QuEChERS方法用于动物源性食品中喹诺酮类兽药残留量测定.pdf

北京：北京：400-608-7719 上海：上海：021-61263966 天津：天津：400-633-6606 广州：广州：020-85593520 成都：成都：028-86612625 沈阳：沈阳：024-22943513 石家庄：石家庄：0311-66686220 青岛：青岛：0532-83725230 济南：济南：0531-83681355 重庆：重庆：023-62568657 QuEChERS方法用于动物源性食品中喹诺酮类兽药残留量方法用于动物源性食品中喹诺酮类兽药残留量测测定定 喹诺酮是一类合成抗生素类药物，治疗系统感染疾病，并且在动物饲养中作为预防和治疗药物普遍使用。近年来，这些药物在动物组织中的残留已被引起广泛关注。联合国粮农组织、世界卫生组织食品添加剂专家联合委员会、欧盟都已制定了多种喹诺酮类药物在动物组织中的最高残留限量。喹诺酮类药物残留分析方法，主要包括高效液相法(HPLC)以及与此相关的HPLC-UV、HPLC-FD、HPLC-DVD、LC-MS/MS、LC-ESI-MS/MS，另外还有荧光光谱法、毛细管电泳法和酶联免疫法等。样品前处理主要采用 SPE、GPC、液液萃取等净化方法；但是目前还没有文献采用 QuEChERS 方法净化。而且官方所发布标准的检测方法中大多数是 LCMS-SPE 或者 LCMS-LLE。方法方法优势优势 基于 QuEChERS 方法原理，采用乙腈提取，然后取出 1 mL 提取液净化，上机分析。对比国标方法GB/T 21312-2007 动物源性食品中 14 种喹诺酮药物残留检测方法 液相色谱-质谱 质谱法，本方法具有：1.前处理过程简单、方便，并能同时检测马波沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、洛美沙星、双氟沙星、萘啶酸、氟甲喹；2.节省时间，降低基质效应；3.回收率达 85%以上，保证实验结果的准确性、重现性；4.方法检出限均为 1.0 g/kg，优于国标方法GB/T 21312-2007 动物源性食品中 14 种喹诺酮药物残留检测方法 液相色谱-质谱 质谱法。以下为详细解决方案，敬请参考！1、适用范围、适用范围 适用于草鱼、猪肉、猪肝等动物源性食品中马波沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、洛美沙星、双氟沙星、萘啶酸、氟甲喹等兽药残留量的测定；本方法检出限 1.0 g/kg。北京：北京：400-608-7719 上海：上海：021-61263966 天津：天津：400-633-6606 广州：广州：020-85593520 成都：成都：028-86612625 沈阳：沈阳：024-22943513 石家庄：石家庄：0311-66686220 青岛：青岛：0532-83725230 济南：济南：0531-83681355 重庆：重庆：023-62568657 2、提取、提取(1)猪肉、草鱼样品猪肉、草鱼样品 取 5.0 g 样品与 1.0 g 氯化钠，搅匀，加 5 mL 5%甲酸乙腈，涡旋混合 1 min，振荡 5 min，8000 rpm 下离心 2 min，取 1 mL 上清液待净化。(2)猪肝样品猪肝样品 取 5.0 g 样品与 2.0 g 氯化钠，搅匀，加 5 mL 5%甲酸乙腈，涡旋混合 1 min，振荡 5 min，8000 rpm 下离心 2 min，取 1 mL 上清液待净化。3、净化、净化 将 1 mL 提取液转移到 ProElut QuE 2 mL Tube(Cat#：64529)，涡旋混合30 s，10000 rpm 下离心 1 min，取上清液 500 L 于浓缩管中，加水 100 L，涡旋混匀，室温下氮吹至剩余约 100 L 溶液，加水定容至 500 L，混匀，过0.22 m 微孔滤膜，进 LC-MS/MS 分析。4、分析条件、分析条件 4.1 UPLC 条件条件 色谱柱：Endeavorsil C18，100 2.1 mm，1.8 m(Cat#：87003)流 速：0.2 mL/min 进样量：5 L 柱 温：35 流动相：A：0.4%甲酸水 B：甲醇：乙腈：甲酸（40：60：0.4）梯度设置 4.2 质谱条件质谱条件 电离模式：ESI 扫描方式：正离子扫描 检测方式：多反应监测 电喷雾电压：5500 V 雾化气压力：50 psi 辅助气压力：50 psi 气帘气压力：20 psi 离子源温度：500 时间/Min.0 4.5 5.5 7 7.5 15 A（%）80 80 0 0 80 80 B（%）20 20 100 100 20 20 北京：北京：400-608-7719 上海：上海：021-61263966 天津：天津：400-633-6606 广州：广州：020-85593520 成都：成都：028-86612625 沈阳：沈阳：024-22943513 石家庄：石家庄：0311-66686220 青岛：青岛：0532-83725230 济南：济南：0531-83681355 重庆：重庆：023-62568657 定性离子对、定量离子对、碰撞气能量及去簇电压见下表 药物名称 定性离子对 定量离子对 碰撞气能量/eV 去簇电压/V（m/z）（m/z）(母离子/子离子)(母离子/子离子)马波沙星 363.2/320.2 363.2/320.2 24 82 363.2/277.4 24 沙拉沙星 386.2/342.2 386.2/342.2 24 92 386.2/299.2 35 双氟沙星 400.2/356.2 400.2/356.2 27 100 400.2/299.3 37 恩诺沙星 360.3/316.1 360.3/316.1 26 80 360.3/245.2 34 洛美沙星 352.3/265.1 352.3/265.1 30 93 352.3/308.3 23 萘啶酸 233.2/215.1 233.2/215.1 20 58 233.2/187.0 33 氟甲喹 262.1/244.2 262.1/244.2 24 69 262.1/201.1 45 5、实验结果、实验结果 草鱼、猪肝、猪肉样品中喹诺酮类药物的 LC-MS/MS 检测添加回收结果 基质 药物名称 添加水平（g/kg）回收率(%)猪肉 马波沙星 10 77.5 恩诺沙星 10 91.2 洛美沙星 10 84.0 沙拉沙星 10 84.6 萘啶酸 10 93.5 氟甲喹 10 80.0 双氟沙星 10 96.9 猪肝 马波沙星 10 84.8 恩诺沙星 10 97.0 洛美沙星 10 92.9 沙拉沙星 10 98.0 萘啶酸 10 90.5 氟甲喹 10 78.2 双氟沙星 10 93.4 草鱼 马波沙星 10 95.9 恩诺沙星 10 91.3 洛美沙星 10 94.1 沙拉沙星 10 91.2 萘啶酸 10 94.6 北京：北京：400-608-7719 上海：上海：021-61263966 天津：天津：400-633-6606 广州：广州：020-85593520 成都：成都：028-86612625 沈阳：沈阳：024-22943513 石家庄：石家庄：0311-66686220 青岛：青岛：0532-83725230 济南：济南：0531-83681355 重庆：重庆：023-62568657 氟甲喹 10 78.4 双氟沙星 10 92.6 X IC o f+M R M (14 p airs):363.200/320.200 D a ID:m o b o sh axin g 1 fro m S am p le 19(10p p b-2p p b-4)o f 20150204.w iff(Tu rb o S p ray)M ax.3380.0 cp s.0.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.011.012.013.014.0Tim e,m in02004006008001000120014001600180020002200240026002800300032003380Intensity,cps2.236.53 马波沙星多反应监测色谱图 X IC of+M R M (14 pairs):352.300/265.100 D a ID:luom ei 1 from S am ple 19(10ppb-2ppb-4)of 20150204.w iff(Turbo S pray)M ax.7500.0 cps.0.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.011.012.013.014.0Tim e,m in050010001500200025003000350040004500500055006000650070007500Intensity,cps3.27 洛美沙星多反应监测色谱图 X IC of+M R M (14 pairs):360.300/316.100 D a ID:ennuo 1 from S am ple 19(10ppb-2ppb-4)of 20150204.w iff(Turbo S pray)M ax.7160.0 cps.0.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.011.012.013.014.0Tim e,m in05001000150020002500300035004000450050005500600065007000Intensity,cps3.52 恩诺沙星多反应监测色谱图 X IC of+M R M (14 pairs):386.200/342.200 D a ID:shala 1 fro m S am ple 19(10p pb-2ppb-4)o f 20150204.w iff(Turbo S pray)M ax.3160.0 cps.0.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.011.012.013.014.0Tim e,m in0200400600800100012001400160018002000220024002600280030003160Intensity,cps5.185.915.678.368.556.43 沙拉沙星多反应监测色谱图 北京：北京：400-608-7719 上海：上海：021-61263966 天津：天津：400-633-6606 广州：广州：020-85593520 成都：成都：028-86612625 沈阳：沈阳：024-22943513 石家庄：石家庄：0311-66686220 青岛：青岛：0532-83725230 济南：济南：0531-83681355 重庆：重庆：023-62568657 X IC of+M R M (14 pairs):233.200/215.100 D a ID:naidingsuan 1 from S am ple 19(10ppb-2ppb-4)of 20150204.w iff(Turbo S pray)M ax.4.1e4 cps.0.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.011.012.013.014.0Tim e,m in0.02000.04000.06000.08000.01.0e41.2e41.4e41.6e41.8e42.0e42.2e42.4e42.6e42.8e43.0e43.2e43.4e43.6e43.8e44.0e44.1e4Intensity,cps5.97 萘啶酸多反应监测色谱图 X IC of+M R M (14 pairs):262.100/244.200 D a ID:fujiakui 1 from S am ple 19(10ppb-2ppb-4)of 20150204.w iff(Turbo S pray)M ax.3.0e4 cps.0.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.011.012.013.014.0Tim e,m in0.02000.04000.06000.08000.01.0e41.2e41.4e41.6e41.8e42.0e42.2e42.4e42.6e42.8e43.0e4Intensity,cps5.97 氟甲喹多反应监测色谱图 X IC of+M R M (14 pairs):363.200/320.200 D a ID:m oboshaxing1 from S am ple 7(1.k)of 20150205.w iff(Turbo S pray)M ax.200.0 cps.0.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.011.012.013.014.0Tim e,m in0.02000.04000.06000.08000.01.0e41.2e41.4e41.6e41.8e42.0e42.2e42.4e42.6e42.8e43.0e43.2e43.4e43.6e43.8e44.0e4Intensity,cps 草鱼空白样品总反应监测图 X IC of+M R M (14 pairs):363.200/320.200 D a ID:m ob osh axing1 from S am ple 25(3.qj)of 20150204.w iff(Tu rbo S pray)M ax.2700.0 cps.0.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.011.012.013.014.0Tim e,m in0.02000.04000.06000.08000.01.0e41.2e41.4e41.6e41.8e42.0e42.2e42.4e42.6e42.8e43.0e43.2e43.4e43.6e43.8e44.0e4Intensity,cps2.19 草鱼加标样品（添加水平：10 g/kg）总反应监测图 北京：北京：400-608-7719 上海：上海：021-61263966 天津：天津：400-633-6606 广州：广州：020-85593520 成都：成都：028-86612625 沈阳：沈阳：024-22943513 石家庄：石家庄：0311-66686220 青岛：青岛：0532-83725230 济南：济南：0531-83681355 重庆：重庆：023-62568657 X IC of+M R M (14 pairs):363.200/320.200 D a ID:m oboshaxing1 from S am ple 23(3,k)of 20150204.w iff(Turbo S pray)M ax.180.0 cps.0.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.011.012.013.014.0Tim e,m in0.02000.04000.06000.08000.01.0e41.2e41.4e41.6e41.8e42.0e42.2e42.4e42.6e42.8e43.0e43.2e43.4e43.6e43.8e44.0e4Intensity,cps 猪肉空白样品总反应监测图 X IC of+M R M (14 pairs):363.200/320.200 D a ID:m oboshaxing1 from S am ple 9(1.qj)of 20150205.w iff(Turbo S pray)M ax.3140.0 cps.0.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.011.012.013.014.0Tim e,m in0.02000.04000.06000.08000.01.0e41.2e41.4e41.6e41.8e42.0e42.2e42.4e42.6e42.8e43.0e43.2e43.4e43.6e43.8e44.0e4Intensity,cps2.26 猪肉加标样品（添加水平：10 g/kg）总反应监测图 X IC of+M R M (14 pairs):363.200/320.200 D a ID:m oboshaxing1 from S am ple 11(2.k)of 20150205.w iff(Turbo S pray)M ax.140.0 cps.0.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.011.012.013.014.0Tim e,m in0.05000.01.0e41.5e42.0e42.5e43.0e43.5e44.0e44.5e45.0e45.5e46.0e46.5e47.0e47.5e4Intensity,cps 猪肝空白样品总反应监测图 X IC of+M R M (14 pairs):363.200/320.200 D a ID:m ob osh axing1 from S am ple 13(2.qj)of 20150205.w iff(Tu rbo S pray)M ax.3100.0 cps.0.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.011.012.013.014.0Tim e,m in0.05000.01.0e41.5e42.0e42.5e43.0e43.5e44.0e44.5e45.0e45.5e46.0e46.5e47.0e47.5e47.8e4Intensity,cps2.26 猪肝加标样品（添加水平：10 g/kg）总反应监测图 北京：北京：400-608-7719 上海：上海：021-61263966 天津：天津：400-633-6606 广州：广州：020-85593520 成都：成都：028-86612625 沈阳：沈阳：024-22943513 石家庄：石家庄：0311-66686220 青岛：青岛：0532-83725230 济南：济南：0531-83681355 重庆：重庆：023-62568657 相关产品信息相关产品信息 货号货号 名称名称 规格规格 样品前处理样品前处理 64529 ProElut QuE 2 mL Tube,For Quinolone 2 mL Tube 100/pk 30039 FitMax 针头式过滤器 Nylon 13 mm,0.22 m 100/pk 色谱柱及保护柱色谱柱及保护柱 87003 UHPLC专用柱Endeavorsil C18 100 x 2.1 mm，1.8 m 标准品标准品 55-34039-100MG 马波沙星115550-35-1 100 mg 50P-C16908001 沙拉沙星98105-99-8 10 mg 55-33984-100MG 双氟沙星盐酸盐91296-86-5 100 mg 55-33699-100MG 恩诺沙星93106-60-6 100 mg 50P-C14646000 洛美沙星盐酸盐98079-52-8 100 mg 50P-C15412000 萘啶酸389-08-2 100 mg 55-45735-250MG 氟甲喹42835-25-6 250 mg HPLC溶剂溶剂 缓冲盐缓冲盐 离子对试剂离子对试剂 50101 乙腈 HPLC 级 4 L 50102 甲醇 HPLC 级 4 L 50144 甲酸 HPLC 级 50 mL 通用色谱产品通用色谱产品 52401B 瓶架/蓝色 50 孔 52401A 瓶架/白色 50 孔 1034 样品瓶（棕色/螺纹）2 mL,100/pk 1035 样品瓶盖/含垫（已经组装）100/pk H80465 HPLC 进样针 25 L 红色产品货号红色产品货号#30039、#1034、#1035 火热促销中火热促销中