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固相分散萃取净化负化学源气质联用法测定蔬菜中多种农药残留量固相分散萃取净化负化学源气质联用法测定蔬菜中多种农药残留量 沈崇钰1 沈伟健*1 吴斌1 赵增运1 余可垚1 孙宁宁1 徐锦忠1 蒋原1 储晓刚2 1(江苏出入境检验检疫局食品实验室，南京 210001)2(中国检验检疫科学研究院,北京 100025)摘摘 要要 建立了一种蔬菜中 20 种农药残留量的固相分散萃取-气相色谱负化学离子源质谱分析方法。样品由正己烷饱和的乙腈(含 1%冰醋酸)提取，固相分散萃取法净化，由气相色谱-负化学离子源质谱分时段选择离子监测技术进行测定与确证，外标法定量。20 种农药在 20400 g/L 范围内线性均良好；方法灵敏度高，定量限(LOQ)均低于 2 g/kg；方法准确度和精密度高，在 5、10 和 20 g/kg 等 3 个添加水平下除了氟虫脲回收率偏低外，其它农药的平均回收率均处于 60%110%之间,RSD10.9%；方法选择性好，抗干扰能力强，可作为测定多种蔬菜基质中农药残留量的确证方法。关键词关键词 气相色谱-负化学离子源质谱联用,选择离子监测,固相分散萃取,农药,蔬菜 Determination of 20 Kinds of Pesticide Residues in Vegetables by offline Disperse Solid Phase Extration and Gas Chromatography-Negative Chemical Ionization Mass Spectrometry Shen Chongyu1,ShenWeijian1,Wu Bin,Zhao Zengyun1,Yu Keyao1,Sun Ningning1,Xu Jinzhong1,Jiang Yuan1,Chu Xiaogang2 1(Jiangsu Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau of Peoples Republic of China,Nanjing 210001)2(Chinese Academy of Inspection and Quarantine,Beijing 100025)Abstract A confirmatory method is proposed for the determination of 20 kind of pesticide residues in vegetables by the technique of offline disperse solid phase extration and gas chromatography-negative chemical ionization mass spectrometry(GC-MS/NCI).Pesticides interested were extracted from samples with acetonitrile containing 1%acetic acid and simultaneous liquid-liquid partitioning formed by adding anhydrous magnesium sulfate plus sodium acetate following by a simple cleanup step known by dispersive solid-phase extraction.The aliquot is determined and confirmed by gas chromatography-negative chemical ionization mass spectrometry(GC-MS/NCI)using external standard method.The method is reliable and 通讯联系人：沈伟健，男，硕士，工程师，Tel:[phone],Email: 基金项目:国家十一五科技支撑计划项目(2006BAK02A08)stable that the recoveries of all pesticides were in the range from 60%to 110%at three spiked level,0.005 mg/kg,0.010 mg/kg and 0.020 mg/kg,and the RSDs were below 10.9.The linearity of method is good from 20400 g/L,and LOQ2 g/kg.The method is selective well with no interference and is suitable for confirmatory of pesticides residue in some kinds of vegetables.Keywords gas chromatography-negative chemical ionization mass spectrometry,selected ion monitoring,disperse solid phase extraction,pesticides;vegetables 1 引言引言 由于要求检测的农药品种越来越多，限量越来越低，多农残的检测技术业已成为农药残留分析技术的研究热点。这些方法往往需要统一的提取、净化步骤和色谱分离条件。近些年来，按照体系所使用的提取溶剂不同先后出现了丙酮(如Luke 法1)，DFG-S19 法2)，乙腈(如 PMRA 法3)，乙酸乙酯(Spain 法4)，甲醇(Alder 的 LC-MS 法5)等等方法。但是这些方法普遍存在着诸如操作麻烦，过程复杂，净化效果不够理想，适用农药种类或基质种类有限等缺陷。2003年美国科学家Steven提出了QuEchERS6,7(Quick,Easy,Cheap,Effective,Rugged and Safe)方法，是一种快速、简便、价格低廉的样品前处理方法，采用分散型固相萃取净化法。该方法已被很多国际农药残留分析机构广泛采纳，亦已成为农药残留分析的研究热点。该方法优点是快速、简单、经济，但是相对于其它多农残检测方法，这种方法存在的主要缺点有:由于最终得到的乙腈浸提液中的样品浓度为1 g/mL，明显低于其它方法,因此在需要GC/MS 达到小于10 ng/g 的检测限时需要 8 L 大体积进样量;提取效率较低;净化效果不理想等。而本文对 QuEchERS 方法中的提取和净化步骤上进行了适当的改进，不仅保证了净化效果，而且还提高了方法的检测限。另外，负化学离子源被称为“软电离”，对含电负性基团的物质具有高选择性和高灵敏度，目前已经成为农药残留检测较为热门的检测技术，但目前主要还是集中于有机氯8、拟除虫菊酯9、有机磷10等项目的研究，也有少量其他类别农药的研究工作11,12,13；由于氟草胺、炔丙酰草胺、氟虫脲、氟菌唑、三唑酮、腐霉利、乙氧氟草醚、己唑醇、抑霉唑、苄氯三唑醇、溴虫腈、环氟菌胺、除草醚、唑酮草酯、吡氟酰草胺、异菌脲、溴螨酯、甲羧除草醚、氟喹唑和烯酰吗啉等农药在分子结构上都含有带有强电负性原子或基团(如 Br、Cl、F、CF3和 NO2等)和具有较好的挥发和半挥发性，因此选用负化学离子源气相色谱-质谱法来检测可以得到很好的灵敏度。本文应用改进的 QuECHERS 净化方法同气相色谱-质谱/负化学离子源联用法测定了蔬菜中多种农药的残留量。2 实验部分实验部分 2.1 试剂与材料试剂与材料 正己烷，丙酮，乙腈、冰醋酸均为色谱纯。水为去离子水。无水硫酸镁，无水乙酸钠：分析纯。石墨化碳黑填料，PSA 填料,ODS-C18 填料。标准品为氟草胺、炔丙酰草胺、氟虫脲、氟菌唑、三唑酮、腐霉利、乙氧氟草醚、己唑醇、抑霉唑、苄氯三唑醇、溴虫腈、环氟菌胺、除草醚、唑酮草酯、吡氟酰草胺、异菌脲、溴螨酯、甲羧除草醚、氟喹唑和烯酰吗啉，均购自 Dr.Ehrenstorfer GmbH 公司，纯度均大于等于 98.0%。2.2 标准储备液和工作液的配制标准储备液和工作液的配制 标准储备液的配制：分别准确称取氟草胺、炔丙酰草胺、氟虫脲、氟菌唑、三唑酮、腐霉利、乙氧氟草醚、己唑醇、抑霉唑、苄氯三唑醇、溴虫腈、环氟菌胺、除草醚、唑酮草酯、吡氟酰草胺、异菌脲、溴螨酯、甲羧除草醚、氟喹唑和烯酰吗啉各 10.0 mg(精确到 0.01 mg)于 10 mL 容量瓶，用丙酮溶解并定容至刻度线，由此配制好浓度均为1.00 g/L的20种农药的单种标准储备液(冷藏保存，4)。标准工作液的配制：各取 1 mL 上述标准储备液于同一个 25 mL 容量瓶中，并用丙酮稀释至刻度线，配制成 40 mg/L 混合工作储备液，由此储备液通过逐级稀释得到 4 mg/L，1 000 g/L，400 g/L，200 g/L，100 g/L，40 g/L 和20 g/L 的系列混合标准工作液。2.3 仪器和设备仪器和设备 气相色谱-质谱仪(GC-MS)：Agilent 6890N GC-5973 Inert MS(配有化学离子源-CI)。旋转蒸发器。2.4 样品前处理样品前处理 2.4.1 提取 准确称取 10 g 均匀试样(精确至 0.01 g)于 50 mL 的离心瓶中，加入 50 mL 正己烷饱和过的乙腈（1%冰醋酸），加入 15 g 无水硫酸镁和 6 g 无水乙酸钠，放置于振荡器中振荡 40 min，以 3000 r/min 离心 5 min，去上清液并过滤于 150 mL浓缩瓶中。再加入 20 m 正己烷饱和乙腈（1%冰醋酸）重复提取一次，合并提取液，40 下减压浓缩至干。用 2 mL 乙腈溶解，待净化。2.4.2 净化 将 1.4 样品溶液转移到小试管(事先加入 250 mg PSA 填料，适量石墨化碳黑填料)中，涡旋 1 min，待颜色完全消除后，过 0.45 m 有机相滤膜，供气相色谱-质谱测定和确证。2.5 气质联用仪参数气质联用仪参数 2.5.1 气相色谱部分 DB-17ms 弹性石英毛细管柱，30 m0.25 mm0.25 m；柱温：程序升温，初始温度 70，以 30/min 升至 220，再以 2/min 升至 228，接着以8/min 升至 280，最后以 10/min 升至 300 保持 12.50 min。载气:高纯氦气（99.999%）；载气流速:1.0 mL/min;进样器温度：300；接口温度：250，进样量：1 L,不分流进样,分流时间：1.50 min。2.5.2 质谱部分 本方法采用气相色谱-负化学离子源质谱联用(GC-MS/NCI)技术。反应气：高纯甲烷(99.99%)，流量：2.0 mL/min。主要的质谱参数有，离子源温度：150；四极杆温度：150；电离模式：负化学离子源（NCI），电子能量：230 eV；溶剂延迟时间：5.00 min；数据采集模式：分时段选择离子监测模式（SIM），详细信息参见表 1。表 1 分段选择离子表 Table 1 The list of selected ion in the different period of time 农药 Pesticides 保留时间窗 Retention time window(min)保留时间Retention time(min)定性离子Identification Ions(m/z)线性方程 Linear equation 相关系数 Correlation coefficient定量限 LOQ(g/kg)氟草胺 Benfluralin 5.008.00 5.59 305,335*,336 y=6778.2x-65373 0.9959 0.007 炔丙酰草胺 Propyzamide 6.93 255*,257,259 y=3249.8x-11763 0.9978 0.033 氟虫脲 Flufenoxuron 7.30 269*,270 y=662.06x-5078.9 0.9976 0.40 三唑酮 Triadimefon 8.0011.00 9.20 127*,129,166 y=995.09x-4792.5 0.9972 0.28 氟菌唑 Triflumizole 9.78 286,345*,347 y=4295.1x-22453 0.9981 0.05 腐霉利 Procymidone 10.73 283,284,285 y=21.626x-110.21 0.9957 1.8 乙氧氟草醚 Oxyfluorfen 11.0011.68 11.36 296,361*,363 y=4865.8x-47574 0.9962 0.018 己唑醇 Hexaconazole 11.48 221,257*,277 y=3581.9x-15264 0.9980 0.046 抑霉唑 Imazalil 11.6812.50 11.85 35,240,296*y=90.164x-827.86 0.9956 2.0 苄氯三唑醇 Dichlorbutrazole 11.90 102,222*,327 y=1721.7x-22214 0.9948 0.092 溴虫腈 Chlorfenapyr 11.98 269,347,349*y=9379.0 x-30989 0.9977 0.004 环氟菌胺 Cyflufenamid 12.04 322,340*,341 y=5292.8x-23837 0.9983 0.021 除草醚 Nitrofen 12.5014.60 12.95 283*,284,285 y=3753.9x-37703 0.9958 0.056 唑酮草酯 Carfentrazone-ethyl 13.21 375*,376,377 y=4113.4x-21499 0.9951 0.21 13.51 y=643.96x-1683.5 0.9983 吡氟酰草胺 Diflufenican 13.75 394*,395 y=7805.4x-31838 0.9977 0.055 异菌脲 Iprodione 14.6015.70 14.89 244*,246,248 y=233.26x-3133.5 0.9977 1.7 溴螨酯 Bromopropylate 15.11 79,426,428*y=296.85x-1290.4 0.9955 0.090 甲羧除草醚 Bifenox 15.7018.10 16.26 341*,342,343 y=859.56x-9040.0 0.9937 0.17 氟喹唑 Fluquinconazole 18.10End 18.58 339*,348,375 y=3594.1x-18095 0.9972 0.035 烯酰吗啉 Dimethomorph 25.21 387*,388,389 y=1028.8x-4521.6 0.9963 0.17 26.27 y=746.08x-3368.7 0.9948 标注*的离子即为该农药的定量离子。*：quantitative ion for the targeted pesticide 3 结果与讨论结果与讨论 3.1 固相分散萃取技术固相分散萃取技术 本文在原 QuEchERS6,7方法基础上作了改进，原方法在样品经提取后只移取了 2 mL 提取液，使得最终得到的样品溶液中的样品浓度为 1 g/mL，而本方法则将提取液全部取出，且为提高提取效率，用适量的提取溶剂再提取一次，使最终的样品溶液中的样品浓度为 5 g/mL，从而既保证了回收率，这样也使得方法检测限在理论上提高了 5 倍。提取溶液由乙腈改为正己烷饱和过的乙腈，降低了提取溶剂的极性，有效降低了含水基质提取液中的水分含量，从而减轻后续的除水压力。方法中的 PSA 填料用于去除基质中的糖类和部分脂肪酸；无水 MgSO4能较充分地吸除基质中的水分，有利于减轻后续的旋转蒸发和上机进样前的除水压力；石墨化碳黑粉墨则用于除去水果与蔬菜中的色素和食品基质中的甾醇。而无水乙酸钠同提取溶剂中的冰醋酸组成的缓冲体系有助于碱性条件下不稳定农药的提取。运用这种固相分散萃取净化技术，一方面，可以简化操作，有效缩短分析时间，减少有机溶剂的使用量，另一方面，在净化步骤中，石墨化碳黑粉末的用量不是固定值，是随基质中色素含量的不同而进行调整的，通常在 150250 mg 以内。这既提高了净化效果，又避免了因为固定用量而出现的诸如使用量过多造成的浪费或使用量过少导致的净化不够等弊端。3.2 方法性能指标方法性能指标 3.2.1 方法的线性关系与检测限 将2.2配制好的10 g/L200 g/L内5个系列浓度混合标准工作液按上述气质条件进样,以各个农药的定量离子峰面积对浓度作标准曲线,得到9种农药的线性方程及其相关系数。混合标准溶液总离子流色谱图见图1。6.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.0022.0024.0026.0028.0020000400006000080000100000120000140000160000180000200000220000240000260000280000Ti m e-AbundanceTI C:M ul t i 22Pest-m i xst d-05.D 图 1 浓度均为 0.10 mg/L 的农药混合标准溶液总离子流色谱图 Fig.1 Total ion chromatogram of the mixture pesticides standard solution at the concentration of 0.10 mg/L 1 氟草胺(Benfluralin);2 炔苯酰草胺(Propyzamide);3 氟虫脲(Flufenoxuron);4 三唑酮(Triadimefon);5 氟菌唑(Triflumizole);6 腐霉利(Procymidone);7 乙氧氟草醚(Oxyflufen);8己唑醇(Hexaconazole);9 抑霉唑(Imazalil);10,11,12 苄氯三唑醇+溴虫腈+环氟菌胺(Dichlorbutrazole+Chlorfenapyr+Cyflufenamid);13 除草醚(Nitrofen);14,15 唑酮草酯(Carfentrazone-ethyl);16 吡氟酰草胺(Diflufenican);17,18 异菌脲+溴螨酯(Iprodione+Bromopropylate);19甲羧除草醚(Bifenox);20氟喹唑(Fluquinconazole);21,22烯酰马啉(Dimethomorph).由表 1 中数据可知，在 20 g/L200 g/L 内所有农药都呈现了良好的线性，而且每个农药的定量限均低于或等于 2.0 g/kg，比国外发达国家的残留限量(10 g/kg)要低一个数量级或以上，能有效突破国外的贸易技术壁垒。3.2.2 方法的准确度和精密度方法的准确度和精密度 在阴性的菠菜样品中分别添加5、10和20 g/kg等3个水平的混合标准溶液，按照上述提取、净化和检测步骤，每个添加水平每天 6 个平行实验,重复 3 天，最后计算各种除草剂的平均回收率和相对标准偏差,以分别考察方法的准确度和精密度(表 3)。结合浓度为 5 g/kg 的添加水平得到的加标回收图谱,根据定量限浓度处信躁比 S/N10 可以计算出方法的定量限(见表 1)。混合标准溶液和阴性菠菜加标回收样品谱图见图 2。1 34 5 6 7 8 910 11 122131417 1819201621 22 15丰度 Abundance t/min6.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.0022.0024.0026.0028.00200250300350400450500550600650700Ti m e-AbundanceTI C:R eagent Bl ank-03.D 图 2 阴性菠菜样品总离子流色谱图 Fig.2 Total ion chromatogram of the negative spinach sample 表2 菠菜中各种农药在3个添加水平下的平均回收率及其相对标准偏差 Table 2 Average recovery and relative standard deviation(RSD)of each pesticide at three spiked level in spinach，n=18 农药 Pesticides 不同添加水平下的平均回收率和相对标准偏差 Average recovery and RSD at different sp ike level 5 g/kg 10 g/kg 20 g/kg 平均回收率Recovery(%)RSD(%)平均回收率 Recovery(%)RSD(%)平均回收率 Recovery(%)RSD(%)氟草胺 Benfluralin 72.5 10.979.5 5.6 71.0 5.8 炔丙酰草胺 Propyzamide 75.5 6.9 74.3 5.8 82.4 6.6 氟虫脲 Flufenoxuron 35.6 4.7 40.6 4.2 38.6 4.6 三唑酮 Triadimefon 75.4 5.4 78.4 7.2 74.1 3.8 氟菌唑 Triflumizole 82.4 3.7 77.2 5.1 78.4 4.8 腐霉利 Procymidone 76.3 6.1 72.6 5.7 78.1 5.8 乙氧氟草醚 Oxyfluorfen 68.2 7.5 62.8 5.9 71.3 4.9 己唑醇 Hexaconazole 64.2 8.5 72.5 6.7 70.3 7.1 抑霉唑 Imazalil 63.3 5.7 65.7 8.1 67.2 7.8 苄氯三唑醇 Dichlorbutrazole 87.9 4.7 85.0 6.0 91.5 3.2 溴虫腈 Chlorfenapyr 78.2 7.5 72.6 5.4 75.4 6.2 丰度 Abundance t/min环氟菌胺 Cyflufenamid 75.4 6.7 83.4 3.6 81.0 4.6 除草醚 Nitrofen 69.4 5.7 71.3 4.7 66.4 3.3 唑酮草酯Carfentrazone-ethyl 91.4 4.2 94.1 3.7 97.4 2.9 吡氟酰草胺 Diflufenican 62.4 7.3 64.6 7.7 61.9 4.5 异菌脲 Iprodione 107.1 6.7 97.5 5.1 98.9 4.4 溴螨酯 Bromopropylate 88.4 5.0 84.7 5.7 83.4 3.1 甲羧除草醚 Bifenox 101.7 4.6 103.6 5.6 100.4 4.8 氟喹唑 Fluquinconazole 71.2 5.6 68.4 4.9 69.9 5.4 烯酰吗啉 Dimethomorph 67.6 7.1 68.1 8.1 67.5 5.7 从表 2 数据可看出，除了氟虫脲回收率明显偏低外，其他农药在 5、10 和20 g/kg 等3个添加水平下平均回收率均在60%110%之间,且RSD10.9%,均在可接受范围内,说明运用本方法得到的数据是准确可靠的。结合方法定量限较低的特点,说明应用本方法检测菠菜中20种农药残留能够从根本上消除了检测结果出现假阴性的可能。而氟虫脲可能是因为农药本身受热不够稳定而导致的回收率偏低,但是 RSD 回收率数据的 RSD4.7%,说明检测结果是稳定可靠的。3.2.3 方法的选择性方法的选择性 在进行方法摸索时，选取菠菜作为试验对象是因为菠菜相对于蔬菜而言具有很好的代表性，菠菜体内含有丰富的叶绿素、胡萝卜素、蛋白质、维生素、碳水化合物、草酸和其他大量不确定的干扰物存在。另外，运用本方法在检测其他种类蔬菜样品如青刀豆、胡萝卜、香葱时，添加水平为 10 g/kg 时除了氟虫脲回收率偏低外,其它所有农药的回收率也均处于 60110%之间，具体数据见表 3。其中阴性香葱样品及其加标回收得到的总离子流色谱图分别参见图 3 和图 4。从图3 和图 4 可看出即便是成分复杂的香葱样品经本方法提取净化检测后得到的总离子图中在待测农药出峰处也没有出现干扰现象,这说明了方法的高选择性。6.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.0022.0024.0026.0028.00200250300350400450500550600650700750800850900Ti m e-AbundanceTI C:FLP08-2786.D 图 3 香葱基质空白总离子流色谱图 Fig.3 Total ion chromatogram of the negative welsh sample 6.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.0022.0024.0026.0028.00500010000150002000025000300003500040000Ti m e-AbundanceTI C:Spi ke-03.D 图 4 香葱加标回收样品得到的总离子流色谱图 Fig.4 Total ion chromatogram of the mixture pesticides standard solution spiked into the negative welsh sample(at the spike level of 5 g/kg)1 氟草胺(Benfluralin);2 炔苯酰草胺(Propyzamide);3 氟虫脲(Flufenoxuron);4 三唑酮(Triadimefon);5 氟菌唑(Triflumizole);6 腐霉利(Procymidone);7 乙氧氟草醚(Oxyflufen);8己唑醇(Hexaconazole);9 抑霉唑(Imazalil);10,11,12 苄氯三唑醇+溴虫腈+环氟菌胺(Dichlorbutrazole+Chlorfenapyr+Cyflufenamid);13 除草醚(Nitrofen);14,15 唑酮草酯(Carfentrazone-ethyl);16 吡氟酰草胺(Diflufenican);17,18 异菌脲+溴螨酯(Iprodione+Bromopropylate);19甲羧除草醚(Bifenox);20氟喹唑(Fluquinconazole);21,22烯酰马啉(Dimethomorph).1234567 8910 11 121513 1417 18192021 22 16丰度 Abundance 丰度 Abundance t/mint/min表4 不同蔬菜中各种农药在10 g/kg添加水平下的平均回收率(n=6)Table 4 Average recoveries of each pesticide at spiked level of 10 g/kg in other vegetables 农药 Pesticide 青刀豆(%)胡萝卜(%)香葱(%)氟草胺 Benfluralin 68.2 81.6 79.6 炔丙酰草胺 Propyzamide 72.0 79.6 79.0 氟虫脲 Flufenoxuron 49.4 45.8 45.8 三唑酮 Triadimefon 71.6 80.4 86.2 氟菌唑 Triflumizole 75.6 78.4 78.4 腐霉利 Procymidone 70.0 81.0 78.4 乙氧氟草醚 Oxyfluorfen 67.2 72.6 63.6 己唑醇 Hexaconazole 62.8 64.8 73.0 抑霉唑 Imazalil 60.8 68.0 65.0 苄氯三唑醇 Dichlorbutrazole 81.2 83.4 79.6 溴虫腈 Chlorfenapyr 70.8 70.4 70.8 环氟菌胺 Cyflufenamid 71.4 78.8 82.8 除草醚 Nitrofen 66.6 70.0 66.8 唑酮草酯 Carfentrazone-ethyl 87.8 85.6 86.2 吡氟酰草胺 Difufenican 58.8 52.2 51.8 异菌脲 Iprodione 94.0 108.2 101.8 溴螨酯 Bromopropylate 78.0 83.4 84.4 甲羧除草醚 Bifenox 98.2 80.6 74.8 氟喹唑 Fluquinconazole 66.2 67.2 61.0 烯酰吗啉 Dimethomorph 61.8 68.8 64.8 3.3 小结小结 本文运用固相分散萃取净化-气相色谱-负离子化学源质谱法检测蔬菜中 20种农药的残留量。方法简单快速，准确度和精密度高，所有农药在5、10和20 g/kg 等 3 个添加水平下的回收率均处于 60%110%之间,RSD10.9%；方法灵敏度高，定量限(LOQ)均低于或等于 2 g/kg；方法选择性好，能有效消除复杂基质(如葱)本身成分带来的干扰，因此可用于多种蔬菜基质中 20 种农药残留量的测定和确证。References 1 Luke M A,Froberg J E,Masumoto H T.J.Assoc.Off.Anal.Chem.1975,58(5):10201026 2 Stan H J,Linkerhagner M.J.Chromatogr.A,1996,750(1-2):369390 3 J.Fillion,R.Hindle,M.Lacroix,J.Selwyn,J.AOAC Int.1995,78:12521266 4 Method IA-Multi-residue,National Program of Residues,M.A.P.A.(Spainish Ministry of Agriculture,Fisheries and Food),Spain,1996 5 Klein J,Alder L.J.AOAC Int.,2003,86:10151037 6 Paya P,Anastassiades M,Mack D,Sigalova I,Tasdelen B,Oliva Je,Barba A.Anal Bioanal Chem,2007,389(6):16971714 7 Garrido Frenich A,Martnez Vidal J L,Pastor-Montoro E,RomeroGonzlez R.Anal Bioanal Chem,2008,390(3):945959 8 Lin Zhuguang(林竹光),Jin Zhen(金珍),Liu Yong(刘勇),Fan Yulan(范玉兰),Tan Jun(谭君),Ma Yu(马玉),Chen Meiyu(陈美瑜),Chen Zhaobin(陈招斌).Chem.J.Chinese Universities(高等学校化学学报),2005,26(12):22182222 9 Shen Chongyu(沈崇钰),ShenWeijian(沈伟健),Jiang Yuan(蒋原),Xu Jinzhong(徐锦忠),Zhao Zengyun(赵增运),Chen Huilan(陈惠兰),Wu Bin(吴斌).Chinese J.Anal.Chem.(分析化学),2006,34(S):3640 10 Lin Zhuguang(林竹光),Fan Yulan(范玉兰),Ma Yu(马玉),Jin Zhen(金珍),Tan Jun(谭君),Chen Meiyu(陈美瑜),Chen Zhaobin(陈招斌),Tu Fengzhang(涂逢樟),Liu Yong(刘勇).Chinese Journal of Chromatography(色谱),2005,26(12):22182222 11 ShenWeijian(沈伟健),Yang Wenquan(杨雯筌),Xu Jinzhong(徐锦忠),Zhao Zengyun(赵增运),Ding Tao(丁涛),Shen Chongyu(沈崇钰).Chinese J.Anal.Chem.(分析化学),2008，in press 12 ShenWeijian(沈伟健),Xu Jinzhong(徐锦忠),Yang Wenquan(杨雯筌),Shen Chongyu(沈崇钰),Zhao Zengyun(赵 增 运),Ding Tao(丁 涛),Wu Bin(吴 斌).Chinese Journal of Chromatography(色谱),2007,25（5）：753757 13 ShenWeijian(沈伟健),Yang Wenquan(杨雯筌),Shen Chongyu(沈崇钰),Zhao Zengyun(赵增运),Xu Jinzhong(徐锦忠),Ding Tao(丁涛).Chinese Journal of Chromatography(色谱),2007,25(3):418421