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一期临床试验及药代动力学测试的主要内容

一期临床试验及药代动力学测试的主要内容
Ⅰ期临床试验是新药人体试验的起始阶段。
Ⅰ期临床试验目的：
  1．在健康志愿者中，对通过临床前安全有效性评价的新药，从绝对安全的初始剂量开始，考察人体对该药的耐受性；
  2．对人体能够耐受的剂量进行药代动力学研究，为研究Ⅱ期临床试验提出合理的给药方案。
Ⅰ期临床试验工作程序
  1.接到药政管理当局（SDA）下达的批件；
  2.签订合同；
  3.阅读有关资料及文献，选择、组织试验研究小组；
  4.计算并确定耐受性试验最小初始剂量与最大剂量；
  5.制定、讨论、确定Ⅰ期临床试验方案；
  6.试验方案呈报伦理委员会审批；
  7.Ⅰ期临床试验前准备工作：
    1）筛选志愿受试者；
    2）准备知情同意书；
    3）准备记录表格与试验流程图；
    4）血药浓度监测考核；
    5）Ⅰ期病房准备；
  8.Ⅰ期临床试验方案伦理委员会批准后，制定试验进度计划；
  9.试验前受试者签署知情同意书；
  10. 受试者随机分组；
  11. 试验前24小时内完成每例受试者病例登记：体格检查、心电图检查、脑电图检查、眼科检查、血液学检查、血生化检查、尿液学分析等各项指标检查；
  12. 准备每例受试者试验流程图；
  13. 按照试验方案与进度计划进行Ⅰ期临床试验；
  14. 数据处理、统计分析；
  15. 总结报告。
Ⅰ期临床试验方案程序
   1）单次给药耐受性试验（随机分组，逐组进行，有主观或其它因素影响时设安慰剂对照）；
   2）单次给药药代动力学研究（设高、中、低三个剂组，三向交叉拉丁方设计，确定临床有效量和给药量，每组均有三个剂量，每次均有三个剂量，以排除仪器、个体差异）；
   3）连续给药耐受性与药代动力学研究，要求达稳态后再继续二天，一般连续七至十天）。
Ⅰ期临床试验方案模式
  1.首页：项目名称、研究者姓名、单位，申办者负责人姓名、单位
  2.简介：试验药物中文名、国际非专利药名、结构式、化学名、分子式、分子量、理化性质、药理作用、作用机制、临床前药理、毒理研究结果摘要（如已在国外进入临床试验，介绍初步试验结果）；
  3.研究目的：在健康志愿受试者中，观察单次给药耐受性，单次给药药代动力学参数，连续给药药代动力学与耐受性；
  4.试验样品：样品名称、代号、制剂与规格，制剂制备单位、制备日期、批号、有效期、药检部门检验人用合格报告、给药途径、贮存条件、数量（剂量总数、制剂总数）；
  5.受试者选择：志愿受试者来源，入选标准，淘汰标准（根据各类具体药物制定）。入选人数、姓名、年龄、性别、体重、身高、籍贯、民族。
  6.受试者签署知情同意书；
  7.伦理委员会报批：三个试验方案需分别报送医学伦理委员会审批；
  8.试验设计与方法；
  9.观察指标：体检检查、心电图、脑电图、神经科检查、眼科检查、血液学、血生化及尿液分析等各项指标均需写明；
  10. 数据处理统计分析：事先规定数据处理方法，确定正常值和异常值确定标准，统计分析方法及单位等；
  11. 总结报告：规定试验周期、总结报告完成日期；
  12. 末页：试验地点、研究者与申办者签名。

健康志愿者耐受性试验步骤和方法
 试验前：首先确定主要研究者，研究者及参研相关人员
  1.获取药品监督管理局同意进行试验的批文；
  2.获得药品检验合格证；
  3.获得临床前或/和临床研究的各种资料，并详细阅读分析研究；
  4.在上述基础上制定耐受性试验方案；
  5.向所属单位伦理委员会提出申请，填写申请表，上报资料包括：申请表、药品监督管理局批文、药品检验合格证、试验方案、志愿者记录表、知情情意书；
  6.试验用仪器设备的详细名称、型号、目前状态、检验负责人；
  7.检查试验现场抢救措施、并呈良好状态；
  8.检查试验样品、包装、规格、批号、生产日期、保存条件及期限、并指定专人管理；
  9.绘制试验流程图；
  10. 筛选试验：
    1）询问过去史和现在史，近期是否参加过新药研究的志愿者与用药史；
    2）是否有烟酒嗜好和量；
    3）体检：身高、体重、主要体征、呼吸、心率、血压、体温；
    4）血尿常规；
    5）血生化；
    6）特殊检查；
    7）签署知情情意书。
试验中：
  1.严格按照试验方案，标准操作规程及流程图执行；
  2.再次检查核对药品、编号、随机号、剂量，研究者和药品管理者保持密切联系；
  3.记录完整、准确、无误、不能随意涂改或抹去原始记录；
  4.给药前24小时，再次复查筛选试验时的所有检查；
  5.给药前，晚8时入住病房；
  6.给药当天8点，100ml温水服药，在病房观察；
  7.服药后24小时、48小时、72小时、复查全部指标；
  8.服药当天只能吃标准早、中、晚餐，不另加其它食物和饮料；
  9.试验期间禁烟酒；
  10. 所有结果，研究者要立即检查核对填表；
  11. 所有临床研究工作，严格遵守GCP，根据方案进行，并接受申办者或药政当局的检查和监督。
试验后：
  1.试验总结交申办单位和研究单位各保存一份；
  2.总结报告由申办单位报送药审中心；
  3.准备参加审评，并回答药审委员的提问；
  4.根据需要作必要的修改。
新药Ⅰ期临床试验中健康受试者的药代动力学研究内容：
  1．单次给药的药代动力学研究；
  2．多次给药的药代动力学研究；
  3．如新药为口服制剂，应进行进食对药物吸收影响的研究。
新药Ⅱ期或Ⅲ期临床试验的药代动力学研究内容
  1．新药在相应病人体内的药代动力学研究，包括单次给药或/和多次给药的药代动力学研究；
  2．如新药为前体药物或在人体内主要以代谢方式进行消除的药物，需进行新药的代谢途径、代谢结构及其药代动力学的研究。
  3．根据新药管理学特点、临床用药需要及试验试验条件的可行性，研究者可选择性地进行：
    1）新药与其它药物相互作用中的药代动力学研究；
    2）新药特殊药代动力学研究（包括肝、肾功能受损，老年人等因素对药代动力学的影响）；
    3）不同种族的药代动力学研究；
    4）人体内血药浓度和临床药理效应相关性研究等。
生物制剂临床药代动力学研究内容基本同上。
临床试验药代动力学研究生物样品分析方法建立的要求
  1． 灵敏度：用最低检测浓度或测量限（OQ）来表示，要求测出3-5个消除半衰期后血药浓度或能检测出Cmax的1/10——1/20的血药浓度；
  2． 特异性：必须能证明所测的药为原型物或其代谢物，并能排除某些内源性物质和杂质的干扰；
  3． 精密度：要求在标准曲线范围内选择低（接近OQ）、中、高（接近上限）三种浓度，每一浓度重复测定5次，求出各自的日内及日间变异系数（低浓度小于等于20%，高浓度小于等于15%）
  4． 准确度：应说明绝对回收率或相对回收率，同样在标准曲线范围内选择低、中、高三个浓度，每一浓度重复5次，绝对回收率要求不低于50%，相对回收率一般为85-115%，如达不到要求，应加以说明；
  5． 标准曲线：不同生物样品应制备各自的标准曲线，标准曲线至少由5个浓度组成，应覆盖整个生物样品的浓度范围，不得外推，相关系数要求应大于0.95；
  6． 样品稳定性：如冻融条件；
  7． 方法学质控：
    1） 分析方法基本建立后，应由相应机构或该研究项目负责人提出来未知浓度样品管5-10个，用单盲法考察其方法的精确可靠性；
    2） 在每次测定样品时，同时制备3份质控（标准浓度）管或制备标准曲线；
  8． 新申报时提供数据：
    1） 如果用色谱法分析，应提供标准品、空白样品和样品三种色谱图；
    2） 标准曲线图及其回归相关分析及相关系数；
    3） 日间和日内准确度和回收率数据；
    4） 未知浓度样品质控检查测定数据。

临床药代动力学的数学术语及其定义
　　α　在二室模型描述药物在体内分布的表观一级混合速率常数
　　β　在二室模型描述药物消除的表观一级混合速率常数
　　τ　给药间隔
　　τ1　肾衰竭时的给药间隔
　　AUC，∫∞0C·dt　血药浓度对时间曲线下的总面积
　　C　在t时的血药浓度
　　dc／dt　血药浓度的变化速率
　　∫τ0C·dt　血药浓度对时间曲线下，从时间0→t时的面积
C∞　稳态时的“平均”血药浓度
　　Cmax　一次给药后的最大血药浓度
　　Cmin　一次给药后的最小血药浓度
　　Cn　在第n次给药间隔期间任何时间t时的血药浓度
Cn　在第n个给药间隔期间的“平均”血药浓度
　　Css　在零级过程滴注（即恒速静脉滴注）后达稳态时的血药浓度
　　C0　静脉注射后瞬时的血药浓度
（C1）max　反复用药后第1次用药中最大血药浓度
（C1）min　反复用药在第1次用药后最小血药浓度
C1　反复用药在第1次用药后的“平均”血药浓度
　　C∞　反复用药达稳制时每一给药间隔期间内任一时间t时的血药浓度
　　∫τ0C∞·dt　稳态时每一给药间隔期间血药浓度对时间曲线下的面积
（C∞）max　稳态时每一给药间隔期间的最大血药浓度
（C∞）min　稳态时每一给药间隔期间的最小血药浓度
　　fp　血浆中未结合药物的分数
　　fs　唾液中未结合药物的分数
　　K　在一定模型的表观一级消除速率常数
　　Ke　表观一级吸收速率常数
　　Ko　在一室模型表观一级肾脏排泄速率常数
　　Km　在一室模型代谢转化的表观一级速率常数，也有代表Michaelis常数
　　Ki　在肾衰竭时的处置速率常数
　　Ko　零级输入或滴注速率常数
　　K10　从中央室消除的表观一级速率常数
　　dm／dt　体内代谢物的变化速率
　　Mu　到t时尿中排泄的代谢物量
　　dMu／dt　尿中代谢物出现的速率
　　M∞u]　最终尿中排出的代谢物总量
　　n　多次用药所给剂量的次数
　　Q　总体清除率
　　Qo　肾清除率
　　Qc　肌酐清除率
　　td　作用持续时间
　　tp　一次给药后最大血药浓度出现的时间
　　t＇p　反复用药达稳态时，在每一给药间隔期间最大血药浓度出现的时间
　　t1/2，t0.5　半衰期
　　t1/2α　在二室模型分布相的半衰期
　　t1/2β　在二室模型消除相的半衰期
　　V　在一室模型药物的表观分布容积
　　Vd　在多室模型药物的表观分布容积，系指体内药量和后分布相血药浓度之间的一个比例常数
　　Vc　中央室的表观分布容积
　　Vm　用Michaelis-Menten动力学所描述过程的理论上的最大速率
　　X　在t时体内的药量
　　dx／dt　体内药量的变化速率

1期临床药代动力学试验设计

1. 单次给药临床药代动力学研究
　(1) 受试者例数 8~12
　(2) 药物剂量 一般选用低、中、高三种剂量。剂量的确定主要根据Ⅰ期临床耐受性试验的结果,以及讨论后确定的Ⅱ期临床试验时采用的治疗剂量,高剂量组剂量必须小于人最大耐受的剂量。
　(3) 研究步骤 受试者在试验日前一日进入Ⅰ期临床监护室(或病房),晚上进统一清淡饮食,然后禁食10小时,不禁水过夜。次日早上空腹(注射给药时不需空腹)口服药物,用150~200ml温水送服(如需收集尿样,则在服药前排空膀胱),服药后1小时后可适量饮水,2~4小时后进统一清淡饮食。按试验方案在服药前、后不同时间采取血样或尿样(如需收集尿样,应记录总体后,留取所需量)。试验期间受试者均应在监护室(病房)内,避免剧烈运动,禁服茶、咖啡及其他含咖啡和醇类饮料。
　(4) 采样点的确定 采样点的确定对药代动力学研究结果具有重大的影响。服药前采空白血样品,一个完整的血药浓度—时间曲线,应包括药物各时相的采样点,一般在血药浓度—时间曲线峰前部至少取4个点,峰后部取6或6个以上的点,一般共为11~13个采样点。即至少应有3~5个消除半衰期的时间,或采样持续到血药浓度为Cmax的1/10~1/20。 
　　如果同时采取尿样时,则应采取服药前尿样及服药后收集不同时间段的尿样。
　　为保证最佳的采样点,建议在正式试验前,进行预试验工作,然后根据预试验的结果,审核并修正原设计的采样点。
　(5) 药代动力学参数的估算 试验中测得的各受试者的血药浓度—时间的数据一般可用模型法或非房室模型分析,进行药代动力学参数的估算,求得新药的主要药代动力学参数,包括有: Ka、 Tmax(实测值)、Cmax(实测值)、AUC(梯形法求算)、Vd、Kel、t1/2和CL等。从尿药浓度估算药物经肾排泄的速率和总量。
　(6) 新药申报时应提供的数据包括以下几方面
　　① 各个受试者的血药浓度—时间数据及曲线图和其平均值(±SD)及曲线图。
　　② 提供各受试者的主要药代动力学参数和其平均数值(±SD)
　　③ 对新药单剂量给药临床药代动力学的规律和特点进行扼要的讨论和小结。
2. 多次给药临床药代动力学研究
　　新药在临床上将连续多次应用或消除 t1/2较长时,应考虑该药多次给药可能引起体内积蓄或改变药代动力学规律,故需对该药进行多次药带动力学研究,指在考察新药多次给药后的稳浓度(Css)、达稳态浓度的速率和程度、药物谷、峰浓度之间的波动系数(DF)和药代动力学规律是否发生改变、是否存在药物积蓄作用及Css和临床药理效应(药效和不良反映)的关系。如果不进行多次给药试验时应加以说明。
　(1) 受试者的选择和要求,试验药物的要求和受试者的例数 均同单次给药 
　(2) 试验药物剂量 采用Ⅱ期临床试验拟订的一种治疗剂量。并根据单次给药药代动力学参数中的消除半衰期和Ⅱ期临床试验给药方案中制订的服药间歇和给药日数,取定总服药次数和剂量。
　(3) 研究步骤 受试者在试验期间内在Ⅰ期临床试验室监护下进行服药、采集样本和活动。以上试验如为口服药物则均用150~200ml温水送服，受试者早、中、晚三餐均进统一饮食。
　(4) 采样点的确定 根据单剂量药代动力学求得的消除半衰期，估算新药可能达到稳态浓度的时间，但在达稳态之时，应连续测定3天的谷浓度（给药前）以确定以达稳态浓度。一般采样点最好安排在不同天的早上空腹给药前，以排除饮食、时辰以及其他因素的干扰。当确定已达稳态浓度后，在最后一次给药后，采取一系列血样，包括各时相（同单次给药），以测定稳态血药浓度—时间曲线。
　(5) 药代动力学参数的估算 根据试验中测定的3次谷浓度及稳态血药浓度—时间曲线数据，求得相应的药代动力学参数;峰时间（Tmax）、峰浓度（Cmax）、消除（血浆）半衰期（t1/2）、消除率（CL）、平均稳态血药浓度（Cav）、稳态血药浓度—时间曲线下面积（AUCss）及DF（波动系数）等药代动力学参数。
　(6) 新药申报时提供的数据 
　　① 各受试者的三次谷浓度数据
　　② 各受试者最后一次服药后的稳态浓度—时间的数据和曲线图及其平均数据（±SD）和曲线图。
　　③ 各受试者最后一次用药后的有关吸收分布及消除的主要药代动力学参数及其平均值（±SD）
　　④ 各受试者的Css、Cav、DF的数据和其平均值（±SD）
　　⑤ 多次给药的药代动力学的规律和特点及与单次给药药代动力学进行比较，并做扼要讨论和小结。
3. 进食对口服药物制剂药代动力学影响的研究
　　指在观察口服药物在饮食前、后服药时对药物药代动力学，特别对药物的吸收过程的影响。
　　进行本试验时，受试者的选者和要求， 试验药物的要求均同前。
试验步骤：本试验应采用随机双周期交叉设计。
　①受试者例数 6~8例（男性）。
　②药物剂量 同单次口服Ⅱ期临床试验治疗剂量。
　③试验步骤 受试者随机分2组。一组在试验前禁食10小时左右，于次日早晨空腹口服药物，用150~200ml温水送服，服药后，4小时进统一饮食，严格控制进餐量（牛奶1杯、面包2片、鸡蛋2个、肉肠2片、蔬菜色拉1勺）。其余步骤均同前。另一组受试者在试验前禁食10小时后，进统一饮食后，立即口服药物（5分钟内），用150~ 200ml温水送服，4小时后进统一饮食。其余步骤均同上。两组清洗期为1或2周或更长。
　④ 采样点的取定 主要药代动力学参数(Cmax、Tmax、AUC)的估算，新药申报时应提供的数据等方面均同单次给药药代动力学研究。最后对进食是否影响该药吸收及其药代动力学规律进行分析和小结。
Ⅱ期和Ⅲ期临床试验中的药代动力学研究
　①新药在相应病人体内的药代动力学研究，包括单次给药或/和多次给药的药代动力学研究，以观察病理状态对新药药代动力学的影响。试验设计除受试者为相应病人外，其他试验条件和要求均与Ⅰ期临床药代动力学研究相同。
　②如新药在人体内主要以代谢方式消除，并产生具有药理作用或毒性作用的主要活性代谢物时，应进行药物在人体的代谢途径、结构及其转化量的研究。如果活性代谢物的化学结构为能确定，可先标明为M1或M2等。