薄荷油口腔溃疡膜的制剂处方研究.pdf

薄荷油口腔溃疡膜的制剂处方研究杜 卓1，艾毅龙2，王梓帆1，蔡炜锋1，刘飞蝶1，朱春霞1，彭立生3，李 霞1，2（1.佛山科学技术学院 医学院，广东 佛山 528225；2.佛山科学技术学院 附属口腔医院，广东 佛山 528000；3.深圳市中医院，广东 深圳 518000）摘要：目的 研究薄荷油口腔溃疡膜的制剂处方，建立其有效成分测定方法并进行质量评价。方法 筛选处方制备薄荷油口腔溃疡膜，建立紫外分光光度法测定薄荷油口腔溃疡膜中薄荷油含量。结果 薄荷油口腔溃疡膜的最佳制剂处方为：聚乙烯醇与羧甲基纤维素钠分开溶胀，两者比例为 2颐1，用量分别为 2.0 g 和 1.0 g，甘油用量为 1.0 g，吐温-80 为 1.3 g，薄荷油为 0.5 g。结论 制得的薄荷油口腔溃疡膜符合 中华人民共和国药典（2020版）要求，经方法学验证，建立的紫外分光光度法测定结果稳定、可靠。关键词：薄荷油；口腔溃疡；膜剂；紫外分光光度法中图分类号：R94；R781.5文献标志码：A复发性口腔溃疡（recurrent oral ulcer，ROU）又名口疮，是临床上较为普遍的口腔黏膜疾病。主要是由各种因素所引起的在舌、颊、唇、牙齿、软腭等处口腔黏膜上出现破损与溃烂 1。目前缺乏能根治 ROU的特效临床方案，主要以对症处理原则为主 2。薄荷是唇形科薄荷属叶本植物，功效是疏散风热、消炎止痛 3。经水蒸气蒸馏薄荷新鲜采集茎叶所得薄荷油，其活性成分主要是具有镇痛抗菌消炎作用的 L-薄荷醇 4-7 等，可有效对症治疗 ROU。应用于含薄荷油成分剂型有纳米乳剂 8、微胶囊 9、茁-环糊精包合物 10 等多种剂型。其中，膜剂可口服口含，在人体腔道内给药，还可用于黏膜损害、烧伤及炎症等人体表面覆盖，从而起到对局部或全身的治疗效果。膜剂对口腔内壁粘着性好、起效快，且生产流程简单、无粉末飞扬。将挥发油薄荷油制备为固体的膜剂，不仅方便保存使用，且覆盖口腔溃疡面隔离阻止病原菌感染，并有效保护溃疡创面。薄荷油口腔溃疡膜剂能快速发挥薄荷醇抗菌消炎止痛功能，促使口腔溃疡创面迅速痊愈，减轻病人痛苦，该制剂具有良好的临床前景和社会效益。故本研究制成的薄荷油口腔溃疡膜剂为今后开展更深入的研究奠定一定的物质前提。1试剂与仪器薄荷油，上海阿拉丁有限公司；羧甲基纤维素钠（CMC-Na），天津市科密欧试剂公司；聚乙烯醇，北京国人逸康公司；吐温-80，广东省化学试剂中心；甘油，广东光华试剂公司；液体石蜡，广州化学试剂收稿日期：2022-12-12基金项目：广东省基础与应用基础研究基金资助项目（2022A1515140098）；佛山市口腔生物材料工程技术研究中心资助项目（2120001009432）作者简介：杜 卓（1977-），男，湖南长沙人，佛山科学技术学院副教授，博士。通信作者：李 霞（1973-），女，江西萍乡人，佛山科学技术学院教授，博士。文章编号：1008-0171（2023）04-0001-05第 41 卷 第 4 期佛山科学技术学院学报（自然科学版）Vol.41 No.42023 年 7 月Journal of Foshan University（Natural Sciences Edition）Jul.2023佛山科学技术学院学报（自然科学版）第 41 卷厂；无水乙醇，天津市北联精细公司；蒸馏水，广州屈臣氏食品饮料有限公司。CU-600 型电热恒温水槽，上海一恒公司；JJ300 型电子天平，常熟市双杰厂；GZX-9140 MBE 数显鼓风干燥箱，上海市博讯厂；UV-1600PC 型紫外可见分光光度计，上海市美谱达；JB-2 型磁力搅拌器，上海市智光公司。2方法与结果2.1 膜剂制备方法称取处方中聚乙烯醇、羧甲基纤维素钠，先用蒸馏水浸泡过夜，溶胀充分后，于维持 90 益条件下将二者混匀并静置冷至常温，加处方中甘油、吐温-80 及薄荷油，混合均匀，静置待气泡消失后，将混合所得溶剂均匀涂刷在已清洁晾干玻璃板上，控制厚度为 0.30.4 mm。事先在玻璃板背面按 1.5 cm伊1.5 cm规格分配好面积，室温晾干两天后割膜，即可得薄荷油膜剂。2.2 最佳处方筛选按表 1 聚乙烯醇与羧甲基纤维素钠的配比 11 设置为 1颐1、2颐1、2颐3，调整甘油用量并进行筛选。以同一工艺方法生产空白膜剂，以找到最适合膜剂基质配比。分别制备 9 个处方膜剂样品各 5 份，通过对空白膜剂样品的成膜性能、脱膜性能、光滑性、厚度、色泽、柔软性及韧性等因素加以对比，记录下评价结果。结果如表 1 所示。从表 1 得知，处方 5 中所制得膜剂成膜性好、表面光洁、厚薄匀称统一、色泽匀称、质感细腻、弹性较好。符合 中华人民共和国药典（2020 版）有关膜剂的相关要求 3，故选择处方 5 为最佳处方制备薄荷油口腔溃疡膜剂，并进行相关质量评价 12。表 1薄荷油口腔溃疡膜处方筛选记录表2.3 筛选溶胀方式确定最佳膜剂处方后，选用将聚乙烯醇和羧甲基纤维素钠分别溶胀和混合溶胀两种方式对比。即选取两种不同溶胀方法制备空白膜剂各 10 片样品，通过对所得样品的成膜性、脱膜性、光滑性、厚度、色泽、柔软性及韧性等特征加以对比评价，记录结果从而筛选最佳的溶胀方式。结果如表 2 所示。根据表 2 所示，将聚乙烯醇与羧甲基纤维素钠分开溶胀是较优的溶胀方式。所制膜剂的整体成膜性好、表面光洁、厚薄匀称统一、色泽均一、质感细致、弹性较好，符合 中华人民共和国药典（2020 版）关于膜剂的相关要求 3。表 2空白膜剂的溶胀方式筛选表处方123456789聚乙烯醇/g1.51.51.52.02.02.01.21.21.2羧甲基纤维素钠/g1.51.51.51.01.01.01.81.81.8甘油/g0.51.01.50.51.01.50.51.01.5吐温-80/g1.31.31.31.31.31.31.31.31.3成膜性一般一般一般一般好较好一般较差一般光滑性有较多气泡有少许气泡有较多气泡光洁无气泡光洁无气泡有少许气泡有少许气泡有较多气泡有少许气泡厚度均匀一致均匀一致均匀一致均匀一致均匀一致均匀一致均匀一致均匀一致均匀一致颜色均匀均匀均匀均匀均匀均匀均匀均匀均匀柔软性一般好较好一般好好一般较差好项目聚乙烯醇与羧甲基纤维素钠分开溶胀聚乙烯醇与羧甲基纤维素钠混合溶胀成膜数量97光滑较少气泡数量67厚度均匀数量108颜色均匀数量1010质地柔软数量64韧性较好数量54张2第 4 期2.4 质量评价2.4.1 重量差异度测定取表 1 中处方 5 的成分剂量，即空白膜剂制备最佳处方再加 0.5 g 薄荷油制备的薄荷油口腔溃疡膜共 20 片（1.5 cm伊1.5 cm）。精密称定总重量，再精密称膜剂每片重量，由此计算获得重量差异度。计算公式为：重量差异度=（单片重量原平均重量）/平均重量伊100%。薄荷油口腔溃疡膜重量差异度结果见表 3，结果显示薄荷油口腔溃疡膜 20 片总重 0.832 0 g，平均每片重为 0.041 6 g。每片膜剂的重量差异度均在依10%以内，符合 中华人民共和国药典（2020 版）有关膜剂的相关要求 3。表 3薄荷油膜的重量差异度表2.4.2 溶解时间测定以最佳处方即表 1 中处方 5，再加 0.5 g 薄荷油制备薄荷油口腔溃疡膜。分别取 6 片放置在 150 mL烧杯，再加入 100 mL 的 37 益蒸馏水并保持恒温。加磁力搅拌子后放在磁力搅拌器开始搅动，记录下薄荷油口腔溃疡膜完全溶解时间 12。另取薄荷油口腔溃疡膜 6 片分别放入 150 mL 烧杯中，并贴在烧杯壁上，再加入 100 mL 的 37 益蒸馏水并维持恒温。记录薄荷油口腔溃疡膜完全溶解的时间。薄荷油口腔溃疡膜的溶解时间见表 4，结果显示：薄荷油口腔溃疡膜在恒温磁力搅拌器搅拌溶解的平均时间为 215 s，而不加搅拌贴壁溶解的平均时间 16.5 min。临床上治疗口腔溃疡需膜剂黏附口腔溃疡面时间保持较长，以利于提高治疗效果。从结果可看出，所制备的薄荷油口腔溃疡膜制剂符合临床上的需求。表 4薄荷油口腔溃疡膜溶解时间测定表2.5 测定方法学考察2.5.1 紫外波长 13-14 对照品溶液：精密量取 1 mL 薄荷油溶液（0.800 3 g），用适量 50%乙醇完全溶解后定容，制成0.004 0 g/mL 薄荷油对照品溶液。供试品溶液：精密称取 6 片薄荷油口腔溃疡膜，分别用少量 50%乙醇溶解并定容至 50 mL，过滤后将续滤液精密移取 10 mL 定容至 25 mL 容量瓶。空白基质溶液：取不加薄荷油制备的空白口腔溃疡膜（聚乙烯醇与羧甲基纤维素钠 2颐1）20 片，同供试品溶液制备方法即得空白膜剂基质溶液。对照品与供试品的吸收峰主要在 200 nm 处 14。考虑末端吸收干扰，而波长在 234 nm 为薄荷油的杜 卓等：薄荷油口腔溃疡膜的制剂处方研究重量/g0.038 20.038 00.040 40.043 50.038 50.037 60.041 50.042 60.044 50.038 1编号12345678910编号11121314151617181920重量差异度/-8.2-8.7-2.94.8-7.5-9.6-0.22.46.9-8.4重量差异度/-9.64.81.47.4-6.04.88.47.77.03.1重量/g0.037 60.043 60.042 20.044 70.039 10.043 60.045 10.044 80.045 50.042 9项目恒温磁力搅拌器溶解时间/s不加搅拌贴壁溶解时间/min119215218514323017422516521718624319平均值21516.53佛山科学技术学院学报（自然科学版）第 41 卷紫外吸收肩峰且无基质吸收干扰，故选择 234 nm 为测定波长。2.5.2 标准曲线从上述制得对照品溶液中精密量取 1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL 置于 10 mL 量瓶中，用 50%乙醇稀释至刻度，定容，摇匀。所得对照品溶液分别为 0.053 3 mg/mL、0.080 0 mg/mL、0.106 0 mg/mL、0.133 3 mg/mL、0.160 0 mg/mL，再以 50%乙醇为空白对照，在 234 nm 的波长测定吸光度。获得标准曲线的回归方程与相关系数 14：在 0.053 3 mg/mL0.160 0 mg/mL 范围内线性良好，回归方程为 y=4.211 5 x+0.135，相关系数 R2=0.999 6。2.5.3 含量测定取同一批号制备的薄荷油口腔溃疡膜 6 片，分别精密称定重量。加入少量 50%乙醇溶液让膜剂充分溶解后移至 50 mL 容量瓶中。以 50%乙醇定容至一定刻度，摇匀制成 6 份样品原液。以 50%乙醇为空白，在 234 nm 处测定其吸光度，计算获得的薄荷油膜剂中薄荷油平均含量及相对标准偏差（relativestandard deviation，RSD）值。薄荷油口腔溃疡膜紫外测定的重复性试验及薄荷油含量测定结果如表 5 所示。试验结果显示：薄荷油口腔溃疡膜所含薄荷油平均含量 66.62 mg/g，RSD=4.4 豫，试验测试结果重复性较好。表 5重复性测试与薄荷油含量测定表2.5.4 精密度试验取 2.5.3 含量测定中样品中含量为 68.23 mg/g 薄荷油供试品溶液，在 234 nm 波长连续测定 6 次吸光度，所得平均吸光度为 0.194，精密度 RSD=0.21 豫，表明该分析方法的精密度很好。2.5.5 样品溶液稳定性试验将 2.5.3 含量测定中薄荷油膜剂 6 份供试品溶液放置于同一避光阴凉处，分别于 0 h、2 h、4 h、8 h、12 h，以 50%乙醇为空白对照测定其吸光度。薄荷油口腔溃疡膜样品溶液的稳定性见表 6，数据表明，薄荷油口腔溃疡膜试样溶液吸光度在 16 h内基本不变。表 6药液稳定性测定表2.5.6 回收率试验分别将 2.5.3 中已知薄荷油含量的 6 份样品原液过滤，弃去初滤液。在 10 mL 容量瓶中加入 5 mL续滤液，再每个容量瓶加入精密量取的薄荷油对照品溶液 1 mL。按 2.5.3 方法进行含量测定，计算平均回收率和相对 RSD 值。平均含量/（mg g-1）66.62含量/（mg g-1）67.7568.2368.0960.7467.4667.46吸光度 A0.2110.1940.1930.1950.1890.189重量/g0.028 00.020 30.019 90.023 30.018 30.018 3编号123456RSD/4.4编号12345616 h0.2090.1960.1930.1930.1870.18912 h0.2060.1940.1920.1950.1860.1898 h0.2100.1950.1930.1930.1890.1884 h0.2110.1970.1930.1920.1890.1872 h0.2110.1900.1930.1950.1890.1880 h0.2110.1940.1930.1950.1890.1894第 4 期结果表明，平均回收率为 95.92 豫，RSD=3.5 豫，回收率良好。3讨论预试验发现，将处方中高分子材料分别用蒸馏水浸泡过夜充分溶胀之后，再 90 益水浴加热溶解，所制得的膜在韧性与柔软性明显优于高分子材料混合后再溶胀制得的膜。而在空白基质筛选中加热熔融时，须先将基质完全熔融后再搅拌混合，混合时搅拌应该缓慢，混合时间适当即可，基质搅拌至无明显结块即可停止。这些措施均能有效减少气泡产生，有助于涂板成膜。在加薄荷油到成膜材料溶液时，搅动也应当缓慢，避免形成泡沫。涂膜时不能搅动，水浴温度要适中，若温度过高，制得膜剂冷却后会出现气泡。而进行涂膜操作之前，要将玻璃板表面清洗干净并烘干备用。在玻璃板上滴加几滴液体石蜡，并小心涂抹整个玻璃板面，这有利于提高玻璃板表面润滑性，从而方便涂板及成膜后顺利脱膜。为了制膜均匀，可将混合基质溶液一次添加足量，并尽量一次完成涂膜。以上操作能使玻璃板上膜厚度均匀一致，光滑性也比较好，有利于成膜及脱膜。从植物薄荷茎叶提取获得挥发油，易受热挥发造成药物损失，因此，在制备薄荷油膜剂过程中，须等到成膜材料溶液温度降低至略高于室温时，才加入薄荷油，避免受热损失影响疗效。制得膜剂干燥温度也不能过高，最好采用自然干燥过夜的方式。4结论本研究制得的薄荷油口腔溃疡膜符合 中华人民共和国药典（2020 版）要求，且建立的紫外分光光度法测定薄荷油含量具有较好精密性和重复性，且操作简单，该方法今后可用于薄荷油口腔溃疡膜的质量控制与产品分析。参考文献：1陈谦明.口腔黏膜病学 M.4 版.北京:人民卫生出版社,2013:67-71.2赵瑞泉.复发性口腔溃疡的治疗现状 J.慢性病学杂志,2013,14（6）:465-467.3中国药典委员会.中华人民共和国药典 M.北京:中国医药科技出版社,2020:394-395.4郭希凯.薄荷油化学成分分析 J.特种经济动植物,2020,23（9）:33-35.5陈光亮,姚道云,汪远金,等.薄荷油药理作用和急性毒性的研究 J.中药药理与临床,2001（1）:11-12.6LEOPOLD J,GERHARD B,STEFANIE B.Antimicrobial Activities of Essential Oils of Mint and Peppermint as Well as Someof Their Main Compounds J.Journal of Essential Oil Research,2009,21（4）:363-366.7KOVANDA,LAUREN 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structure of biomass seriouslyhinders the palpability of biological enzymes and cellulose and hemicellulose,greatly reducing the utilizationrate of biomass,and pretreatment technology is the key to solving this problem.Based on this,this paper reviewsvarious pretreatment methods for wood fiber biomass at home and abroad in recent years:physical,biological,chemical and physical-chemical methods,and analyzes and summarizes the advantages and disadvantages ofthese pretreatment methods in order to provide reference for the establishment of green and efficient pretreatmenttechnology in the future and the efficient utilization of lignocellulosic biomass.biomass;biomass structure;pretreatment;enzymatic hydrolysisPretreatment promotes enzymatic hydrolysisof lignocellulosic biomass to producehigh value chemicals（1.School of Food Science and Engineering,Foshan University,Foshan 528225,China;2.School of Environmental and Chemical Engineering,Foshan University,Foshan 528000,China）LU Kaihong1,CHEN Xiaojuan2,ZHOU Yu1To study the optimization of formulation of peppermint oil oral ulcer film,establish thedetermination method and evaluate its quality.The peppermint oil oral ulcer film was prepared byscreening prescription and the content of peppermint oil oral ulcer film was determined by UVspectrophotometry.The best optimization of formulation of peppermint oil oral ulcer film is as follows:polyvinyl alcohol and sodium carboxymethyl cellulose are swelled separately,with the ratio of 2颐1,the dosage of2.0 g and 1.0 g respectively.The dosage of glycerol is 1.0 g,tween-80 is 1.3 g and peppermint oil is 0.5 g.By the best optimization of formulation,the peppermint oil oral ulcer film meets the provisions ofChinese Pharmacopoeia 2020 edition.The UV spectrophotometry method is stable and reliable.peppermint oil;oral ulcer;films;UV-spectrophotometry（1.School of Medicine,Foshan University,Foshan 528225,China;2.Foshan Stomatology Hospital,Foshan 528000,China;3.Shenzhen Traditional Chinese Medicine Hospital,Shenzhen 518000,China）DU Zhuo1,AI Yilong2,WANG Zifan1,CAI Weifeng1,LIU Feidie1,ZHU Chunxia1,PENG Lisheng3,LI Xia1,2Optimization of formulation of peppermintoil ulcer film（上接第 5 页）42