金黄色葡萄球菌（平板计数法）检验原始记录表.doc

金黄色葡萄球菌（平板计数法）检验原始记录表

样品名称

样品编号

检验项目
金黄色葡萄球菌检验
检验日期

检验地点
BSL-2实验室
温湿度（℃，RH%）

检验依据
GB4789.10-2016
判定依据

检验仪器
生化培养箱 均质器 菌落计数仪
生物安全柜 电子天平 显微镜
检验试剂
Baird-Parker平板、血琼脂平板、磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水等。
样品制备
□固体和半固体样品：无菌称取25g，置于盛有225mL磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水的无菌灭菌袋内，进行均质处理。
□液体样品：吸取25mL于样品于225mL磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水中，混匀。
检验程序
1
实验采集抽样方案来自GB4789.1；
2
25g(mL)样品+225mL稀释液均质（或原液直接检验）并10倍系列稀释；
3
选2-3个适宜稀释度样品匀液，每个稀释度分别吸取1mL样品匀液以0.3mL、0.3mL、0.4mL接种量分别加入Baird—Parker平板，无菌涂布整个平板，36±1℃，24-48h培养；
4
典型菌落计数，选择有典型的金黄色葡萄球菌菌落的平板，且同一稀释度3个平板所有菌落数合计在20CFU～200CFU之间的平板计数；
5
典型菌落确认，从典型菌落中至少选5个可疑菌落（少于5个全选）进行鉴定试验。分别做染色镜检，血浆凝固酶试验（辅以阴阳性对照）；同时接种到血平板，36±1℃，24-48h培养后观察菌落形态。
6
记录结果，报告。
报告

检验员： 审核员：

金黄色葡萄球菌（平板计数法）检验原始记录表（续页）

金黄色葡萄球菌计数[ CFU/g (mL ) ]
培养温度
℃
培养时间
h
确证性试验结果
稀释度

阳性
空白
样品A

平板A1

样品B

平板A2

样品C

平板A3

样品D

平板B1

样品E

平板B2

实验结果
平板B3

T1

公式
平板C1

平板C2

T2

公式
平板C3

平板D1

T3

公式
平板D2

平板D3

T4

公式
平板E1

平板E2

T5

公式
平板E3

计算公式
公式（1）：
………（1）式中：
T—样品中金黄色葡萄球菌菌落数；
A—某一稀释度典型菌落的总数；
B—某一稀释度血浆凝固酶阳性的菌落数；
C—某一稀释度用于血浆凝固酶试验的菌落数；
d—稀释因子。
公式（2）：
…………………（2）式中：
T —样品中金黄色葡萄球菌菌落数；
A1—第一稀释度（低稀释倍数）典型菌落的总数；
A2—第二稀释度（高稀释倍数）典型菌落的总数；
B1—第一稀释度（低稀释倍数）血浆凝固酶阳性的菌落数；
C1—第一稀释度(低稀释倍数)用于鉴定试验的菌落数;
A2—第二稀释度(高稀释倍数)典型菌落的总数;
B2—第二稀释度(高稀释倍数)鉴定为阳性的菌落数;
C2—第二稀释度(高稀释倍数)用于鉴定试验的菌落数;
1.1 —计算系数;d—稀释因子(第一稀释度)。