组织学实验指导.doc

※<组织学实验指导>

组织学实验指导
   温州医学院组胚教研室编印
2006年12月

目 录
绪 论--------------------------1
基本组织------------ ---- ------6
上皮组织----------------6
结缔组织--------------8
固有结缔组织-----------------9
血 液------------------9
软骨和骨-----------------10
肌肉组织------------------12
神经组织---------------------14
组织学各论------------------------15
眼 和 耳----------------16
循环系统------------------16
皮 肤---------------------19
免疫系统---------------------20
内分泌系统--------------------22
消 化 管-----------------------24
消 化 腺--------------------------27
呼吸系统---------------------------29
泌尿系统---------------------------30
男性生殖系统-------------------------32
女性生殖系统---------------------34

绪 论

一．实验目的
组织学是研究机体的微细结构及其相关功能的科学。在教学过程中，由理论课和实验
课两部分组成，而实验课的目的是让学生自己通过观察组织标本、模型、彩色图谱等，进一步深化理论内容的理解和巩固，培养同学们观察、比较与综合分析能力，使大家能基本识别人体各主要细胞、组织和器官的光镜结构特点，并正确理解它们的整体与局部、立体与平面、结构与功能的关系。

二．实验的准备与要求
1．课前必须认真复习理论课内容和预习实验指导，以便在实验课中取得最大的效果。
2．上实验时，应携带实验指导、理论教材及绘图用品，凭学生证领取显微镜和组织切片。并检查显微镜和组织切片，如有不妥，应报告带教老师。
3．严格遵守实验室的各项规章制度，不得违犯，否则照章处理。
4．实验过程中，要认真听讲，如有疑问应积极问询带教老师，或与周边同学小声讨论。
5．实验完毕后，值日同学应认真做好清洁卫生工作，关好门窗、水龙头、照明灯等。

三．组织切片的一般制作方法
在自然情况下绝大多数组织是无色不透明的，需用相应的方法做成薄片，再经过染色和透明后才能在光镜下观看。其中最常用的方法是石蜡包埋HE染色切片法，其他的方法基本原理与此相似。下面我们介绍此方法的基本原理与制作过程：
基本原理：从人体或动物身上取下小块组织后，为防止其变性或腐烂，先用固定剂迅速将组织固定；因含有水分的组织不易切成薄片，所以要进行石蜡包埋固化（也可用火棉胶包埋或直接冰冻切片），但因组织内有水分不易与石蜡混合，故先用酒精脱水，再用二甲苯去酒精后，才能使组织包埋成功；然后，再用切片机切成5~8μm的薄片，脱蜡后进行染色，最后脱水、封片。
制作过程：
1。取材 组织或器官愈新鲜愈好。尽可能在动物死亡后6小时内取材，剪取大小约为1×1×0.5cm的组织块备用。
2．固定 在生理盐水中洗去组织块上的血污后，将其放入固定液中。常用的有10%的福尔马林、80~95%的酒精等，固定24小时。
3．冲洗与脱水 固定后的组织充满固定液，须用大量水冲洗掉。冲洗后组织液又充满水分，若直接投入石蜡内，则石蜡不能浸入组织内部，故必须经过各浓度酒精（70-100%）逐级脱水，约2-6小时，使组织中所含的水份脱出。
4．透明 经过脱水的组织内含有酒精，仍不能与石蜡融合，需用二甲苯作媒介，驱除组织内的酒精，才能使石蜡浸入组织内。组织经过二甲苯后呈透明状态。
5．浸蜡 透明后的组织入溶化的石蜡（56 –60℃）中浸泡数小时。
6．包埋 待石蜡浸入组织内后，将溶化的石蜡倒入纸质的或金属的包埋器中，然后把组织块放入其中，石蜡冷却凝固后，组织块即被包埋在石蜡内。
7．切片 用切片机将已包埋好的组织块切成5~8μm厚的蜡片。
8．贴片 在清洁的载玻片上涂以少量蛋白甘油，再滴上数点蒸馏水，然后将切好的蜡片放上并小心展开，再将此载玻片置于烘片台（45℃左右），使蜡片水分烘干后再置温箱中烘烤一天；最后，组织切片须经二甲苯脱蜡再染色。
9．染色 将切片顺序经过以下各道程序：
（1）二甲苯 10分钟
（2）100%酒精 10分钟
（3）95%酒精 5分钟
（4）90%酒精 5分钟
（5）80%酒精 5分钟
（6）70%酒精 5分钟
（7）蒸 馏 水 5分钟
（8）苏木素水溶液 数分钟
（9）酸酒精（70%酒精100ml + 浓盐酸05~1ml） 分色数秒钟
（10）流水洗1小时，以去除余酸。
（11）蒸馏水洗数分钟
（12）入70%与80%酒精各10分钟
（13）入95%酒精伊红染液2~3分钟
（14）入95%酒精分色，至无红色自切片上洗下。
（15）入100%酒精二次 15分钟
（16）二甲苯二次 20~30分钟
10．封片 从二甲苯内取出后，滴以中性树胶并覆以盖玻片，即可观察。
由上述过程可见，制片是一个连续细致的操作过程，稍有不慎，都会影响切片的质量，因此，在实验过程中，必须十分小心，对切片要倍加爱护。

四．显微镜使用的要求
1．认真复习有关显微镜的结构(图-1、2)与使用方法。
2．必须牢记“盖玻片朝上，先低倍，后高倍”的要求。
3．严禁拆卸、玩弄显微镜的各部件；执搬显微镜时要规范。
4．低倍镜视野广而清晰，利于观察和寻找组织和器官的一般特征，因此，观察组织或器官的总体结构特点时，要在低倍镜下多下功夫；而高倍镜视野小，但放大倍数大，利于观察各种细胞或其它微小结构特点。
5．要爱护显微镜，做到“课前细心检查显微镜，课中规范使用显微镜，课后认真还原显微镜。”

五．观察切片与做实习作业时的注意事项
（一）理论与实际应紧密结合
本课程的实验标本主要是切片，对每张所观察的切片，必须按实习指导先用低倍镜认真观察，然后选择适当部位转高倍镜仔细观察。
在显微镜下所观察到的形态结构，有时和理论内容上所描述的不一致，其原因可从以下几个方面考虑：
1．与机体生活时的功能状态有关：如腺细胞一般为立方形或矮柱状，但在充满分泌物时，细胞可为柱状；当分泌物完全排出时，又可变为立方或矮柱状，个别甚至是扁平形。
2．立体与平面或全局与局部的关系：在理论讲述时，我们总是以全面和立体的观点予以介绍。例如神经细胞的胞体为多角形，从胞体四周发出好多长短不一的突起，当细胞切成组织薄片时，由于所切部位不同，有时切到胞体，有时切到突起或其它部位，则必然形成不同的镜下形态（如图-3所示）；又如一管状器官可因所切方向不同，可形成多种切面图象（图-4，5所示）。所以在观察切片时，要具体问题具体分析，通过各个切面的观察后，加以总结建立该器官或细胞的整体形态特点。
3．人工伪像的识别：活细胞或组织在制片过程中会受到某些因素的影响，如脂肪细胞内脂滴被溶解后形成空泡，细胞脱水后皱缩变形现象，以及组织结构之间的裂隙和染料残渣、刀痕、气泡等都属于人工伪像，观察时注意加以区别。

图-1、2 显微镜的结构

图-3神经细胞的不同切面的形态

图-4 管形器官的各种切面

图-5弓形器官的不同切面

（二）实验作业的基本要求
组织学实验的绘图作业是一项重要的基本技能训练，以培养学生严谨的科学态
度，同时在认真观察切片的基础上，通过绘图注字，以加深对所学内容的理解与记忆。
1．用具
红蓝铅笔、普通铅笔、直尺、橡皮、铅笔刀以及实验报告纸等。
2．要求
⑴ 科学性 所绘结构和文字说明应当概念清楚，正确无误。
⑵ 真实性 力求反映镜下所见的真实微细结构特点。
⑶ 特征性 图中应突出所看到的细胞、组织或器官的结构特点。
⑷ 艺术性 画面设计、比例大小、颜色深浅、线条粗细等应适当美观。
⑸ 认真性 要在看懂的基础上绘图，对所画的每个结构负责，不能敷衍了事。
3．方法
⑴ 选择目标 用低倍镜和高倍镜全面观察后，找出足以能表示该组织或器官构
造特征的镜下视野。
⑵ 确定画面 选择好典型结构后，设计好画面整体的布局。
⑶ 认真绘图 用各种颜色的铅笔细心绘出大小比例适当的各结构成分，而且着
色正确，特征明显。绘图时应视不同的对象而选择绘图顺序，一般绘细胞时，
可从细胞的外形、胞核、胞质的顺序进行；画上皮组织时，应由一侧开始；画有腔器官时，则由腔内向外进行；而画实质性器官时，可由外向内进行。
⑷ 规范注字 绘好后，将各种结构引出水平平行标线，用黑色铅笔注明内容。做到标线平行整齐，文字规整，标本名称标注正确等。

基 本 组 织

上 皮 组 织

上皮组织的共同特点是：分布于体表和有腔器官的内表面及体腔的表面，细胞排列紧密且间质少，单层或复层排列。另外，因功能的需要在上皮细胞的游离面上形成各种的特殊结构，有些可在镜下观察到。
腺上皮是上皮组织的特殊形式，其组成与特点将分别在器官与系统中观察。
一．单层扁平上皮表面观
取材：蛙的肠系膜。
染色：镀银整装片。
标本制法：取蛙肠系膜浸于1%硝酸银,再晒于日光下，当肠系膜变浅褐色时，再用水洗净，剪小，脱水，封藏而成。
观察：因为所观察的是整装标本,它的厚度各部也有不同,这就引起镀银强度的不同。选择标本最薄的地方〈该处染成淡黄色〉观察，可见多角形的细胞密集排列，细胞间有波纹状黑线相隔。细胞核圆形或椭圆形，色浅，较明亮，位于细胞中央。

二．单层扁平上皮侧面观
取材：中动脉
染色：H E
观察：肉眼见器官的切面呈圆形，中间有一圆形的腔，管壁粉红色的部分为肌层，要找寻的单层扁平上皮侧切面，系最内表面的内皮。
低倍镜下在标本的最内面，可见呈一红色细线状，其上有数个染成兰色、扁圆形的细胞核（有的地方可能脱落），此即单层扁平上皮的细胞核。再用高倍镜观察，可见细胞核呈扁椭圆形染成兰色，核周围有细胞质极少，相互连接，染成粉红色细线状，细胞界线不清楚。

三．单层立方上皮
取材：甲状腺。
染色：H E
观察：尽管甲状腺的上皮为腺上皮，但其结构为典型的单层立方上皮，且易于寻找，故以此代替被覆上皮来观察。镜下可见大小不同的甲状腺滤泡，内含有红色胶体，滤泡壁由单层上皮组成。选择比较典型的上皮进行观察，细胞呈立方形，细胞核圆形，位于细胞的中央。
四．单层柱状上皮
取材：十二指肠
染色：H E
观察：肉眼见标本的一侧有弯弯曲曲的皱褶，此即环状皱襞，其上有极细小突起为绒毛。低倍镜下可见绒毛有的纵切呈指状，有的横切呈游离状态且与肠壁脱离，其表面复盖有一层柱状上皮，也有部分上皮已经脱落，有的上皮由于切面关系不呈单层而呈复层。选择一部分比较清楚的、单层排列的上皮在高倍下观察，可见细胞排列紧密，每个柱状上皮细胞核长椭圆，位于近细胞基底部；细胞顶端有纹状缘，其由许多微细整齐的微绒毛所形成，与消化吸收有关。
此外，在柱状上皮细胞之间，尚可见散在的杯状细胞，此细胞上端膨大，下端缩窄，因细胞体内积有大量的粘液部位，制片时已溶解，故呈空泡状，显白色。细胞核被推向基底，为较小的扁椭圆形或不规则形，有时不易见到。杯状细胞其顶端无纹状缘，大部份由于斜切看不到顶端或基部，只见一个椭圆形或圆形的空泡。

五．复层扁平〈鳞状〉上皮
取材：食管横切面
染色：H E
观察：镜下先找到食管的腔面，其最表面的就是复层扁平上皮，上皮由多层细胞组成，上皮基底部凹凸不平，其下方的结缔组织形成圆锥形的乳头，有时乳头被斜切，则在上皮内可见到一圈圈浅色的结构。高倍下可见基层细胞为低柱状或立方形，细胞较小，细胞核为椭圆形或圆形，染色较深，位于细胞基部，细胞界限不清楚；此层以上的细胞移行为多边形，细胞界限逐渐清楚，接近表面的细胞又逐渐变成扁平，细胞核也相应变扁平梭形，细胞分界不清。

六．假复层纤毛柱状上皮
取材：气管横断面
染色：H E
观察：切片的凹面为腔面，其表面色深部分即是上皮。看到假复层上皮时，首先会认为它是复层上皮，因为细胞核排成几层。实际上它是单层上皮，因所有细胞的下端都固着在一层发亮的基膜上。细胞核排列成数层，是由于组成上皮的细胞，有不同大小和形状。观察上皮的游离面，可见排列紧密的纤毛复盖，呈刷毛样，生活状态时能够摆动，帮助分泌物的输送。在柱状上皮之间，也可见空泡状的杯状细胞。

七．变移上皮
取材：膀胱
染色： H E
观察：凹凸不平的一侧为腔面，表面为上皮，细胞排列成复层，基层和中间层细胞略与复层鳞状上皮似，但层数减少；表层细胞形态不一，有的略扁，有的呈立方形，一般均比较大，细胞顶面略微凸起，细胞核圆形，体积大，可见有两个细胞核的情况。
注意与复层扁平上皮的区别。

观察上皮组织切片后，同学们试总结一下各种上皮的形态特点,特别要记住各自的典型特征，以及分布的部位。

实验要点：
1.       上皮细胞排列的层次，上皮细胞核的特点，能区分单层与复层上皮。
2.       立方细胞、柱状细胞及杯状细胞的特点。
3.       各种上皮的分布。

结 缔 组 织
固有结缔组织
结缔组织在人体分布最广，所包括的种类也最多，如疏松结缔组织、致密结缔组织、网状结缔组织、软骨、骨和血液等。它们一般都具有共同的特征：
1．它们都起源于胚胎时期的中胚层组织，即间充质。
2．组成中除细胞外，还有大量非细胞物质（基质及纤维），由于大量非细胞成分之存在，细胞排列稀疏，不象上皮组织中那样排列成层，亦无极性。
疏松结缔组织、软骨、骨与血液各有其特点，故又分章叙述。

观察疏松结缔组织时，由于细胞种类较多，必须注意相互比较。由于其中一些成分的性质不同，需用不同方法制成各种标本，来研究其形态结构；例如在分离标本，则可观察结缔组织的两种细胞和两种纤维。而在一般切片上只能观察固有结缔组织，不易分辨其细胞或纤维类型。
一．疏松结缔组织铺片
取材：兔皮下结缔组织铺片
染色：活体注射+We i gert弹性纤维染色+偶氮洋红
观察：选择标本最薄处进行观察，主要区别两种细胞与两种纤维。胶原纤维数量甚多，为红色粗细不等的束条状结构，交叉排列，有的较直，也有的呈波浪形。混杂在胶原纤维之间，有细的紫兰色弹性纤维，仔细观察可见其有分枝，彼此交叉，且折光性强。纤维间见有两种细胞：（1）成纤维细胞：只见红色椭圆形细胞核，细胞质有的隐约可见,有的则模糊不清。（2）巨噬细胞细胞：多呈卵圆形或不规则形，细胞核深红色，位于细胞中央，泡质内有大小不等的兰色颗粒，此即吞噬的台盼兰颗粒。
在纤维与细胞之间的空隙中，充满无定形的基质，染色浅，其轮廓很难区分。

二．疏松结缔组织切片
取材：食管
染色：H E
观察：在深红色的肌层与粘膜肌层间，可见染色稍浅的区域，此层即为疏松结缔组织，
胶原纤维染成淡红色，不规则分布的弹性纤维混杂其间，但在标本上不易识到。在纤维之间有染成紫兰色长椭圆形的核，多为成纤维细胞的核。

三．脂肪组织
取材：食道或甲状腺
染色：HE
观察：先用低倍镜在此切片的外围绕看一圈，见有如鱼网状的结构者即为脂肪组织。换高镜仔细观察，脂肪细胞圆形或多边形，胞浆内之脂滴已被溶去，故使整个细胞呈空泡状，只剩下少量胞浆附于细胞膜，核被挤成扁圆形，紫兰色，位于一边，但大多数核往往没有切到，故没有见到。脂肪细胞之间有少量结缔组织及小血管等。

血 液

一．血液涂片
取材：人的血液涂片
染色：瑞特氏（Wright）染色或吉姆氏（Giemsa）染色
方法：将少量血液滴于载玻片上，用另一片边缘光滑的玻片的较短的一边斜浸在血滴上，使血液沿玻片边缘伸张，再迅速将血液推向另一端，这样载玻片上涂成一层薄的血膜，干燥后用瑞特氏染液染色或吉姆氏（Giemsa）染色。
观察：先用低倍镜观察，见有许多密密的桔红色小圆点，此即红细胞，有时因染色不当，红细胞呈浅兰色；其中有少量蓝色的小点，体积稍大，此即各种白细胞。然后用高倍镜辨识各种血细胞的形态结构，并注意它们数量的多少。在寻找各种血细胞时，注意观察血小板。
1．红细胞：桔红色，因为是双凹圆盘形，边缘较厚而中央较薄，所以中央染色较浅，
无细胞核。
2．中性粒细胞：数目较多，占白细胞总数50%一70%，胞浆中颗粒最细而均匀，呈
浅紫色，折光较强，但一般不明显。核呈分叶状或杆状，多为两叶，染成紫蓝色，
也可见到3~5叶，叶多表示细胞越衰老。
3．嗜酸粒细胞：较少，仅占白细胞总数1~3%。颗粒粗大，大小一致，分布均匀，呈
鲜红色或桔红色、折光较强，核常为两叶，染紫色。
4.嗜碱粒细胞：数目最少，仅占白细胞总数的0~1%。一般不易见到。颗拉粗细不匀，
染深紫兰色，往往覆盖细胞核而使核不明显，核染色浅，一般分两叶或杆状。
5.淋巴细胞：数目较多，仅次于中性粒细胞，占20~30%。细胞大小不等，可分大、中、小三种。细胞核圆形或椭圆形，有时可见一侧有凹陷，染色较深，细胞质少，呈天兰色，只在细胞核周边可见，甚至不易见到。
6.单核细胞：数目不多，占3~8%。是血液中体积最大的细胞，核染色浅，体积大，呈肾形或马蹄形，也可呈不规则形；细胞质丰富，染成灰兰色，亦可见少量嗜天青颗粒。
7.血小板：分布于血细胞间，常聚集成群，为不规则或多角的小体。小体周围部分染成浅兰色，中央可见紫色颗粒。

软骨和骨

一．透明软骨
取材：气管
染色：HE
观察：标本中紫蓝色的部分即为透明软骨，从软骨周围向中央看：
1．软骨膜：包在软骨周围，为一层淡红色的致密结缔组织，和周围的组织分界不清。
2．软骨细胞：在边缘部一般为单个分布，体积小成梭形；渐近中央，体积增大呈圆形或椭圆形，且常三五成群分布，称为同源细胞群，它们是由一个细胞分裂而来。软骨细胞生活时富于水分，固定后收缩，周边显露的腔隙称为软骨陷窝。实际上镜下所见的软骨陷窝形态即为软骨细胞形态。
3．基质：呈均质状，染成紫兰色，在软骨陷窝周围染色较深，呈强嗜碱性，称为软骨囊，这是因该处含硫酸软骨素较多之故；基质内含较细的胶原原纤维，其染色与基质一致而不能显示。
二．骨磨片
取材：人的长骨
染色：大丽紫染色或银染色
观察：由于骨板排列方式不同分以下几个部分进行观察：
1．骨单位 在视野中可以看到许多大小不等，呈多层同心圆排列的结构，称为骨单位或叫哈佛氏系统，每个哈佛氏系统由两部份组成，中央有一个黑色或白色的圆形的哈佛氏管，活体时为血管、神经、淋巴管的通道；邻近哈佛氏管之间，有时可见有横向管道相连，此为穿通管；在哈佛氏管周围有几层或十几层同心圆排列的骨板，相邻的骨板呈现明暗交替排列现象，是由于构成每一骨板中的胶原纤维，彼此排列方向一致，而相邻的两个骨板纤维排列方向不同，折光的程度不同而显出层状。在骨板之间有许多梭形色深结构，为骨细胞所在的空隙，即骨陷窝，其向四周发出许多色深丝状突起，此为骨小管，是骨细胞的突起所在的位置。相邻骨陷窝之间的骨小管是彼此相通的，但相邻骨单位之间的骨小管则不相通。
2．间骨板：在哈佛氏系统之间可以看到一些排列不规则的骨板，此即间骨板。
3．外环骨板：在骨的外表面有数层骨板与骨表面呈平行的排列，此即为外环骨板。
4．内环骨板：位于骨髓腔周围，层次少且不及外环骨板完整。有时可能在制片中已损坏。
有时切片因取材部位关系，可能不能看到内、外环骨板。

三．骨的发生
取材：胎儿的指骨
染色：H E
观察：标本是切取指骨的一半制成，浅紫色膨大的一头为骨骺端，红色细长的部分为骨干。有时因取材时间较迟，在骨骺端已出现次级骨化中心。从骨骺开始，向骨干侧移动直到骨髓腔为止，可以分为以下几个区域：
1．软骨细胞贮备区：此区靠近关节面部位，占据的面积较大，软骨细跑排列不整齐，
体积小，为其特点。偶见次级骨化中心。
2．软骨细胞增生区：软骨细胞沿着骨的长轴排列成行，渐近骨干部份，细胞体积增
大。
3．软骨基质钙化区：此区软骨细胞体积更大，细胞质出现空泡，软骨基质有钙盐沉
淀，在染得好的标本，呈深兰色。
4．成 骨 区：接近软骨基质钙化区的部分软骨细胞退变，部分的软骨基质被破
坏溶解，形成初级骨髓腔，其中含有血管和结缔组织等。渐向骨
干中央,在兰色的残余软骨基质表面，已有粉红色的骨小梁形成，
大小不等。
5．骨 髓 腔：此处骨小梁多被破坏吸收，原有的初级骨髓腔汇合成一个大腔，
位于骨干的中央部分，内有红骨髓，称为骨髓腔。移动标本观察
骨干周围部分，可见有骨外膜被覆。骨外膜由致密结缔组织所成，
此内层为粉红色的骨领，包围在骨干表面。
在依次观察上列各区时特别注意下列两点：
1．成骨细胞与破骨细胞：观察成骨区，在骨小梁的表面，见到很多长方形的细胞，细
胞质嗜碱性，核呈圆或椭圆形，细胞分界不清，此即成骨细胞；渐向骨髓腔方向移
动，常可在骨小梁凹面处或骨髓腔内见到体积较大，形状不规则的破骨细胞，其细
胞核多个，细胞质呈嗜酸性。包埋在骨小梁内的细胞，即为骨细胞。
2．骨外膜：分内外两层，外层纤维较多，也较致密。内层细胞较多，较疏松。

观察时应注意上列各区的结构特点，位置关系并联系其变化情况以了解全部骨化过程。

结缔组织的实验要点：
1．  熟悉结缔组织的一般特征、分类与分布。
2．  各种结缔组织的主要构成成分镜下特点，如：成纤维细胞、巨噬细胞、胶原纤维、弹性纤维、脂肪细胞、软骨基质、软骨细胞与软骨陷窝、软骨囊、同源细胞群、骨陷窝、骨小管、骨单位、中央管与穿通管、骨板、红细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、血小板等。

肌 肉 组 织

根据肌细胞的形态与功能上的差异，一般分成三种：即平滑肌，心肌和骨骼肌；以下实验就是在光镜下从纵横切面，来观察三种细胞的各自形态特点。

一．平滑肌
取材：膀胱
染色：HE
观察：镜下标本是膀胱壁，凹凸不平的一侧是粘膜面，下面是一层染色较浅的为结缔
组织，再向外可见染色较深，呈红色的肌层，根据肌细胞的排列不同，镜下可见两种切面。
1．横切面 肌束呈大小不等的圆形或不规则形，每个肌束内可见许多兰色的圆形细
胞核，核周围包有红色的细胞质；此外，也可见许多大小不等，仅有细胞质的平
滑肌细胞的横断面。
2．纵切面 肌束呈束条状排列，细胞核染成紫兰色，形态为长椭圆形或杆状，细
胞形态为长梭形。

二．骨骼肌
取材：骨骼肌
染色：HE
观察：镜下见长带状的是骨骼肌的纵切面，肌细胞为长的束条状，其上有多个扁椭圆
形的细胞核，位于肌膜内侧，肌原纤维沿肌纤维长轴排列，在高倍镜下可见明显的明带与暗带相间排列，形成清楚的横纹结构。镜下见圆形或多边形的红色块状是骨骼肌细胞的横端面，每一切面上可见多个细胞核，位于细胞的边缘，细胞质呈红色，典型时可见肌原纤维呈点状，被肌浆分隔为多边形的小区，称孔亥氏区。在肌细胞之间，可见薄层结缔组织，即为肌内膜。

三．心肌
取材：心脏
染色：HE
观察：心脏壁的主要成分为心肌，而且呈螺旋状排列，故同一切面上可见心肌的纵切
面、横切面及斜切面。找到纵切面，见心肌细胞为短柱状有分支，彼此吻合成网，细胞核呈椭圆形，位于细胞的中央；心肌纤维也有较明显的横纹，但不如骨骼肌典型。在心肌细胞的一定距离上（即相邻心肌之间）可见染色较深稍粗的横线，此为闰盘，这是心肌纤维的特有结构。找到横切面，心肌纤维呈圆形或不规则形，细胞的中央染色较浅，边缘较深。如切到细胞核，核呈圆形，一个，位于细胞的中心。另外，也可见心肌纤维之间有结缔组织，丰富的血管等。

实验要点：
1．  在观察以上三种肌细胞时，应注意相互之间的大小，形态，细胞核的数量和位置等的区别。
2．  同时也注意不典型的纵切或横切时，各种肌细胞的形态特点。
3．  注意细胞核、横纹及闰盘的辨别。

神 经 组 织

神经组织由神经元和神经胶质细胞组成，神经元具有接受刺激和传导冲动的功能，而
神经胶质细胞则具有支持、营养、保护、修复等作用。本章实验主要观察神经元和有髓神经纤维，及一些神经末梢的结构。

一．多极神经元
取材：脊髓的横切面
染色：HE
观察：肉眼观察标本，可见中间染色深呈蝴蝶形的是脊髓的灰质，周围染色浅的是白
质。用低倍镜在灰质前角处可看到一些大小不等，且不规则的染色稍深的细胞，这就是多极神经元；有的有核，有的没有切到核，有的切到的突起多，有些少。选择一个或几个典型的来看，细胞核圆而大，染色浅，内有染色深的核仁。细胞质内充满块状或颗粒状，染成紫兰色的结构，这是嗜染质，有时因染色不好，显示不明显。从胞体四周发出多个大小不等的突起，一般都为树突，可以有多个，偶可看到轴突，只有一个。但是这些突起往往因为切面的关系而切不完整，甚至没有切到。凡是突起内含有嗜染质的则为树突，轴突内则无，同时在其起始部因不含嗜染质，因而呈现一较亮的区域，称为轴丘。

二．有髓神经纤维
取材：猫的坐骨神经的纵横切面
染色：H E
观察：肉眼区别好纵横两个切面。
横切面可见：在整根神经外面围以结缔组织，此为神经外衣（外膜），其中含有血管和脂肪细胞等。神经外衣的结缔组织带着血管伸入内部，将神经分成许多神经束，这些结缔组织包在每个神经束的外面称为神经束衣（膜）。神经纤维呈圆形，纤维中央紫色圆点为轴突，周围是白色的髓鞘与神经膜，有的尚附有紫兰色的施万氏细胞核。神经纤维外面包有少量结缔组织，不明显，叫神经内衣（膜）。
纵切面可见：神经纤维常常排列比较紧密，选择一条比较规则，轮廓较清楚的神经纤维进行观察，先找出一个典型的神经纤维节，形态呈小写的“X”形，此处可容易看到神经纤维中央有一条紫红色的索条状结构，称为轴索，轴索外是染色浅的呈网状的髓鞘部分，因髓鞘在制片过程中被酒精溶解，故呈现浅色网状结构。最外方是暗红色为神经膜。在髓鞘边缘或神经膜的内侧，可见到紫色梭形的神经膜细胞核。
注意在纵横切面上区别神经膜细胞核与结缔组织内成纤维细胞核。

三．神经末梢
1．环层小体〈示教〉
中心是一个无结构的圆柱体，偶可见到丝状的神经末稍，外围绕有许多层同心圆
排列的结缔组织和少量扁平细胞构成的薄膜。
2．触觉小体〈示教〉
外包有薄层结缔组织的被囊，囊内有扁平横行的细胞，神经纤维因非特殊染
色，故看不到。
3．游离神经末梢〈示教〉
此片为小白鼠的口唇皮特殊染色，显示游离神经末梢。棕黄色的为其它组织，黑色细丝状者为游离神经末梢，分布在结缔组织内，或上皮组织内。

实验要点：
1．  脊髓的白质与灰质的区分，多极神经元的特点。
2．  有髓神经纤维的概念及髓鞘、郎飞节、结间体的特征。
3．  了解神经末梢的结构特点。

器 官 与 系 统

在复习巩固基本组织的基础上，来观察各系统与器官的组织结构。所有的器官都是由四种基本组织共同结合而成，但每一系统的各个器官都具有一定的形态特点以完成一定的生理功能。因此，在观察器官时，应先了解各器官组织结构上的共同性与规律性，掌握该系统的基本结构特点，然后再根据具体功能的不同，来研究各个器官的特殊结构。现将观察时应注意的地方作几点介绍：
一．先肉眼观察，再低倍后高倍：先通过肉眼观察，初步了解是属于有腔器官还是实质性器官。再用低倍镜全面观察整个器官的轮廊和各种组织构成情况，掌握该器宫的基本结构特点。然后在低倍镜下选择比较典型的部位，转用高倍镜深入观察，但切忌“好用高倍镜"的做法。
二．由内向外，由表及里：观察有腔器官的管壁时，应从管腔内表面向外逐层观察，而实质性器官就应自该器官的被膜起，由外向内逐步观察。
三．先看共同性，再看特征性：如血管先区分其三层结构，然后辩认动脉管壁与静脉管壁有何不同之处，再体会大、中、小各级动静脉的各自特点。
四．看到切面，想到整体：同一器官由于切面不同，在切片上就可有不同的形象，观察后要将局部、孤立的现象，通过思考来理解其整体、立体构造。

眼 与 耳

一．角 膜
取材：人的角膜
染色：HE
观察：由前向后，角膜可分为五层，依次是角膜上皮、前界层、角膜基质、后界层及角膜内皮。镜下可见一侧染色稍深的为角膜上皮，为不角化的复层扁平上皮，细胞排列有5~6层，上皮表面与基底面都很平整；前界层为一层粉红色的透明均质薄膜；角膜基质最厚，由许多与表面平行排列的胶原纤维组成，纤维间可有少量纤维细胞，但无血管；后界层也是一层粉红色的透明均质薄膜；角膜内皮是一层单层扁平上皮。

二．眼球后壁
取材：人的眼球后壁
染色：HE
观察：肉眼看，颜色较深，表面平整（如视网膜脱落除外）的为内侧，由内向外可分成三层：
1．视网膜：较薄，有时其可见与血管膜分离。主要有四层细胞构成，细胞轮廓不清，由内向外分别是①节细胞层：细胞核较稀少；②双极细胞层：细胞核较多；③视细胞层：由视杆细胞与视锥细胞组成，细胞核数量最多，排列密集，但细胞之间轮廓不清；④色素上皮层：贴着血管膜，为一层单层立方上皮，细胞胞质内含有大量色素颗粒。
2．血管膜：又称脉络膜。为一层疏松结缔组织构成，含有丰富血管与大量的色素细胞。色素细胞往往成群分布，数量较多。
3．巩膜：为致密结缔组织构成，最厚。内有较多的胶原纤维及小血管。

四．耳的结构、位觉斑与螺旋器（不作要求）

实验要点：
1．  角膜的分层及各层的特点。
2．  眼球壁的分层及各层的特点，视网膜的四层主要细胞的排列及数量。

循 环 系 统

本章实验学习心血管系统，它是一个封闭式的管道系统。其基本的结构分为三层，以中动脉最典型，各部分功能不同而结构也有差异。

一．中动静脉
取材：中动、静脉的横切面
染色：HE
观察：标本中有两个较大的管道断面，管腔规则的是中动脉，管腔塌陷呈不规则的是中静脉；动脉管壁厚，腔呈椭圆形，静脉管壁薄，腔为不规则形。用低倍镜区分出动脉和静脉。
换高倍镜仔细观察动脉的各层：
内膜：很薄，内皮细胞轮廓不明显，一般只见到扁平的细胞核。有些部分内皮细胞可能脱落。内皮下层极薄，以至波浪状起伏的，染成红色的内弹性膜在有些部位好象是直接附于内皮下。
中膜：最厚，主要由多层环行平滑肌组成，平滑肌细胞核为长梭形，胞质分界不很清楚。注意肌细胞的排列层次及之间的结缔组织等，包括弹性纤维的分布。
外膜：较中膜稍薄，与周围结缔组织无明显分界。外弹性膜多层，不连续且分散，不如内弹性膜清楚。外膜中含有营养小血管及神经等。

再以同样方法观察静脉的结构，并注意与中动脉的比较。

二．静脉瓣(示教〉
取材：人的中静脉
染色：H E
观察：可见静脉的内膜层向管腔面伸出一个皱襞样结构，此即静脉瓣。表面有单层扁平上皮，中间是薄层结缔组织。

五．小动脉、小静脉
取材：人的食道
染色：H E
观察：先用低倍镜在管壁的疏松结缔组织中找小动静脉，两者常伴行，注意在低倍镜下之区别。切片中可见它们有横、纵、斜等不同断面。一般腔小壁厚的是小动脉，腔大璧薄的是小静脉。再换高倍镜观察，注意小动脉之内皮细胞往往突向管腔，有时内弹性膜能看到，中膜平滑肌有2~5层，外膜与周围结缔组织分界不明显。再看伴行的静脉，并比较之。

四．大动脉
取材：人的主动脉切面。
染色：H E
观察：标本取材为主动脉的一段，凹面是管腔肌面。管壁的主要部分（约占2/3）是数十层，染成红色的弹性膜及少量的平滑肌组成，此即中膜。内、外弹性膜与中膜内的弹性膜相续，故而三层结构分界不清。
内膜：较薄，内皮细胞有时脱落，使内皮层不完整。内皮下层为结缔组织，较致密。其中除胶原纤维和弹性纤维外，还有一些散在的纵行平滑肌。
外膜：较内膜略厚，由疏松结缔组织构成，含脂肪细胞，营养血管和淋巴管及神经纤维等。

五．大静脉
注意与大动脉比较，特别是大静脉的中膜不发达，非常薄，而外膜很厚，内有大量纵行排列的平滑肌。

六．心