大肠O157：H7能力验证技术方案.doc

食品微生物学检验
大肠埃希氏菌O157：H7/NM检验能力验证技术方案

根据《新项目论证技术要求》，为保证此次能力验证数据准确，结果可靠，特制定如下技术方案：
一、 检验依据
《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠埃希氏菌O157：H7/NM检验 GB4789.36-2016 》
二、 检品
蜜饯、牛肉、酱腌菜三种物质形态不同种类的典型性样品
三、 人员比对
a、b分别试验进行数据比对（双人双平行）
四、 准备工作
仔细核对试验使用试剂及相关培养基，灭菌试验所需要的试剂、耗材以及玻璃器皿等。
五、 质量控制
1、 按照国家标准规定准确称取样品和试剂并进行前处理。
2、 仪器设备性能和检测环境的确认
（1）依据《消毒与灭菌效果的评价方法与标准GB15981-1995》定期对高压蒸汽灭菌锅的灭菌效果进行检测评价并记录；
（2）依据《无菌室消毒灭菌操作规程》定期对对无菌室、生物安全柜、超净台、无菌衣进行清洁消毒灭菌并记录；
（3）依据《实验室质量控制规范 食品微生物检测GB/T 27405-2008》定期对对无菌室、生物安全柜及超净台进行沉降菌检测并记录。
3、 培养基性能测试
依据《食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求GB4789.28-2013》对此参数涉及到的改良山梨醇麦康凯琼脂、O157显色培养基、改良EC肉汤培养基进行验证并记录。
4、 菌株确认
依据《实验室质量控制规范 食品微生物检测GB/T 27405-2008》和《食品安全国家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验 GB4789.10-2016 》对试验所用到的大肠埃希氏菌O157：H7/NM（MUG试验阴性菌株）和大肠埃希氏菌（MUG试验阳性菌株）进行确认。
5、 对照
每次实验均应进行阳性、阴性和空白对照确保实验数据的可靠性。
六、 注意事项
1、 实验后对本实验所涉及到含阳性菌的耗材、容器、玻璃器皿、培养基、菌株等进行灭菌处理并做好记录；
2、 实验人员要严格按照《无菌检查系统操作规程》进出无菌室；
3、 严格按照《食品微生物学检验总则GB4789.1-2016》进行采样和实验。