.129/4310甲氨基阿维菌素苯甲酸盐正21.6250866.5/82.1866.5/158.1110/4111噻螨酮正21.8856353.1/228.0353.1/168.121/3312吡虫啉正3.8345256.1/175.1256.1/209.127/2213茚虫威正20.3350528.1/293.0528.1/249.018/2314灭多威正3.5838163.1/88.0163.1/106.012/1415抗蚜威正6.8176239.2/182.1239.2/72.021/3616咪鲜胺正17.9320376.2/308.0376.2/266.015/2217吡唑醚菌酯正18.2350388.1/194.1388.1/163.118/3618噻菌灵正4.47100202.0/175.0202.1/131.134/4319戊唑醇正16.3595308.5/70.0308.2/125.049/4778 食品安全导刊 2023年8月（下）分析检测1.4.2样品的提取分别称取解冻至室温的样品白菜和样品空白各10 g 于 50 mL 离心管中，各 3 个平行，另外取空离心管做试剂空白。分别加入 10 mL 乙腈、1 颗陶瓷均质子，剧烈振荡 1 min；加入提取盐包（内含 4 g无水硫酸镁、1 g 氯化钠、1 g 柠檬酸钠二水合物、0.5 g 柠檬酸二钠盐倍半水合物），剧烈振荡 1 min，4 200 rmin-1离心 5 min。1.4.3样品的净化从每个离心管吸取上层乙腈溶液 5.00 mL，分别加入净化盐管（内含除水剂和净化材料），再经混匀用涡旋仪涡旋 1 min，4 200 rmin-1离心 5 min，吸取上清液经过滤膜，等候测定。1.4.4标准曲线的配制将 上 述 1.1 中 的 19 种 农 药 标 准 品（浓 度 为 100 gmL-1）用乙腈配制成浓度为 2 gmL-1的 19 种农药混标溶液 A，再将混标溶液 A 稀释成浓度梯度 分别为 0.005 gmL-1、0.010 gmL-1、0.020 gmL-1、0.050 gmL-1和 0.100 gmL-1的混合标准工作溶液，上机测定，建立标曲曲线。1.4.5结果上报上机检测完毕后，实验人员应及时打印检测结果并分析数据得到结果，收集色谱图以及做好原始记录的完善，结果数据分析确认无误后，在规定的时间内提交验证结果以及报送图谱与原始记录等，然后针对此次能力验证进行全面梳理，及时进行分析总结与整理归档工作。2结果与分析2.1定性和定量检测结果为防止待测液目标未知物衰减，样品处理结束后立即安排上机检测，允许的情况下，每个样品上机重复测定3次以上，减少系统误差。初检结果显示，样品空白未检出农药残留；样品白菜检测出含有吡唑醚菌酯，其余 18 种农药均未检出，检出结果如表3 所示。表 3初检结果编号吡唑醚菌酯浓度/（mgkg-1）平均浓度/（mgkg-1）白菜 10.2040.202白菜 20.1980.202白菜 30.2040.2022.2回收率试验根据初检结果，样品白菜含有的吡唑醚菌酯平均浓度为 0.202 mgkg-1。称取 3 个空白样品 10 g，分别加入 1 mL 混标溶液 A 以及 9 mL 的乙腈，剩余步骤与 1.4.2、1.4.3 步骤一致，获得加标待测液，再进行上机测定，计算回收率 回收率=（加标浓度-初检浓度）/质控添加浓度 100%，结果如表 4 所示。表 4加标试验结果编号吡唑醚菌酯浓度/（mgkg-1）回收率/%平均回收率/%加标 10.237118.5118.3加标 20.236118.0加标 30.237118.52.3能力验证结果通过对样品空白、样品白菜以及加标回收质控样进行上机检测分析，质控回收率满足 70%120%这一要求的范围。为使结果更为准确，将样品检出值经质控回收率矫正后上报结果，即考核盲样中检出农药及含量：样品空白为未检出；样品白菜中检出吡唑醚菌酯检测值为 0.17 mgkg-1，结果上报 1 个月后收到反馈结果为合格，通过此次能力验证。3农残检测能力验证的注意事项3.1样品保存收到的样品处于冷冻状态，样品可能存在水和冰晶，此时应重新匀浆再取样检测。3.2称量称量样品时应注意是否具有代表性，尽量用比较大的称量勺，减少样品间的差异性；瓜果类冷冻蔬菜样品，需要在完全解冻后再均匀混合处理进行称量，以保证检测数据的准确性5。称量样品时应注意是否过度解冻；称量之前应该充分搅拌；称量时尽量使用开口较大的容器，可以避免样品粘在容器边缘；称量前应规划好样品的用量，防止实验过程中出现过失时需要重新称取样品而样品量不够的情况。3.3提取根据实验标准操作，应注意样品是深绿色时，如青菜椒、菠菜、菜心等，可以在均质前加入石墨粉先将大部分色素去除，再进行提取；样品为汁液时，如桃汁、菠菜汁等，这类样品含水分多且呈酸性，建议在称取之前先将 pH 调制中性，再进行提取。3.4标准品配制（1）标准品应按说明书要求来存放。浓度为500 1 000 mgL-1的 标 准 品，一 般 存 放 温 度 在-18 左右，有效期为 6 个月；浓度为 1 10 mgL-1Aug.2023 CHINA FOOD SAFETY 79分析检测的标准品，一般存放温度在05，有效期为1个月；浓度为 0.5 1.0 mgL-1的标准品，一般存放温度在0 5，有效期为 2 3 周。（2）实验室管理标准溶液应该做到规范并且可追溯，应建立标准物质管理台账和配制领用台账。每种标准品都能溯源到所购买标准品的标准证书。（3）标准品在配制时应逐级稀释，做到现配现用，应使用在保质期内且新开封的标准品，避免标准品放置时间过久出现浓度变化的情况。（4）当标液浓度与样品的浓度相差较大时若使用单点校准，容易导致结果偏差较大，因此本实验采用五点校准。3.5检测过程中质量控制先做试剂空白，根据空白值高低来判断试剂是否有问题或者是器皿是否被污染。质量控制加标时尽量使用混标进行添加，避免因添加溶剂体积过大而对结果造成影响。回收率试验时，可用样品空白进行添加，添加的浓度应尽量与考核样品初步定量一致，以确保数据结果的准确性。3.6仪器设备维护在接到能力验证通知时，检测人员应对仪器设备进行全方位维护5，对仪器状态有清晰的把握，及时确定仪器设备的准确度、灵敏度、稳定性等各项关键参数。可将新配制的标准溶液进行上机测定，与之前记录的标准溶液响应值进行比较，响应值一致，则表明仪器设备正常，否则需一一排查是否需要更换色谱柱、更换进样隔垫、清洗离子源等，最终使设备处于最佳运行状态。3.7数据处理（1）在日常实验中，需要加强实验的前处理过程，否则容易出现结果不平行、回收率偏高或偏低等。如若出现两个样品结果不平行的情况，首先要排除仪器问题，再排查前处理环节问题。（2）原始记录应及时填写，不能补记；所填写的信息应该完整并且可追溯；填写有效数字的数位要正确，并且使用国家规定的法定计量单位；有效数字计算应符合有效数字运算规定；数值修约应符合GB/T 81702008 标准的规定；农药残留和农药污染物检测的计算结果一般保留 2 位有效数字，若含量超过 1 mgL-1时，保留 3 位有效数字。4结论农药残留能力验证结果是否合格直接反映了实验室是否具备农药残留检测能力。要想顺利通过能力验证，检验人员应夯实基本功，规范各项操作规程，不断分析总结，提升检测水平，最终为农产品质量安全以及人们的身体健康提供保障。本文以福建省农业农村厅组织的农产品农药残留能力验证为例，分享整个实践过程中应注意的各项关键点，旨在于加强交流学习，为农产品农药残留检测机构提高能力验证水平提供参考和借鉴。参考文献1 郭华.草萘胺对土壤环境的影响以及农药多残留分析方法研究 D.南京:南京农业大学,2007.2 张文静.西葫芦中 3 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