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新大泽绿色巴夫藻的光生物反应器培养研究
福清市新大泽螺旋藻有限公司、 生物藻类研发部 李胜明

实验利用玻璃管道光生物反应器进行了绿色巴夫藻培养研究, 详细探讨了更新
率、 更新周期等因素与藻细胞的生长、 采收量、 产率及氮、 磷营养盐的利用之间的关系。实验发现, 更
新率、 更新周期和起始更新时间均是半连续培养的重要参数。
绿色巴夫藻( P av lova v ir idis ) 是一种单细胞微藻, 可作为优质的生物饵料。微藻的培养系统一般分为开
放式和封闭式( 光生物反应器) 两大类, 光生物反应器具有较高的表面/ 体积比以充分利用光能而提高单位产量, 可有效的避免细菌、 真菌、 原生动物及其它杂藻的污染, 有效的控制生长条件。
1. 1 试验材料
绿色巴夫藻( P av lova v ir idis ) 由台湾微藻生物工程重点实验室藻种室提供。营养盐母液使用人工海水配方Mgcl2.6h2O-8.4g, mgSO4.7H2O-3.5g, CaSO4.2H2O-1.27g, K2SO4-0.83g, NaCl-28.36g, MgBr2.6H2O-0.05g,

1.2绿色巴夫藻的培养;
将生长至对数生长期的藻种接种到1L的三角烧瓶中, 装液量为800mL, 培养温度26±1℃, 光照由三组30W荧光灯提供, 光照强度约为3000lux, 光暗周期为24h: 0h。
进行气体流速实验时, 保持培养温度、 光照强度和装液量不变, 通入CO2浓度为10%的混合气体, 气体流速设置为200mL/min、 300mL/min、 400mL/min和500 mL/min,以300 mL/min空气组做对照。每个处理设置两个平行样,. 进行培养基成分流加培养实验时, 保持培养温度、 光照强度和装液量不变, 通入CO2浓度为10%的混合气体, 通气速率为300mL/min。培养基中的氮源( 尿素) 和磷源( KH2PO4) 采用流加方式进行添加, 其余营养物质一次性投入。尿素和KH2PO4的起始添加量分别设置为总量的30%、 40%、 50%和60%, 从培养第三天开始流加培养, 连续流加四天。以一次性投入全部氮源和磷源的批次培养做为对照, 每个处理设置两个平行样。
1. 3 试验方法
藻种经预培养至指数生长期后接种到光反应器, 密度为0.88, 培养体积10 L。培养
温度由室内空调控制在25 d , 光照强度120 LE/ m2 # s, 光照周期( L BD) 为24 B 0, 充气量3 L/ min。在试验室中扩大到10L瓶中, 最后在试验室中放大到能够到室外光生物反应器中培养阶段, , 。在室外光生物反应器在140升---1000升的管道中培养。

1.4 室外光反应器管道养殖
研究了温度、 光照强度、 光照时间、 酸碱度和相对密度对绿色巴夫藻生长繁殖的影响, 结果
表明: 绿色巴夫藻在水环境pH 6.0 - 9. 5、 相对密度1.005-1.020 的范围内都能生长, pH 6.5相对生长良好,
密度1.015 条件下生长率最高; 温度在5- 35 度 范围内都能生长, 20-30 度为适宜温度; 光照强度在
1000-10000 Lx 范围内都能生长, 4000 Lx 为最适光照强度。光照强度< 1000 Lx 时, 绿色巴夫藻的接种 接种时间在上午8: 00- 10: 00, 接种
时藻液的密度要高按常规处理。
1.5, 在室外管道中实验结果表明, 在福建福清4月份-6月份是培养绿色巴夫藻最佳时期, 在这个时间段温度在20-30度之间, 是绿色巴夫藻最好培养的时间, 经过了7月份的实验出现了很多的问题, 温度过高现象在7月份温度在30-38度之间, 光照在8万勒克斯—10万勒克斯, 问题在管道中出现水温过高现象水温和室外的温度一样, 出现藻的游动细胞停止, 经过多次的实验, 我们采用网布低当光照是光照在7000勒克斯, 经过显微镜下观察慢慢的藻细胞开始游动。

1.6 绿色巴夫藻在光生物反应器管道养殖中重要观察几点,
( 1) ; 在光生物反应器管道养殖中需要温度和光照和PH值控制;
( 1) ; 在光生物反应器管道养殖中只要观察藻的细胞和藻的颜色, 藻的颜色是黄绿色, 和盐度的控制。
1.7当前经过管道实验和养殖的技术, 我们准备在室外开放室外大面积培养绿色巴夫藻。能提高生产的效益, 和获得更高的养殖技术。在后面的工作中还有很多的实验和研究能提高更好的技术。