CRTSTAL色谱柱固定相手册.pdf

1 2 Crystal 系列固定相系列固定相 固定相 固定相结构 孔径 粒径 载碳量pH 固定相 固定相结构 孔径 粒径 载碳量pH GP-C18 120 3,4,5,7,10m 17%2-8.5 HP-C18 120 3,4,5,7,10 m 17%2-8 BR-C18 120 3,5,7,10 m 17%1.5-10Bio-C18 200,300 3,5,10 m 10%2-8 GP-C8 120 3,5,7,10 m 11%2-8.5 Bio-C8 200 300 3,5,7,10 m 11%2-8.5 GP-C4 120 3,5,7,10 m 8.0%2-8 Bio-C4 200 300 3,5,7,10 m 8.0%2-8 GP-Phenyl 120 3,5,7,10 m 11%2-8.5 HP-Cyano 120 3,5,7,10 m 70%2-8 HP-Amino 120 3,5,7,10 m 40%2-8 HP-SAX 120 3,5,7,10 m 16%2-8 HP-SCX 120 3,5,7,10 m 11%2-8 HP-Silica 120 3,5,7,10 m 0%2-8 SiO2OSi(CH2)17CH3SiO2OSi(CH2)17CH3SiO2(CH2)17CH3PolarSiO2(CH2)17CH3PolarSiO2OH SiO2OH SiO2OSi(CH2)3SO3HSiO2OSi(CH2)3SO3HSiO2OSi(CH2)3CH2N(CH3)3SiO2OSi(CH2)3CH2N(CH3)3 SiO2OSi(CH2)3NH2SiO2OSi(CH2)3NH2SiO2OSi(CH2)3CNSiO2OSi(CH2)3CNSiO2OSi(CH2)3SiO2OSi(CH2)3SiO2OSi(CH2)3CH3SiO2OSi(CH2)3CH3SiO2OSi(CH2)3CH3SiO2OSi(CH2)3CH3SiO2OSi(CH2)7CH3SiO2OSi(CH2)7CH3SiO2OSi(CH2)7CH3SiO2OSi(CH2)7CH3SiO2(CH2)17CH3PolarSiO2(CH2)17CH3PolarSiO2OSi(CH2)17CH3SiO2OSi(CH2)17CH33 Crystal ODS 系列系列 特性特性 采用高纯度硅胶填料 运用高度可控的化学技术形成单层和完全封端的固定相结构 柱与柱之间具有高度的重现性 分离具有高度选择性及高效性 优异的稳定性 适用于 LC/MS 分析 Crystal ODS 系列参数说明系列参数说明 Crystal GP-C18 Crystal HP-C18 Crystal Bio-C18 Crystal BR-C18 硅胶 球形，高纯度(金属杂质10 ppm)球形,高纯度(金属杂质10 ppm)球形，高纯度(金属杂质10 ppm)球形，高纯度(金属杂质10 ppm)孔径 120 120,200 200，300 120 粒径 3,4,5,and 7 m 3,4,5,and 7 m 3,5,and 7 m 3,5 m 孔体积 1.0 mL/g 1.0 mL/g;1.1 mL/g 1.10 mL/g 1.0 mL/g 比表面积 300 m2/g 300 m2/g;200 m2/g 200 m2/g 300 m2/g 固定相结构 单功能分子层 完全封端 单功能分子层 完全封端 单功能分子层 完全封端 单功能分子层 完全封端 碳载量 17 17%;10%10 17 表面覆盖率 约 3.3 mol/m2 约 3.3,3.3 mol/m2;约 3.0 mol/m2 约 3.3 mol/m2 通用反相 C18 液相分析柱 通用反相 C18 液相分析柱 Crystal GP-C18 Crystal GP-C18 系列为通用反相 C18 液相色谱柱，广泛适用于酸性，中性，碱性有机化合物的分离，通常流动相使用有机溶剂或有机溶剂与水的混合物。Crystal GP-C18 以高纯度硅胶为基质，采用高度可控的表面化学技术形成单层和完全封端的固定相结构，使柱与柱之间具有高度的重现性，分离度具有高度选择性。可用 100水溶液为流动相 可用 100水溶液为流动相 Crystal HP-C18 Crystal HP-C18系列适于需要使用100水溶液作为流动相的酸性，碱性化合物分离，以及极性化合物的分离。通常的 C18 具有非极性固定相表面，对极性化合物保留很弱或者没有保留，同时在使用纯水为流动相时，会产生严重的固定相塌陷。HP-C18 采用独特的表面修饰，能够长久的在纯水溶液环境下使用，并且对极性化合物有着更强的保留。多肽、小分子蛋白的分离 多肽、小分子蛋白的分离 Crystal Bio-C18 Crystal Bio-C18 系列比 GP-C18,HP-C18 具有更大的孔径，适于天然和合成多肽，小分子蛋白质等生物样品的分离。Bio-C18 同时可以使用100水溶液作为流动相，对极性化合物亦有优于 GP-C18 的保留。高 pH 环境下的样品分离 高 pH 环境下的样品分离 Crystal BR-C18 Sepax Br-C18 系列色谱柱适用于高 pH 环境下的色谱方法。碱性化合物样品的 pKa 值通常较高，使用高 pH 流动相，可以使样品非离子化，减轻样品与固定相残留硅羟基的作用，显著提高分离度。Br-C18 系列色谱柱也适用于在高 pH 环境下更稳定或者更易离解的化合物的分离和洗脱。Br-C18 对所有类型化合物都有良好的分离度，在中性或低 pH 条件下，具有和 GP-C18,HP-C18 不同的选择性。4 Figure 1.SepaxGP C18(4.6x150 mm)Stability Test00.511.522.533.54576172828804032576074888640103681152012672Column volumeRetention time(min)TolueneAnisoleAnilinemin0123456mAU0100200300400500600123Figure 2Column:SepaxGP C18,4.6x250mm,5mMobile phase:85%Methanol/15%H2OFlow rate:1.0 mL/minDetector(UV):254 nmInjection volume:5 LTemperature:Ambient(23oC)Compounds:1.Aniline 0.5 mg/mL2.Anisole 1.6 mg/mL3.Toluene 1.0 mg/mLmin0123456min0123456mAU0100200300400500600mAU0100200300400500600123Figure 2Column:SepaxGP C18,4.6x250mm,5mMobile phase:85%Methanol/15%H2OFlow rate:1.0 mL/minDetector(UV):254 nmInjection volume:5 LTemperature:Ambient(23oC)Compounds:1.Aniline 0.5 mg/mL2.Anisole 1.6 mg/mL3.Toluene 1.0 mg/mLFigure 2Column:SepaxGP C18,4.6x250mm,5mMobile phase:85%Methanol/15%H2OFlow rate:1.0 mL/minDetector(UV):254 nmInjection volume:5 LTemperature:Ambient(23oC)Compounds:1.Aniline 0.5 mg/mL2.Anisole 1.6 mg/mL3.Toluene 1.0 mg/mL柱效柱效 独特的单层功能键合化学技术使 Sepax-C18 柱避免形成多层 C18 层。均匀的固定相使柱子具有高选择性及高效性。图 2 为典型的 4.6x 250mm Crystal GP-C18 柱的质量控制色谱图。柱稳定性柱稳定性 Crystal GP-C18 使用完全封端的键合硅胶填料，具有非常高的稳定性。图 1 是三种标准化合物（苯胺、苯甲醚、甲苯）在运行 13,000 倍柱体积时保留时间的重现性，流动相为 85%甲醇和 15%水的混合液。如此高的稳定性使其非常适用于不同分析物的定性与定量分析。Injection No.3Injection No.23Injection after 1800 column volume1 min132465781.Scoporamine2.Atropine3.Lidocaine4.Toluenesulfonamide5.m-nitroaniline6.Proplanolol7.Carbamazepine8.NortriptylineColumn:SEPAX HP-C18(4.6x50 mm,3 m,120)Mobile phase:(A)0.1%TFA/H2O(B)0.1%TFA/99%CH3CN Linear gradient:30%-75%B(1.0 min)Flow rate:2.5 ml/minDetection:UV at 210 nmInjection No.3Injection No.23Injection after 1800 column volume1 min132465781.Scoporamine2.Atropine3.Lidocaine4.Toluenesulfonamide5.m-nitroaniline6.Proplanolol7.Carbamazepine8.NortriptylineColumn:SEPAX HP-C18(4.6x50 mm,3 m,120)Mobile phase:(A)0.1%TFA/H2O(B)0.1%TFA/99%CH3CN Linear gradient:30%-75%B(1.0 min)Flow rate:2.5 ml/minDetection:UV at 210 nm图 3.采用 Crystal HP-C18 快速分离 8 个药物分子的重现性(由日本 M&S 仪器公司提供)高重现性高重现性 图 3 所示用Sepax HP-C18,3m,4.6x50mm短柱分离 8 种药物分子的结果。在运行 1,800 倍柱体积后（流动相 0.1%TFA 和 CH3CN 的混合液）柱效几乎不变。5 应用应用 有机酸 有机酸 色谱柱:Crystal GP-C18,4.6x150mm,5m 流动相:0.10 M 磷酸盐缓冲液,pH 3.1 流速:1.0 mL/min 检测波长:UV 210 nm 进样量:5 L 柱温:室温(23C)化合物:有机酸 (10 mM)嘌呤碱 嘌呤碱 由于生物碱的碱性基团与残留硅醇基（Si-OH）之间的离子交换与静电作用，基于硅胶基质的反相色谱填料用于分离生物碱时存在一定的难度。Crystal GP-C18 和 Crystal HP-C18 在分离生物碱时都具有高选择性和高分离度。Crystal HP-C18 对水溶液具有更好的相容性，因此，分离生物碱时表现出比 Crystal GP-C18 更好的性能。儿茶酚胺 儿茶酚胺 色谱柱:Crystal GP-C18,4.6x150mm,5 m 流动相:57 mM 柠檬酸/43 mM NaAc/0.10 mM EDTA (磷酸氢二钠形式)/1 mM 辛磺酸/10%MeOH(pH 3.4)流速:1.0 mL/min 检测器:电化学检测器 GC 进样量:25 L 柱温:室温(23C)化合物:1.去甲基肾上腺素 (100 nM)2.肾上腺素 (100 nM)3.二羟基苄胺 (100 nM)4.多巴胺 (100 nM)mAU0.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0-5.00.05.010.015.020.025.030.035.040.0Minutes1.Formic Acid2.Malic Acid3.Lactic Acid4.Acetic Acid5.Impurity 6.Citric Acid7.Succinic Acid1234567mAU0.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0-5.00.05.010.015.020.025.030.035.040.0Minutes1.Formic Acid2.Malic Acid3.Lactic Acid4.Acetic Acid5.Impurity 6.Citric Acid7.Succinic Acid1234567色谱柱:Crystal HP-C18,4.6x150mm,5 m 流动相:0.10 M 磷酸盐缓冲液,pH 3.1 流速:0.75 mL/min 检测波长:UV 254 nm 进样量:5L 柱温:室温(23C)化合物:1.可可碱(1 mM)2.茶碱(1 mM)3.咖啡因(1 mM)4.苯酚(7 mM)nAMinutes024681012141618202225-2.0-1.00.01.02.03.04.05.06.07.08.01234nAMinutes024681012141618202225-2.0-1.00.01.02.03.04.05.06.07.08.01234mAUMinutes0.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0-500501001502002501234NHNNNOOCH3H3CNNNHNOH3CCH3ONNNNOH3CCH3OCH3OHmAUMinutes0.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0-500501001502002501234NHNNNOOCH3H3CNNNHNOH3CCH3ONNNNOH3CCH3OCH3OH6 LC/MS/MS 药物分析药物分析 Max.1540.0 cps.12345Min0200400600800100012001400Intensity,cps3.642.602.15Max.4850.0 cps.12345Min01000200030004000Intensity,cps2.60Max.5.0e4 cps.12345Min0.01.0e42.0e43.0e44.0e45.0e4Intensity,cps2.97123Max.1540.0 cps.12345Min0200400600800100012001400Intensity,cps3.642.602.15Max.4850.0 cps.12345Min01000200030004000Intensity,cps2.60Max.5.0e4 cps.12345Min0.01.0e42.0e43.0e44.0e45.0e4Intensity,cps2.97Max.1540.0 cps.12345Min0200400600800100012001400Intensity,cps3.642.602.15Max.1540.0 cps.12345Min0200400600800100012001400Intensity,cps3.642.602.15Max.4850.0 cps.12345Min01000200030004000Intensity,cps2.60Max.4850.0 cps.12345Min01000200030004000Intensity,cps2.60Max.5.0e4 cps.12345Min0.01.0e42.0e43.0e44.0e45.0e4Intensity,cps2.97Max.5.0e4 cps.12345Min0.01.0e42.0e43.0e44.0e45.0e4Intensity,cps2.97123色谱条件：色谱条件：色谱柱:Crystal GP-C18,3 m,50 x2.1 mm 流动相:75:25/ACN:1.0 mM 醋酸铵水溶液,pH 4.5 流速:0.2 mL/min 进样量:10 L 柱温:25 C 仪器:API 4000 Q Trap LC-MS/MS system 化合物化合物:1.Simvastatin 2.Simvastatin hydroxyl acid 3.Lavastatin(内标)Courtesy of Miyako Kawakatsu,M&S Instruments IncTryptic digest of Bovine HbCourtesy of Miyako Kawakatsu,M&S Instruments IncTryptic digest of Bovine HbTryptic digest of Bovine Hb色谱柱:Crystal Bio-C18,4.6x150 mm,5 m,200 流动相:(A)0.1%TFA 水溶液 (B)0.1%TFA/70%CH3CN 溶液 线性梯度:0-95%B(20 min)流速:1.0 mL/min 进样量:10 L(1.0 mg/mL)样品:牛-Hb 链胰蛋白酶消化液 检测波长:UV at 210 nm Injection#4Injection#5Detection at 210 nmDetection at 280 nmDetection at 210 nmDetection at 280 nmInjection#4Injection#5Detection at 210 nmDetection at 280 nmDetection at 210 nmDetection at 280 nm图4.牛血红蛋白的胰蛋白酶降解色谱分离，柱子:Crystal Bio-C18,4.6x150 mm,5 m,200;流动相:(A)0.1%TFA 水 溶 液,(B)0.1%TFA 70%CH3CN/30%H2O 溶液；线性梯度;流速:1.0 mL/min;样品:10 L(1.0 mg/mL)牛-Hb 链胰蛋白酶消化液;检测波长:UV at 210 nm 和280 nm.(由日本M&S 仪器公司.提供).(由美国 Avantix Laboratories 提供)生物分子分离 生物分离的高重现性 7 高温下药物分离高温下药物分离 Crystal GP-C18 在高温水流动相中具有极高的稳定性。下图所示 GP-C18 柱子在流速 0.1mL/min，温度 60C 条件下，连续测试 24 h 和 48h 后的色谱图.实验结果显示保留时间误差在 1.0%以下,并且分辨率误差在 3.0%以下.AU0.0000.0050.0100.0150.0200.025Minutes2.004.006.008.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 22.00 24.00 26.00 28.00 30.00 32.00 34.00 36.00 38.00 40.00 42.0027.084132Run 1 Initial 2 24 h later3 48 h laterAU0.0000.0050.0100.0150.0200.025Minutes2.004.006.008.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 22.00 24.00 26.00 28.00 30.00 32.00 34.00 36.00 38.00 40.00 42.0027.084132Run 1 Initial 2 24 h later3 48 h laterAU0.000.100.200.300.400.500.60Minutes25.625.826.026.226.426.626.827.027.227.427.627.828.028.228.428.628.81231.Initial injection2.After 24 h 60 oC3.After 48 h 60 oC Injection Peak Height Peak Area1.Initial 658092(100%)7641879(100%)2.After 24h 658885(100%)7647708(100%)3.After 48h 636500(97.0%)7734673(101%)AU0.000.100.200.300.400.500.60Minutes25.625.826.026.226.426.626.827.027.227.427.627.828.028.228.428.628.8123AU0.000.100.200.300.400.500.60Minutes25.625.826.026.226.426.626.827.027.227.427.627.828.028.228.428.628.8AU0.000.100.200.300.400.500.60Minutes25.625.826.026.226.426.626.827.027.227.427.627.828.028.228.428.628.81231.Initial injection2.After 24 h 60 oC3.After 48 h 60 oC Injection Peak Height Peak Area1.Initial 658092(100%)7641879(100%)2.After 24h 658885(100%)7647708(100%)3.After 48h 636500(97.0%)7734673(101%)色谱条件色谱条件:色谱柱:Crystal GP-C18,5m,4.6x150 mm 流动相：A:99%磷酸盐缓冲液(5.0 mM,pH 7.2)/1%乙腈 B:40%磷酸盐缓冲液(5.0 mM,pH 7.2)/60%乙腈 梯度:Time(min)A%B%0 100 0 3 100 0 38 0 100 柱温：60 C 流速:1.0 mL/min 检测波长:210 nm 样品:一个美国制药公司提供的实样 8 Crystal GP-C18 和市场同类和市场同类 C18 产品选择性比较产品选择性比较 选择性在药物分析中对于检测低含量的成份和杂质非常重要。下图显示美国Novartis制药公司在药物分析方法的研发过程中，对 Crystal GP-C18 和其他同类产品进行比较，结果显示 Crystal GP-C18 柱子在选择性和灵敏度方面具有明显优势。色谱柱:Inertsil ODS-3,3m(Varian),Xterra RP18,3.5 m(Waters),Suplex PKB-100,5 m(Supelco),and Crystal GP-C18,3 m 流动相:A:99%硼酸盐缓冲液(5.0 mM,pH 7.0)/1%乙腈 B:40%硼酸盐缓冲液(5.0 mM,pH 7.0)/60%乙腈梯度:0-3 min(100%A);3-38min(0-100%B);38-43 min(100%B)柱温:50 C 流速:1.0 mL/min 检测波长:210 nm 样品:Novartis 提供的实样 AU0.0000.0050.0100.0150.020Minutes5.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.00Sepax-GP-C183 m,4.6 x 150 mmAU0.0000.0050.0100.0150.020Minutes5.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.00Sepax-GP-C183 m,4.6 x 150 mmA U0.0000.0020.0040.0060.0080.010Minutes5.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.00Varian,Inertsil-ODS3 m,4.6 x 150 mmA U0.0000.0020.0040.0060.0080.010Minutes5.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.00Varian,Inertsil-ODS3 m,4.6 x 150 mmA U-0.030-0.020-0.0100.0000.010Minutes5.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.00Supelco,Suplex PKB-100,5 m,4.6 x 250mm A U-0.030-0.020-0.0100.0000.010Minutes5.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.00Supelco,Suplex PKB-100,5 m,4.6 x 250mm A U0.0000.0050.0100.0150.0200.0250.030Minutes5.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.00Waters,Xterra RP18,3.5 m,4.6 x150mmA U0.0000.0050.0100.0150.0200.0250.030Minutes5.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.00Waters,Xterra RP18,3.5 m,4.6 x150mm9 Crystal 多种固定相多种固定相 特性：特性：运用高度可控的化学技术形成单层和完全封端的固定相结构 柱与柱之间的重现性极好 分离具有高度选择性及高效性 填充覆盖的键合硅胶填料具有异常高的稳定性 适于分离有机酸，多肽、蛋白质、药物等 Crystal GP-C8 Crystal Bio-C8 Crystal GP-C4 Crystal Bio-C4 硅胶:球形,高纯度 (金属杂质10 ppm)球形,高纯度 (金属杂质10 ppm)球形,高纯度 (金属杂质10 ppm)球形,高纯度 (金属杂质10 ppm)孔径:120 300 120 120 粒径:3,4,5 and 7 m 3 and 5 m 3 m,5 m 3 and 5 m 孔体积:1.0 mL/g 0.9 mL/g 1.0 mL/g 1.0 mL/g 比表面积:300 m2/g 300 m2/g 300 m2/g 300 m2/g 固定相结构:单功能分子层 完全封端 单功能分子层 完全封端 单功能分子层 完全封端 单功能分子层 完全封端 载碳量:11.0%5.0%8.0%3.0%表面覆盖率:3.4 mol/m2 3.4 mol/m2 3.8 mol/m2 3.8 mol/m2 Crystal HP-苯基苯基 Crystal HP-CNCrystal HP-NH2Crystal HP-SCX Crystal HP-硅胶硅胶硅胶:球形,高纯度 (金属杂质10 ppm)球形,高纯度 (金属杂质10 ppm)球形,高纯度 (金属杂质10 ppm)球形,高纯度硅胶(金属杂质10 ppm)球形,高纯度硅胶(金属杂质10 ppm)孔径:120 120 120 120 120 粒径:3 m,5 m 3 m,5 m 3 m,5 m 3 m,5 m 3 m,5 m 孔体积:1.0 mL/g 1.0 mL/g 1.0 mL/g 1.0 mL/g 1.0 mL/g 比表面积:300 m2/g 300 m2/g 300 m2/g 300 m2/g 300 m2/g 固定相 结构:单功能分子层 完全封端 单功能分子层 完全封端 单功能分子层 完全封端 高分子键合混合模式，全封端 羟基(-OH)载碳量:11.0%7.0%4.0%11.0%0.0%表面覆盖率:3.0 mol/m2 约 3.5 mol/m2 约 3.6 mol/m2 3.0 mol/m2 10 应用：应用：LC/MS 代谢物分析代谢物分析 LC/MS/MS 药物分析药物分析 123123123(由美国 Avantix Laboratories 提供)色谱条件色谱条件 色谱柱:Crystal HP Silica,3 m,50 X 2.1 mm 流动相:ACN/water(85/15)with 0.1%TFA 和 5 mM CH3COONH4 流速:0.5 mL/min 进样量:5 L 柱温:25 C 仪器:Micromass Quattro LC LC-MS/MS system 化合物:1.右美沙芬 2.Dextrophan(代谢物)3.双氢可待因-D6(内标)NCH3NCH3H3COHONCD3D3OCODextromethorphanDextrorphanDihydrocodeine-D6(IS)色谱条件色谱条件:色谱柱:Crystal HP Silica,3 m,50 X 2.1 mm 流动相:ACN/water(80/20)with 0.1%FA and 5 mM CH3COONH4 流速:0.5 mL/min 进样量:20 L 柱温带:25 C 仪器:Micromass Quattro LC LC-MS/MS system 化合物化合物:1.吗啡-D6(内标)2.吗啡 3.吗啡-6-葡萄糖苷酸-D6(内标)4.吗啡-3-葡萄糖苷酸-D6（内标)5.吗啡-6-葡萄糖苷酸 6.吗啡-3-葡萄糖苷酸 (由美国 Avantix Laboratories 提供)(由美国 Avantix Laboratories 提供)12345612345612345611 一种用于测量人体内一种用于测量人体内 Vardenafil 的的 LC-MS/MS 方法方法 Max.223.3 cps.0.20.40.60.8Min04080120160200Intensity,cps0.500.33Max.2.1e4 cps.0.20.40.60.8Min0.00.4e40.8e41.2e41.6e42.0e4Intensity,cps0.470.37Max.223.3 cps.0.20.40.60.8Min04080120160200Intensity,cps0.500.33Max.2.1e4 cps.0.20.40.60.8Min0.00.4e40.8e41.2e41.6e42.0e4Intensity,cps0.470.37NNNNNNOSNNNNNNOSOO2O2(由美国 Avantix Laboratories 提供)极低含量(LLOQ)Vardenasil 色谱图（0.1 ng/mL:(A)Vardenasil and(B)Sildenafil(IS)）色谱条件：色谱条件：色谱柱:Crystal HP Silica,3 m,50X2.1 mm 柱温:室温 流动相:Acetonitrile:water+0.1%蚁酸和 5 mM 醋酸胺溶液(80:20)流速:0.5 mL/min 自动取样器温度:室温 进样量:10 L Max.6.0e4 cps.1.02.03.04.05.0Min0.01.0e42.0e43.0e44.0e45.0e46.0e4Intensity,cps2.45Max.2.4e4 cps.1.02.03.04.05.0Min0.04000.08000.01.2e41.6e42.0e42.4e4Intensity,cps2.44Max.2.4e4 cps.1.02.03.04.05.0Min0.04000.08000.01.2e41.6e42.0e42.4e4Intensity,cps3.02123Max.6.0e4 cps.1.02.03.04.05.0Min0.01.0e42.0e43.0e44.0e45.0e46.0e4Intensity,cps2.45Max.6.0e4 cps.1.02.03.04.05.0Min0.01.0e42.0e43.0e44.0e45.0e46.0e4Intensity,cps2.45Max.2.4e4 cps.1.02.03.04.05.0Min0.04000.08000.01.2e41.6e42.0e42.4e4Intensity,cps2.44Max.2.4e4 cps.1.02.03.04.05.0Min0.04000.08000.01.2e41.6e42.0e42.4e4Intensity,cps2.44Max.2.4e4 cps.1.02.03.04.05.0Min0.04000.08000.01.2e41.6e42.0e42.4e4Intensity,cps3.02Max.2.4e4 cps.1.02.03.04.05.0Min0.04000.08000.01.2e41.6e42.0e42.4e4Intensity,cps3.02123LC/MS 代谢物分析代谢物分析 色谱条件色谱条件:色谱柱:Crystal HP Silica,3 m,100 X 2.1 mm 流动相:ACN/water(97/3)with 0.05%TFA 流速:0.5 mL/min 进样量:20 L 柱温:25 C 仪器:API 4000 LC-MS/MS system 化合物化合物:1.Midazolam 2.1-hydroxymidazolam(代谢物)3.Alprazolam-D5(内标)(由美国 Avantix Laboratories 提供，ASMS 会议，2005,San Antonio,TX)Vardenafil Sildenafil(IS)Crystal UPLC 系列系列 2 m 以下填料以下填料 硅胶颗粒 粒径:1.8 和 2 m 孔径:120 固定相结构 特性特性 广泛的固定相选择 首创了 2 m 以下的 离子交换相 离子交换柱具有空前的效率和分辨率 PS/DVB 反相 pH 范围 1-14，离子交换相 pH 范围 2-12 高速，高覆盖率，高稳定性 极高的机械稳定性，能承受最高压力 10000psi 小分子分离 小分子分离 右图为 Crystal GP-C18(2 m)柱的典型色谱图，其高效分析结果如下图所示 Compound Rt(min)USP Plate Count USP Tailing USP Resolution1 Aniline 2.696 6047 1.4 1.77 2 Anisole 5.419 14432 1.2 11.96 3 Toluene 8.666 17459 1.1 14.76 应用应用 UPLC 分离 蛋白质 DNA 多肽 碳水化合物 药物 蛋白组学 蛋白质分离蛋白质分离 采用 2m 粒径填料 GP-C18 柱，对蛋白分离取得极好的效果.图 1.GP-C18(2m,120,3.0 x150mm)柱分离效果.流动相:55%ACN/45%H2O;流速:0.45 mL/min.柱后压:3,450 psi;检 测 器 (UV):254nm;温 度:ambient(23oC).(1)Ribonuclese A;(2)Cytochrome C;(3)Lysozyme.C18C8C4CNNH2PhenylC18C8C4CNNH2PhenylAU0.000.100.200.300.400.500.600.70Min012345678910123AU0.000.100.200.300.400.500.600.70Min012345678910AU0.000.100.200.300.400.500.600.70Min01234567891012313 Crystal 制备和半制备系列制备和半制备系列 Crystal GP-C18 Crystal HP-C18 Crystal Bio-C18 Crystal BR-C18 硅胶 球形，高纯度(金属杂质10 ppm)球形,高纯度(金属杂质10 ppm)球形，高纯度(金属杂质10 ppm)球形，高纯度(金属杂质0.1M or 50mg/mL)。选择性():1.25;尽量不要使用，如果使用尽量不要过载(1.5 过载量不超过 15 mg/g 填料)。14 Crystal GP-C8 Crystal Bio-C8 Cryst