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论著N C O A 5通过调控上皮间质转化促进卵巢癌细胞的侵袭转移能力*刘俊 成洁 庄珩之 王圣坦 刘晓行(海南省人民医院妇科,海南 海口 5 7 0 3 1 1)【摘要】目的 研究核受体共激活因子5(N C OA 5)对卵巢癌细胞侵袭和转移能力的作用及分子机制。方法 常规培养卵巢癌细胞株S KOV-3、A 2 7 8 0、O C 3、HO-8 9 1 0和正常卵巢上皮细胞系I O S E 8 0,W e s t e r n b l o t检测各细胞中N C OA 5蛋白的表达水平。选取高表达N C OA 5的卵巢癌细胞S KOV-3 和A 2 7 8 0,各分为s i-N C组、s i-N C OA 5组,并分别转染N C s i R NA和N C OA 5 s i R NA。B o y d e n实验检测各组细胞侵袭能力,T r a n s w e l l实验检测各组细胞转移能力,W e s t e r n b l o t检测各组细胞上皮间质转(EMT)相关蛋白E-c a d h e r i n、N-c a d h e r i n、v i m e n t i n和S l u g蛋白的表达水平。结果 W e s t e r n b l o t结果显示N C OA 5在卵巢癌细胞中的表达显著上调(P0.0 5)。在S KOV-3和A 2 7 8 0细胞中干扰N C OA 5的表达均显著抑制卵巢癌细胞侵袭和转移能力(P0.0 5),并促进EMT相关蛋白E-c a d h e r i n的表达,抑制细胞中EMT相关蛋白N-c a d h e r i n、v i m e n t i n和S l u g蛋白的表达(P0.0 5)。结论 N C OA 5促进卵巢癌侵袭转移能力,具有作为卵巢癌新型预后生物标志物和治疗分子靶点的潜力。【关键词】卵巢癌;N C OA 5;侵袭;转移;EMT【中图分类号】R 7 3 7.3 1 【文献标志码】A D O I:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 6 7 2-3 5 1 1.2 0 2 3.0 9.0 0 7 基金项目:海南省卫生计生行业科研项目(1 8 A 2 0 0 1 1 4)通讯作者:王圣坦,E-m a i l:2 0 0 0 w a n g t a n 1 6 3.c o m引用本文:刘俊,成洁,庄珩之,等.N C OA 5通过调控上皮间质转化促进卵巢癌细胞的侵袭转移能力J.西部医学,2 0 2 3,3 5(9):1 2 8 2-1 2 8 6.D O I:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 6 7 2-3 5 1 1.2 0 2 3.0 9.0 0 7N C O A 5 p r o m o t e s t h e i n v a s i o n a n d m e t a s t a s i s o f o v a r i a n c a n c e r c e l l s b y r e g u l a t i n g E p i t h e l i a l-m e s e n c h y m a l t r a n s i t i o nL I U J u n,C H E N G J i e,Z H U A N G H e n g z h i,WA N G S h e n g t a n,L I U X i a o x i n g(D e p a r t m e n t o f G y n a e c o l o g y,H a i n a n P r o v i n c i a l P e o p l e s H o s p i t a l,H a i k o u 5 7 0 3 1 1,C h i n a)【A b s t r a c t】O b j e c t i v e T o s t u d y t h e r o l e o f N u c l e a r R e c e p t o r C o a c t i v a t o r 5(N C OA 5)o n o v a r i a n c a n c e r c e l l s a n d m o l e c u l a r m e c h a n i s m s.M e t h o d s O v a r i a n c a n c e r c e l l l i n e s S KOV-3,A 2 7 8 0,O C 3,HO-8 9 1 0 a n d n o r m a l o v a r i a n e p i t h e-l i a l c e l l l i n e I O S E 8 0 w e r e c u l t u r e d r e g u l a r l y.W e s t e r n b l o t a n a l y s i s w a s p e r f o r m e d t o d e t e c t t h e e x p r e s s i o n l e v e l o f N C OA 5 p r o t e i n i n e a c h c e l l l i n e.O v a r i a n c a n c e r c e l l s S KOV-3 a n d A 2 7 8 0 w i t h h i g h e x p r e s s i o n o f N C OA 5 w e r e s e l e c t e d a n d d i v i d e d i n t o s i-N C g r o u p a n d s i-N C OA 5 g r o u p,r e s p e c t i v e l y,a n d t r a n s f e c t e d w i t h N C s i R NA a n d N C OA 5 s i R NA,r e s p e c t i v e l y.B o y d e n a s s a y w a s u s e d t o d e t e c t c e l l i n v a s i o n a b i l i t y,T r a n s w e l l a s s a y w a s u s e d t o d e t e c t c e l l m e t a s t a s i s a-b i l i t y,a n d W e s t e r n b l o t a s s a y w a s u s e d t o d e t e c t t h e e x p r e s s i o n l e v e l s o f EMT-r e l a t e d p r o t e i n s E-c a d h e r i n,N-c a d h e r i n,v i m e n t i n a n d S l u g.R e s u l t s W e s t e r n b l o t r e s u l t s s h o w t h a t t h e e x p r e s s i o n o f N C OA 5 i n o v a r i a n c a n c e r c e l l s w e r e s i g n i f i-c a n t l y i n c r e a s e d(P 0.0 5).T h e e x p r e s s i o n o f i n t e r f e r e n c e N C OA 5 s i g n i f i c a n t l y i n h i b i t e d o v a r i a n c a n c e r c e l l i n v a s i o n a n d m e t a s t a s i s(P 0.0 5),a n d p r o m o t e d t h e e x p r e s s i o n o f EMT-r e l a t e d p r o t e i n E-C a d h e r i n,i n h i b i t e d t h e e x p r e s s i o n o f EMT-r e l a t e d p r o t e i n N-C a d h e r i n,V i m e n t i n,a n d S l u g p r o t e i n i n c e l l s(P 0.0 5).C o n c l u s i o n N C OA 5 p r o m o t e s t h e m e t a s t a s i s o f o v a r i a n c a n c e r i n v a s i o n a n d h a s t h e p o t e n t i a l t o b e a n e w t y p e o f p r o g n o s i s o f o v a r i a n c a n c e r a n d t h e p o t e n-t i a l f o r t h e t r e a t m e n t o f m o l e c u l a r t a r g e t s.【K e y w o r d s】O v a r i a n c a n c e r;N C OA 5;I n v a s i o n;M e t a s t a s i s;EMT 卵巢癌是女性生殖系统中常见的恶性肿瘤,其死亡率较高,全球每年约有1 4万患者死亡1,且由于缺乏早期临床症状和有效的筛查策略,大约7 5%的病例确诊时通常分期较晚2。目前减瘤手术和铂/紫杉醇2821西部医学 2 0 2 3年9月 第3 5卷第9期 M e d J W e s t C h i n a,S e p t e m b e r 2 0 2 3,V o l.3 5,N o.9联合化疗是卵巢癌的标准疗法,而随着医疗技术的持续发展,卵巢癌的治疗已在一定程度上得到改善,但是大多数患者5年生存率仍低于5 0%3。卵巢癌的发病机制尚未完全明确,核受体共激活因子5(N u c l e-a r R e c e p t o r C o a c t i v a t o r 5,N C OA 5)是一种广泛表达的核受体共同调节剂,也是雌激素受体和孤儿核激素受体共激活因子B D 7 3的共同调节剂4。NC O A5基因表达异常可导致肿瘤的发生,在乳腺癌中N C OA 5表达增 加,促 进 乳 腺 癌 细 胞 的 增 殖 和 侵 袭 转 移 能力5。N C OA 5在宫颈癌组织中表达减少,并与宫颈癌患者不良临床病理参数和预后相关,抑制宫颈癌细胞增殖和转移能力6。由此可见,N C OA 5在不同肿瘤中发挥的作用可能相反,其参与了几种恶性肿瘤的发生发展。但是它在卵巢癌中的作用仍然未知。因此本文在卵巢癌中研究N C OA 5的表达及发挥的生物学功能,以表明N C OA 5作为促进卵巢癌恶性进展的重要分子,具有作为抗卵巢癌治疗分子靶点的潜力。1 材料与方法1.1 试剂来源 卵巢癌细 胞株S KOV-3、A 2 7 8 0、O C 3、HO-8 9 1 0和正常卵巢上皮细胞系I O S E 8 0购自中国科学院细胞库(中国上海);R PM I-1 6 4 0培养基、胎牛血 清 和 青 链 霉 素 双 抗 购 自 美 国G i b c o公 司;N C OA 5 s i R NA购于S a n t a C r u z生物技术有限公司;基质胶购自美国B D公司;T r a n s w e l l小室购自美国C o r n i n g公司;二辛可宁酸(B C A)蛋白质测定试剂盒和P V D F膜购自美国T h e r m o试剂公司;N C OA 5、E-c a d h e r i n、N-c a d h e r i n、v i m e n t i n、S l u g、GA P DH和HR P偶联的二抗购于英国A b c a m公司。1.2 细胞培养、分组和转染 卵巢癌细胞株S KOV-3、A 2 7 8 0、O C 3、HO-8 9 1 0和 正 常 卵 巢 上 皮 细 胞 系I O S E 8 0快速复苏后均采用R PM I-1 6 4 0细胞培养基重悬,并加入胎牛血清(1 0%)和青霉素/链霉素的混合物(1%),放置在含有5%C O2的3 7 培养箱中培养,细胞长至9 0%左右时,胰酶消化进行细胞传代。S KOV 3及A 2 7 8 0细胞生长较好时,胰酶消化后以每孔21 05个细胞接种于6孔板内,分为s i-N C组和s i-N C OA 5组。按照L i p 2 0 0 0转染试剂说明书分别将N C s i R NA和N C OA 5 s i R NA转染至对应组的细胞中。转染4 8 h后,通过w e s t e r n-b l o t检测沉默效率。1.3 B o y d e n实验 将B D基质胶在4 下解冻,采用无血清培养基稀释基质胶(稀释比例为1 1 0),取1 0 L稀释的基质胶均匀加至T r a n s w e l l小室的上室聚碳酸酯膜上,放置3 7 培养箱中3 0 m i n备用。胰酶消化s i-N C组和s i-N C OA 5组S KOV 3及A 2 7 8 0细胞重悬,采用无血清培养基洗3次并重悬细胞,将细胞密度调整为1.51 06个细胞/m L,接种至铺好的基质胶上,并在T r a n s w e l l小室的下室中加入1 0 0 L含有1 0%胎牛血清的培养基。在培养箱中孵育1 2 h后,用棉签去除上室中的细胞,将聚碳酸酯膜放置4%多聚甲醛中固定,并采用结晶紫染料染色。在显微镜下随机选择5个不重叠的视野计算侵袭细胞数目。1.4 T r a n s w e l l实 验 胰 酶 消 化s i-N C组 和s i-N C OA 5组S KOV 3及A 2 7 8 0细胞重悬,采用无血清培养基洗3次并重悬细胞,将细胞密度调整为11 06个细胞/m L,接种至T r a n s w e l l小室的上室聚碳酸酯膜上,并在T r a n s w e l l小室的下室中加入1 0 0 L含有1 0%胎牛血清的培养基。在培养箱中孵育6 h后,用棉签去除上室中的细胞,将聚碳酸酯膜放置4%多聚甲醛中固定,并采用结晶紫染料染色。在显微镜下随机选择五个不重叠的视野计算转移细胞数目。1.5 W e s t e r n-b l o t实验 胰酶消化s i-N C组和s i-N C OA 5组S KOV 3及A 2 7 8 0细胞,P B S洗3次后,加入含有蛋白酶/磷酸酶抑制剂混合物的蛋白裂解液,经高速 离 心 获 得 蛋 白 裂 解 液。根 据 二 辛 可 宁 酸(B C A)蛋白检测试剂盒检测和计算蛋白质浓度。吸取5 0 g等量的蛋白质加入十二烷基硫酸钠(S D S)聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳,并将凝胶转移到聚偏二氟乙烯膜(P V D F)上。采用封闭液封闭P V D F膜上的非 特 异 蛋 白,T B S T洗3次 后,将P V D F膜 与N C OA 5、E-c a d h e r i n、N-c a d h e r i n、v i m e n t i n、S l u g、GA P DH一抗稀释液(稀释浓度均为1 5 0 0 0)于4 中孵育过夜。T B S T洗3次后,将P V D F膜与兔、鼠二抗(稀释浓度均为1 8 0 0 0)孵育。采用E C L试剂盒检测蛋白条带。1.6 统计学分析 采用S P S S 2 0.0软件进行统计学分析,所有实验重复3次,计量数据以xs表示,3组间比较采用方差分析,两组间比较采用t检验分析。计数数据采用率表示,组间比较采用2检验分析。通过K a p l a n M e i e r法绘制患者生存曲线,L o g-R a n k法进行统计检验,使用G r a p h P a d P r i s m软件作图。P0.0 5为差异有统计学意义。2 结果2.1 N C OA 5在卵巢癌细胞系中表达上调 W e s t e r n b l o t检测N C OA 5在卵巢癌细胞株S KOV-3、A 2 7 8 0、O C 3、HO-8 9 1 0中的表达分别为0.8 90.0 8、0.9 10.1 0、0.1 90.0 3、0.2 10.0 4,显著高于在正常卵巢上皮细胞系I O S E 8 0中的表达(0.0 80.0 3)(F=1 0 3.7 9,P0.0 0 1)。其中在S KOV-3和A 2 7 8 0细胞中的表达相对较高(P0.0 5),见图1。3821西部医学 2 0 2 3年9月 第3 5卷第9期 M e d J W e s t C h i n a,S e p t e m b e r 2 0 2 3,V o l.3 5,N o.9 图1 W e s t e r n b l o t检测N C O A 5蛋白在卵巢癌细胞中的表达F i g u r e 1 T h e N C O A 5 p r o t e i n s e x p r e s s i o n i n o v a r i a n c a n c e r c e l l s w a s d e-t e c t e d b y W e s t e r n b l o t2.2 N C OA 5 s i R NA转染卵巢癌细胞效果 W e s t-e r n-b l o t结 果 显 示,N C OA 5蛋 白 在s i-N C组 和s i-N C OA 5组S KOV 3细胞中的表达分别为0.3 10.0 4和0.1 10.0 2,与s i-N C组相比,s i-N C OA 5组卵巢癌细胞 中N C OA 5的 表 达 显 著 降 低(t=7.7 4 6,P=0.0 0 1),见图2 A。在s i-N C组和s i-N C OA 5组A 2 7 8 0细胞中的表达分别为0.4 00.0 8和0.1 00.0 3,与s i-N C组相比,s i-N C OA 5组卵巢癌细胞中N C OA 5的表达显著降低(t=6.0 8 2,P=0.0 0 2),见图2 B。图2 W e s t e r n-b l o t检 测 显 示 与s i-N C组 相 比,s i-N C O A 5组 细 胞 中N C O A 5的表达显著降低F i g u r e 2 T h e w e s t e r n b l o t s h o w t h a t c o m p a r e d w i t h t h e s i-N C g r o u p,N C O A 5 p r o t e i n e x p r e s s i o n i s s i g n i f i c a n t l y r e d u c e d i n t h e s i-N C O A 5 c e l l c e l l s注:A.S KOV 3细胞;B.A 2 7 8 0细胞。2.3 N C OA 5 s i R NA对细胞侵袭能力的影响 B o y-d e n实验检测显示,s i-N C组和s i-N C OA 5组S KOV 3穿膜细胞数目分别为6 7.3 36.1 1和4 1.6 74.9 8,与s i-N C组相比,s i-N C OA 5组卵巢癌细胞侵袭能力显著降低(t=7.9 7 4,P0.0 0 1),见图3 A。s i-N C组和s i-N C OA 5组A 2 7 8 0穿膜细胞数目分别为7 2.6 77.3 2和2 2.6 75.9 8,与s i-N C组相比,s i-N C OA 5组卵巢 癌 细 胞 侵 袭 能 力 显 著 降 低(t=9.1 6 2,P0.0 0 1),见图3 B。2.4 N C OA 5 s i R NA对细胞转移能力的影响 T r a n-s w e l l实验检测显示,s i-N C组和s i-N C OA 5组S K-OV 3穿膜细胞数目分别为7 3.6 79.0 4和4 0.6 75.7 8,与s i-N C组相比,s i-N C OA 5组卵巢癌细胞转移能力显著降低(t=1 5.7 5 2,P0.0 0 1),见图4 A。s i-N C组和s i-N C OA 5组A 2 7 8 0穿膜细胞数目分别为8 8.9 38.9 6和3 3.6 47.4 3,与s i-N C组相比,s i-N C OA 5组卵巢癌细胞转移能力显著降低(t=8.2 2 7,P0.0 0 1),见图4 B。图3 B o y d e n实验检测显示与s i-N C组相比,s i-N C O A 5组S K O V 3细胞侵袭能力显著降低F i g u r e 3 T h e B o y d e n e x p e r i m e n t a l s h o w t h a t c o m p a r e d w i t h t h e s i-N C g r o u p,i n v a s i o n a b i l i t y o f s i-N C O A 5 S K O V 3 g r o u p c e l l s w a s s i g n i f i c a n t d e c r e a s e d注:A.S KOV 3细胞;B.A 2 7 8 0细胞。图4 T r a n s w e l l检测显示与s i-N C组相比,s i-N C O A 5组S K O V 3细胞转移能力显著降低F i g u r e 4 T r a n s w e l l a s s a y s h o w t h a t c o m p a r e d w i t h t h e N C g r o u p,m e t a s-t a s i s a b i l i t y o f t h e s i-N C O A 5 g r o u p c e l l s w a s s i g n i f i c a n t d e-c r e a s e d注:A.S KOV 3细胞;B.A 2 7 8 0细胞。2.5 N C O A 5 s i R N A对细胞E MT的影响 W e s t e r n-b l o t检测结果显示,与s i-N C组相比,s i-N C O A 5组卵巢癌细胞S K O V 3中E MT相关蛋白E-c a d h e r i n表达增加,N-c a d h e r i n、v i m e n t i n和S l u g蛋白表达减少(均P0.0 5),见图5 A。与s i-N C组相比,s i-N C O A 5组卵巢癌细胞A 2 7 8 0中E MT相关蛋白E-c a d h e r i n表达增加,N-c a d h e r i n、v i m e n t i n和S l u g蛋白表达减少(均P 0.0 5),见图5 B。4821西部医学 2 0 2 3年9月 第3 5卷第9期 M e d J W e s t C h i n a,S e p t e m b e r 2 0 2 3,V o l.3 5,N o.9图5 w e s t e r n-b l o t检测显示与s i-N C组相比,s i-N C O A 5组S K O V 3细胞中E M T相关蛋白E-c a d h e r i n表达增加,N-c a d h e r i n、v i m e n t i n和S l u g蛋白表达减少F i g u r e 5 T h e w e s t e r n b l o t s h o w t h a t c o m p a r e d w i t h t h e N C g r o u p,EMT-r e l a t e d p r o t e i n E-c a d h e r i n e x p r e s s i o n o f t h e s i-N C O A 5 g r o u p c e l l s w a s i n-c r e a s e d,a n d N-C a d h e r i n,V i m e n t i n a n d S l u g p r o t e i n e x p r e s s i o n w a s d e c r e a s e d注:A.S KOV 3细胞;B.A 2 7 8 0细胞。3 讨论卵巢癌严重威胁女性患者生命健康,其发病机制也尚未完全明确。研究显示基因表达改变在卵巢癌的发生发展中发挥重要作用7,因此研究在卵巢癌恶性进展中发挥关键作用的分子对寻求抗卵巢癌治疗的分子靶向药物以改善患者预后至关重要。N C OA 5是一种核受体核心调节剂,与和雌激素受体相互作用,可以调节雌激素受体介导的转录活性8。此外,N C OA 5与肿瘤抑制剂T AT相互作用蛋白相互作用,以调节癌基因C-MY C的转录,以促使肿瘤的发生9。已有研究显示N C OA 5 在乳腺癌、宫颈癌、结直肠癌和甲状腺乳头状癌等常见肿瘤中表达异常,其中N C OA 5在结直肠癌和肝细胞肝癌中高表达,与肿瘤患者预后较差相关,并促进肿瘤细胞增殖和侵袭转移能力,以发挥癌基因的作用1 0-1 1。在宫颈癌和甲状腺乳头状癌中N C OA 5 表达降低,低表达N C OA 5的宫颈癌和甲状腺乳头状癌患者预后较差,抑制宫颈癌细胞增殖、侵袭和转移作用,以发挥抑癌作用6,1 2。表明N C OA 5 在肿瘤的恶性进展中充当“双面”角色,但是N C OA 5在卵巢癌中的研究鲜有报道。本研究在卵巢癌细胞系中检测发现N C OA 5中表达升高,提示N C OA 5在卵巢癌中发挥促癌作用,与N C OA 5在乳腺癌和结直肠癌组织水平的表达具有一致性。但是本研究未在卵巢癌组织水平检测N C OA 5的表达情况,将在后续进行卵巢癌组织样本的收集并进行研究。在乳腺癌、结直肠癌和肝细胞肝癌等肿瘤中,相关研究显示N C OA 5与肿瘤细胞增殖和侵袭、转移能力相关5,1 0,1 3。本研究在卵巢癌细胞系S KOV-3和A 2 7 8 0中干扰N C OA 5的表达,生物学功能显示抑制N C OA 5的表达后,卵巢癌细胞的侵袭和转移能力降低。表明N C OA 5促进卵巢癌的恶性进展,可能是宫颈癌恶性进展的关键基因,但是N C OA 5发挥的作用机制仍需探讨。过往研究显示,N C OA 5可以通过调控N o t c h 3、P I 3 K/AK T、p 2 1(WA F 1/C I P 1)等信号通路参与肿瘤的进展6,9,1 4。其中在乳腺癌和肝细胞肝癌中干扰N C OA 5的表达,通过抑制上皮间质转化(E p i t h e l i a l-m e s e n c h y m a l t r a n s i t i o n,EMT)抑制肿瘤细胞的侵袭和转移5,1 3。而EMT被认为是肿瘤从发生到转移的主要驱动力,并且在诱导肿瘤恶性进展和耐药性方面发挥关键作用1 5-1 6。EMT包含粘附连接和底物极性的丧失以及获得间充质特征,如纺锤形细胞形态和肌动蛋白应激纤维的重组、增强细胞运动和侵袭能力等过程1 7。在分子水平上,EMT的主要标志是E-c a d-h e r i n表达降低,这导致细胞连接减弱,随后细胞之间脱离,以至单细胞迁移增加1 8。E-c a d h e r i n的缺失经常与N-c a d h e r i n表达增加相结合,这被认为有助于基质导向的细胞粘附谱,从而导致运动、侵入性和转移性细胞表型1 9。同时在EMT过程中,上皮细胞失去了极性转化为间充质细胞,并伴随着v i m e n t i n2 0和S l u g蛋白表达增加2 1,本研究检测发现干扰N C OA 5的表达后,E-c a d h e r i n蛋白的表达增加,N-c a d h e r i n、v i m e n t i n和S l u g蛋 白 的 表 达 减 少。表 明 干 扰N C OA 5的表达是通过减弱EMT抑制卵巢癌的侵袭和转移能力。4 结论 N C OA 5在卵巢癌细胞系中高表达,并有促进卵巢癌细胞侵袭和转移能力,其作用机制可能是通过调控EMT发挥作用,N C OA 5具有成为卵巢癌治疗分子靶点的潜力。5821西部医学 2 0 2 3年9月 第3 5卷第9期 M e d J W e s t C h i n a,S e p t e m b e r 2 0 2 3,V o l.3 5,N o.9【参考文献】1B R AY F,F E R L AY J,S O E R J OMA T A RAM I,e t a l.G l o b a l c a n c e r s t a t i s t i c s 2 0 1 8:G L O B O C AN e s t i m a t e s o f i n c i d e n c e a n d m o r t a l i t y w o r l d w i d e f o r 3 6 c a n c e r s i n 1 8 5 c o u n t r i e sJ.C A C a n c e r J C l i n,2 0 1 8,6 8(6):3 9 4-4 2 4.2TO R R E L A,T R A B E R T B,D E S AN T I S C E,e t a l.O v a r i a n c a n c e r s t a t i s t i c s,2 0 1 8J.C A C a n c e r J C l i n,2 0 1 8,6 8(4):2 8 4-2 9 6.3王雯智,郑蕾,李虹.L n c R NA P VT 1 m i R-3 0 d表达与上皮性卵巢癌患者化疗敏感性及预后的关系J.西部医学,2 0 2 0,3 2(5):6 8 7-6 9 1.4L I U X,L I U F,GAO S,e t a l.A s i n g l e n o n-s y n o n y m o u s N C OA 5 v a r i a t i o n i n t y p e 2 d i a b e t i c p a t i e n t s w i t h h e p a t o c e l l u l a r c a r c i n o m a i m p a i r s t h e f u n c t i o n o f N C OA 5 i n c e l l c y c l e r e g u l a t i o nJ.C a n c e r L e t t,2 0 1 7,3 9 1:1 5 2-1 6 1.5TAN Y,L I U F,XU P.K n o c k d o w n o f N C OA 5 s u p p r e s s e s v i a-b i l i t y,m i g r a t i o n a n d e p i t h e l i a l-m e s e n c h y m a l t r a n s i t i o n,a n d i n-d u c e s a d h e s i o n o f b r e a s t c a n c e r c e l l sJ.O n c o l L e t t,2 0 2 1,2 2(4):6 9 4.6L I ANG Y,Z HAN G T,S H I M,e t a l.L o w e x p r e s s i o n o f N C OA 5 p r e d i c t s p o o r p r o g n o s i s i n h u m a n c e r v i c a l c a n c e r a n d p r o m o t e s p r o l i f e r a t i o n,m i g r a t i o n,a n d i n v a s i o n o f c e r v i c a l c a n c-e r c e l l l i n e s b y r e g u l a t i n g n o t c h 3 s i g n a l i n g p a t h w a yJ.J C e l l B i o c h e m,2 0 1 9,1 2 0(4):6 2 3 7-6 2 4 9.7张勇,孙丹,黄三秀,等.梓醇通过调控m i R-2 0 0表达抑制卵巢癌细胞的增殖和促进其凋亡J.西部医学,2 0 1 9,3 1(1):1 9-2 3.8YUAN X,Z HAN G L,C U I Y,e t a l.N C OA 5 i s a m a s t e r r e g u-l a t o r o f a m i n o a c i d-i n d u c e d mT O R a c t i v a t i o n a n d-c a s e i n s y n-t h e s i s i n b o v i n e m a mm a r y e p i t h e l i a l c e l l sJ.B i o c h e m B i o p h y s R e s C o mm u n,2 0 2 0,5 2 9(3):5 6 9-5 7 4.9J I AN G C,I T O M,P I E N I N G V,e t a l.T I P 3 0 i n t e r a c t s w i t h a n e s t r o g e n r e c e p t o r a l p h a-i n t e r a c t i n g c o a c t i v a t o r C I A a n d r e g u l a t e s c-m y c t r a n s c r i p t i o nJ.J B i o l C h e m,2 0 0 4,2 7 9(2 6):2 7 7 8 1-2 7 7 8 9.1 0S UN K,WAN G S,HE J,e t a l.N C OA 5 p r o m o t e s p r o l i f e r a-t i o n,m i g r a t i o n a n d i n v a s i o n o f c o l o r e c t a l c a n c e r c e l l s v i a a c t i v a-t i o n o f P I 3 K/AK T p a t h w a yJ.O n c o t a r g e t,2 0 1 7,8(6 4):1 0 7 9 3 2-1 0 7 9 4 6.1 1 何静彩.N C OA 5在肝细胞癌中的功能及机制的研究D.南方医科大学,2 0 1 8.1 2Z HE N G Z C,WAN G Q X,Z HAN G W,e t a l.A n o v e l t u m o r s u p p r e s s o r g e n e N C OA 5 i s c o r r e l a t e d w i t h p r o g r e s s i o n i n p a p i l-l a r y t h y r o i d c a r c i n o m aJ.O n c o T a r g e t s T h e r,2 0 1 8,1 1:3 0 7-3 1 1.1 3HE J,Z HAN G W,L I A,e t a l.K n o c k o u t o f N C OA 5 i m p a i r s p r o l i f e r a t i o n a n d m i g r a t i o n o f h e p a t o c e l l u l a r c a r c i n o m a c e l l s b y s u p p