疱疹病毒案例专家讲座.pptx

疱疹病毒疱疹病毒 herpesviruses,HV herpesviruses,HV第第2424章章 疱疹病毒案例第1页掌握掌握 疱疹病毒致病性疱疹病毒致病性熟悉熟悉 疱疹病毒生物学性状疱疹病毒生物学性状了解了解 疱疹病毒检验方法和防治标准疱疹病毒检验方法和防治标准教学目标教学目标疱疹病毒案例第2页疱疹病毒疱疹病毒(Herpesvirus)Herpesvirus)是一类中等大小、结构相同、有包膜是一类中等大小、结构相同、有包膜DNADNA病毒。病毒。现已发觉现已发觉114114种，种，分分3 3个亚科个亚科已知人类已知人类疱疹病毒疱疹病毒有：有：单纯单纯疱疹病毒疱疹病毒 1 1 型和型和 2 2 型型 （HSV 1&2HSV 1&2）水痘水痘带状带状疱疹病毒疱疹病毒（VZVVZV）巨细胞病毒巨细胞病毒 （CMVCMV）EBEB病毒病毒（EBVEBV）人类人类疱疹病毒疱疹病毒 6 6型、型、7 7型、型、8 8型型 （HHV 6,7,HHV 6,7,8 8）疱疹病毒案例第3页正式命名正式命名惯用名病毒亚科病毒亚科主要生物学性状所致疾病所致疾病人类疱疹病毒1型（HHV-1）单纯疱疹病毒1型（HSV-1）繁殖快、杀细胞性感染感觉神经节中潜伏唇疱疹、龈口炎、角膜结膜炎、脑炎等人类疱疹病毒2型（HHV-2）单纯疱疹病毒2型（HSV-2）同上生殖器疱疹、新生儿疱疹人类疱疹病毒3型（HHV-3）水痘-带状疱疹病毒（VZV）同上水痘、带状疱疹、脑炎人类疱疹病毒4型（HHV-4）Epstein-Barr病毒（EBV）淋巴细胞中繁殖与潜伏传染性单核细胞增多症、Burkitt淋巴瘤、鼻咽癌（?）等人类疱疹病毒5型（HHV-5）人类巨细胞病毒常在淋巴细胞、肾脏及分泌腺体中潜伏先天性巨细胞包涵体病、单核细胞增多症、间质性肺炎、先天性畸形、肝炎人类疱疹病毒6型（HHV-6）人类疱疹病毒6型同人巨细胞病毒婴儿急疹、间质性肺炎、骨髓抑制人类疱疹病毒7型（HHV-7）人类疱疹病毒7型同人巨细胞病毒未明确人类疱疹病毒8型（HHV-8）人类疱疹病毒8型同EB病毒Kaposi肉瘤弥猴疱疹病毒1猿猴B病毒同HSV脊髓炎、出血性脑炎疱疹病毒案例第4页疱疹病毒共同特征疱疹病毒共同特征病毒颗粒呈球形，病毒颗粒呈球形，120120300300nmnm。核衣壳核衣壳约约100100nmnm。2020面体立体对称，面体立体对称，有有包膜包膜双链线形双链线形DNADNA疱疹病毒案例第5页除除EBEB病毒及病毒及HHV-6HHV-6、HHV-7HHV-7和和HHV8HHV8外，均能外，均能在人二倍体细胞内复制，产生显著在人二倍体细胞内复制，产生显著CPECPE，并并有核内嗜酸性包涵体，形成多核巨细胞有核内嗜酸性包涵体，形成多核巨细胞各种感染类型各种感染类型:显性感染显性感染潜伏感染潜伏感染整合感染整合感染先天性感染先天性感染疱疹病毒案例第6页Herpes simplex virus,HSV第一节第一节 单纯疱疹病毒单纯疱疹病毒疱疹病毒案例第7页单纯疱疹病毒案例单纯疱疹病毒案例患者，女，患者，女，2020岁。因经常出现口唇黏岁。因经常出现口唇黏膜处水疱而就诊，患者发烧时口唇周膜处水疱而就诊，患者发烧时口唇周围常起针头大小小疱，常为一群，也围常起针头大小小疱，常为一群，也有两三群，自觉有轻度烧灼感，历时有两三群，自觉有轻度烧灼感，历时1 1周左右可自愈，重复发作屡次，并周左右可自愈，重复发作屡次，并伴有口腔溃疡、咽炎、舌炎等现象。伴有口腔溃疡、咽炎、舌炎等现象。疱疹病毒案例第8页思索题：思索题：1 1该患为何种病原体感染？病原体该患为何种病原体感染？病原体存在于何处？存在于何处？2 2潜伏感染定义是什么？潜伏感染定义是什么？疱疹病毒案例第9页单纯疱疹病毒单纯疱疹病毒单纯疱疹病毒，因为在感染急性期发生单纯疱疹病毒，因为在感染急性期发生水疱性皮疹即所谓单纯疱疹而得名水疱性皮疹即所谓单纯疱疹而得名包含两个血清型包含两个血清型HSV-1HSV-1HSV-2HSV-2疱疹病毒案例第10页一、生物学性状一、生物学性状疱疹病毒案例第11页生物学性状生物学性状经典疱疹病毒科病毒特征经典疱疹病毒科病毒特征HSVHSV有两个血清型，有两个血清型，即即HSV-1HSV-1和和HSV-2HSV-2。二者二者DNADNA同源性约为同源性约为50%50%病毒体有六个包膜相关糖蛋白：病毒体有六个包膜相关糖蛋白：gpBgpB、gpCgpC、gpDgpD、gpEgpE、gpGgpG和和gpHgpH。gpCgpC是型特是型特异抗原，只有异抗原，只有HSV-1HSV-1有。有。gpDgpD是病毒中和是病毒中和抗原，是亚单位疫苗备选蛋白抗原，是亚单位疫苗备选蛋白疱疹病毒案例第12页在各种细胞增殖，病毒复制快（在各种细胞增殖，病毒复制快（48h48h），），出现细胞肿胀变圆和核内嗜酸性包涵体出现细胞肿胀变圆和核内嗜酸性包涵体CPECPE疱疹病毒案例第13页二二、致病性与免疫性、致病性与免疫性疱疹病毒案例第14页性接触性接触垂直传输垂直传输传输路径传输路径亲亲密密接接触触传传输输：唾唾液液、阴阴道道分分泌泌物物、疱疱疹疹液液，接接吻吻，共共用用杯杯子子，牙刷等牙刷等。疱疹病毒案例第15页HSVHSV感染较普遍感染较普遍 亲密接触和性接触亲密接触和性接触 经粘膜和破损皮肤经粘膜和破损皮肤上上皮皮细细胞胞内内复复制制，水水疱疱浆浆液液充充满满病病毒毒颗颗粒粒，细细胞胞碎碎片片，基基底底部部多多核核巨巨细细胞胞；神神经经细细胞胞则为潜伏感染。则为潜伏感染。皮肤损伤性水疱皮肤损伤性水疱皮肤损伤性水疱皮肤损伤性水疱疱疹病毒案例第16页 原发感染原发感染 表现：粘膜与皮肤局部疱疹表现：粘膜与皮肤局部疱疹HSV-1HSV-1：腰以上感染为主：腰以上感染为主唇疱疹唇疱疹龈口炎龈口炎角膜结膜炎角膜结膜炎等等 疱疹病毒案例第17页lHSV-2HSV-2：腰以下及生殖器感染为主：腰以下及生殖器感染为主 生殖系统疱疹、新生儿疱疹等生殖系统疱疹、新生儿疱疹等疱疹病毒案例第18页 潜伏感染潜伏感染 原发感染后原发感染后,HSV,HSV由感觉神经由感觉神经 感觉神经节感觉神经节 HSV-1:HSV-1:三叉神经节和颈上神经节三叉神经节和颈上神经节 HSV-2:HSV-2:骶神经节骶神经节 潜伏潜伏HSVHSV不复制，反抗病毒药品不敏感不复制，反抗病毒药品不敏感疱疹病毒案例第19页复发性感染复发性感染 非特异性刺激：发烧、月经、感染等非特异性刺激：发烧、月经、感染等 激活潜伏病毒激活潜伏病毒 沿感觉神经纤维沿感觉神经纤维 下下行行到到末末梢梢 感感染粘膜或皮肤上皮细胞染粘膜或皮肤上皮细胞 免疫记忆反应免疫记忆反应 病程短病程短,组织损伤轻组织损伤轻,感染更局限感染更局限 疱疹病毒案例第20页先天性感染先天性感染及新生儿感染及新生儿感染：妊娠期妇女（妊娠期妇女（HSV-1HSV-1）影响胚胎细胞有影响胚胎细胞有丝分裂丝分裂 胎儿畸形、智力低下、流产胎儿畸形、智力低下、流产 。分娩。分娩 -新生儿疱疹新生儿疱疹疱疹病毒案例第21页HSV-2HSV-2可能引发可能引发宫颈癌宫颈癌患过生殖器疱疹妇女，宫颈癌发病率高患过生殖器疱疹妇女，宫颈癌发病率高用免疫荧光检验癌组织用免疫荧光检验癌组织HSV-2HSV-2抗原抗原患者患者HSV-2HSV-2抗体效价高抗体效价高宫颈疱疹与宫颈癌好发部位相同宫颈疱疹与宫颈癌好发部位相同分子杂交试验发觉分子杂交试验发觉HSV-2HSV-2基因片段基因片段尚尚不能作出结论。不能作出结论。HSV-2HSV-2可能是一个辅助致可能是一个辅助致癌因子，或是一个与之无关癌因子，或是一个与之无关“过客过客”病毒病毒疱疹病毒案例第22页 免疫免疫lIFNIFN和和NKNK细胞：限制原发感染发展细胞：限制原发感染发展l中和抗体：阻断病毒扩散及潜伏中和抗体：阻断病毒扩散及潜伏感染感染l细胞免疫：控制和消除细胞免疫：控制和消除HSVHSV感染感染疱疹病毒案例第23页三三、微生物学检验法、微生物学检验法疱疹病毒案例第24页检测核酸检测核酸 PCRPCR或原位杂交或原位杂交检测抗原检测抗原 荧荧光光素素或或酶酶标标识识抗抗体体染染色色分离病毒分离病毒 标本：水疱液、唾液标本：水疱液、唾液 细胞：细胞：BHK-21BHK-21，VeroVero CPECPE：细细胞胞肿肿胀胀；融融合合细细胞；包涵体胞；包涵体疱疹病毒案例第25页防治标准防治标准预防预防 防止同患者接触防止同患者接触 预防医院内感染预防医院内感染 剖腹产预防新生儿感染剖腹产预防新生儿感染 HSVHSV有致癌可能性，减毒活疫苗和死疫苗有致癌可能性，减毒活疫苗和死疫苗不宜用于人体不宜用于人体 包膜蛋白（提纯包膜蛋白（提纯gGgG、gDgD）亚单位疫苗）亚单位疫苗 基因重组疫苗、多肽疫苗治疗正研制基因重组疫苗、多肽疫苗治疗正研制 国内用国内用HSV gC gDHSV gC gD单克隆抗体制成滴眼液，单克隆抗体制成滴眼液，用于治疗疱疹性角膜炎，取得显著疗效用于治疗疱疹性角膜炎，取得显著疗效 无环鸟苷（无环鸟苷（ACVACV）对疱疹病毒选择性很强）对疱疹病毒选择性很强药品药品疱疹病毒案例第26页单纯疱疹病毒案例单纯疱疹病毒案例患者，女，患者，女，2020岁。因经常出现口唇黏岁。因经常出现口唇黏膜处水疱而就诊，患者发烧时口唇周膜处水疱而就诊，患者发烧时口唇周围常起针头大小小疱，常为一群，也围常起针头大小小疱，常为一群，也有两三群，自觉有轻度烧灼感，历时有两三群，自觉有轻度烧灼感，历时1 1周左右可自愈，重复发作屡次，并周左右可自愈，重复发作屡次，并伴有口腔溃疡、咽炎、舌炎等现象。伴有口腔溃疡、咽炎、舌炎等现象。疱疹病毒案例第27页思索题：思索题：1 1该患为何种病原体感染？病原体该患为何种病原体感染？病原体存在于何处？存在于何处？2 2潜伏感染定义是什么？潜伏感染定义是什么？疱疹病毒案例第28页案例提醒案例提醒 依据临床表现为单纯疱疹病毒依据临床表现为单纯疱疹病毒1型感染。不一样疱疹病毒其体内潜型感染。不一样疱疹病毒其体内潜伏部位不一样，伏部位不一样，1主主要潜伏于三叉神经节或颈上神经节，要潜伏于三叉神经节或颈上神经节，2潜伏于骶神经节，潜伏于骶神经节，主要潜伏于淋巴细胞内。主要潜伏于淋巴细胞内。疱疹病毒案例第29页 原发感染后少数病毒不被去除，以原发感染后少数病毒不被去除，以非活化状态存留于机体内。病毒不非活化状态存留于机体内。病毒不增殖，也不破坏细胞，与宿主细胞增殖，也不破坏细胞，与宿主细胞处于暂时平衡状态。一旦病毒被再处于暂时平衡状态。一旦病毒被再激活，可转为显性感染，疾病复发。激活，可转为显性感染，疾病复发。疱疹病毒案例第30页Varicella zoster virus（VZV）第二节第二节 水痘水痘-带状疱疹病毒带状疱疹病毒疱疹病毒案例第31页水痘带状疱疹病毒案例水痘带状疱疹病毒案例患者，男，患者，男，58岁。因感冒发烧岁。因感冒发烧2天后胸天后胸部皮肤产生水疱疹，水疱逐步增多并显部皮肤产生水疱疹，水疱逐步增多并显著疼痛就诊。查体见患者胸部皮肤有片著疼痛就诊。查体见患者胸部皮肤有片状水疱，沿肋缘分布形成带状。状水疱，沿肋缘分布形成带状。疱疹病毒案例第32页思索题：思索题：1该患为何种病原体感染？该患为何种病原体感染？2该病怎样进行预防和治疗？该病怎样进行预防和治疗？疱疹病毒案例第33页水痘带状疱疹病毒（水痘带状疱疹病毒（VZVVZV）在儿童首次感染时引发在儿童首次感染时引发水痘水痘（VaricellaVaricella），恢复后病毒潜伏在），恢复后病毒潜伏在体内，青春期或成年以后少数人复发体内，青春期或成年以后少数人复发可引发可引发带状疱疹带状疱疹（ZosterZoster），），故称为故称为水痘带状疱疹病毒水痘带状疱疹病毒（Varicella-Zoster VirusVaricella-Zoster Virus）疱疹病毒案例第34页与与HSVHSV相同：相同：潜伏神经细胞，引发复发感染潜伏神经细胞，引发复发感染 细胞免疫限制和预防重症水痘细胞免疫限制和预防重症水痘 皮肤损伤以水疱为特征皮肤损伤以水疱为特征 与与HSVHSV不一样：不一样：呼吸道感染呼吸道感染 经过病毒血症播散至皮肤经过病毒血症播散至皮肤一、生物学性状一、生物学性状疱疹病毒案例第35页水痘和带状疱疹水痘和带状疱疹水痘和带状疱疹水痘和带状疱疹二、二、致病性与免疫性致病性与免疫性疱疹病毒案例第36页致病性致病性传染源主要是患者，水痘患者急性期传染源主要是患者，水痘患者急性期水疱内容物及上呼吸道分泌物、或带水疱内容物及上呼吸道分泌物、或带状疱疹患者水疱内容物都含有病毒状疱疹患者水疱内容物都含有病毒病毒借飞沫经呼吸道或接触传输病毒借飞沫经呼吸道或接触传输好发年纪为好发年纪为3 39 9岁，多在冬季春季流岁，多在冬季春季流行行疱疹病毒案例第37页原发感染：原发感染：水痘，普通病情较轻水痘，普通病情较轻潜伏感染：潜伏感染：原发感染后，原发感染后，病毒潜伏于病毒潜伏于脊髓后根神经脊髓后根神经节或颅神经感觉神经节节或颅神经感觉神经节。以后以后如如机体免机体免疫力下降，病毒被激活，病毒沿疫力下降，病毒被激活，病毒沿神经轴神经轴突突下行下行到所支配皮肤细胞内增殖，发生到所支配皮肤细胞内增殖，发生疱疹，排列呈带状，称带状疱疹疱疹，排列呈带状，称带状疱疹发生于身体一侧，以躯干中线为界，好发生于身体一侧，以躯干中线为界，好发部位为胸、腹和面部发部位为胸、腹和面部多见于成年人，尤其是多见于成年人，尤其是4040岁以上成年人岁以上成年人疱疹病毒案例第38页水痘水痘(Chicken Pox)(Chicken Pox)病毒病毒经呼吸道、结经呼吸道、结膜、皮肤等处膜、皮肤等处侵入人体侵入人体先在局部先在局部淋巴结增淋巴结增殖殖进入血液散布到进入血液散布到各个内脏继续大各个内脏继续大量增殖量增殖2 23 3周潜伏周潜伏期期皮肤广泛发生丘皮肤广泛发生丘疹，水疱疹和脓疹，水疱疹和脓疱疹疱疹疱疹病毒案例第39页带状疱疹（带状疱疹（ShinglesShingles）儿童时期儿童时期患过水痘患过水痘愈合愈合病毒潜伏在病毒潜伏在脊髓后根神脊髓后根神经节或脑感经节或脑感染神经节中染神经节中机体免疫力机体免疫力下降等条件下降等条件刺激刺激病毒沿感觉病毒沿感觉神经轴索下神经轴索下行行该神经所支该神经所支配皮肤细配皮肤细胞胞内增殖内增殖在皮肤上沿着感觉神在皮肤上沿着感觉神经通路发生串联水疱经通路发生串联水疱疹，形似带状疹，形似带状疱疹病毒案例第40页免疫性免疫性儿儿童患水痘后，机体产生持久特异性细童患水痘后，机体产生持久特异性细胞免疫和体液免疫，极少再患水痘胞免疫和体液免疫，极少再患水痘病毒中和抗体病毒中和抗体和细胞免疫和细胞免疫不能有效地去不能有效地去除潜伏于神经节中病毒，故不能阻止病除潜伏于神经节中病毒，故不能阻止病毒被毒被激激活而发生带状疱疹活而发生带状疱疹疱疹病毒案例第41页诊疗：似诊疗：似HSVHSV治疗：治疗：无环鸟苷无环鸟苷 IFNIFN：限制疾病：限制疾病预防：减毒活疫苗预防：减毒活疫苗三、微生物学检验法与防治三、微生物学检验法与防治疱疹病毒案例第42页防治标准防治标准VZVVZV减毒活疫苗预防水痘感染和传输有良减毒活疫苗预防水痘感染和传输有良好效果好效果治疗可用无环鸟苷、阿糖腺苷和高剂量治疗可用无环鸟苷、阿糖腺苷和高剂量干扰素干扰素疱疹病毒案例第43页水痘带状疱疹病毒案例水痘带状疱疹病毒案例患者，男，患者，男，58岁。因感冒发烧岁。因感冒发烧2天后胸天后胸部皮肤产生水疱疹，水疱逐步增多并显部皮肤产生水疱疹，水疱逐步增多并显著疼痛就诊。查体见患者胸部皮肤有片著疼痛就诊。查体见患者胸部皮肤有片状水疱，沿肋缘分布形成带状。状水疱，沿肋缘分布形成带状。疱疹病毒案例第44页思索题：思索题：1该患为何种病原体感染？该患为何种病原体感染？2该病怎样进行预防和治疗？该病怎样进行预防和治疗？疱疹病毒案例第45页提醒提醒依据临床表现为单纯疱疹病毒依据临床表现为单纯疱疹病毒2型感染。型感染。疱疹病毒案例第46页提醒提醒VZVVZV减毒活疫苗预防水痘感染和传输有良减毒活疫苗预防水痘感染和传输有良好效果，接种对象为好效果，接种对象为1 1岁以上末患过水痘岁以上末患过水痘儿童和成人。对免疫功效低下者可用高儿童和成人。对免疫功效低下者可用高效价人免疫球蛋白进行紧急预防。效价人免疫球蛋白进行紧急预防。治疗可用无环鸟苷、阿糖腺苷和高剂量治疗可用无环鸟苷、阿糖腺苷和高剂量干扰素干扰素疱疹病毒案例第47页Human cytomegalovirus（HCMV）第三节第三节 人巨细胞病毒人巨细胞病毒疱疹病毒案例第48页人类人类巨细胞病毒（巨细胞病毒（HCMVHCMV）19561956年年SmithSmith等首先用组织培养方法从患等首先用组织培养方法从患者者腺体组织培养中腺体组织培养中分离出病毒。因为感分离出病毒。因为感染细胞肿大并含有巨大核内包涵体故染细胞肿大并含有巨大核内包涵体故得得名名是巨细胞包涵体病病原体是巨细胞包涵体病病原体CMVCMV多为潜伏感染，常可由怀孕多为潜伏感染，常可由怀孕、器官移、器官移植、免疫抑制、艾滋病植、免疫抑制、艾滋病等原因被激活等原因被激活疱疹病毒案例第49页形形态态结结构构：与与HSVHSV极极相同相同宿主范围：宿主范围：较较窄窄，不不感感染染其其它它动动物物；仅仅成成纤纤维维细胞中增殖。细胞中增殖。一、一、生物学性状生物学性状疱疹病毒案例第50页生物学性状生物学性状经典疱疹病毒结构经典疱疹病毒结构对宿主或培养组织细胞对宿主或培养组织细胞感染感染有高度种有高度种属特异性：即属特异性：即H HCMVCMV只能感染人。只能感染人。只能只能在人成纤维细胞增殖在人成纤维细胞增殖复制周期为复制周期为36364848h h（增殖迟缓），其增殖迟缓），其特点是细胞变圆、膨胀、核变大、形特点是细胞变圆、膨胀、核变大、形成巨大细胞，核内出现周围绕有一轮成巨大细胞，核内出现周围绕有一轮鹰眼状鹰眼状大型嗜酸性包涵体（大型嗜酸性包涵体（Owls Owls eye inclusion bodyeye inclusion body）疱疹病毒案例第51页致病性致病性潜伏部位潜伏部位唾液腺、乳腺、肾脏、白细胞及唾液腺、乳腺、肾脏、白细胞及其它腺体其它腺体长久或间歇地从尿长久或间歇地从尿液液、唾液、泪液、唾液、泪液、乳汁、精液、宫颈及阴道分泌物排乳汁、精液、宫颈及阴道分泌物排出病毒出病毒疱疹病毒案例第52页传输步骤传输步骤传染源传染源患者及无症状隐性感染者患者及无症状隐性感染者传染方式传染方式胎盘产道胎盘产道亲密接触，经过口口或手口传输亲密接触，经过口口或手口传输输血输血器官移植器官移植疱疹病毒案例第53页先天性感染（先天性感染（宫内感染宫内感染）经过胎盘感染胎儿。发生率为经过胎盘感染胎儿。发生率为0.5%2.5%0.5%2.5%，CMVCMV是能引发先天性感染主要病毒之一是能引发先天性感染主要病毒之一只有少部分（只有少部分（10%10%）感染者表现症状，主）感染者表现症状，主要临床要临床表现表现是是巨细胞包涵体病（巨细胞包涵体病（黄疸、肝黄疸、肝脾肿大、溶血性贫血、紫癜等脾肿大、溶血性贫血、紫癜等），），极极少数少数患儿表患儿表现现为为先天性畸形（小头智力先天性畸形（小头智力低下、神经肌肉运动障碍、耳聋、脉络膜低下、神经肌肉运动障碍、耳聋、脉络膜视网膜炎等）视网膜炎等）疱疹病毒案例第54页经产道感染，或出生后数周由母体经产道感染，或出生后数周由母体病毒（尿或乳汁中病毒），或护理病毒（尿或乳汁中病毒），或护理人员排出病毒所引发感染人员排出病毒所引发感染多数无症状或症状轻微，表现为轻多数无症状或症状轻微，表现为轻声度或显著呼吸障碍、肝功损害声度或显著呼吸障碍、肝功损害通常不表现神经损伤，预后良好通常不表现神经损伤，预后良好围生期围生期感染感染疱疹病毒案例第55页免疫功效低下病人感染免疫功效低下病人感染发生于发生于长久免疫抑制剂治疗、器官移长久免疫抑制剂治疗、器官移植、植、AIDSAIDS、白血病、淋巴瘤等患者白血病、淋巴瘤等患者是因为体内原有潜伏是因为体内原有潜伏HCMVHCMV被激活被激活症状主要是肺炎、视网膜炎、脑炎、症状主要是肺炎、视网膜炎、脑炎、脑膜炎等，预后不好脑膜炎等，预后不好疱疹病毒案例第56页输血感染输血感染输入大量含有输入大量含有CMVCMV新鲜血液，可发生输血新鲜血液，可发生输血后单核细胞增多症和肝炎等后单核细胞增多症和肝炎等HCMVHCMV造成单核细胞增多症检测不到嗜异造成单核细胞增多症检测不到嗜异性抗体和性抗体和EBVEBV相关抗体，可籍此区分与相关抗体，可籍此区分与EBVEBV所致单核细胞增多症所致单核细胞增多症预后良好预后良好疱疹病毒案例第57页接触感染接触感染唾液、乳汁、尿、精液、宫颈分泌唾液、乳汁、尿、精液、宫颈分泌物存在物存在HCMVHCMV，经过接吻、性接触、，经过接吻、性接触、哺乳等方式传染。哺乳等方式传染。疱疹病毒案例第58页细胞转化与致癌潜能细胞转化与致癌潜能HCMVHCMV基因组基因组DNA DNA 片段，体外可转化地片段，体外可转化地鼠胚和人胚成纤维细胞。接种乳鼠可鼠胚和人胚成纤维细胞。接种乳鼠可形成肿瘤。形成肿瘤。宫颈癌、前列腺癌、结肠癌和宫颈癌、前列腺癌、结肠癌和Kaposi Kaposi 肉瘤组织检出肉瘤组织检出HCMVHCMVDNA DNA 序列。序列。疱疹病毒案例第59页l细细胞胞培培养养：成成纤纤维维细细胞胞中中增增殖殖，生生长长慢，慢，CPECPE需需2 26 6周周。lELISAELISA：HCMV-IgMHCMV-IgM；近期感染；胎儿感染；近期感染；胎儿感染HCMVCPE HCMVCPE 包涵体包涵体 三、微生物学检验法三、微生物学检验法疱疹病毒案例第60页防治标准防治标准丙氧鸟苷（丙氧鸟苷（ganciclovir DHPGganciclovir DHPG）有预防）有预防CMVCMV扩散作用扩散作用耐丙氧鸟苷耐丙氧鸟苷CMVCMV感染可选取磷甲酸钠，但感染可选取磷甲酸钠，但效果比前者差效果比前者差CMVCMV病毒活疫苗致癌潜能问题有待处理病毒活疫苗致癌潜能问题有待处理CMVCMV包膜糖蛋白亚单位疫苗是研究方向包膜糖蛋白亚单位疫苗是研究方向疱疹病毒案例第61页第第四节四节 EBEB病毒病毒Epstein-Barr virus，EBV疱疹病毒案例第62页EBEB病毒（病毒（Epetein-Barr virusEpetein-Barr virus）BurkkitBurkkit先生在研究非洲中部一个发先生在研究非洲中部一个发生于儿童恶性淋巴瘤时曾预测该病生于儿童恶性淋巴瘤时曾预测该病是一个病毒感染性疾病。是一个病毒感染性疾病。19641964年年加加拿大学者拿大学者EpsteinEpstein和和BarrBarr从从这种这种恶性恶性淋巴瘤体外培养淋巴瘤细系中，用淋巴瘤体外培养淋巴瘤细系中，用电镜电镜观察到观察到一个新人类疱疹病毒，一个新人类疱疹病毒，后被后被命名为命名为EBEB病毒病毒疱疹病毒案例第63页形态结构类似形态结构类似HSVHSV一、一、生物学性状生物学性状疱疹病毒案例第64页生物学性状生物学性状经典疱疹病毒，但抗原结构与其它疱疹病经典疱疹病毒，但抗原结构与其它疱疹病毒不一样毒不一样常规方法不能培养。常规方法不能培养。仅能在仅能在CD21+CD21+B B淋巴细淋巴细胞中增殖胞中增殖，转化为可长久传代类淋巴母细，转化为可长久传代类淋巴母细胞株。胞株。是一个嗜是一个嗜B B细胞疱疹病毒细胞疱疹病毒CD21CD21分子是该病毒受体，故含分子是该病毒受体，故含CD21CD21粘膜上粘膜上皮细胞和皮细胞和B B淋巴细胞是该病毒宿主淋巴细胞是该病毒宿主疱疹病毒案例第65页增殖性感染产生抗原：增殖性感染产生抗原：l早期抗原（早期抗原（early antigenearly antigen，EAEA）：）：DNADNA聚合酶活性聚合酶活性,表示表示EBVEBV增殖增殖 EAEA抗抗体体：早早期期抗抗体体,连连续续几几个个月，表示近期感染。月，表示近期感染。疱疹病毒案例第66页l衣壳抗原（衣壳抗原（VCAVCA）：）：结构蛋白，存在细胞质和细胞核结构蛋白，存在细胞质和细胞核 VCA-IgM VCA-IgM出现早，消失快出现早，消失快 VCA-IgGVCA-IgG出现晚，连续几年出现晚，连续几年lEBVEBV膜抗原（膜抗原（MAMA）：）：在细胞表面，属包膜糖蛋白在细胞表面，属包膜糖蛋白 MA-IgMMA-IgM表示近期感染表示近期感染 MA-IgGMA-IgG可连续存在可连续存在疱疹病毒案例第67页 潜伏感染潜伏感染 EBVEBV感染感染B B细胞或上皮细胞细胞或上皮细胞 潜伏感染潜伏感染l细胞含细胞含EBVEBV基因组基因组 (游离或整合游离或整合)l选选择择性性表表示示潜潜伏伏期期抗抗原原，刺刺激激B B细细胞增生或永生化胞增生或永生化 疱疹病毒案例第68页 EBVEBV潜伏期抗原潜伏期抗原核抗原（核抗原（EBNAEBNA）B B细胞核内，为细胞核内，为DNADNA结合蛋白结合蛋白 感染细胞逃避感染细胞逃避CTLCTL杀伤杀伤 与细胞永生化相关与细胞永生化相关 EBNA EBNA抗体：感染晚期连续存在抗体：感染晚期连续存在潜伏膜蛋白（潜伏膜蛋白（LMPLMP）在在B B细胞表面细胞表面,致癌蛋白致癌蛋白 改变细胞功效改变细胞功效,抑制细胞凋亡抑制细胞凋亡 阻止潜伏病毒激活功效阻止潜伏病毒激活功效疱疹病毒案例第69页二、二、致病性与免疫性致病性与免疫性EBEB病毒在人群中广泛感染病毒在人群中广泛感染我国我国3 35 5岁儿童感染率达岁儿童感染率达90%90%以上以上主要经过唾液传输，也可经输血传染主要经过唾液传输，也可经输血传染EBEB病毒在口咽部上皮细胞内增殖，然后感病毒在口咽部上皮细胞内增殖，然后感染染B B淋巴细胞淋巴细胞感染感染B B细胞进入血循环可造成全身性感染细胞进入血循环可造成全身性感染病毒可长久潜伏病毒可长久潜伏疱疹病毒案例第70页传染性单核细胞增多症传染性单核细胞增多症首次感染大剂量病毒，多见青少年，首次感染大剂量病毒，多见青少年，是一个急性全身淋巴细胞增生性疾病是一个急性全身淋巴细胞增生性疾病症状为发烧、咽炎、颈淋巴腺炎、肝症状为发烧、咽炎、颈淋巴腺炎、肝脾肿大、血液中大量异形淋巴细胞脾肿大、血液中大量异形淋巴细胞连续数月后自愈，预后良好连续数月后自愈，预后良好致病性致病性疱疹病毒案例第71页非洲儿童淋巴瘤（即非洲儿童淋巴瘤（即BurkittBurkitt淋巴瘤）淋巴瘤）于中非、新几内亚和美洲温热带地域呈于中非、新几内亚和美洲温热带地域呈地方性流行地方性流行多见于多见于5 51212岁儿童岁儿童好发部位为颜面、腭部好发部位为颜面、腭部全部全部BLBL病人血清均含病人血清均含EBVEBV抗体，其中抗体，其中80%80%以上滴度高于正常人以上滴度高于正常人在肿瘤组织中发觉在肿瘤组织中发觉EBVEBV基因组基因组100%100%死亡率死亡率疱疹病毒案例第72页鼻咽癌（鼻咽癌（Nasopharyngeal CarcinomaNasopharyngeal Carcinoma，NPCNPC）地域性分部，主要东南亚和华南广东省地域性分部，主要东南亚和华南广东省4040岁以上中老年人岁以上中老年人从鼻咽癌活检组织中找到从鼻咽癌活检组织中找到EBVEBV鼻咽癌患者血清鼻咽癌患者血清EBVEBV相关抗原抗体效价高于正相关抗原抗体效价高于正常人常人NPCNPC患者患者EBVEBV潜伏感染时间通常很长，在潜伏感染时间通常很长，在3030年年左右左右还不能认为还不能认为EBVEBV是鼻咽癌唯一致病原因，可能是鼻咽癌唯一致病原因，可能是各种综合原因中一个是各种综合原因中一个疱疹病毒案例第73页免疫性免疫性EBVEBV在人群中广泛存在，成人抗体阳性在人群中广泛存在，成人抗体阳性率达率达90%90%以上以上出现中和抗体，能阻止外源性病毒再出现中和抗体，能阻止外源性病毒再感染感染细胞和体液免疫细胞和体液免疫不能去除体内不能去除体内已经潜已经潜伏伏EBVEBV疱疹病毒案例第74页异嗜性抗体检测异嗜性抗体检测EBVEBV特异性抗体检测特异性抗体检测 三、微生物学检验法三、微生物学检验法疱疹病毒案例第75页微生物学检验微生物学检验EBVEBV分离培养困难分离培养困难可用核酸杂交和可用核酸杂交和PCRPCR等方法检测细胞内等方法检测细胞内EBVEBV基因基因组及其表示产物组及其表示产物血清学诊疗血清学诊疗 EBVEBV特异性抗体检测特异性抗体检测 检测病毒检测病毒VCAVCAIgAIgA或或EAEAIgAIgA抗体，滴度抗体，滴度1 1：5 51 1：1010有诊疗意义有诊疗意义 异嗜性抗体凝集试验异嗜性抗体凝集试验 用于传染性单核白细胞用于传染性单核白细胞增多症辅助诊疗增多症辅助诊疗疱疹病毒案例第76页防治标准防治标准我国用基因工程方法构建同时表示我国用基因工程方法构建同时表示EBV EBV gp320gp320和和HBsAgHBsAg疫苗，重点使用在鼻咽癌疫苗，重点使用在鼻咽癌高发区高发区gp320gp320膜蛋白疫苗，正在英国大学生患者膜蛋白疫苗，正在英国大学生患者中作小规模接种，以期观察该疫苗是否中作小规模接种，以期观察该疫苗是否能降低传染性单核细胞增多症发病率能降低传染性单核细胞增多症发病率疱疹病毒案例第77页临床病原教研室：孙艳临床病原教研室：孙艳EB病毒感染与多发性硬病毒感染与多发性硬化症关系研究化症关系研究疱疹病毒案例第78页 课题起源 该该课课题题分分别别列列为为黑黑龙龙江江省省教教育育厅厅普普通通科科研研项项目目和和齐齐齐齐哈哈尔尔市市科科技技局局指指令令项项目目，获获项项目目经经费费1.51.5万元，学院配置万元，学院配置1.51.5万元。万元。疱疹病毒案例第79页 研究工作概述 该课题于该课题于年年9 9月开启月开启年年1212月完成全部试验月完成全部试验疱疹病毒案例第80页研究工作概述1.MS1.MS患患者者CSFCSF中中EBEB病病毒毒（EBVEBV）相相关关抗抗体检测及体检测及EBVEBV核酸核酸PCRPCR检测检测2.2.小小鼠鼠MSMS动动物物模模型型制制备备及及EBEB病病毒毒感感染染造成神经系统病理改变研究造成神经系统病理改变研究疱疹病毒案例第81页 研究背景 多发性硬化症（多发性硬化症（Multiple SclerosisMultiple Sclerosis，MSMS）是一个中枢神经系统脱髓鞘性疾病，病变累及部是一个中枢神经系统脱髓鞘性疾病，病变累及部位为脑和脊髓。特点为病灶多发，常有缓解和复位为脑和脊髓。特点为病灶多发，常有缓解和复发，病残性大。表现为各种神经系统症状和体征。发，病残性大。表现为各种神经系统症状和体征。有复发缓解型、继发进展型、原发进展型、复发有复发缓解型、继发进展型、原发进展型、复发进展型和良性进展型和良性MSMS等数种类型，多见于欧洲及北美等数种类型，多见于欧洲及北美国家，在西方社会国家，在西方社会MSMS是造成青壮年神经性残疾中是造成青壮年神经性残疾中仅次于外伤第二大原因。仅次于外伤第二大原因。疱疹病毒案例第82页 过去认为此病在我国较罕见，但近年来伴随过去认为此病在我国较罕见，但近年来伴随诊疗伎俩和医疗水平不停提升，陆续有这类病诊疗伎俩和医疗水平不停提升，陆续有这类病例报道，而且发病率呈上升趋势，尤其是在我例报道，而且发病率呈上升趋势，尤其是在我国高纬度地域，如黑龙江发病率较高。尽管当国高纬度地域，如黑龙江发病率较高。尽管当前对前对MSMS病因及病理机制还未完全明了，但认为病因及病理机制还未完全明了，但认为MS MS 发病与遗传、病毒、免疫、环境地理等原发病与遗传、病毒、免疫、环境地理等原因相关，是多原因共同作用结果。因相关，是多原因共同作用结果。疱疹病毒案例第83页 关于关于EBEB病毒感染与多发性硬化症关系研病毒感染与多发性硬化症关系研究，国外研究只证实，究，国外研究只证实，EBVEBV感染与感染与MSMS发病高发病高度相关，而国内当前尚属空白，至今没有度相关，而国内当前尚属空白，至今没有直接试验证据证实直接试验证据证实EBVEBV感染能够造成感染能够造成MSMS二者二者研究报道，假如我们能开展此项研究将能研究报道，假如我们能开展此项研究将能填补国内研究领域空白。填补国内研究领域空白。疱疹病毒案例第84页 EBEB病毒病毒(Epstein Barrvirus,EBV)EB(Epstein Barrvirus,EBV)EB病病毒是一个嗜淋巴细胞毒是一个嗜淋巴细胞DNADNA病毒病毒,主要侵犯主要侵犯B B细细胞。胞。EBEB病毒基因组编码病毒基因组编码6 6个抗原蛋白个抗原蛋白,膜壳膜壳抗原抗原(VCA)(VCA)、膜抗原、膜抗原(MA)(MA)、早期抗原、早期抗原(EA,(EA,可可分为弥散成份分为弥散成份D D和局限成份和局限成份R)R)、补体结合抗、补体结合抗原原(即可溶性抗原即可溶性抗原S)S)、EBEB病毒核抗原病毒核抗原(EBNA,(EBNA,分分EBNA 1EBNA 1和和EBNA 2)EBNA 2)和淋巴细胞检测膜抗原和淋巴细胞检测膜抗原(LY DMA)(LY DMA)。疱疹病毒案例第85页 EBVEBV与人类许多疾病亲密相关，如：传染与人类许多疾病亲密相关，如：传染性单核细胞增多症，性单核细胞增多症，EBVEBV相关嗜血细胞综合症，相关嗜血细胞综合症，鼻咽癌，淋巴瘤等。当前国外研究只证实鼻咽癌，淋巴瘤等。当前国外研究只证实EBVEBV感染与感染与MSMS发病高度相关，国内当前尚属空白，发病高度相关，国内当前尚属空白，至今没有直接试验证据证实至今没有直接试验证据证实EBVEBV感染能够造成感染能够造成MSMS研究。研究。疱疹病毒案例第86页 本课题将从临床抗体检测、病毒核酸本课题将从临床抗体检测、病毒核酸检测、检测、MSMS小鼠神经系统病理改变等方面小鼠神经系统病理改变等方面研究研究EBVEBV感染与感染与MSMS发病间关系，将为探讨发病间关系，将为探讨MSMS致病机制和治疗提供理论基础。致病机制和治疗提供理论基础。疱疹病毒案例第87页 ELISAELISA法法EBV IgGEBV IgG检测试剂盒（上海生物制品检测试剂盒（上海生物制品研究所）、多功效酶标仪（奥地利迪肯企研究所）、多功效酶标仪（奥地利迪肯企业产品）、业产品）、EBV-DNA-PCREBV-DNA-PCR试剂盒试剂盒(EBV-DNA(EBV-DNA：269bp,269bp,华美生物工程企业华美生物工程企业)、PCRPCR仪仪(美国美国MJMJ企业产品企业产品)、凝胶成像系统、垂直电泳仪、凝胶成像系统、垂直电泳仪 豚鼠由哈尔滨兽医研究所提供。豚鼠由哈尔滨兽医研究所提供。主要试剂和主要仪器主要试剂和主要仪器疱疹病毒案例第88页1.1.经过酶免疫法检测对临床经过酶免疫法检测对临床MSMS患者患者CSFCSF中中EBVEBV特特异异IgGIgG水平，对水平，对MSMS患者患者CSFCSF中中EBVEBV核酸检测。核酸检测。2.2.构建动物模型，将灭活构建动物模型，将灭活EBVEBV和和EBVEBV提取蛋白提取蛋白接种小鼠足垫，观查神经系统病理改变。接种小鼠足垫，观查神经系统病理改变。实实 验验 方方 法法疱疹病毒案例第89页1.MS1.MS1.MS1.MS患者患者患者患者CSFCSFCSFCSF中中中中EBEBEBEB病毒（病毒（病毒（病毒（EBVEBVEBVEBV）相关抗体检测及）相关抗体检测及）相关抗体检测及）相关抗体检测及EBVEBVEBVEBV核核核核酸酸酸酸PCRPCRPCRPCR检测检测检测检测1.11.11.11.1研究对象研究对象研究对象研究对象 MSMSMSMS组：组：组：组：选择临床确诊为选择临床确诊为选择临床确诊为选择临床确诊为MSMSMSMS患者患者患者患者26262626例，符合例，符合例，符合例，符合Post