非洲猪瘟的检测与防控.pdf

非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒引起的猪急性、烈性传染病。临床症状以高热、皮肤发绀、呼吸障碍和神经症状为主要特征病理变化以全身广泛出血为主，发病率和死亡率几乎达1 0 0。猪是唯一的自然宿主，软蜱为传播的主要媒介。1 9 2 1 年肯尼亚首次报道；1 9 5 7，1 9 7 1，2 0 0 7 年分别传到了葡萄牙、南美洲和高加索地区；2 0 1 7 年3 月，在俄罗斯远东地区伊尔库茨克州发生了非洲猪瘟，伊尔库茨克州距离我国较近，且边境地区存在软蜱和野猪，非洲猪瘟传人我国的风险很大，对我国的防控提出了严峻的挑战。关键词：非洲猪瘟；临床症状；病理变化；防控中图分类号：$8 5 8 2 8文献标识码：A文章编号：1 0 0 2 2 4 8 1(2 0 1 7)1 2 2 0 0 6 0 3D e t e c t i o na n dC o n t r o lo fA f r i c a nS w i n eF e v e rJ I A OF u l i n，H A NY i c h a o，L IW e n g a n g，L I A N GX i n g l o n g，R E NX i b i n，L I UW e n j u n，W UZ h i j u a n，H ED o n g c h a n g(I n s t i t u t eo fA n i m a lH u s b a n d r ya n dV e t e r i n a r y，S h a n x iA c a d e m yo fA g r i c u l t u r a lS c i e n c e s，T a i y u a n0 3 0 0 3 2，C h i n a)A b s t r a c t：A f r i c a ns w i n ef e v e rc a u s e db yA f r i c a ns w i n ef e v e rv i r u si np i g sw h i c hi sa na c u t ea n dv i r u l e n td i s e a s e H i g hf e v e r,s k i nc y a n o s i s，r e s p i r a t o r y,d i s o r d e r sa n dn e u r o l o g i c a ls y m p t o m sw e r et h em a i nc l i n i c a ls y m p t o m s T h em a i np a t h o l o g i c a lc h a n g e sw e r ee x t e n s i v eh e m o r r h a g e，m o r b i d i t ya n dm o r t a l i t yw e r ea l m o s t1 0 0 T h ep i gi st h eo n l yn a t u r a lh o s t，a n ds o f tt i c k sa r et h em a i nv e c t o ro ft r a n s m i s s i o n K e n y aw a sf i r s tr e p o d e di n1 9 21，a n ds p r e a dt oP o r t u g a l，S o u t hA m e r i c aa n dt h eC a u c a s u si n1 9 5 7，1 9 7 1a n d2 0 0 7，r e s p e c t i v e l y I nM a r c h2 017，A f r i c a ns w i n ef e v e ro c c u r r e di nt h eF a rE a s to fR u s s i aI r k u t s k I r k u t s kd i s t a n c ei no u rc o u n t r yi ss h o r t，s o f tt i c k sa n dw i l db o a ri s i nb o r d e ra r e a s，t h er i s ko fA f r i c a ns w i n ef e v e rs p r e a dt oC h i n ai sg r e a t I ti sas e v e r ec h a l l e n g et op r e v e n t i o na n dc o n t r o lA f r i c a ns w i n ef e v e ri nourc o u n t r y K e yw o r d s：A f r i c a ns w i n ef e v e r；c l i n i c a ls y m p t o m s；p a t h o l o g i c a lc h a n g e s；p r e v e n t i o na n dc o n t r o l非洲猪瘟(A f r i c a ns w i n ef e v e r，A S F)，又称非洲猪瘟疫，或疣猪病【l I，是由非洲猪瘟病毒(A f r i c a ns w i n ef e v e rv i r u s，A S F V)引起的猪急性、烈性传染病。临床以高热、皮肤发绀、呼吸障碍和神经症状为主要特征，发病率和死亡率几乎达1 0 0。A S F 是世界动物卫生组织(O I E)要求各成员国及时报告的疾病之一，也是我国动物病原微生物名录中的一类病。1 9 2 1 年东非肯尼亚首次公开报道了非洲猪瘟，1 9 5 7 年传到了葡萄牙，1 9 7 1 年传人南美洲，2 0 0 7 年传人高加索地区。目前全球共有2 9 个国家存在非洲猪瘟，大部分都是非洲国家，也包括高加索地区和俄罗斯联邦以及一些欧洲国家口I。2 0 1 7 年3 月，俄罗斯远东地区伊尔库茨克州发生非洲猪瘟疫情。伊尔库茨克州距离我国较近，同时边境地区有软蜱和野猪的存在，使非洲猪瘟传人我国的风险加大，对我国防控A S F 提出了严峻的挑战，因此，应加强我国非洲猪瘟实验室的检测方法建设和对边境地区软蜱和野猪以及进口家猪的检测。1病原体特征非洲猪瘟病毒属非洲猪瘟病毒科(A s f a r v i r i d a e)中的唯一成员1 3 。A S F V 是一种非常复杂的病毒，直径为1 7 0 2 0 0n m、带衣壳和含类脂的囊膜双股D N A病毒，基因组全长1 7 0 1 9 0k b，含有1 5 1 个开放阅读框(O R F s)，5 个多基因家族编码2 0 0 多种蛋白质【3 J。A S F V 只有一个血清型，根据B 6 4 6 L 基因(编码P 7 2 蛋白)进行分型，可以分成2 2 种不同的基因型M，其中，最大的基因群为基因I 型，或称E S A C 一收稿日期：2 0 1 7 0 9 一1 1基金项目：山西省科技攻关项目(2 0 1 5 0 3 1 1 0 1 8 2)；山西省农业科技成果转化和示范推广项目(2 0 1 7 C G Z H 0 4)；生猪安全高效生产山西省科技创新团队(2 0 1 3 1 3 1 2 0)作者简介：焦福林(1 9 6 4 一)，男L【J 西晋中人，副研究员，主要从事养猪与猪病防治研究工作。2 0 0 6 万方数据焦福林等：非洲猪瘟的检测与防控W A 基因型，由从欧洲、南美洲、加勒比海和西非等地区的2 4 个国家分离到的毒株组成同，不同基因型的A S F V 毒株分布有一定的区域性特点I”，不同分离毒株间全基因组序列有明显差异I8 1。A S F V 在自然环境中抵抗力很强，在猪舍中能存活3 0d 以上，混于2 5 血清中的病毒3 7 半存活期为2 4h，1 8 个月仍能从血液和血清中分离出病毒；室温条件下，在粪便中能存活1 ld，6 0 3 0m i n 可灭活，冰冻的肉中能存活几周或几月；p H 值1 9 1 3 4 可存活2h以上；对甲醛、氢氧化钠、乙酰乙烯亚胺等常用消毒剂以及乙醚和氯仿等脂溶剂敏感。2流行特点猪是A S F V 唯一的自然宿主1 9 1，A S F 仅发生于猪和野猪，并且传播快、发病率和死亡率高，所有品种和年龄猪均可感染。欧洲野猪、非洲野猪和美洲野猪都是非洲猪瘟的宿主和易感动物f 1 0】，其中，非洲的疣猪在A S F 的流行、维持与传播中起着最重要的作用J。非洲软蜱、患病猪、康复猪为主要传染源。猪虱以及蜱类是主要的传播媒介【9 J，作为A S F 媒介的蜱仅局限于软蜱科中的钝缘蜱属【1 2】，软蜱通过吸血而感染A S F V，而受感染的软蜱能长时间的贮藏病毒，并通过叮咬将其传播给其他易感猪群，同时可将病毒垂直传染给子代。病毒存在于病猪和死猪的体液、组织、分泌物和排泄物中，能够污染饲料、圈舍、围栏、器具和衣物。猪群可通过带毒的吸血昆虫如软蜱叮咬，采食被污染的饲料、泔水，接触被污染圈舍、围栏、器具和衣物感染；也可通过短距离内被污染的空气感染【1 3】；精液也有可能成为A S F V 传播的一个途径【1 4】。某一地区一旦暴发A S F，很难消灭，多数会成为地方性疾病。3临床症状自然感染潜伏期4 1 9d，实验室感染潜伏期由于接种病毒的剂量和接种的途径不同一般为2 5d。临床症状与病毒的毒力、感染的剂量和途径有关，可分为超急性型、急性型、亚急性型和隐性型。感染A S F V 后，开始体温骤然上升，精神及食欲正常，随后精神不振、食欲废绝、心跳及呼吸急促、畏寒、无法站立，耳、腹、尾巴等处皮肤可出现蓝紫色出血块，一般病程为5 7d，致死率9 5 1 0 0。尽管A S F V 感染后产生的中和抗体不能对病毒感染提供足够的保护，但是可以减少病毒血症，延缓临床症状的出现【1 5 I。4病理变化急性型、亚急性型的病理剖解变化较明显，主要的病变器官为脾脏、淋巴结、肾脏和心脏。脾脏肿大、出血，呈红黑色，质脆，有梗死灶；淋巴结肿大、出血、变脆，有时血肿呈黑红色，切面呈大理石样；肾皮质和肾盂切面有点状出血；心脏斑点状出血，心包积液带有血液。急性型消化道水肿出血，腹腔内有血性浆液，胆囊、肝充血，胸腔内有胸水，胸膜上有出血点，肺水肿，膀胱黏膜针尖状出血。5买验室检测A S F 是猪的急性、烈性传染病，目前，我国尚未发现，建立快速有效的实验室检测方法，并对边境地区软蜱和野猪以及进口家猪进行及时准确地检测，对于我国防控A S F 非常重要。非洲猪瘟病原的检测常用直接免疫荧光法(D I F)，血细胞吸附实验(H A)，聚合酶链式反应(P C R)等方法。D I F 是A S F 最常用、安全的检测方法，对急性A S F 是一种快速、经济和敏感性高的一种方法，而对于亚急性和慢性A S F 的敏感性较低，只有4 0；H A 具有很高的特异性和灵敏性，常用于疾病的急性暴发诊断，尤其是在应用其他方法检测为阴性时常用的检测方法；聚合酶链式反应(P C R)具有及时、快速、准确的特点，对于任何毒力的毒株以及H A 方法不能诊断的毒株都能检测，在疾病的检测、诊断和根除计划中起着很重要的作用。吴忆春1 1 6 研制了敏感性可达0 1f g 的快速检测A S F V P C R 试剂盒，并且I g G 与猪伪狂犬病病毒、猪瘟病毒(疫苗株)、猪圆环病毒2 型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪乙型脑炎病毒、猪细小病毒、健康猪和蜱的基因组无交叉反应。邬旭龙在分子生物学的基础上，利用环介导等温扩增快速、简便的特性，建立了一种快速检测非洲猪瘟病毒L A M P 方法。抗体检测常用补体结合反应、琼脂扩散试验、间接免疫荧光技术、酶联免疫吸附试验(E u S A)等方法。A S F V 感染猪7d 左右即可检出I g M 和I g G，并且I g G 在感染猪体内能存在数年。蒋正军等【1 8】在国内首次用B a c 价2 作载体表达的非洲猪瘟衣壳蛋白抗原即2 作为间接E H A S 反应的包被抗原，建立了非洲猪瘟的E L I S A 检测方法，并对我国的A S F血清学进行了调查，没有阳性结果，这与我国实际情况相符。董志珍等【1 9 建立了检测血清中非洲猪瘟抗体的竞争法E L I S A，结果表明，E L I S A 竞争法特2 0 0 7 万方数据山西农业科学2 0 1 7 年第4 5 卷第1 2 期异性高，无交叉反应，灵敏度高于间接免疫荧光法，可用于猪血清的非洲猪瘟抗体检测。6预防控制我国尚未报道有A S F 的发生，2 0 1 7 年3 月，俄罗斯远东地区伊尔库茨克州发生非洲猪瘟疫情，由于非洲猪瘟病毒的传播速度快、传播媒介多，中俄边境地区野猪的流动和软蜱的存在，对我国构成了严重的威胁，应提高警惕。对A S F V 的感染机制至今不完全了解，保护性免疫反应复杂，目前传统的灭活疫苗、弱毒疫苗、亚单位疫苗和D N A 疫苗不能提供完全有效地免疫保护，无理想的疫苗用于主动或被动免疫 2 0-2”，也无理想的药物可以进行治疗，因此，做好周密的预防和控制计划是预防控制A S F 发生的关键。(1)引种时加强检疫、检测，从无疫区引种；(2)密切关注疫情动态，对与我国相邻的发病国家边境周边地区的蜱类和野猪进行检疫、检测；(3)对来自发病国家的过境车辆、飞机和船舶上需要在港口处理的食物和泔水等要进行无害化处理；(4)严禁进口疫区猪肉及副产品；(5)发现疑似病例，及时向主管部门报告，做到“早、快、严、小”，划定疫点、疫区、受威胁区，调查疫源，对猪群迅速采取封锁、隔离、扑杀、销毁、消毒、无害化处理等强制性措施，迅速扑灭疫病，严防扩散。参考文献：1 王君玮，张维，王华非洲猪瘟病毒分子流行病学进展 J 中国动物检疫，2 0 1 0，2 7(9)：6 5 6 6 2 王华，王君玮，徐天刚，等非洲猪瘟流行病学和诊断方法的研究进展【J 中国兽医科学，2 0 0 8，3 8(6)：5 4 4 5 4 8 13JB A R B A R AES T R A W，J E F F E R YZ I M M E R M A N，S Y L V I ED A L L A I R E，等猪病学 M 9 版北京：中国农业大学出版社，2 0 0 8：3 0 3 3 1 2 4 A N D R I SG，S I M O N M A T E OC，V l l q U E L AE A s s e m b l yo fA f r i c a ns w i n ef e v e rv i r u s：r o l eo fp o l y p r o t e i np p 2 2 0【J】J o u r n a lo fV i r o l o g y，1 9 9 7，7 1：2 3 3 1-2 3 4 1 5 W A R D L E YR，A N D R A D EM，B L A C KDN，e ta 1 A f r i c a ns w i n e2 0 0 8 f e v e rv i r u s J A r c h i v e so fV i r o l o g y，1 9 8 3，7 6：7 3-9 0【6 JB A S T O SAD G e n o t y p i n gf i e l ds”m n so fA f r i c a ns w i n ef e v e rv i r u sb yp a r t i a lp 7 2g e n ee h a r a c t e r i s a t i o n【J】A r c h i v e so fV i r o l o g y，2 0 0 3，1 4 8：6 9 3 7 0 6 1 7JB O S H O F FCI，B A S T O SA DS，G E R B E RLJ，e ta 1 G e n e t i cc h a r a e t e r i z a t i o no fA f r i c a ns w i n ef e v e rv i r u s e s f r o mo u t h g e a k si ns o u t h e r nA f r i c a(1 9 7 3-1 9 9 9)J】V e tM i c r u b，2 0 0 7，1 2 1：4 5 5 5 18JD I X O NLK，W I L K I N S O NPJ G e n e l i cd i v e r s i t yo fA f r i c a ns w i n ef e v e rv i r u si s o l a t e sf r o ms o f tt i c k s(O m i t h o d o r o sm o u b a t a)i n h a b i t i n gw a r t h o g b u r r o w s i n z a r n b i a【J】G e n V i r u l，1 9 9 8，6 9：2 9 8 1 2 9 9 3 9 陈溥言兽医传染病学 M I 5 版北京：中国农业出版社，2 0 1 1：2 1 6 2 1 7 1 0 王君玮非洲猪瘟防控策略探讨 J】兽医导刊，2 0 1 1(1 1)：2 7 2 9 5 1 1 1 王君玮，张维，任炜杰野猪在非洲猪瘟流行中的重要作用【J】现代生物医学进展，2 0 1 2，1 2(1)：1 5 5 1 5 9 1 2 刘建，吴绍强，唐慧林蜱对非洲猪瘟传播作用的研究进展【J】中国媒介生物学及控制杂志，2 0 0 9，2 0(2)：1 7 5 1 7 7 11 3JW I L K I N S O NPJ，D O N A L D S O NA T r a n s m i s s i o ns t u d i e sw i t hA f r i c a ns w i n ef e v e rv i r u s：i n f e c t i o no fp i g sb ym r b o r u ev i r u s 硼J o u r n a lo f C o m p a r a t i v eP a t h o l o g y，1 9 9 7，8 7：4 9 7 5 0 1 1 4 张志诚，黄炯，包静月，等基于“风险邻近”的全球尺度非洲猪瘟发生状况及其输人风险模型构建【J】畜牧兽医学报，2 0 1 l，4 2(1)：8 2 9 1 1 5 翁善钢非洲猪瘟流行病学最新研究进展叨广东畜牧兽医科技，2 0 1 2，3 7(3)：3-5，2 3 1 6 吴忆春非洲猪瘟病毒P C R 检测试剂盒的研制叨中国兽医科学，2 0 1 2，4 2(1 1)：1 1 5 8 1 1 6 2 1 7 邬旭龙快速检测非洲猪痘病毒环介导等温扩增方法的建立【D 雅安：四川农业大学，2 0 1 4 1 8 蒋正军，马世东，蔡丽娟，等非洲猪瘟间接E L I S A 诊断试剂盒的研究【J】中国预防兽医学报，2 0 0 0，2 2(Z)：1 0 7 一1 1 3 1 9 董志珍，肖妍，赵祥平，等检测非洲猪瘟M c A b E L I S A 竞争试剂盒的建立及初步应用【J 1 中国动物检疫，2 0 1 2，2 9(4)：3 7 4 0 2 0 T U L M A NER，R O C KDL N o v e lv i r u l e n c ea n dh o s tr a n g eg e n e so fA f r i c a ns w i n ef e v e rv i r u s【J】C u r rO p i nM i c r u b i o l，2 0 0 1，4：4 5 6-4 6 1 1 2 1JR E I SAL，P A R K H O U S ERM，P E N E D O SAR，e ta 1 S y s t e m a t i ca n a l y s i so fl o n g i t u d i n a ls e r o l o g i e Mr e s p o n s e so fp i g si I l f e c t e de x-p e r i m e n t a l l yw i t hA f r i c a ns w i n ef e v e rv i r u s【J】JG e nV i r o l，2 0 0 7 8 8：2 4 2 6 2 4 3 4 万方数据