天然低共熔溶剂在中药降香薄层色谱鉴别中的应用_荆晓烨.pdf

国食物与营养，（）：董治程，谢昭明，黄 丹，等 黄精资源、化学成分及药理作用研究概况 中南药学，（）：王 兰，赵 鹏，李雅明，等 四补益青颗粒剂的制备及抗湿性研究 陕西科技大学学报，（）：杨 晶，汤成成，王雅洁，等 辅料和粒径对黄芪浸膏吸湿性影响的研究 中国现代应用药学，（）：杨 红 改性技术用于改善中药浸膏粉吸湿性的研究 成都中医药大学硕士学位论文，孙道开，范益芹 添加不同辅料牛膝浸膏粉体表面特征与吸湿性的相关性 中成药，（）：李生茂，刘 琳，潘 媛，等 川芎挥发油化学成分 分析及抗氧化活性研究 中国民族民间医药，（）：贾 荣 山葡萄籽多酚提取物及抗氧化活性的研究 吉林大学硕士学位论文，井文华，骆立双，刘永芳，等 超声提取红花总黄酮工艺优化及抗氧化活性研究 时珍国医国药，（）：国药鉴定收稿日期：；修订日期：基金项目：上海市卫生健康委员会中医药传承和科技创新项目（）；国家药典委员会中国药典薄层色谱图集项目（）作者简介：荆晓烨（），女（汉族），山东淄博人，上海中医药大学在读硕士研究生，主要从事中药化学及质量标准研究工作通讯作者简介：吴立宏（），男（汉族），河南栾川人，上海中药标准化研究中心研究员，硕士研究生导师，博士学位，主要从事中药质量标准及中药资源与鉴定研究工作天然低共熔溶剂在中药降香薄层色谱鉴别中的应用荆晓烨，呼 忭，吴立宏，（上海中医药大学中药研究所，中药标准化教育部重点实验室暨中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室，上海；上海中药标准化研究中心，上海）摘要：目的 基于环保理念，对比天然低共熔溶剂（，）与传统溶剂的提取效率，为低共熔试剂应用于降香薄层色谱鉴别和质量评价提供依据。方法 合成并利用 作为提取溶剂，采用超声水浴法提取降香药材；同时避免使用现版中国药典降香薄层色谱鉴别中的有害试剂，优化展开系统。结果 比较了六种（），（乳酸葡萄糖水 ），具有较好的提取率，并以优化的环己烷 乙酸乙酯 乙酸（）为展开系统试验，薄层色谱斑点丰富，分离度良好。结论 具有绿色环保、原料易得和价格低廉等优点，可以应用到中药降香的薄层色谱鉴别，也为其他中药化学成分的环保提取提供了新思路。关键词：天然低共熔溶剂；降香；薄层色谱鉴别 标识：中图分类号：文献标识码：文章编号：（），（，；，；，）：（）（），（），（：，），（：）：；时珍国医国药 年第 卷第 期 降香为名贵中药材，中国药典规定为豆科黄檀属植物降香檀 的树干和根的干燥心材，具有化瘀止血、理气止痛的功效，用于吐血、衄血、外伤出血、肝郁胁痛、胸痹刺痛、跌扑伤痛，呕吐腹痛。降香原产于海南岛，现广东、广西、福建、云南和中国台湾等地也有栽培。现代药理作用研究表明，降香具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗肿瘤、抗血小板聚集、抗心肌缺血等药理作用，黄酮类及挥发油等为其主要成分，。低共熔溶剂（，）是具有离子特征及低熔点特性的有机化合物复合体系。当 由植物初生代谢产物如氨基酸、有机酸、糖类、胆碱衍生物等组成时则称为天然低共熔溶剂（，），绿色环保、廉价易得、制备简单等为 的独特优点，成为当代绿色化学新热点。已引起了各国学者的广泛关注，在植物生物活性物质提取、生物大分子分离、制药工业、酶工业、食品工业中已有深入的应用并展现出了美好的前景，。绿色环保理念是中国药典中药质量标准研究制订技术倡导的总原则。现版中国药典降香标准的薄层色谱鉴别中仍然使用三氯甲烷、甲苯、甲醇等有毒有害试剂。本研究以绿色环保为宗旨，运用天然低共熔溶剂对样品进行提取、利用改进的无毒或低毒的薄层展开系统对中药降香进行薄层色谱鉴别尝试，以期为绿色质量标准的制订提供参考。仪器与材料 仪仪器器与与试试药药 薄层色谱自动点样器（，瑞士 公司）；薄层色谱摄像仪（，瑞士 公司）；分析天平（德国赛多利斯科学仪器有限公司）；数控超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司）；型恒温水浴锅（上海精宏实验设备有限公司）；涡旋振荡器（上海精科实业有限公司）；小柱（沃特世科技有限公司）；硅胶预制板（烟台市化学工业研究所，批号：）；超纯水（自制）；葡萄糖、氯化胆碱、柠檬酸、乳酸、无水乙醇、三氯甲烷、甲醇、乙醚、环己烷、乙酸乙脂等试剂均为分析纯（国药集团化学试剂有限公司）；降香对照药材购自中国食品药品鉴定研究院（批号：）。饮饮片片 批降香饮片样品信息见表。药材经上海中医药大学中药研究所吴立宏研究员鉴定。表 降香样品来源序号编号来源收集地产地 降香 上海华宇药业有限公司广西 降香 亳州市中正中药材饮片有限公司 未知 降香 河南张仲景大药房股份有限公司 云南 降香 上海康桥中药饮片有限公司广东降香（伪品）青岛某药品连锁有限公司海南降香（伪品）青岛某某堂云南降香（伪品）湖南某大药房未知降香（伪品）安国某冷背药材有限公司广东 方法与结果 天天然然低低共共熔熔试试剂剂配配制制 种 的配制均按照文献报道的方法进行（见表）。将组成 的两种组分（和）按照一定比例置于烧杯中，在 热水浴中进行搅拌，并加入一定比例水，直至形成均一的液体（约在 ）。表 种 溶剂组成及其配比组成 组成 （）水文献序号 乳酸氯化胆碱 柠檬酸氯化胆碱 乳酸氯化胆碱 乳酸氯化胆碱 乳酸葡萄糖（）乳酸葡萄糖 供供试试品品溶溶液液的的配配制制 中中国国药药典典 方方法法试试液液 取样品粉末 ，加甲醇 ，超声处理 ，放置，取上清液作为供试品溶液。另取降香对照药材 ，同法制成对照药材溶液。天天然然低低共共熔熔溶溶剂剂法法试试液液 取样品粉末 ，加天然低共熔溶剂 ，涡旋振荡 ，于 水浴超声处理，于转速 离心 。取上清液 至 小柱，取 水洗脱，弃去水洗液，加 无水乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，加无水乙醇定容至 作为供试品溶液。另取对照药材粉末 ，同法制成对照药材溶液。薄薄层层色色谱谱条条件件及及结结果果 不不同同提提取取方方法法和和 中中国国药药典典 色色谱谱条条件件及及结结果果 吸取以序号 样品（）为参照的以上述方法制备的样品溶液 （“”项方法）和 （“”项方法），分别点于同一硅胶薄层板上，置干燥器干燥 。以中国药典降香的薄层色谱鉴别（）展开系统（甲苯 乙醚 三氯甲烷）展开，取出，晾干，喷以 香草醛硫酸溶液与无水乙醇（）的混合溶液，在 加热至斑点显色清晰。结果如图 。不不同同提提取取方方法法和和改改进进的的色色谱谱条条件件及及结结果果 方法同“”，以改进优化的展开系统（环己烷 乙酸乙酯 乙酸 ）代替中国药典的薄层色谱鉴别（）展开条件，结果如图 。以以 提提取取和和改改进进的的色色谱谱条条件件及及结结果果 吸取以 为溶剂、以“”项方法制备的样品溶液和对照药材溶液各，分别点于同一硅胶 薄层板上，置干燥器干燥。以改进优化的展开系统（环己烷 乙酸乙酯 乙酸 ）展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸溶液与无水乙醇（）的混合溶液，在加热至斑点显色清晰。结果如图。为药典方法提取；为 法提取（溶剂 ，见表）图 不同提取方法降香（）薄层色谱比较（药典展开系统；优化展开系统）讨论比较中国药典方法和天然低共熔溶剂方法对降香药材的提取效率，从图 可知，天然低共熔溶剂方法与中国药典的常规试剂方法提取效率基本相当。表明以无毒的天然低共熔溶剂时珍国医国药 年第 卷第 期 替代有毒有害试剂甲醇是可行的。中国药典在降香的薄层色谱鉴别展开系统中使用了有毒有害试剂，如三氯甲烷、甲苯等。以绿色环保为宗旨，实验尝试替换这些有害试剂，考察了正己烷 乙醇、正己烷 乙醇 乙酸、石油醚 丙酮、石油醚 丙酮 乙酸、环己烷 乙酸乙酯、环己烷 乙酸乙酯 乙酸等多种展开系统。结果表明以无毒或低毒的环己烷 乙酸乙酯 乙酸（）为展开系统，薄层色谱斑点更丰富，分离度更好（图 ）。实验考察了 种天然低共熔溶剂对降香的提取效率，结果表明 种溶剂提取没有显著差异（图）。但 （乳酸葡萄糖水）粘度最小，组成中的葡萄糖和乳酸无毒、易得、价格低廉。故而推荐 为降香薄层色谱鉴别的提取溶剂。以 提取降香药材，以改进的无毒或低毒的展开系统进行展开，结果能对降香药材的正品和伪品进行很好的鉴别（图）。为对照药材；为样品（分别为：；，见表）图 以 为溶剂（乳酸葡萄糖水）提取和以改进展开系统为条件的降香正品与伪品薄层色谱鉴别图综上，以天然低共熔溶剂（乳酸葡萄糖水）提取降香药材样品，以环己烷 乙酸乙酯 乙酸（）为薄层展开系统，可以作为中国药典降香药材薄层色谱鉴别的绿色环保方法。天然低共熔溶剂在中药降香质量标准中应用，可作为其他绿色中药标准的制订的引玉之砖。致谢：本研究得到分析室张紫佳研究员、谷丽华副研究员、金武燮博士以及中药所王峥涛教授的帮助，以表谢忱。参考文献：国家药典委员会 中国药典，一部 北京：中国医药科技出版社，：，：，：李岩岩，祁龙凯，林 励，等 法同时测定降香中 个黄酮类成分含量及主成分分析 药物分析杂志，（）：，：，（）：，（）：，（）：，：，：，（）：，：，：，：，：时珍国医国药 年第 卷第 期