尼氏染色.pptx

尼氏染色生理心理教研室一 尼氏染色法n尼氏染色法是德国病理学家F.Nissl（）于年创立的。n碱性染料染色，发现神经元胞体中的尼氏体。二 神经细胞的尼氏体 n尼氏体（Nissl body）：是胞质内的一种嗜碱性物质，广泛见于各种神经元，但其形状大小和数量则各有差异。n在电镜下观察，尼氏体主要由平行排列的粗面内质网和多聚核糖体组成。尼氏体的主要功能是合成蛋白质，作为神经活动时所需，如细胞中的某些成分的更新以及产生神经递质有关的蛋白质和酶类。轴突端的蛋白质大都来自胞体的尼氏体。神经元在兴奋传导过程中，不断消耗某些蛋白质物质，尼氏体可合成新的蛋白质以补充这种消耗。三 尼氏染色的优势n以往显示神经元尼氏体多采用苏木精-伊红染色方法,此法虽然也能观察到胞质中嗜碱性颗粒,但结构不甚清晰,胞核、核仁、尼氏体颗粒模糊,分界不清,轴突、树突难以辨认。n在尼氏染色中尼氏体清晰可辨,胞核、核仁也非常清晰,而且很容易区分轴突和树突,收到了既可辨认器官又可同时观察细胞质特殊结构的效果。尼氏染色中尼氏体受染后呈块状(形如虎斑)或颗粒状,核周围尼氏体颗粒较大,近边缘处较小而细长,如在生理情况下,尼氏体大而数量多,反映神经细胞合成蛋白质的功能较强,在神经元受损时,尼氏体的数量可减少甚至消失。四 尼氏染色的应用n观察神经元内的细胞结构；n通过尼氏染色后对尼氏体的观察来了解神经元的损伤；n检验实验动物脑区损毁或埋藏电极的位置五 尼氏染色步骤1切片脱脂，程序如下：二甲苯I（5min）-二甲苯II（5min）-100%酒精I（2min）-100%酒精II（2min）-95%酒精（2min）-80%酒精（2min）-70%酒精（2min）2切片浸入蒸馏水过洗，约1min；3切片染色：将切片浸入工作染液中，室温下1020min；4切片入蒸馏水水洗5切片再依次浸入70%、80%、95%的酒精中，每次约12min；6切片如特殊分色液中分色7切片浸入100%酒精I，II，各2min8切片浸入二甲苯I，II，透明各2min9树脂胶封片。