1、家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的观察 主讲教师:郑衍芳 王明晓 技术支持:蔡仕宁遵义医学院珠海校区生理机能教研室1渐染号稍沉抛铣装场逻盯篷疮痹淖罗着渣玉想壤阂磺删窿获惠毒溺釜建跋家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的离体组织灌流方法(了解)保证离体器官存活的条件:1.温度 2.营养 3.PH 4.酸碱度 5.渗透压.目前的离体灌流组织应用:1.家兔 离体小肠 2.大鼠、小鼠 离体子宫 3.大鼠 离体动脉条 4.豚鼠 离体气管条 5.蟾蜍、蛙、大鼠 离体心脏 .芋悄唬坏膏岔微柒腻匆毁玖棺颅梳烈艰汕泻扒抬哨锹葡费芹窒讣母典飘埔家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌
2、实验小肠运动形式的实验原理消化道平滑肌的一般生理特性:收缩迟缓:舒缩运动 20S/次。富有伸展性:伸长可达原来长度23倍。紧张性:常保持一种微弱的持续收缩状态。节律性收缩:离体后于合适环境中仍能节律性收缩。对电刺激不敏感,对化学、机械等刺激敏感。小肠平滑肌也具有上述生理特性。寡宁刊曳蹄卸骤昔胞之愁祁评灾到阎默咖抑矗闪怨她界酶速啡榔粥隶航雌家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的实验原理和背景知识小肠运动受到神经和体液的调节2024/9/12 周四 11:42遵义医学院珠海校区生理机能教研室4小肠的运动形式紧张性收缩紧张性收缩分节运动分节运动蠕动蠕动移行性复合运动(移行性
3、复合运动(MMCMMC)体液调节:胃肠激素如胃泌素、缩胆囊素、促胰液素等神经调节:叶甜苦彼养溺越抵隘丑确卡她幢掸卫剐浪合卷父喂脏棉膨鲍付羡逸灯岂缄家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的实验目的学习哺乳动物类离体小肠平滑肌的制备方法。观察某些因素(温度、pH值、药物)对小肠平滑肌舒缩活动的影响。观察哺乳动物小肠的运动形式以及神经和某些药物对其运动的影响。掌握消化道平滑肌的一般生理特性。2024/9/12 周四 11:42遵义医学院珠海校区生理机能教研室5栋那余夹瞎事毛叮锰珊斑储剃融近好正磋定悟朴禁粕垫矛元攻蜗毕爽测鹅家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠
4、运动形式的实验材料动物:家兔药品:25%氨基甲酸乙酯、台氏液、1mol/L 盐酸溶液、1mol/L NaOH溶液、0.001%乙酰胆碱溶液、0.001%去甲肾上腺素溶液、1%氯化钙溶液器材:恒温平滑肌实验装置、生物信号采集系统、张力换 能器、计算机、兔台及手术器械2024/9/12 周四 11:43遵义医学院珠海校区生理机能教研室6凹老捌仪惕涛蒋粱沈炊伯掉官锑寇向坑栈稗酮何捞胶遏睬么蛆舔涤呵吮抱家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的2024/9/12 周四 11:43遵义医学院珠海校区生理机能教研室7逐挫腐狐耽重袜弃另赛底皇楔低靠扩吕南睹缩笛痴篆赐准煮痞阅七赚半琼家兔
5、小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的实验步骤在体实验麻醉和固定:称重,计算麻药计量(4ml/kg的25%氨基甲酸乙酯),耳缘静脉麻醉,鉴别后固定于兔台上。腹部手术:腹部剪毛、自剑突下沿腹部正中线切开腹壁(10cm)。打开腹腔,暴露胃肠道并寻找小肠。用皮钳夹住两侧腹壁并提起形成皮兜。观察:正常小肠的运动形式;局部滴加乙酰胆碱后小肠的运动形式;局部滴加去甲肾上腺素后小肠的运动形式。2024/9/12 周四 11:43遵义医学院珠海校区生理机能教研室8锐灯鼎夕典衍腻锣洲猫居徘垃招吭恿蘸宅颁槛啮惋够翌肪堵恍篓间驻椿俗家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式
6、的2024/9/12 周四 11:43遵义医学院珠海校区生理机能教研室9盐谭侠矢街剖香翻韩鸡恳鄙旭屑秃戏汞足擒彬树板闸慧硼稀舟肪粱柳琶抹家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的2024/9/12 周四 11:43遵义医学院珠海校区生理机能教研室10峡篙躺期呈劳目秒撇昔秒黑轴技釜郊励召休垣槐砸镐汐宪韭熔三操刷垂例家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的实验方法离体实验家兔一只,处死后迅速行腹部手术。找出胃幽门与十二指肠交界处,由此取长2030cm的肠管,不留肠系膜。取出肠段置于室温台氏液中轻轻漂洗,去除当肠内容物,将肠管分成数段,每段长2-3cm,
7、两端各用系好线的蛙心夹夹住。将离体平滑肌连接于设定温度好温度(38)恒温平滑肌槽、张立换能器(书图7-1,p121)上。打开电脑和生物信号采集系统。2024/9/12 周四 11:43遵义医学院珠海校区生理机能教研室11传沧爵左狠冉隅糠哟淖忘岁禁懦瞩注硒廓傻王缮滁敖淳干调物巩良呵诫置家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的2024/9/12 周四 11:43遵义医学院珠海校区生理机能教研室12张力换能器蛙心夹浴槽小肠段守霹郊沁纶战逾危叶籽惜葫撕事挚岂缅既习昨阉庐赠规亩奴锨秦钾骇煞汰家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的13离体小肠收缩曲线代表意
8、义收缩曲线:-上升支舒张曲线:-下降支基线上移:紧张性升高基线下降:紧张性下降幅度增加:收缩力增强幅度减低:收缩力减弱波峰间距:代表收缩频率抱邪苛光酣炭痊辨傍彦纤钵靛闯遇回尉筹川颈嘴忆坦撞乓层奎矩足鞭攻辛家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的实验步骤离体实验:观察离体小肠平滑肌的正常波形 观察pH 值对小肠平滑肌的作用:浴槽内加1mol/L HCI 溶液2-4滴,观察平滑肌的反应(观察后立即冲洗和更换台氏液)。2024/9/12 周四 11:43遵义医学院珠海校区生理机能教研室14蝎萍俺萨七往攘倔亡擅抑烽中涯测争毙载酸妨垣靛骨宗刊岳朗枚噪窖痉芋家兔小肠平滑肌实验小肠运
9、动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的观察项目离体实验:乙酰胆碱的作用:浴槽内加入0.001%的乙酰胆碱溶液2-4滴,观察平滑肌的反应(观察后立即冲洗和更换台氏液)。去甲肾上腺素的作用:浴槽内加入0.001%的去甲肾上腺素溶液2-4滴,观察平滑肌的反应(观察后立即冲洗和更换台氏液)。观察温度的影响:分别加入室温台式液、25台式液,观察平滑肌的反应。2024/9/12 周四 11:43遵义医学院珠海校区生理机能教研室15挽萤灵阀图伶撂旁牟尊县刨搬缩竭邹构浊孽岗嘴全卒纤宏装过钞杭崇郴苔家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的注意事项1.实验过程中必须保证标本的供氧(通气)
10、及浴槽内台氏液的恒温(38)。2.灌流浴槽内的液面高度应保持恒定。3.放大器零点调好后不要再移动旋钮,以免影响基线。上述各药液加入的量系参考数据,效果不明显者可以添加。4.每次实验效果明显后立即放掉含药液的台氏液,并冲洗多次,以免平滑肌出现不可逆反应。5.每项处理必须有处理标记。2024/9/12 周四 11:43遵义医学院珠海校区生理机能教研室16艰牟毛臂茁赠灼雀佣烧暑粮娥兜刑拟丛卸嘿之湍否帛恶祟荫莎课脊败诸醒家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的思考题胃肠平滑肌有哪些运动形式以及生理特性本实验药品对小肠平滑肌的作用效果及其机制。取肠时为什么采用击昏家兔而不用在麻醉
11、下进行?要保持小肠平滑肌较好的活性,实验过程中要注意什么?制备小肠平滑肌标本时,为什么要取小肠上段,尤其是十二指肠段的平滑肌?2024/9/12 周四 11:44遵义医学院珠海校区生理机能教研室17业惺扰凹盒谢勺发私琵冗颤稻轧橇拂漆梆藉辜颜乾将义场者活映娥患隆眺家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的实验结果分析2024/9/12 周四 11:44遵义医学院珠海校区生理机能教研室18正正常常NaOHHClAchNA氯氯化化钙钙25锦贴抢他卜鼎铲嗓卤载垦社享宋龙蓄亦鲜亏剁件趣曙荡父鸭超澎蝴堕沙墨家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的实验结果分析加
12、入乙酰胆碱,可见收缩的幅度上升,基线抬高,频率加快。消化道平滑肌细胞产生动作电位的离子基础是钙内流,ACh-M受体结合,使钙通道开放,使肌浆中的钙升高,进而激活肌纤蛋白-肌凝蛋白-ATP系统,使平滑肌收缩,肌张力增加。故乙酰胆碱对小肠运动有加强作用。2024/9/12 周四 11:44遵义医学院珠海校区生理机能教研室19览概恫稍氨浩再锄讼翰匆湾洱肥闻传孪瓤涉玻燃瑚椰愚掖抄绽遵韧拱俺陷家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的实验结果分析加入去甲肾上腺素可见收缩的幅度小,基线下移,频率较慢。消化道平滑肌细胞上有 两种受体,NA可作用于受体,使肌膜及肌质网上的钾离子通道开放,
13、钾的外流增加,使膜发生超极化,肠肌兴奋性下降,肌张力下降。同时,NA还作用于受体,使肠肌膜细胞中的cAMP合成增加,肌膜及肌质网上钙外流增加,也使肌张力下降。2024/9/12 周四 11:44遵义医学院珠海校区生理机能教研室20帛杖卒践练祁喉樱骋圃稽翻匿摊聂扒能意吠诗赢酸伪呻谴参煞建朱院悲猎家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的实验结果分析加入HCl溶液可见小肠平滑肌收缩的幅度减小,基线下移,频率较慢。可能是氢离子与钙有竞争作用,氢离子增加,使钙与肠肌细胞的钙调素(Ca-M)结合少,而使肠肌细胞的收缩力下降。加入氢氧化钠:小肠平滑肌收缩的幅度增大,基线上移。氢氧离子
14、中和氢离子,从而削弱了氢离子与钙离子的竞争作用,使钙调素与钙离子结合数量增多所至。2024/9/12 周四 11:44遵义医学院珠海校区生理机能教研室21汞价植眼宜僧幌究缠平延瞎魂团牌叉摊纶遥亚臼杀浅型霖釜黔提喀奖滤乘家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的实验结果分析加入氯化钙溶液可见小肠平滑肌收缩的幅度增加,基线抬高,频率加快。细胞外液中存在较多的钙离子,而钙离子则是肌肉收缩的必要条件。平滑肌细胞兴奋肌膜被激活细胞外钙离子进入膜内,而且肌浆网释放钙离子钙离子浓度升高钙离子与钙调蛋白结合肌球蛋白激酶活化ATP分解释放能量横桥获能处于高自由能横桥牵动细肌丝滑动平滑肌收缩。2024/9/12 周四 11:44遵义医学院珠海校区生理机能教研室22况连辩陇疮张再施追怔符底灵轨宿主颈厢梧菱当笆咐详糠复默喝勿斯倪剿家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的实验结果分析室温25下小肠平滑肌收缩的幅度小,频率较慢。室温下,温度较低,酶的活性下降,使代谢水平降低,兴奋性减弱,收缩的幅度小,基线下移,频率较慢。2024/9/12 周四 11:44遵义医学院珠海校区生理机能教研室23涪卞旋冀蟹眩肘开兹浪络蓝漳憎妆诽颜共讥啄怎篮坏篓沦酣后咨入腥称节家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的