外源激素对枣果环磷酸腺苷和抗坏血酸含量的影响_李双双.pdf

种植技术 年第 期 收稿日期：基金项目：中央高校基金“东北寒区有机苜蓿生产利用技术”（）；陕西省科技厅重大专项“苹果重大病害绿色防控技术及产品研发”（）；陕西省科技厅项目“基于分子挖掘的生物农药检验检测平台建立”（）；陕西省重点研发计划项目“猕猴桃溃疡病生物防治 春雷霉素互配制剂的创制”（）。作者简介：李双双（），女，硕士，研究方向：应用微生物及生物医药。：。为通讯作者。外源激素对枣果环磷酸腺苷和抗坏血酸含量的影响李双双，潘忠成，张心心，郑鹏飞，田利明，周 柳，张鹏飞，李蒲民（陕西麦可罗生物科技有限公司，陕西 渭南，哈尔滨工程大学材料科学与化学工程学院 教育部超轻材料与表面技术重点实验室，哈尔滨，山西农业大学园艺学院，山西 太古）摘 要：生产上常采用植物生长调节剂改善枣果的品质。本试验研究了外源激素对不同生育期壶瓶枣果实环磷酸腺苷（）、抗坏血酸（）功能物质含量的影响。在壶瓶枣幼果期开始进行喷施赤霉素（）、脱落酸（）、萘乙酸钠的栽培技术处理，并对果实的功能成分含量动态变化进行分析，发现喷施外源激素对不同时期的果实环磷酸腺苷、抗坏血酸含量会有不同程度的作用。喷施脱落酸，在白熟期和脆熟期显著提高了果实环磷酸腺苷含量，完熟期无显著性影响且其他处理无显著性差异；喷施脱落酸，在白熟期提高了果实抗坏血酸含量，高出 处理。处理对不同时期的枣果实环磷酸腺苷含量有促进作用，此处理也能有效增加枣果抗坏血酸含量，利于鲜枣提高营养。关键词：环磷酸腺苷；抗坏血酸；外源激素；枣果 近年来，越来越多的人们开始关注饮食营养和保健作用，药食同源的红枣被人们愈加关注。枣原产于我国，至少有 多年的栽培历史，且我国是世界上枣产量最大的国家。红枣含有丰富的、多酚类、黄酮类以及多糖类等功能成分，同时又为补中益气、养血安神、缓和药性的常用中药，是集营养与医疗保健于一体的优质滋补品。研究进展环磷酸腺苷（，简称）化学式为，在成熟枣果肉中含量为一般动植物的数千至数万倍，是枣果中最重要的生物活性物质。它是蛋白激酶致活剂，是最重要的胞内信使之一，能参与细胞分裂与分化、形态建成、类固醇生成、糖原和脂肪分解等多种生理生化过程，在基因表达中发挥至关重要的作用，能抑制细胞增殖、癌细胞、过敏性疾病等，对神经系统也有调节作用，还能诱导激素或酶的合成，促进机体合成代谢。还有研究表明，包括癌症、高血压、冠心病、心肌梗塞在内的 余种疾病均与人体内 代谢相关。年 从哺乳动物的组织中发现了。刘孟军和王永蕙对枣和酸枣等 种植物的 进行了研究，测定结果表明，枣和酸枣含量明显高于其他植物，并且山西木枣成熟果肉中含量最高。由于大枣中 含量丰富，近年来从枣中提取 的相关的研究较多。等率先从枣中分离出，利用离子交换柱法并优化了该分离提取工艺。环磷酸腺苷的测定方法有高效液相色谱法（，简称）、竞争蛋白法、薄层层析、酶联免疫法等方法。目前，已成为 测定的常用方法，以其分离、定量分析性能高，分析速度快、操作简便、检测灵敏、适用范围广等优点，逐步在分析领域内占据重要的地位。张明娟等采用高效液相色谱法测定了 种枣果中的 的含量，其中最高的为朝阳圆枣（），最低为 早脆王（），由该试验可知超声时间、乙醇浓度、料液比对 的提取有不同的影响，各因素作用主次顺序为：料液比 超声时间 乙醇浓度，料液比：。赵堂等以宁夏几种特色红枣（灵武长枣、同心圆枣和中宁圆枣）为研究对象，并与山东大枣、陕北滩枣进行比较，结果发现宁夏的灵武长枣（）含量最高，灵武长枣以其个大、味甜等享誉国内外。通过本研究可发现，灵武长枣在药用价值方面也具有一定的竞争优势，研究结果为进一步推动灵武长枣走向国际市场提供了一定的科技支撑。也有学者研究过不同处理措施对枣中环磷酸腺苷含量的变化影响。刘世军等研究发现，经与未经炮制的大枣生品比较中，经过炮制的大枣中环磷酸腺苷含量均有提高，其中经过醋蒸的大枣环磷酸腺苷含量增加最为明显。张冠楠等以灵武长枣为试材，采用海藻酸钠、壳聚糖、普鲁兰多糖进行涂 年第 期种植技术膜处理。研究表明，各处理果中环磷酸腺苷含量均远远高于对照组，其中，壳聚糖涂膜处理环磷酸腺苷含量提高最为显著。研究进展抗坏血酸（，）主要存在于日常食用的新鲜蔬菜水果中，它作为人体必不可少的一种维生素，可以帮助人体内铁的吸收，降低人体血液胆固醇浓度，预防普通感冒，促进蛋白质的牢聚性，防治环血病等，从而起到延长寿命的效果。重要的是它可以参与到人体的某些代谢活动中，对生物氧化有重要影响，增强机体的抗病力和解毒作用等。在化学实验中也可作为还原剂、掩蔽剂及色谱分析试剂等。是植物中广泛存在的一种水溶性抗氧化有机小分子，年 和 首先分离出纯的，并证明是抗坏血病因子。植物抗坏血酸首先在线粒体内膜上合成，然后再运输到胞内其他亚细胞区室和质外体中。由于调节性转运体系的存在，抗坏血酸能够根据生理、发育和代谢的需要在不同细胞区间迅速转移，因此植物不同组织抗坏血酸含量存在差异。在 含量测定中，法相较于滴定法，荧光法优势在于稳定性好重复性高，已有部分研究者侧重使用。李小梅等对野生酸枣果肉、酸枣仁、红心猕猴桃和冬枣中维生素 含量进行测定和比较。研究表明，野生酸枣果肉中维生素 的含量最高，达到 ，是红心猕猴桃的 倍，冬枣的 倍，酸 枣 仁 中 维 生 素 的 含 量 最 低，仅 有.。石东里等对滨州市 个枣品种的 含量进行了测定，发现一般鲜枣果实的抗坏血酸含量都在 以上，大部分在 之间，平均为，其中在 以上的品种有酸枣、金丝小枣、阳信大枣、长红和滨北薄枣。国内外研究者为提高 含量，做了大量研究。孙学成等采用分期播种的方法研究了钼对冬小麦叶片中 含量的影响，结果表明施钼提高了冬小麦叶片中 含量，在取样温度较低时，含量上升幅度大。外源激素：植物生长调节剂植物生长调节剂是经过果实表皮、叶片的角质膜等进入果树体内来调节果树不同时期的生长发育状况，由于它吸收好、用量小、作用大以及高效等优点，在农业生产中广泛被使用。我国使用频繁的属生长素与 类的化合物，多应用于果蔬、棉花等作物来提高产量。其中 经常被用来促进植物芽和叶的伸长与生长；是一种抑制高等植物生长的植物激素，多用于提高花卉园艺的应用价值。萘乙酸及其钠盐等类均具有一定的生长素的活性，它能促进根的伸长和不定根的形成，以及果实、块根和块茎的膨大，在栽培时常被用作膨大素来使用，且经过田间试验证明了它能提高苹果、梨、葡萄、弥猴桃等果树以及辣椒、茄子等蔬菜单果重，并大幅度提高产量，改善品质。果实的功能营养随着人们生活水平的提高愈加得到关注，同时能够提高果实营养价值的植物生长调节剂的使用也成为农业上必不可少的栽培技术之一，此技术也很好的为枣农收益做出了贡献。基于此，本试验选定了植物生长调节剂对不同生长期的枣进行处理，来比较分析调节剂对果实、等功能物质的动态影响，为枣果实提高功能物质技术的研究提供理论依据。材料与方法 试验材料 试验点 试验地点在山西省太谷县，壶瓶枣枣树属小冠疏层形。试验设计在枣幼果期进行处理。试验分为赤霉素（）、萘乙酸钠、脱落酸（）以及清水对照组（）。选择长势一致并良好的枣树，完全随机区组设计，每处理分为 个重复，每小区 株。试验方法 喷施处理及采样试验中所选用的植物生长调节剂为、和 萘乙酸钠。在枣幼果期进行喷施，共喷施 次。每次均在喷药前进行采样共 次。采样在果树东南西北四个方向进行，适量即可，要求果实饱满、完好，成熟度一致。测定方法 测定方法采用 法进行测定。具体步骤如下，液氮研磨，精确称取 枣样到 离心管中，加入 的乙醇，震荡，黑暗条件超声提取，离心 转，吸取上清液至 离心管里，用小离心机离心 转，离完，用移液枪取 于小棕色瓶中，过滤膜到小棕瓶，待上样。色谱条件：赛默飞高效液相色谱仪 色谱柱；检测波长：；流动相：甲醇：磷酸二氢钾 ：（体积比）；流速：；柱温：；时长：。根据利用抗坏血酸标准品反应所得的标准曲线方程种植技术 年第 期 （）计算 的含量。图 标品出峰图 测定方法采用 法进行测定。液氮研磨，准确称取 样品，加入 草酸，避光超声提取，转离心，取上清液至 离心管中，重复提取 次，合并 次上清液，离心，取上清液于 离心管，离心 转，用移液枪取 于小棕色瓶中，待上样。色谱条件：赛默飞高效液相色谱仪 色谱柱；检测波长：；流动相：草酸；流速：；柱温：；时长：。其中并根据利用抗坏血酸标准品反应所得的标准曲线方程 （）计算 的含量。图 标品出峰图 数据处理试验中所有数据均使用 进行记录，软件进行显著性分析。结果与分析 外源激素对 的影响果实 的含量总体上呈现先上升后下降的趋势（图）。方差分析表明：在幼果期进行了 次施药处理，表现为、和 萘乙酸钠处理的果实 的含量与 相比差异均不显著。在白熟期 月 日至 月 日，处理的果实 的含量与其他处理相比有显著差异，白熟期 月 日，处理的果实 的含量显著高于 和 处理的。脆熟期 月 日，处理极显著高于 处理，显著高于 萘乙酸钠处理，同时其他处理均显著高于 处理。完熟期无显著性差异。其中 月 日至 月 日，处理的果实 的含量在生长过程中一直处于缓慢上升的阶段，而脆熟期 月 日极显著低于其他处理。图 不同处理对壶瓶枣 含量的影响注：数据为平均数 标准误，小写英文字母表示 水平差异显著性。下同。外源激素 的影响果实 含量动态变化如图 所示。果实可溶性总糖的含量总体上呈现先下降后上升的趋势。枣果在幼果期 月 日各处理的 含量均达到最大值，分别为、和。在白熟期 月 日，处理的果实 含量显著高于 处理的。其他时期各处理的果实 含量无显著性差异。年第 期种植技术图 不同处理对壶瓶枣 含量的影响 讨论本试验在壶瓶枣幼果期开始进行喷施、萘乙酸钠的栽培技术处理，并对壶瓶枣果实功能成分含量的动态变化进行分析发现，喷施、萘乙酸钠对壶瓶枣成熟期果实、含量会有不同程度的影响。本试验研究结果表明，果实 的含量在果实的生长发育过程中呈现前期积累在完熟期到达最大值后又略微下降的趋势。枣果中的 参与并调节枣细胞的生理活动以及新陈代谢，发挥着重要调节和控制作用。白熟期 月 日、月 日 处理的果实 的含量均显著高于、和 萘乙酸钠处理，不同时期分别高出 、和 、。白熟期 月 日，处理的果实 的含量显著高于 和 处理，分别高出 倍和 倍。脆熟期 月 日，处理极显著高于 处理，高了 倍，且显著高于 萘乙酸钠处理，为。其中脆熟期 月 日 处理的果实 的含量极显著低于其他处理，可能是由于 处理造成枣果 的合成减缓，使其含量过低造成的。试验研究发现 处理对 的含量存在一定的促进作用。植物体 的含量受到品种、类别以及栽培技术和环境条件影响之外，还会受到外界因子如光强或昼夜温差变化、气候环境、水肥管理等的影响。本试验通过喷施外源激素观察 含量变化，研究结果表明，枣果实 的含量早期最高，后随着果实的发育 含量逐渐下降，在完熟期有略微的上升。这与大多数的研究结果相似，都支持 在果实不成熟期的绿色期发生迅速积累，但早期的枣果果肉呈现绿色，质地较疏松，汁少，酸涩，不适宜食用。白熟期 月 日，处理的果实 含量显著高于 处理的，高出 。这与 等和 等研究结果一致，等和 等研究发现在干旱胁迫条件下，对抗坏血酸含量的影响中均表明，显著提高干旱胁迫下玉米幼苗和白皮松低温胁迫中的 含量。完熟期、和 萘乙酸钠处理的果实 含量平均值分别为、和，此阶段是壶瓶枣最适合食用的阶段，其 含量比其他瓜果蔬菜的 高出几十倍甚至更多。本试验 处理以及与其他研究者相同的 处理，对果实中 含量均表现为促进作用。结论（）处理对完熟前期枣果实 的含量有促进作用。此外白熟期 处理的果实 的含量显著高于其他处理。脆熟期 处理极显著高于 处理，显著高于 萘乙酸钠处理，同时其他处理均显著高于 处理。完熟期无显著性差异。（）处理能有效增加枣果 含量利于鲜枣提高营养。幼果期各处理的 含量均达到最大值，此时枣果酸涩汁少不利于食用。白熟期 处理的果实 含量显著高于 处理的。其他时期各处理的果实 含量无显著性差异。参考文献：鲁周民，刘坤，闫忠心，等 枣果实营养成分及保健作用研究进展 园艺学报，（）：曲泽洲，王永蕙 中国果树志枣卷 北京：中国林业出版社，：刘莉，任水英 红枣中功能成分提取技术研究进展 广州化工，（）：樊保国 枣果的功能因子与保健食品的研究进展 食品科学，（）：刘莉，任水英 红枣中功能成分提取技术研究进展 广州化工，（）：，：，：楼秀余 环磷酸腺苷 的生理功能 药物与临床，（）：党立，王希敏，韩立文，等 环磷酸苷的临床应用进展 山东科学，（）：杨芳媛，赵智慧，赵锦，等 枣中环磷酸腺苷的研究进展 塔里木大学学报，（）：，（）：种植技术 年第 期 ，：，（）：刘孟军，王永蕙 枣和酸枣等 种园艺植物 含量的研究 河北农业大学学报，（）：，：热那汗买买提，敬思群 阿克苏“次等枣”环磷酸腺苷提取工艺优化 食品科技，（）：赫欣睿，武中庸，叶永丽 高效液相色谱法测定氨基酸的研究进展 分析测试学报，（）：张明娟，李薇，庞晓明 枣果中环磷酸腺苷（）的提取工艺及含量测定 食品与发酵工业，（）：赵堂，郝凤霞，杨敏丽 几种红枣中生物活性物质环磷酸腺苷的含量分析 湖北农业科学，（）：刘世军，王林，唐志书，等 不同炮制方法对大枣中环磷酸腺苷含量的影响 吉林中医药，（）：张冠楠，陆辉，陈子奇，等 涂膜处理对低温贮藏期间灵武长枣抗氧化能力的影响 江苏农业科学，（）：刘拥海，俞乐，王若仲，等 抗坏血酸对植物生长发育的作用及其缺失突变体的研究进展 植物生理学报，（）：马慧婷 抗坏血酸与几种生物活性物质的相互作用研究郑州：河南大学，黎观红，瞿明仁，晏向华，等 的营养和应用研究进展 粮食与饲料工业，（）：张凤霞，陶佩文，李汉霞，等 番茄抗坏血酸合成代谢研究进展 中国蔬菜，（）：刘成浩，张蓉，邬国庆，等 法测定保健食品中抗坏血酸的组成及稳定性 食品研究与开发，（）：，（）：李小梅，章斌，叶群丽 紫外分光光度法测定野生酸枣中维生素 的含量 山西化工，（）：石东里，姚志刚，申保忠 枣品种抗坏血酸含量的测定与比较 滨州师专学报，（）：孙学成，胡承孝，魏文学 钼肥对冬小麦脯氨酸及抗坏血酸含量的影响 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