橡胶–砂仁间作土壤中细菌数...原菌拮抗性和作物促生性影响_陈红梅.pdf

2022 年 12 月 热 带 农 业 科 学热 带 农 业 科 学 第 42 卷第 12 期 Dec.2022 CHINESE JOURNAL OF TROPICAL AGRICULTUREVol.42,No.12收稿日期 2022-06-20；修回日期 2022-07-08 基金项目 国家天然橡胶产业技术体系普洱综合试验站（No.CARS-ZD11）；云南省高校天然橡胶绿色生产工程研究中心（No.2019RYPTS01）；中国热带农业科学院橡胶研究所省部重点实验室及科学观测实验站开放课题：橡胶林下间作砂仁对土壤特性及胶乳性质的影响（No.RRI-KLOF202101）；乡村振兴专项兴边富民（阳春砂仁良种推广和橡胶林下高产种植技术示范）。第一作者 陈红梅（1982），女，植物病理学硕士，讲师，主要研究方向为植物病理和作物病虫害防控，E-mail：。通讯作者 谭万忠（1955），男，博士，教授，主要研究方向为植物病理、入侵生物，E-mail：。橡胶砂仁间作土壤中细菌数量及其对 病原菌拮抗性和作物促生性影响 陈红梅1,2 余东2 罗虎1,3 李维峰1,2 杜华波1,2 谭万忠2（1.云南高校天然橡胶绿色生产工程研究中心 云南普洱 665000；2.云南农业大学热带作物学院 云南普洱 665000；3.云南天然橡胶产业集团江城有限公司 云南江城县 665907）摘 要 近年来我国在主要橡胶林区开展橡胶林下种植砂仁研究和推广，已经取得较好经济效益，但对该种植模式的生态效益尚很少有研究报道。分析橡胶砂仁间作土壤中细菌丰度及其对病原菌拮抗性和作物促生性的影响。经观察可知，随着砂仁种植年限不断增加，土壤质地变得越来越松软，粘性逐渐减弱，目测孔隙度增大，颜色变成灰黑色。结果显示，随着砂仁种植年限的增加，土壤中细菌体数量逐年增加，经过 4 年的砂仁种植后土壤细菌数量达到6.232109 cfu/mL，比未种植过砂仁的土壤细菌丰度提高了近 7 倍；种植砂仁 34 年的土壤细菌中可抑制砂仁炭疽病菌生长的细菌占 26.0%，显著高于未种植砂仁土壤细菌中拮抗细菌的比例(18.7%,p0.05)；2 种土壤中都存在着对小麦种子萌发和幼苗生长有促生作用、抑制作用和无影响的细菌，但种植砂仁的土壤中对种子萌发和幼苗生长有明显促生作用的细菌量（39.3%和 35.7%）极显著（p0.01）高于未种植砂仁土壤（26.7%和 23.3%）。橡胶林下种植砂仁可以明显改善土壤特性，增加土壤中细菌的丰富度，特别是提高可抑制砂仁炭疽病菌及对作物有促生作用的有益细菌数量。因此，橡胶间作砂仁模式可产生重要的生态效益。本研究结果为在我国广大橡胶林区进一步推广应用橡胶林间作砂仁模式提供了科学依据。关键词 砂仁-橡胶间作；土壤细菌；砂仁炭疽病菌；拮抗作用；小麦促生性 中图分类号 S154.3；S476.1 文献标识码 A DOI:10.12008/j.issn.1009-2196.2022.12.001 Quantitative Abundance and its Effect on Antagonism Against Colletotrichum gloeosphorioides and Growth Promotion of Bacteria in Soils of Amomum villo-sum Intercropping with Rubber Trees(Hevea brasiliensis)CHEN Hongmei1,2 YU Dong2 LUO Hu1,3 LI Weifeng1,2 DU Huabo1,2 TAN Wanzhong2(1.Natural Rubber Green Production Engineering Research Center of Universities in Yunnan,Puer,Yunnan 665000,China;2.College of Tropical Crops,Yunnan Agriculture University,Puer,Yunnan 665000,China;3.Jiangcheng Natural Rubber Co.Ltd.of Yunnan Natural Rubber Industry Group,Jiangcheng,Yunnan 665907,China)Abstract The production system of inter-cropping amomum(Amomum villosum)with rubber trees(Hevea brasiliensis)has been studied and applied in rubber tree growing provinces in China and great economic benefit has been achieved.However,the ecological benefits of this production practice have not been fully recognized and rarely studied.The bacterial abundance and its effects on pathogen antagonism and crop growth in rubber-sand kernel intercropping soil were analyzed.A close ob-servation of the soil samples from fields with 0-4 years of amomum growing demonstrated that,With the increasing of grow-ing years,the soil texture became more loosened,less sticky,increased porocity and its color changed gradually from brown-red to gray-black.The bacteria abundance in the idle soil was reaching 6.232 109 cfug1 after 4 years of amomum growing,which was 7 times higher than that of neither growing amomum.From 3-4 years of amomum growing soil,26%were antagonists against C.gloeosporioides,but only 18.7%of the bacteria from idle soil were shown antagonistic to this patho-2022 年 12 月 热带农业科学 第 42 卷第 12 期 -2-gen,both were significant different(p0.05)statistically;When tested in vitro with wheat seeds,there were plant growth pro-motive,neutral and suppressive bacteria in both the soils,but the proportions of bacteria with seed germination and seedling growth promotion activities were extremely and significantly higher(p0.01)in the amomum growing soil(39.3%and 35.7%)than in the idle soil(26.7%and 23.3%).It can be concluded from these results that inter-cropping amomum with rubber trees improved the soil texture and humus contents,increased abundance of soil-borne bacteria,especially the pathogen-antagonistic and plant growth-promotive bacteria.Therefore,this under-forest inter-cropping system can achieve great ecological benefits and can be employed extensively in the rubber tree growing areas in China.Keywords rubber tree-amomum inter-cropping;soil bacteria;colletotrichum gloeosphorioides;antagonism against Colleto-trichum gloeosphorioides;wheat growth promotion 橡胶树（Hevea brasiliensis，英文名 rubber tree）和阳春砂仁（Amomum villosum，英文名amomum）是 2 种重要的热带经济植物。橡胶树为典型热带雨林多年生高大乔木植物，产胶寿命高达 3040 年，所分泌的胶乳是重要的工业原料，世界上使用的天然橡胶绝大部分由橡胶树生产1-2；同时，橡胶树的木材质轻，花纹美观，加工性能良好，经化学处理后可制作纤维板、胶合板和纸浆等原材料及高档家具3。在我国广西、广东、云南和海南等南方省区有大面积胶林4。阳春砂仁则是一种重要的草本药用植物，其果实含有酚类、多糖、有机酸、黄酮等重要药理化学成分5-6，具有抵抗溃疡、降低血糖、化湿开胃、温脾止泻及理气安胎等药用功效7，同时还可用作烹调食品的调味品8-9。近年来我国主要橡胶种植省区开始了林下种植经济植物的间作体系研究和推广应用10，这些种植体系充分利用橡胶林下土地种植经济植物，从而增加林地植物物种的多样性，提高经济效益和增加胶农收入。橡胶树植株高大，占用土地面积较大，单一种植橡胶树造成土地资源利用率低，在林下种植其它比较矮小和喜阴的经济植物（咖啡、茶树、魔芋、蘑菇类和多种中药材等）可大大提高土地资源利用率和生产效益11-14。在橡胶林下种植砂仁是一项重要的间作种植体系，该种植模式的探索已有 30 多年的历史15，近十多年来已受到有关方面的重视并在我国较大面积推广应用。不少研究报道表明，橡胶林下种植砂仁不仅可大幅度提高土地资源利用率，增加经济效益，同时还具有改善土壤肥力和提高胶园林植物多样性等重要的生态效益。在橡胶与砂仁间作的生态学效益方面，已经有了一些的报道，这些研究揭示了种植砂仁可提高土壤肥力和微生物数量，从而可改善橡胶根际环境16-19。本研究通过分析土壤中的细菌丰度及其对病原菌拮抗性和植物促生性功能变化来揭示砂仁种植对橡胶林下土壤改良的生态环境效益，为推广橡胶砂仁间作体系模式提供充分可靠的科学依据。1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 土样 2021 年 5 月在云南省江城县的橡胶种植区分别选择橡胶树林下种植砂仁 14 年（4个处理）和未种植（对照）砂仁的山地，各取 3个样点，每点取地表下 510 cm 层土壤约 1.0 kg，带回室内于冰箱中冷藏（4）保存备用。1.1.2 培养基 营养琼脂培养基（NA）中含蛋白胨 10 g、牛肉膏 3.0 g、NaCl 5.0 g、琼脂粉 15 g、蒸馏水 1 000 mL，NA 平板用作土壤细菌分离培养，NA 斜面用于细菌菌种保存。马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）的配方为新鲜马铃薯小块 200 g、左旋葡萄糖 20 g、琼脂粉 15 g、蒸馏水 1 000 mL，PDA 平板用于细菌对植物病原菌的拮抗测定。1.1.3 砂 仁 炭 疽 病 菌（Colletotrichum gloeo-sporioides）2021 年 5 月从云南农业大学温棚内种植的砂仁发病植株叶片上分离纯化的菌株CLV06，经柯赫氏法则证病试验验证及形态学与分子生物学鉴定，其为砂仁炭疽病菌，并保存（4冰箱）于本校微生物实验室，用于土壤细菌对病菌的拮抗性测试。1.1.4 小麦种子 供试小麦品种为泰山 24 号，由山东泰安登海种业有限公司提供，用于细菌对种子萌发和幼苗生长的影响测试。1.1.5 细菌纯化分离株 从未种植和种植砂仁的土壤稀释液中各分离纯化 50 个细菌菌株，培养于试管 NA 斜面上，保存于 4冰箱中，用于病菌陈红梅 等 橡胶砂仁间作土壤中细菌数量及其对病原菌拮抗性和作物促生性影响-3-拮抗性和作物促生性测定。1.2 方法 1.2.1 土壤表观特性观察 直接观察种植 04 年砂仁的田间新鲜土壤样品，拍照记录其团粒结构、松散度和颜色等，粗略显示土壤中腐殖质成分；取每年的土壤样品各 1 g 置于试管中，分别加入9 mL 灭菌水充分震荡均匀后配制成悬浮液，拍照观察不同砂仁种植年限土壤悬浮液的颜色变化。1.2.2 土壤细菌数量测量及分析 采用稀释平板培养计数法20-22。将每个处理的风干土样充分混合均匀，用 1%电子天平称取 10 g 土壤，置于盛有 90 mL 灭菌水的 250 mL 锥形瓶中，在磁力搅拌器上震荡，使土壤充分分散悬浮于水中，静置沉淀 2.0 min，制成 101的细菌悬浮液；取 7 支灭菌 10 mL 试管，每支试管中分别加入 9.0 mL 灭菌水，取前述土壤悬浮液 1.0 mL 加入第一支试管中充分摇匀混合，从第一支试管中取 1.0 mL 菌悬浮液，放入第二支试管中充分摇匀混合，如此继续稀释至最后一支试管，制成108102细菌稀释液；从 106、107和 108的每种稀释液中各取 0.1 mL，分别均匀涂布接种于培养基平板上，放入 28培养箱中培养 72 h 后观察，记录每个培养基平板上的菌落数；最后根据 107稀释液培养 72 h 后记录的平板菌落数计算单位重量土壤的可培养细菌含量（cfu/g），即为土壤细菌数量丰富度。该试验重复 5 次，用新复极差法比较不同砂仁种植年限土壤中细菌数量丰富度之间的差异。1.2.3 土壤细菌对砂仁炭疽病菌的抑制作用测试 采用对峙培养法23-24，在 PDA 平板上接种砂仁炭疽病菌（CGV06），在 28培养箱中培养 10 d，用灭菌解剖刀将病菌菌落切成约 2 mm2 mm 的菌块；从种植砂仁 34 年的土壤细菌培养平板上随机取 50 个菌落，分别接种到试管斜面 NA 培养基上，放置于 28培养箱中黑暗培养 72 h，从每支试管中取适量细菌菌落，加入 10 mL 灭菌水中，制成约 109 cfu/mL 的细菌悬浮液；在 PDA 平板中央放置一个砂仁炭疽菌菌块，再用细菌接种环取细菌悬浮液，在距菌块两边 2.5 cm 处分别划两条近似平行线；将接种好的培养皿放入在 28培养箱中培养 7 d，观察记录土壤中对砂仁炭疽病菌有抑制作用的拮抗细菌数，测量抑菌带宽（mm）。试验重复 3 次，用新复极差检验法分析比较种植砂仁土壤和未种植土壤中拮抗细菌数量之间的差异。1.2.4 土壤细菌对小麦种子萌发的影响测试 选择大小均匀饱满的健康（除去瘪粒和有破损的）小麦种子各 100 粒，放入一个培养皿的吸水纸上，一共准备 100 个培养皿；在各个培养皿中分别倒入 1.2.2 中每个土壤细菌菌落的 10 mL 细菌悬浮液，再加入 10 mL 清水，摇动培养皿使种子充分浸润；扣上培养皿盖，浸泡 24 h 后倒掉培养皿中剩余的细菌悬浮液，留种子于培养皿内，置于室温（1825）条件下萌发；24 h 后揭开培养皿盖，让种子继续萌发和幼苗生长，并适时适量浇水保持吸水纸潮湿；处理 14 d 后观察记录发芽率和测量幼苗高度（cm）。试验重复 3 次，用新复极差检验法比较种植砂仁土壤和未种植土壤中促生细菌量的差异。2 结果与分析 2.1 不同砂仁种植年份土壤的表观特性差异 橡胶林下从未种植过砂仁的土壤质地较坚硬，粘性较强，颜色偏红棕色。随着砂仁种植年限不断增加，土壤中腐殖质越来越丰富，质地变得越来越松软，粘性逐渐减弱，目测孔隙度增大，颜色变成灰黑色（图 1）。将土壤配制成土壤悬浮液后，也能显示出种植砂仁不同年份后土壤的这种颜色变化。图 1 橡胶林下种植砂仁不同年份后土壤表观特性变化 2.2 不同砂仁种植年限土壤中的细菌丰度比较 共进行 5 次重复试验，每次检测 5 个不同砂仁种植年限（04 年）的土壤样品，从各次检测所得的土壤细菌丰度结果（表 1）可以看出，不同砂仁种植年限的土壤中细菌丰度存在着极显著2022 年 12 月 热带农业科学 第 42 卷第 12 期 -4-的差异（p0.001）。未种植过砂仁的橡胶林下土壤平均丰度仅为 0.890109 cfu/mL，随着砂仁种植年限的增加，土壤中细菌丰度也逐年增加，种植砂仁 4 年后土壤细菌丰度达到 6.232109 cfu/mL，比未种植过砂仁的土壤细菌丰度提高了近 6 倍。橡胶林下种植砂仁不同年限后土壤中细菌的这种丰度变化，从土壤稀释液在 PDA 培养基平板上培养 72 h 后的情况（图 2）可直观看出。表 1 不同种植年限砂仁土壤中的细菌丰度 重复(109 cfumL1)种植时间/年 平均(109 cfumL1)0(对照)0.74 0.84 0.98 0.96 0.93 0.890 E 1 1.06 1.15 1.08 1.50 1.25 1.208 D 2 1.19 1.22 2.12 1.62 1.75 1.580 C 3 4.39 5.27 4.13 3.86 3.67 4.264 B 4 5.37 9.63 5.20 6.31 4.65 6.232 A 注：根据在 28培养箱中培养 72 h 后每个 NA 培养基平板上记录的菌落数计算而得的每克土壤细菌量(cfu/mL)。平均细菌量数值后不同的字母表示用新复极差法检验不同种植年限土壤中细菌量存在极显著差异（p0.001）。取 0.1 mL 土壤悬浮液的 10-8稀释液涂布于 PDA 培养基平板上，在 28培养 72 h 后拍摄记录。图 2 橡胶林下种植砂仁不同年限后土壤中的细菌量变化 2.3 砂仁种植土壤细菌中的拮抗细菌 对峙培养试验结果（图 3）表明，有的土壤细菌对砂仁炭疽病菌具有很强的拮抗作用，完全抑制了该病菌菌落的生长（Strong antagonicity）；另外一些细菌具有一定程度的拮抗作用，仅可部分 抑 制 炭 疽 菌 菌 落 的 生 长（Intermediate an-tagonicity）；而其它细菌则没有拮抗作用，对病菌菌落生长没有影响（No antagonicity）。比较未种植和种植砂仁 34 年的土壤中细菌对砂仁炭疽病菌的拮抗性（表 2）可知，可抑制炭疽病菌生长的 2 种土壤细菌分别占 18.7%和 26.0%，统计分析显示二者的差异显著（p0.05）。接种处理后，在 26下培养 120 h，拍摄记录。图 3 土壤细菌与砂仁炭疽病菌的拮抗作用关系 表 2 不同处理土壤中拮抗细菌比率统计 单位：%重复 处理 平均 未种植砂仁（对照）20 22 14 18.7 B种植 34 年砂仁 26 30 22 26.0 A注：接种处理后在 26下培养 120 h 拍摄记录；不同字母表示用新复极差法检验可拮抗炭疽病菌的 2 类土壤细菌数量存在显著的差异（p0.05）。2.4 砂仁种植土壤中细菌对植物的促生和抑制作用 测试结果（图 4）表明，未种植和种植砂仁34 年的橡胶林下土壤中细菌对小麦种子发芽和幼苗生长的影响表现为促进、抑制作用或者没有明显的影响。土壤中都存在抑制和促进植物生长的细菌，但 2 种土壤中促生细菌的数量存在极显著的差异（p0.01）：在种植砂仁的土壤中分别有39.3%和 35.7%的细菌对小麦种植萌发和幼苗生长有明显促进作用；而在未种植砂仁的土壤中，对种子萌发和幼苗生长有促进作用的比例分别仅为 陈红梅 等 橡胶砂仁间作土壤中细菌数量及其对病原菌拮抗性和作物促生性影响 -5-细菌悬浮液处理后在室温下培养 36 和 120 h 后，分别拍摄种子萌发（上）和幼苗生长（下）。图 4 土壤中细菌对小麦种子发芽和幼苗生长的促生与抑制作用 23.3%和 26.7%（表 3）。2 种土壤中可抑制种子萌发的细菌数量都较少（均0.05）；两种土壤中能抑制幼苗生长的细菌也较少（均0.05）。表3 未种植和种植砂仁 34年的土壤中对小麦有促生和 抑制作用的细菌占比 单位：%重复 类别 处理 平均未种植砂仁土 22 16 3223.3 B促进种子萌发的细菌 种植砂仁土 42 28 4839.3 A未种植砂仁土 4 6 34.3 a抑制种子萌发的细菌 种植砂仁土 6 4 44.7 a未种植砂仁土 34 24 2226.7 B促进幼苗生长的细菌 种植砂仁土 40 36 3135.7 A未种植砂仁土 14 16 1414.7 a抑制幼苗生长的细菌比率 种植砂仁土 12 14 1614.0 a注：表中种子萌发和幼苗生长数据分别在处理后 36 和 12 h记录；同一栏内 2 个平均数后标有不同大写字母表示新复极差法检验显示二者之间存在极显著差异（p0.05）。3 讨论与结论 橡胶树为多年生常绿高大乔木植物，纯橡胶林下土壤板结而不疏松，颜色呈棕红色，显示出其土壤中腐殖质和有机质稀少；而砂仁则是常绿阔叶草本植物，每年都有一定落花落叶掉入土壤中腐烂，成为土壤中的有机成分19。因此，在橡胶林下种植砂仁后可逐渐改善土壤质地和结构，增加有机质成分含量，从而促进土壤生境的改良，为本研究中观察到的土壤表观特征提供充分而科学的诠释。微生物是土壤生境中最重要的构成要素，其中很多微生物的功能是将各种来源的动、植物残体分解为较简单的化合物，使之成为可供栽培植物吸收利用的有机物成分。本研究结果显示，种植砂仁的胶园土壤较胶园闲置土壤中细菌丰度显著增加，而且在测试的年限内随着种植时间的延长细菌丰度也逐年增加。这与前人有关作物间作方面的研究结果一致，如桔梗与大葱间作显著提高了土壤中微生物和细菌的数量25-26，桑树和大豆间作后 2 种植物根际土壤中细菌、放线菌和真菌数量分别增加 26.8%、42.3%、59.1%和 9%、86.5%、30.6%27，黄瓜与大蒜/葱间作也能大幅度丰富土壤微生物的群落和提高酶活性28。正如其它作物间作体系一样，橡胶林下间作砂仁后，砂仁的老叶枯叶和落花等腐烂后产生的有机质在土壤中不断累积19，这为更多细菌的生长繁殖提供2022 年 12 月 热带农业科学 第 42 卷第 12 期 -6-了丰富的营养和有利环境条件，且土壤中的细菌数量丰富度随砂仁的种植年限而增加。进一步测试分析土壤细菌对砂仁炭疽病菌的拮抗性和对小麦的促生作用，结果发现，种植砂仁 34 年的土壤中，对炭疽病菌生长具有很强抑制作用的细菌比例较未种植砂仁土壤大幅度提高；种植砂仁的土壤中，对小麦种子萌发及其幼苗生长有显著促进作用的细菌比例显著增加。另外，种植砂仁的土壤与闲置土壤细菌中都有对小麦种子萌发和幼苗生长有抑制作用的细菌，但 2种土壤中这种“有害”细菌的数量都较少且没有显著差异。结果表明，种植砂仁的土壤中细菌数量丰度的提高可能主要是“有益”细菌的增加。查阅现有同类研究的文献资料，尚未见有关“有益”细菌或其它有益微生物方面的类似研究报道。有几点问题需要指出：（1）本研究只探讨土壤细菌数量丰度的变化，且正用分子生物学方法29-30对细菌类群或群落多样性进行深入细致的分析。（2）与其它同类研究报道一样，本研究中谈及的细菌只是“可培养”细菌，实际上自然界中还存在大量在人工培养基上生长增殖的“不可培养”细菌22-31，由于对这部分细菌迄今人们还缺乏足够的认识和相应的培养技术，在现有的研究中几乎都予以忽略，但这种忽略一般都不会影响有关研究结果或结论。（3）在土壤细菌菌株促生作用试验中，先采用了砂仁种子，但因为多次测试砂仁种子均未萌发而换用了小麦种子替代完成该试验；虽然如此，试验结果足以说明“种植砂仁的土壤中植物促生细菌显著增加”的结论。（4）在拮抗作用和植物促生性试验中获得了 20 多个既对砂仁炭疽病菌有很强抑制作用也可明显促进小麦种子萌发和生长的有益细菌菌株，对这些菌株本课题组将进行进一步的测试，从中筛选出在砂仁生产中具有应用潜力的菌株，并对其进行分类学鉴定，为研发控制砂仁炭疽病的生防菌产品奠定基础。综上所述，橡胶林下种植砂仁可以明显改善土壤特性，增加土壤中细菌的数量，尤其是提高可抑制植物病原菌及对作物有促生作用的有益细菌的数量，由此证明，橡胶林间作砂仁模式可产生显著的生态效益。本研究结果为在我国橡胶林区广泛推广应用橡胶林间作砂仁种植模式提供了生态效益方面的科学依据。参考文献 1 曾霞,郑服丛,黄茂芳,等.世界天然橡胶技术现状与展望J.中国热带农业,2014(1):31-36 2 邓静飞,汪秀华.海南天然橡胶林下经济发展模式及对策研究J.中国热带农业,2013(5):28-31.3 李家宁,林位夫,谢贵水,等.海南橡胶树木材加工利用现状J.热带农业科学,2010,30(3):67-70.4 佟金鹤,刘少军,陈小敏,等.中国橡胶树气候适宜度分布特征研究J.生态科学,2021,40(1):162-168.5 Guerra N B,Pegorin G S,Boratto M H,et al.Biomedical applications of natural rubber latex from the rubber tree Hevea brasiliensisJ.Materials Science and Engineering,2021,126:112-126.6 姜春兰,蔡锦源,梁莹,等.砂仁的有效成分及其药理作用的研究进展J.轻工科技,2020,36(7):43-45+47.7 赖晓峰.砂仁促进胃部疾病患者胃肠功能恢复的临床研究J.哈尔滨医药,2021,41(3):136-137.8 尤小梅,李远志,李婷,等.春砂仁的保健功能及春砂仁食品的研究与开发C/“食品加工与安全”学术研讨会暨2010 年广东省食品学会年会论文集.湛江:出版社不详,2010:157-160.9 黄国中,王琴,马路凯,等.砂仁主要活性组分的研究进展J.食品研究与开发,2021,42(9):219-224.10 周立军,潘剑,黄坚雄,等.不同胶园间作模式比较研究J.热带农业科学,2020,40(11):1-6.11 陈进辉,李锦红.德宏垦区胶园间作的经济效益分析J.中国热带农业,2012(3):46-50.12 李云候,柳成章,刀倩,等.橡胶园林下种植大球盖菇初报J.热带农业工程,2019,43(2):1-3.13 袁淑娜,潘剑,黄坚雄,等.播期对胶园林下种植疣柄魔芋产量和品质的影响J.中国农业科技导报,2020,22(11):124-132.14 Snoeck D,Lacote R,Kli J,et al.Association of hevea with other tree crops can be more profitable than hevea monocrop during first 12 yearsJ.Industrial Crops&Products,2013,43:578-586.15 李昌海,彭志平.橡胶及防护林间种砂仁效益显著J.中国农垦,1986(12):36.16 李图宝.橡胶砂仁间作套种可行性分析J.农业开发与装备,2019(6):211-218.17 潘超美,杨风,郑海水,等.橡胶林在间种砂仁与咖啡的模式下土壤微生物生物量J.土壤与环境,2000(2):114-116.18 武寒.云南金平砂仁根际土壤生态环境研究D.昆明：云南中医学院,2018.19 杨曾奖,郑海水,周再知,等.橡胶间种砂仁模式下凋落 陈红梅 等 橡胶砂仁间作土壤中细菌数量及其对病原菌拮抗性和作物促生性影响 -7-物的特征J.广东林业科技,1997(4):19-24.20 李青晏,唐运林,蒋睿轩,等.云南地区草地贪夜蛾肠道细菌的分离及鉴定J.西南大学学报(自然科学版),2020,42(1):1-8.21 柴景亮.微生物快检方法纸片法与平板计数法的对比研究J.食品安全导刊,2019(18):160-161.22 杨丽洁,贾仲君.“99%难培养”微生物的概念与初步评价:以固氮菌为例J.微生物学报,2021,61(4):903-922.23 田书鑫,刘南南,王桂清.对峙培养法在生防菌抑制效果研究中的应用J.河南农业科学,2019,48(8):1-6.24 杨蓉,杨文琦,张峥,等.2 株番茄早疫病拮抗菌的分离筛选与拮抗作用研究J.新疆农业科学,2017,54(8):1 496-1 504.25 王鹏,祝丽香,陈香香,等.桔梗与大葱间作对土壤养分、微生物区系和酶活性的影响J.植物营养与肥料学报,2018,24(3):668-675.26 孙文帅.桔梗/大葱间作对桔梗根系及根际的调控研究D.泰安:山东农业大学,2019.27 胡举伟,朱文旭,张会慧,等.桑树/大豆间作对植物生长及根际土壤微生物数量和酶活性的影响J.应用生态学报,2013,24(5):1 423-1 427.28 Zhou X G,Yu G B,Wu F Z.Effects of intercropping cu-cumber with onion or garlic on soil enzyme activities,mi-crobial communities and cucumber yield J.European Journal of Soil Biology,2011,47(5):279-287.29 刘晓燕,张磊,韦泽秀,等.用 PCR-DGGE 研究菌肥对西藏青稞土壤微生物群落多样性的影响J.西南大学学报(自然科学版),2014,36(7):39-48.30 顾偌铖,唐运林,吴燕燕,等.重庆地区取食高粱的草地贪夜蛾与玉米黏虫肠道细菌比较J.西南大学学报(自然科学版),2019,41(8):6-13.31 Alam Khorshed,Abbasi Muhammad Nazeer,HAO Jinfang,et al.Strategies for natural products discovery from uncul-tured microorganismsJ.Molecules,2021,26(10):2 977.（责任编辑 林海妹）