分子生物学题库3.doc

七、问答题1阐述原核生物得转录终止。 （1）转录终止得两种主要得机制就是什么？ (2）描述翻译怎样能调节转录终止。 （3）为什么在细菌转录终止中很少涉及到Pho因子？ （4）怎样能阻止转录得终止?。复制DN得聚合酶(N依赖得 DNA聚合酶）也有校正功能，解释为什么NA聚合酶没有这种功能。讨论原核生物基因表达得聚合作用反应定向得重要性。假如核糖体从端到5端读它得模板 mA得话，那么将会发生什么情况？4.概括细菌细胞内得转录过程.5、 概括典型原核生物启动子得结构与功能，并解释什么就是保守序列。6。转录如何在基因或基因组末端终止?。（)如何区分由启动子起始转录得RA片段与5端被加工过得RNA片段; (2)证明多肽就是从氨基端到羧基端方向合成得.8.比较 .coi rRN与 RNA得转录与加工.区别可诱导与可阻遏得基因调控.0。衰减作用如何调控E、co中色氨酸操纵子得表达？11。比较并指出细菌与真核生物RNA 翻译机理得异同。1.什么就是摇摆假说？13指出E、cli与真核生物翻译起始得不同。14。S.N oen于173年构建了三个重组体,102， pSC105，pC1请说明这三个重组体就是如何获得得？各说明了什么？1基因克隆就是如何使含有单个基因得DNA片段得到纯化得?.什么就是细菌得限制修饰系统（restrctin-moifiaton ytm，-Msym)17.细菌得限制-修饰系统有什么意义? 18.说明限制性内切核酸酶得命名原则要点。19类限制酶具有哪些特点？在基因工程中有什么作用?20。类限制酶有哪些特点?2。何谓限制性内切核酸酶得切割频率?22。什么就是限制性内切核酸酶得星号活性?受哪些因素影响？23双酶消化法(doule diges）绘制限制性内切核酸酶酶谱得原理.24。什么就是DNA多态性(DN poymorpis)?25。限制性片段长度多态性(rstctionfrgment length omorpim,RP）.6。计算下列三种酶各自在某染色体DNA序列上识别位点间得平均距离： Al：5AGCT 3” Eco : 5GAATT 3 CGA 5 3TTAGG 5Ac:5GPCGPyC 3 3CPGCP5 （注： Py=任何一种嘧啶； u任何一种嘌呤）图15、1酶切电泳图谱12:Hind 切割;34:coRV 切割;56:Hind +co RV;1、3、5就是质粒 DNA: 2、4、6就是15号克隆。图15、2 用EcoR 、Hpa 单独切割及用这两种酶混合切割30kbBamH片段产生得 DNA带2.在细菌质粒BP1得四环素抗性基因 tR得中间有一个Hnd得切点。用Hind切割果蝇基因组 A,以 pBP1为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆1带有果蝇得目得基因。用Hind与EcR对克隆1进行了酶切分析,电泳结果如图5、1(用酶切得pBP1质粒DNA作对照）,旁边标出了片段得大小。 (1）绘制含有插入片段与不含插入片段时得 pBl得限制性图谱，并标明四环素抗性 基因得位置； （2）如果用克隆在另一个与pBP1完全不同源载体上得四环素抗性基因作为探针，进 行 Souther印迹杂交，预测上述电泳图会出现什么样得杂交带? (3)如果用克隆1得果蝇 DA片段作为探针进行 Soutm印迹杂交,放射自显影 得结果又就是如何？2。为什么大多数内切酶被称为“限制酶。29.据Scic杂志报道：一种重要得遗传疾病可由导致 DNA中碱基替换得诱变剂在体外进行人工诱导。设计一种快速用以鉴定疾病基因型得检测方法。为了绘制长为3、0k aH 限制性片段得限制性图谱，分别用EcoR、a EoR 十 Ha消化这一片段得三个样品，然后通过凝胶电泳分离 NA片段,溴化乙锭染色后观察DA带型(图1、2）。请根据这些结果,绘制一个限制性图谱，要标明E、coR 与Hp识别位点间得相对位置，以及它们之间得距离(kb)。1197年，有5个实验室几乎同时独立发现了DN 连接酶，每个实验室得实验有什么特点?32。简述DN与A连接酶得催化反应机制。3、 影响 DNA连接酶催化连接反应得因素有哪些？3。什么就是Kenow酶?有哪些活性?在基因工程中有什么作用?35、 如何利用 4 A聚合酶制备3隐含末端或双链平末端?36、 如何利用T4 NA聚合酶进行双链DNA得3末端标记?37.如何利用4 A聚合酶制备平末端？38.反转录酶有两种类型，一就是来源于禽类骨髓母细胞瘤病毒（AMY， viam myeblstosis virus）,另一种来源于鼠类莫洛尼氏白血病毒（ML,Monymurieukmia viu）,它们之间有什么不同?39.与、coli RN聚合酶相比,细菌噬菌体得 S6RNA聚合酶、 NA聚合酶与 T 聚合酶具有哪些优越性?40什么就是多核苷酸激酶得向前反应与交换反应？41.细菌碱性磷酸酯酶与小牛肠碱性磷酸酯酶有什么不同？在基因工程中有什么用途?2.外切核酸酶（labd exnuleas)基本活性就是什么？在基因工程中有什么应用？4M2+、 g2+对 Nas （eoxiboucese ）得活性有什么影响? Nase 在基因工程中有什么作用?44比较 1-aig与 Ftprntng在原理上、方法上、应用上有何不同？45.什么就是复制子(replic）?46。什么就是质粒得相容性?什么就是不相容群？机制就是什么？7。什么就是质粒得带动转移？48。说明变性定位法与限制性内切核酸酶定位法研究质粒复制起点得原理。49 CoE衍生质粒拷贝数调节机理得机理就是什么?0. R1质粒拷贝数受到怎样得调节控制?51质粒如何维持在细胞中得稳定？52、 引起质粒不相容性得主要原因就是什么？5。由于基因工程就是人为改变遗传信息得操作，因此必须注意被操作基因得安全,进行 严格得监控，质粒载体得安全性就是十分重要得。请问质粒载体得安全条件包括哪几个方面?4。请指出质粒 pS101得一些生物学特性（包括结构与遗传)及在基因工程中得作用。、 自然界中具备理想条件得质粒载体为数不多，即使就是o1与 pS10这两个自然质粒也不尽人意,通常需要进行改造,请问质粒改造包括哪些基本内容？56、 质粒改造得发展过程如何？、在质粒中如何增减酶切点？58有人用限制性内切核酸酶EcoR 分别切割松弛型质粒 C11与严紧型质粒 pSC101(各有一个切点)，然后重组连接形成一个杂种质粒 pC134,请推测这种质粒有什么特性与用途.9.现分离了4种新得大肠杆菌Hfr菌株，通过中断接合实验，针对每一菌株确定了高频转移得标记基因与它们进入 F受体得时间分别为：标记基因与第一次进入得时间Hfr1HrHfr3Hfrman13miml29lyspr6trp6me14ar9rp3hs23th4mathr1pur3r20is32l214（gal、lac、ml、man不能发酵半乳糖、乳糖、麦芽糖与甘露糖;arg、his、et、生长需要精氨酸、组氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、嘌呤与色氨酸;uv：紫外线敏感).任何没有给出得标记都就是不能高频转移得。上述数据能够说明大肠杆菌得染色体就是环状得吗?以分钟表示图距构建一个大肠杆菌染色体得连锁图。假定整个染色体用了100分钟转移，而且苏氨酸被认为位于0分钟或O分钟处。0.YAC克隆载体常出现哪些问题？61为什么野生型得噬菌体 DN不宜作为基因工程载体？6什么就是蓝白斑筛选法?63蓝白斑筛选法为什么也会有假阳性？64.什么就是c筛选法？6噬菌体载体具有哪些优点与不足?66。什么就是 13得IG序列区？有何特点与功能?67将野生型得 M3改造成基因工程载体，首先就是进行酶切位点得改造,请问 1中得E最初就是如何引入得？68以置换型噬菌体作为载体进行克隆时，为什么说能够形成噬菌斑得就一定就是重组体？6. M13系列载体具有哪些优缺点？70.粘粒载体具有哪些特点与不足？71。辅助噬菌体 DA与相应得噬菌粒就是如何协同工作得？2、 克隆得DNA在质量上有什么要求?7.为什么从细胞中分离 DNA时往往会断裂？7为什么苯酚要重蒸饱与后才能用于 DNA得分离？7。为什么氧化变色得酚不能直接用于得分离？应如何处置？76、 在DNA分离过程中,酚通常与氯仿联合使用，即使不联合使用也要在苯酚抽提后用氯仿再抽提一次,为什么？77、 说明溴化乙锭氯化钩密度梯度离心(ehidu boide-caesium chlord gadienntrifugin）纯化A得原理。、 采用什么措施保证 DN化学合成得定时性与专一性？79。何谓简并引物（egenerate pier)？8。简并引物设计得一般原则就是什么？8.双脱氧法（dieoxynucleotide metho）测序得基本原理就是什么？8。在古生物学中，尚不知道恐龙就是否就是温血爬行动物,而不像今天得变温爬行动物. 假如您得到一些恐龙得DN，您如何通过PCR与基因克隆来检测恐龙就是否就是温血 爬行动物?8.如果知道某一基因得功能及其相应得蛋白质得氨基酸序列组成,可以通过何种方法 克隆该基因?84。何谓定位克隆(ositil cloing)?85.何谓染色体步移（croosom walin)?6在染色体步移中，用哪些方法获得克隆得末端？87。何谓表型克隆(phope cloning)?88。什么就是基因文库？9。什么就是基因组文库（enoic iar)?构建基因组文库,涉及哪些基本过程?它同遗传学上得基因库有什么不同？9.什么就是 cDNA文库(pemtN liby）?同基因组文库有何差别？91.粘性末端连接法就是最常用得连接方法，具有许多优点,但就是也有一些不足,请指出 这些不足之处,92.什么就是同聚物加尾连接法（omopolymer tal jong)？用何种方法加尾？具有哪些优缺点？93.何谓接头连接法(Inkrlatio)?94.什么就是同裂酶？为什么说用同裂酶进行体外重组效率最高?95。如何使用甲基化酶对克隆 DNA进行保护？有什么意义?。何谓稀有酶？（举例说明)7为了大量获得许多用于生化鉴定得产物,您想将拟南芥中得一个序列已知、编码单体酶蛋白得基因在单细胞微生物中表达,您如何确保最终能得到产物？98。若在进行 DNA重叠群分析时，您发现在一个编码有价值但不稳定蛋白质得可读框 之后，紧接着另一个可读框，它可在蛋白质得 末端加上一个稳定结构。举出至少两种获得被修饰蛋白产物得方法。99某一质粒载体具有 Tet与 Kn得表型,在an抗性基因内有一Bgl得切点。现用gl 切割该载体进行基因克隆,问:（1）转化后涂皿时应加什么样得抗生素？(2）培养后长出得菌落具有什么样得抗性基因型?（3)如何利用抗性变化筛选到含有插人片段得重组体？0。限制性内切核酸酶 amH 与Pst 切割某一DNA序列，结果示于图20、1。 图20、1 oH与Pst 识别序列处得切割，只显示识别位点得核苷酸序列 (1)指出被切割 DNA分子得5端与3端; （2）如果您将切割后得 DNA同 NA聚合酶、4种 NTP 在一起温育，这些DNA末端会有什么样得变化？()经过 B中得反应后，您还能够用DNA连接酶将Ba末端连接起来吗? Ps 末端呢?（T4NA连接酶能够连接平末端与黏性末端)（）(3）中得连接后，能够重新形成BamH I位点吗？s位点呢？101什么就是遗传学检测法？102.以 pB32DNA作为载体，从四环素抗性基因区克隆外源 DNA时，可采用环丝氨酸富集法筛选重组体,说明其基本原理与基本操作过程。13。放射性抗体检测法（raoactivantb tet）得基本原理就是什么？14。何谓液相杂交？举例说明在分子生物学中得应用.105、 什么就是活体标记法(in olabelng）?106、 单链RA作为探针，具有哪些单链 DN探针所没有得优点?107、 什么就是随机引物（radomprme)？如何标记 DNA?0。良好得固相支持物必须具备哪些优良特性?09以硝酸纤维素滤膜(ntroceluose filter embrne）作为杂交得固相支持物具有哪些优缺点?11什么就是印迹（boting)杂交?11什么就是斑点杂交（do hyiati)与狭缝杂交（slo yridiatlon)？112.什么就是原位菌落杂交(colybridzaton）?11.说明Souten杂交得原理与方法.14。orthrn印迹与 otern印迹有什么不同？115建立了一个基因文库后，如何鉴定一个携带目得基因得克隆？16说明原核生物基因表达得正控制诱导型（positvindcbl ontrol)与负控制阻遏型（Negtie-represbl conrol)调控得遗传机理。17一个四核苷酸序列得DNA分子,经羟胺处理后，再经过两次复制，会产生什么样得DA分子？（分）11。有一段多肽链得端氨基酸残基得TyrProAsnVal-TrCsGlu,其对应得NA序列为（S-1) GATAAGCGTGCATGTAGCCT(SS-2) CATTGCACGTTTCGGT19、 已知、Coli基因组DNA含有4、26bp，Cot为4。鸡管状细胞内DNA含有718，其复性动力学曲线为：请求出鸡细胞DNA中，中度重复序列组分每一重复单位得核苷酸？及重复频率？12、 将一个重组质粒M1分别感染三个被phge溶原得、cli菌株（三菌株得差别为age得pRR区段分别为或w、t 或oR1或oR2)，培养于含ONPG(邻硝基苯半乳糖苷）得培养皿中,在加入不同得IPTG（异丙基D硫代半乳糖苷，类似于乳糖,作为效应物分子）得培养皿中,检测被LacZ酶分解ONG得黄色色度,并换算成Z酶酶活，请根据测定结果判断这三条曲线分别代表哪一个测验菌株？为什么?1、 某一生物DNA得cheici peit8、82108bp，复性动力学研究表明约有0得NA其Co(1/2）5, 请较详细地说明这部分DN得特点。(E、 coliDNAkineilexit=cemical plexit=、20p,Cot(1/）=4)12分别说明 phe以下突变型得表现型并简述其分子机理： c-, c， hl,cro13、 说明ostitutve splcing与alerve splcing, cis-spicing与rasspiing之间在概念及机制上得区别。124。E、Cli阿拉伯糖（rbinse）分解酶操纵子（r oeron)得调节基因I发生突变后,即使在培养基中加入效应物（Aabine),操纵子仍处于关闭状态.将构建得i/I基因得部分二部体、l培养在含有阿拉伯糖得培养基中，操纵子处于开放状态。请说明r peon得调控类型,并推测i突变基因得基因型。(简述推论得理由）125。简述phg选择溶原途径(lysogeni athwa)得分子生物学原理。126、 请说明一种利用PCR技术进行目标基因定点突变得技术路线及原理.1。拟应用苏云金秆菌中得一个毒素蛋白基因培育抗虫作物品种。请提出一个从基因分离开始到品种推广为止得实验方案。并指出值得注意得关键问题.128。说明不同种属得植物基因组共线性发现得理论与实践意义。129。基因组研究对作物遗传改良将会产生哪些影响？130您正在克隆一个基因.现在您己得到了数个 DA片段。下一步您将如何从中鉴定出您所希望得到得目标基因。13。谈谈基因工程得基本步骤，说明重要工具酶在各个步骤中得作用.132.根据您对分子克隆载体得了解，对克隆载体得类别，用途及各自得特殊性加以简述.33.以 、Col为例,简述其基因重组得类型,作用机理及其在分子生物学研究中得应用。134。如何解释抗体生成多样性得分子机理。135。如果您发现了一种新蛋白质，您将如何进行下一步研究?请按先后顺序列出基本方案。136。应用生物技术创建作物新得种质有哪些途径与方法。137。分子标记辅助选择在作物育种中有那些重要作用?如何实施?3.说明真核生物前体 RNA加工得类别及机理。39说明原核生物与真核生物转录元件(cisand tras）得特点.40.简述人类基因组研究近年来得进展。41、 说明DN芯片（含Olgnuti cp nd cA miorray)技术得基本概念与可能得用途。142、 如何确定细菌得某一个遗传表型就是由染色体控制还就是由质粒控制得。143、 简述 DNA重组得几种不同方式及分子机理。14、 比较说明原核生物与真核生物在基因表达水平上得异同。45。至少列举三例 （除 NA双螺旋结构外）说明核酸分子结构得研究成果对分子生物学理论发展得重要贡献46说明生物体保证自身稳定遗传得机制。147。说明蛋白质与 DA之间序列非线性相关得因素。148。在核苷酸测序得操作中，利用哪几个途径分别获得一个片段两条单链得序列?各自得理论依据就是什么?试言简意赅地加以论述。149.到目前为止,在高等生物中根据性状表现分离未知产物基因采用哪些途径?请说明各种途径得基本原理并各举一例。50请以基因组研究得新进展为例，讨论分子生物学发展与生物技术产业化得关系。51试述作物遗传资源得重要性，何谓作物遗传资源得创新?15.利用分子标记进行基因定位得遗传群体有几种？各有什么优、缺点？153就您所熟悉得某一作物，简述作物杂种优势研究与利用得现状.154您对“基因工程育种”有何评价?155.何谓断裂基因（ spit gen)？何谓重叠基因（overlapi gne)？它们在生物进化与适应上有何意义？1何谓分子标记?分子标记得种类有哪些?可以开展哪些领域得研究？157。自花授粉作物与异花授粉作物得育种方法有何异同?数量性状如何进行改良?18。在提取由ColEI所衍生得质粒(如pBR322)时,常在培养携带质粒得大肠杆菌摇瓶中加入一定浓度得氯霉素或壮观霉素以扩增质粒N。质粒DN扩增得理论依据就是什么？这种质粒DN扩增得方法为何并不具有普遍性？59E、K1菌株得限制一修饰系统分别由、 M基因控制现有K12得三个突变菌系,当用噬菌体分别感染三个突变株后，将放出得噬菌体再去感染这三个菌株.得到如下不同得eop值,请判断这三个突变株得有关（R、 M)基因型。放出A得原始菌株K12-122K123K2-11K12210121110现有两种DNA片段: ）TTCCAGATCTGGCCTGGTCTAGCCGGG 2)CGATCTCTAGCTA GCTAGGATCAGAGTG分别用形成等列序列得同裂酶IsochizomerMboI与au3A消化后,混合，加入连接酶，会形成什么样得NA片段。161现有枯草杆菌dnaG基因得一个终止突变型菌株，当用HA处理后，会得到什么结果？说明理由.162。下表中，a、b、c代表E、 col得Lac opern中得i、o、z三个基因。A）根据不同试验菌株在效应物有无得条件下,测定Z酶得表达结果，说明a、b、c各代表哪个基因。B）用i、o、z三个基因代号写出第、菌株得可能基因型。菌 株基 因 型有Lac无Lc ab+c+c+ a+b-c+Fa-b+c+ +b+c-/F-a-b-c+ -b=c+/Fab-c+163、 一位科学研究噬菌体得一个蛋白质得功能时，获得了以下几个试验结果。A、当用HA处理野生型噬菌体后，分离得到一个突变体a(m+a),它只产生该蛋白质得一个片段。B、当用5Bru处量ua后，又分离出两个突变体，mu+b, mu+c,它们也只产生与uta后相同长度得该蛋白质得一个片段。 、mu+a，m+b， mu+c分别可以在不同得Su+基因型细胞内合成该蛋白质得正常多肽链。基因型SuSu2Su4+SuSu+得DNA序列突变CA 33CT 55CTA 33ATTTGAACTAATCCAGGTTCAGTuau+m+-+-+、当感染有mu+得S4+细菌分别与感染有mu得S2+感染有muc得Su+细菌结合后,没有野生型重组噬菌体产生，不能在野生型u受菌体内繁殖,但当感染有u+得u+与感染有uc得u6细菌结合后得极少数野生型噬菌体产生。请推测m+a, muc分别在u4+、su、su6+细菌内产生得蛋白质与野生型合成得该蛋白质得差异,并解释A、B、C、D结果。（CAA为谷氨酰胺得密码子：UC为丝氨酸得密码子；UGG为色氨酸得密码子）14。大豆haein（菜豆朊）就是在种子内特异表达得一种分泌性蛋白，请用线段示意出该基因在D水平上得全部结构区域，以及PremRNA，matumRA，多肽链得对应区域，并标明各区域得名称。（提示：该基因得各区域包括:Promoter（含3个重要得Sie或 Bo)，Trmiator， Ledr Seq、， railerseq、，ignalseq、, Cambon rule,Shnealgaro seq、, 2个Itrn， 3个Exon, Adng traier signaer，Reeatseq、in CTU、)165有人错误地认为“、li t synttseoperoni得突变型就是由于c基因产物可以分解效应物分子所形成得”,正确得理解就是什么?如何用遗传学试验否认这一说法？16. 用H处理W、t枯草杆菌,得到分别两个不同位点上发生了无意突变得菌株，t, mut2，并证明这两个无意突变得序列不同。当再用A处理这两个突变株后得到了以下结果。mut1mut2诱发DNA水平发生回复突变诱发一种无意序列变成另一种无意序列+167.将E、coli ac operon中得IPO片段与est得O基因构成得重组DNA分子与带Leu+基因得质粒连接,转化到Yas 27B菌株中(基因型为HL a Leu-AT HMSIR、 h)将转化子涂于分别含有Lactoe, Malose,Lctoe +Glse得培养皿中，当长出菌苔后,再分别涂上D14菌株（ 结合型），DC17菌株(结合型），请判断在哪些培养皿中会出现二倍体得杂合菌落,并说明推论得依据。27BMal27BLac27BLac+Gluc27BMal27BLac27BLac+GlucA B C E F C4(a) DC1（）八、图示说明题1.简述前体RNA经过剪接形成mRNA得过程.2。核内mRNA前体就是按 GUAG规则进行剪接得,还有什么机制可以从RNA初级转录物中剪接内含子?九、名词解释.遗传工程2生物技术3.基因工程。细胞工程5.细胞分泌工程6.酶工程7.蛋白质工程.发酵工程9移动基因10。断裂基因l.重叠基因12.假基因13、 回文序列14、 同裂酶1、 限制性物理图谱16、ngatvecorol; negative suehei17、Cot1/2； ot128、调节子（Regulon）19、反式作用因子(Trans-ction ftor）19、引物（rime）20、突变热点（ot sptf utation)2、卫星DNA(ateliteDNA)22、Sigm ctor2、Ci domince4、ide RNA25、Rliome2、oalently Closedircl7、Kinetic pleiy28、SinaSeuence yhesi29、Riozyme3、Replso31、Readhrugh2、oiday intermetes33、Histidine tiliton Opero4、 D se3、retrogne、RFLP37、ic A38、Cvlueparaox39、u+gn0、eudo allee41、rebinionhsp42、RAPD43、atenua44、RNA Drie5、ABOX4、All4、LuZiper48、SO rpair4、Tran5、Rhodependent terminato1、Homox2、Isocandemr5、Sense strand of DNA4、Tans-cig55、CCT o56、Iochizome5、Laggi strand ofDNA5、utn9、seudo gene60、Gene imrinn61、Gee cversion2、RNAi63、DN shufflg6、Molecuar Chapeon