免疫学应用.pptx

第一节第一节 免疫学防治免疫学防治特异性免疫特异性免疫自然免疫自然免疫人工免疫人工免疫人工自动免疫人工自动免疫人工被动免疫人工被动免疫过继免疫过继免疫计划免疫：有计划对儿童进行预防接种，预防传染性疾病不同时间不同接种对象不同疫苗计划免疫计划免疫 是机体受抗原（病原体）刺激后，产生特异性抗体和是机体受抗原（病原体）刺激后，产生特异性抗体和效应效应T细胞，诱导产生免疫应答，从而建立对该抗原的抵细胞，诱导产生免疫应答，从而建立对该抗原的抵抗力；亦可通过给机体注入免疫效应物质，使机体立即获抗力；亦可通过给机体注入免疫效应物质，使机体立即获得对某种抗原的特异性免疫力。得对某种抗原的特异性免疫力。1、免疫学防治的基本原理、免疫学防治的基本原理v人工主动免疫人工主动免疫给机体接种疫苗或类毒素等抗原物质，激发机体特异性免给机体接种疫苗或类毒素等抗原物质，激发机体特异性免疫应答，获得对某种传染病的免疫力，临床多用于预防疫应答，获得对某种传染病的免疫力，临床多用于预防v人工被动免疫人工被动免疫直接给机体输入免疫效应物质（如：抗体），使机体短时直接给机体输入免疫效应物质（如：抗体），使机体短时期获得对某种传染病的抵抗力期获得对某种传染病的抵抗力v过继免疫过继免疫2、人工免疫、人工免疫n细菌疫苗细菌疫苗n细菌类毒素细菌类毒素n病毒疫苗病毒疫苗（1 1）人工主动免疫）人工主动免疫接种的免疫原性物质接种的免疫原性物质：产生的免疫力出现比较慢，但维持的时间较持久，产生的免疫力出现比较慢，但维持的时间较持久，临床上多用于预防临床上多用于预防疫疫苗苗n灭活疫苗（死疫苗）灭活疫苗（死疫苗）病原微生物人工培养后，用理化方法灭活而制成的制病原微生物人工培养后，用理化方法灭活而制成的制剂，又称死疫苗。剂，又称死疫苗。常用的死疫苗有常用的死疫苗有乙脑疫苗乙脑疫苗、百日咳疫苗百日咳疫苗、狂犬病疫苗狂犬病疫苗n减毒活疫苗：减毒活疫苗：用人工诱导变异或从自然界筛选获得的减毒或无毒的用人工诱导变异或从自然界筛选获得的减毒或无毒的活的病原微生物制成的制剂。活的病原微生物制成的制剂。常用的活疫苗有常用的活疫苗有卡介苗卡介苗卡介苗卡介苗、脊脊髓灰质炎疫苗髓灰质炎疫苗、麻疹疫苗麻疹疫苗等。等。疫苗疫苗死疫苗与活疫苗的比较死疫苗与活疫苗的比较 区别点区别点 死疫苗死疫苗 活疫苗活疫苗制剂特点制剂特点强毒株灭活强毒株灭活活的减毒或无毒株活的减毒或无毒株接种剂量及次数接种剂量及次数较多，较多，2-32-3次次较少，较少，1 1次次保存及有效期保存及有效期易保存，易保存，1 1年年不易保存不易保存44数周数周免疫效果免疫效果较差，维持数月至较差，维持数月至2 2年年较好，维持较好，维持3-53-5年或年或更长更长n类毒素：类毒素：细菌外毒素经细菌外毒素经0.30.4%甲醛处理后，失去毒性，甲醛处理后，失去毒性，保留其抗原性所制成的生物制品保留其抗原性所制成的生物制品破伤风类毒素破伤风类毒素白喉类毒素白喉类毒素百日咳死疫苗百日咳死疫苗百、白、破三联疫苗百、白、破三联疫苗 n新型疫苗：新型疫苗：亚单位疫苗亚单位疫苗结合疫苗结合疫苗合成肽疫苗合成肽疫苗基因工程疫苗基因工程疫苗人工主动免疫的注意事项人工主动免疫的注意事项接种对象：流行地区的易感者；接种对象：流行地区的易感者；接种剂量接种剂量：次数和间隔时间：死疫苗次数和间隔时间：死疫苗2-3次，间隔次，间隔7-10天；天；活疫苗活疫苗1次；类毒素次；类毒素2次，间隔次，间隔4-6周。周。接种途径：死疫苗多皮下注射、活疫苗多皮内注射、皮上接种途径：死疫苗多皮下注射、活疫苗多皮内注射、皮上 划痕或以自然感染途径接种。划痕或以自然感染途径接种。接种后反应：接种接种后反应：接种24小时左右局部出现红肿、疼痛、淋巴结小时左右局部出现红肿、疼痛、淋巴结 肿大；短暂发热、头痛、恶心等，一般症状轻肿大；短暂发热、头痛、恶心等，一般症状轻 微，数天恢复正常。微，数天恢复正常。禁忌症：高热、严重心、肝、肾疾病、传染病、恶性肿瘤、禁忌症：高热、严重心、肝、肾疾病、传染病、恶性肿瘤、孕妇等。孕妇等。我国儿童计划免疫程序表我国儿童计划免疫程序表接种时间接种时间疫疫 苗苗新生儿新生儿卡介苗、乙肝疫苗卡介苗、乙肝疫苗1月龄月龄乙肝疫苗乙肝疫苗2月龄月龄脊髓灰质炎糖丸疫苗脊髓灰质炎糖丸疫苗3月龄月龄脊髓灰质炎糖丸疫苗、白百破三联疫苗脊髓灰质炎糖丸疫苗、白百破三联疫苗4月龄月龄脊髓灰质炎糖丸疫苗、白百破三联疫苗脊髓灰质炎糖丸疫苗、白百破三联疫苗5月龄月龄白百破三联疫苗白百破三联疫苗6月龄月龄乙肝疫苗、流脑多糖疫苗乙肝疫苗、流脑多糖疫苗8月龄月龄麻疹疫苗麻疹疫苗1岁岁乙脑疫苗（首针、第二针，间隔乙脑疫苗（首针、第二针，间隔710天）天）115岁岁脊髓灰质炎糖丸疫苗、白百破三联疫苗、流脑多糖脊髓灰质炎糖丸疫苗、白百破三联疫苗、流脑多糖疫苗、麻疹疫苗疫苗、麻疹疫苗n抗毒素抗毒素n人免疫球蛋白制剂人免疫球蛋白制剂（2 2）人工被动免疫）人工被动免疫直接输入抗体等效应物质，使机体立即获得特异直接输入抗体等效应物质，使机体立即获得特异性免疫力，多用于治疗或紧急预防，维持时间短，性免疫力，多用于治疗或紧急预防，维持时间短，2-3周周n抗毒素抗毒素将类毒素多次免疫动物（一般选择马），取其血清纯将类毒素多次免疫动物（一般选择马），取其血清纯化、浓缩所制成的抗体制剂，抗毒素用于治疗和紧急预化、浓缩所制成的抗体制剂，抗毒素用于治疗和紧急预防相应外毒素所致的疾病。防相应外毒素所致的疾病。必须进行皮试必须进行皮试防止超敏反应防止超敏反应 n人免疫球蛋白制剂人免疫球蛋白制剂人血浆和胎盘血中提取制成人血浆和胎盘血中提取制成人的免疫球蛋白人的免疫球蛋白包括人血浆丙种球蛋白、胎盘丙种球蛋白包括人血浆丙种球蛋白、胎盘丙种球蛋白（3 3）过继免疫）过继免疫把致敏淋巴细胞输入细胞免疫功能低下者，使其把致敏淋巴细胞输入细胞免疫功能低下者，使其获得对某种抗原的免疫力或弥补免疫细胞的不足。获得对某种抗原的免疫力或弥补免疫细胞的不足。人工主动免疫与人工被动免疫的比较人工主动免疫与人工被动免疫的比较 一、抗原或抗体的体外检测一、抗原或抗体的体外检测（一）抗原抗体反应特点（一）抗原抗体反应特点特异性特异性阶段性阶段性比例性比例性可逆性可逆性第二节第二节 免疫学检测技术免疫学检测技术抗体过剩抗体过剩比例适当比例适当抗原过剩抗原过剩抗原抗体的比例与其形成免疫复合物大小的关系抗原抗体的比例与其形成免疫复合物大小的关系比例性比例性（二）抗原抗体反应的类型（二）抗原抗体反应的类型 1 1、凝凝集集反反应应：颗颗粒粒性性抗抗原原与与相相应应抗抗体体结结合合，在在一一定定条件下，出现肉眼可见的凝集物，称为凝集反应。条件下，出现肉眼可见的凝集物，称为凝集反应。凝集反应凝集反应 2 2、沉沉淀淀反反应应：可可溶溶性性抗抗原原与与相相应应抗抗体体结结合合，在在一一定定条条件下，出现肉眼可见的沉淀物，称为沉淀反应。件下，出现肉眼可见的沉淀物，称为沉淀反应。单向琼脂扩散试验单向琼脂扩散试验双向琼脂扩散试验双向琼脂扩散试验 3 3、免免疫疫标标记记技技术术：将将抗抗原原-抗抗体体反反应应与与标标记记技技术术相相结结合合，以以检检测测抗抗原原或或抗抗体体的的一一种种试试验验方方法法。为为提提高高抗抗原原和和抗抗体体检检测测的的灵灵敏敏性性，可可用用易易显显示示的的物物质质标标记记已已知知的的抗抗原原或或抗抗体体，通通过过检检测测标标记记物物，间间接接测测定定待待检检抗抗体体或或抗抗原原。常常用用的的标标记记物物有有酶酶、荧荧光光素、放射性同位素、胶体金素、放射性同位素、胶体金等。等。1）免疫荧光技术）免疫荧光技术免疫荧光间接法免疫荧光间接法免疫荧光直接法免疫荧光直接法2）免疫酶技术）免疫酶技术 1、包被抗体、包被抗体 2、加抗原、加抗原 3、加酶标抗体、加酶标抗体 4、加底物显色、加底物显色1、包被抗原、包被抗原 2、加抗体、加抗体 3、加酶标抗球、加酶标抗球蛋白蛋白 4、加底物显色、加底物显色ELISA双抗体夹心法双抗体夹心法ELISA间接法间接法二、免疫细胞的数量及功能测定二、免疫细胞的数量及功能测定1、T细胞数量测定细胞数量测定通过检测通过检测T细胞表面细胞表面CD分子分子T细胞亚群测定细胞亚群测定：用间：用间接荧光法检测接荧光法检测CD4+和和CD8+T细胞细胞CD4+/CD8+正常比正常比值为值为2:1左右。左右。2 2、B B细胞数量测定细胞数量测定 检测检测mIgmIg来测定成熟来测定成熟B B细胞的数量细胞的数量 正常人外周血正常人外周血mIg+mIg+细胞一般为细胞一般为8%-12%8%-12%亦可采用检测亦可采用检测B B细胞表面特定细胞表面特定CDCD抗原抗原 3 3、T T细胞功能测定细胞功能测定 淋巴细胞转化试验：淋巴细胞转化试验：T细胞在体外受特异性抗原或非特异性有丝分裂原（PHA、ConA等）刺激后，能转化为体积较大、代谢旺盛、且能进行分裂的淋巴母细胞4 4、B B细胞功能测定细胞功能测定1）可检测血清免疫球蛋白水平进而了解B细胞功能2）B细胞增殖试验：和T细胞增殖试验类似，以SPA及抗IgM抗体作为丝裂原，在体外刺激B细胞增殖3）抗体形成细胞测定：溶血空斑实验绵羊红细胞（SRBC）刺激动物，脾脏分离致敏B细胞，然后和SRBC、补体等混合培养。B细胞产生抗SRBC体在补体作用下溶解SRBC