广东药学会讲稿3月.pptx

中国药典中国药典20052005版一部简介版一部简介 广东省药品检验所 陆惠文 510180历版中国药典版本版本中药材中药材中成药中成药合计合计1953195319631963197719771985198519901990199519952000200020052005656544644688288250650650950952252253453458258246*46*19719727027020720727527539839845845856411111164364311521152713713784784920920992992114611462005 Ch.pn2005年版中国药典分为一、二、三部n一部凡例、正文、附录三部分n一部药材及饮片、植物油脂和提取物、成方制剂和单味制剂 2005 chp 收载 新增 修订 删除n一部品种(种)1146 154 453 3n一部附录(个)98 12 48 1n薄层鉴别 1523项 用于定量45项n高效液相定量 479种 涉及518项n气象色谱定性或定量47种 凡凡 例例 2005 Ch.pn 中国药典一经国务院药品监督管理部门颁布实施，上版或同品种原标准即同时停止使用。除特别注明版次外，中国药典均指现行版中华人民共和国药典凡例凡例 2005 Ch.p 凡例是解释和使用中国药典正确进行质量检定的基本指导原则，并把与正文品种、附录及质量检定有关的共性问题加以规定。凡例中的有关规定具有法定的约束力 附录中收载的指导原则,是为执行药典、考察药品质量、起草与复核药品标准所制定的指导性规定 凡例凡例 2005Ch.pn名称及编排n项目与要求 (标准规定)n检验方法和限度n对照品、对照药材、对照提取物、标准品n计量 n精确度n试剂、试药、指示剂n动物试验n说明书、包装、标签凡例凡例 2005Ch.pn对照品、对照药材、对照提取物、标准品系指用于鉴别检查含量测定的标准物质.n对照品(不包括色谱用的内标物质)、对照药材、对照提取物与标准品均由国务院药品监督管理部门指定的单位制备标定与供应.n 除另有规定外,对照品应置五氧化二磷干燥器中干燥12小时以上使用.11种对照提取物名单n对照提取物 广藿香油 木香挥发油 乌灵菌粉 发酵虫草菌粉 穿龙薯蓣皂苷提取物 总银杏酸 黄山药皂苷提取物 银杏叶提取物 温莪术油 薄荷素油 檀香油凡例凡例 2005 Ch.pn动物试验所用的动物及其管理应按国务院有关部门颁布的规定执行.n动物品系.年龄.性别应符合药品检定要求n随着药品纯度的提高,已有准确的化学和物理方法或细胞学方法能取代动物试验进行药品质量检测的,应尽量采用,以减少动物试验制剂通则制剂通则 丸剂丸剂 2005Ch.p n丸剂蜜丸（大、小）、水蜜丸、水丸、糊丸、蜡丸和浓缩丸n删除微丸n丸剂应检查【水分】【重量差异】【装量差异】或【装量】【溶散时限】【微生物限度】制剂通则制剂通则 丸剂丸剂 2005Ch.pn装量以重量标示的多剂量包装丸剂，照最低装量检查法检查，应符合规定。n明确规定：包糖衣丸应检查丸芯的重量差异并符合规定,包糖衣后不再检查重量差异.其他包衣丸应在包衣后检查重量差异。凡进行装量差异检查的单剂量包装丸剂，不再进行重量差异检查制剂通则制剂通则 丸剂丸剂 2005Ch.pn修改重量差异检查，增加以10丸为一份的检查方法：丸重0.015g以上,一次服用量最高数超过10丸的丸重0.015g及0.015g以下，一次服用量不足10丸的制剂通则制剂通则 散剂 2005Ch.pn散剂的定义中引入提取物概念；n内服散剂应为细粉，儿科用及外用散剂应为最细粉；n含有毒性药、贵重药或药物剂量小的内服散剂应单剂量包装；制剂通则制剂通则 散剂 2005Ch.pn散剂应检查 【粒度】【水分】【装量差异】或【装量】【无菌】或【微生物限度】n用于烧伤或严重损伤的外用散剂应检查粒度、无菌制剂通则制剂通则 颗粒剂 2005Ch.p n颗粒剂系指药材提取物或药材细粉制成具有一定粒度的颗粒状物,分为可溶、混悬、泡腾颗粒剂 制备时可加入矫味剂和芳香剂；为防潮、掩盖药物的不良气味也可包薄膜衣，必要时包衣颗粒应检查残留溶剂。颗粒剂应密封,在干燥处贮存,防止受潮 制剂通则制剂通则 颗粒剂 2005Ch.pn颗粒剂应检查 【粒度】【水分】【溶化性】【装量差异】或【装量】【微生物限度】制剂通则制剂通则 颗粒剂 2005Ch.p溶化性检查：取一袋（多剂量包装的取10g），加热水200ml，泡腾颗粒 取一袋,置盛有200ml水的烧杯中,水温为15-250C,应能迅速产生气体而成泡腾状,10分钟内颗粒应完全分散并溶解在水中 均不得有焦屑等异物制剂通则制剂通则 片剂片剂 2005Ch.p n 片剂压制或用其他适宜的方法制成的圆片状异型片状的制剂，有浸膏片、半浸膏片和全粉片。片剂以口服普通片为主，另有含片、咀嚼片、泡腾片、阴道片、阴道泡腾片和肠溶片等压片前的颗粒应控制水分，以适应制片工艺的需要,并防止成品在贮存期间发霉、变质。制剂通则制剂通则 片剂片剂 2005Ch.pn根据需要可加入矫味剂、芳香剂和着色剂等附加剂n为增加稳定性,掩盖药物不良气味,可包糖衣或薄膜衣,必要时薄膜包衣片应检查残留溶剂n片剂应检查 【重量差异】【崩解时限】【微生物限度】n阴道片照融变时限检查法检查,不做崩解时限n阴道泡腾片检查【发泡量】制剂通则制剂通则 片剂片剂 2005Ch.p重量差异：糖衣片的片芯应检查重量差异，其他包衣片应在包衣后检查重量差异并符合规定；阴道泡腾片发泡量检查 取25ml具塞刻度试管(内径1.5cm)10支，各精密加水2ml，置37水浴中5分钟后，各管中分别投入供试品1片，密塞，20分钟内观察最大发泡量的体积，平均发泡体积应不少于6ml，且少于4ml的不得超过2片。制剂通则制剂通则 贴膏剂贴膏剂 2005Ch.p贴膏剂：橡胶膏剂、巴布膏剂、贴剂贴膏剂指药材提取物、药材或药物与适宜的基材制成供皮肤贴敷的片状外用制剂 n贴膏剂必要时可加入透皮促进剂、表面活性剂、保湿剂、防腐剂、抗氧剂等n若涂布中使用有机溶剂的必要时检查残留有机溶剂制剂通则制剂通则 贴膏剂贴膏剂 2005Ch.pn橡胶膏剂橡胶膏剂含膏量检查照第二法，检查耐热含膏量检查照第二法，检查耐热 试验，试验，黏附力测定第二法黏附力测定第二法，重量差异；，重量差异；n巴布膏剂巴布膏剂含膏量检查照第一法，应做赋形性含膏量检查照第一法，应做赋形性试验，试验，黏附力第一法黏附力第一法，重量差异；，重量差异；n贴剂贴剂黏附力测定第二黏附力测定第二、三法三法，重量差异，微，重量差异，微生物限度。生物限度。制剂通则制剂通则 胶囊剂 2005Ch.p 胶囊剂可分为硬胶囊、软胶囊（胶丸）和肠溶胶囊等。硬胶囊剂的填充物可以是粉末、细小颗粒、小丸、半固体或液体；肠溶胶囊系指不溶于胃液，但能在肠液中崩解或释放的胶囊剂。n酒剂n应检查总固体、甲醇量、装量、微生物限度n修订总固体检查第一法：加入适量硅藻土，使含糖和蜜蜂的酒剂易于干燥。操作时要注意：蒸发皿干燥、恒重操作时应预先放置一玻棒，加入的硅藻土应预先经1050C干燥3小时。制剂通则制剂通则 酒剂酒剂 2005Ch.p制剂通则制剂通则 膏药剂膏药剂 2005Ch.pn定义：膏药系指药材、食用植物油与红丹（铅丹）或官粉（铅粉）炼制成膏料，摊涂于裱背材料上制成的供皮肤贴敷的外用制剂。前者称为黑膏药，后者称为白膏药。n膏药剂应检查软化点和重量差异n【软化点】照膏药软化点测定法测定，应符合各品种项下的有关规定。制剂通则制剂通则 注射剂 2005Ch.pn注射剂分类：注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液。n溶液型注射剂应澄明。n乳状液型注射剂应稳定，不得有相分离现象，不得用于椎管注射；n静脉用乳状液型注射液分散相球粒的粒度90%应在1m以下，不得有大于5m的球粒。n静脉输液应尽可能与血液等渗.制剂通则制剂通则 注射剂 2005Ch.pn配制注射剂时，可根据药物的性质加入适宜的附加剂。如渗透压调节剂、pH值调节剂、增溶剂、抗氧剂、抑菌剂、乳化剂等。n所用附加剂应不影响药物疗效，避免对检验产生干扰，使用浓度不得引起毒性或过度的刺激。n抗氧剂有亚硫酸钠、亚硫酸氢钠和焦亚硫酸钠，一般浓度为0.1%-0.2%；制剂通则制剂通则 注射剂 2005Ch.pn抑菌剂为0.5%苯酚、0.3%甲酚、0.5%三氯叔丁醇等。n多剂量包装的注射液可加适宜的抑菌剂，抑菌剂的用量应能抑制注射液中微生物的生长，加有抑菌剂的注射液，仍应用适宜的方法灭菌n静脉输液与脑池内、硬膜外、椎管内用的注射液均不得加抑菌剂。除另有规定外，一次注射量超过15ml的注射液，不得加抑菌剂。制剂通则制剂通则 注射剂 2005Ch.pn生产过程中应尽可能缩短注射剂的配制时间，防止微生物与热原的污染及药物变质。静脉输液的配制过程更应严格控制。n制备乳状液型注射液过程中，应采取必要的措施，保证粒子大小符合质量标准的要求。n注射用无菌粉末应按无菌操作制备制剂通则制剂通则 注射剂 2005Ch.pn灌装标示装量不大于50ml的注射剂时，应适当增加装量。除另有规定外，多剂量包装的注射剂，每一容器的装量不得超过10次注射量，增加装量应能保证每次注射用量。n加有抑菌剂的注射剂，在标签上应标明所加抑菌剂的名称与浓度；注射用无菌粉末应标明所用溶剂。制剂通则制剂通则 注射剂 2005Ch.pn注射剂应检查以下项目:n装量或装量差异 凡规定检查含量均匀度的注射用无菌粉末，不再检查重量差异n可见异物检查n不溶性微粒检查(用于静脉注射)n有关物质检查n无菌检查n热源或细菌内毒素检查（用于静脉注射）制剂通则 凝胶剂 2005 Ch.p 凝胶剂系指药材提取物与适宜的基质制成的具凝胶特性的半固体或稠厚液体制剂,按基质不同,可分为水性凝胶与油性凝胶 水性凝胶的基质为水、甘油或丙二醇与纤维素衍生物、卡波姆和海藻酸盐、西黄蓍胶、明胶、淀粉等;油性凝胶的基质由液状石蜡与聚氧乙烯或脂肪油与胶体硅或铝皂构成制剂通则 凝胶剂 2005 Ch.pn必要时可加入保湿剂、防腐剂、抗氧剂、透皮促进剂等附加剂.n凝胶剂应避光密闭贮存,并应防冻n凝胶剂 应检查【装量】【微生物限度】制剂通则 2005 Ch.p搽剂、洗剂、涂膜剂：均为外用液体制剂鼻用制剂：鼻用液体制剂、鼻用半固体制剂、鼻用固体制剂眼用制剂：眼用液体制剂、眼用半固体制剂 固态药物形式包装另备溶剂茶 剂：块状茶剂、煎煮茶剂、袋装茶剂 制剂通则 2005 Ch.p n流浸膏剂、浸膏剂 n气雾剂、喷雾剂 锭 剂 合 剂 胶 剂 栓 剂 酊 剂 露 剂 糖浆剂 煎膏剂 滴丸剂 凝胶剂 软膏剂 膏药剂附录增订检测方法 2005 Ch.pn毛细管电泳法 n铅、镉、砷、汞、铜测定法 n粒度测定法 可见异物检查法n膏药软化点测定法 贴膏剂黏附力测定法n细菌内毒素检查法 灭菌法n电感耦合等离子体质谱法n中药质量标准分析方法验证指导原则n中药注射剂安全性检查法应用指导原则附录主要修订项目 2005 Ch.pn 修订29个 删除灰屑检查法,n紫外-可见分光光度法n原子吸收分光光度法 薄层色谱法n高效液相色谱法 农药残留量检查法n注射剂中不溶性微粒检查法n浸出物测定法 鞣质含量测定法紫外-可见分光光度法 2005 ch.pn用于含量测定一般有以下三种方法n对照品比较法 CX=(AX/AR)CR 吸收系数法（E1%1Cm）通常应大于100 比色法 删除计算分光光度法原子吸收分光光度法 2005 ch.p n原子吸收分光光度法的测量对象是呈原子状态的金属元素和部分非金属元素。n原子吸收遵循分光光度法的吸收定律，通常通过比较标准品和供试品的吸收度，求得供试品中待测元素的含量。原子吸收分光光度法 2005 ch.pn测定法n第一法（标准曲线法）以每一浓度3次吸收度读数的平均值为纵坐标、相应浓度为横坐标,绘制标准曲线n第二法（标准加入法）原子吸收分光光度法 2005 ch.p 线性图薄层色谱法 2005 ch.p2005 ch.pn定义：供试品溶液点于薄层板上，在展开容器内用展开剂展开，使供试品所含成分分离,所得图谱与对照物图谱对比,并可进行薄层扫描,用于鉴别、检查或含量测定的方法。n市售薄层板 分为普通薄层板和高效薄层板。n自制薄层板 在保证色谱质量的前题下，如需 对薄层板进行特别处理或化学改性，以适应供 试品分离的要求也可用自制薄层板。薄层色谱法 2005 ch.p2005 ch.pn薄层色谱扫描仪 系指用一定波长的光照射在薄层板上，对薄层板上分离出来的在紫外和可见光区有吸收的斑点，或经激发后能发射出荧光的斑点进行扫描，将扫描得到的图谱和积分数据用于物质定性或定量的分析仪器薄层色谱法 2005 ch.p2005 ch.pn 操作方法（略）n 系统适用性试验 按各品种项下要求对实验条件进行适用性试验，即用待测样品和对照品对实验条件进行试验和调整，应达到规定的检测灵敏度、分离度和重复性要求n 分离度：R=2R=2（d d2 2-d-d1 1）/(W/(W1 1+W+W2 2)n 重复性：RSD3.0%RSD3.0%；需显色后测定的RSD5.0RSD5.0%n 鉴别 检查 薄层色谱法 2005 ch.p2005 ch.p 含量测定 照薄层色谱扫描法，测定供试品中相应成分的含量。n薄层色谱扫描测定时可根据不同薄层扫描仪的结构特点，按照规定方式扫描测定，一般选择反射方式，采用吸收法或荧光法。n方法：单波长扫描或双波长扫描，内标法与外标法。薄层色谱法 2005 ch.p2005 ch.pn薄层色谱扫描法应注意的问题：n1、除另有规定外，含量测定应使用市售薄层板。2、必要时可适当调整供试品溶液的点样量。3、供试品与对照品应同板点样，展开，扫描，测定和计算。薄层色谱法 2005 ch.p2005 ch.p 4、薄层色谱扫描用于含量测定时，采用线性回归二点法计算。如线性范围窄时，可采用多点法校正多项式回归计算；5、交叉点样，供试品点样不得少于2个，对照品每一浓度不得少于2个；6、扫描时应沿展开方向扫描，不可横向扫描。高效液相色谱法 2005 ch.p2005 ch.p修订内容和特点：p明确了HPLC方法的几种分离机制，为分类应用提供了基础；p明确了数据处理系统（色谱工作站）作为色谱信号记录;p增加了色谱柱、检测器、流动相的内容，适应快速发展的、日趋成熟的HPLC技术的要求。高效液相色谱法 2005 ch.p2005 ch.pn高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。注入的供试品，由流动相带入柱内，各成分在柱内被分离，并依次进入检测器，由数据处理系统记录色谱信号。n高效液相色谱法的主要分离机制有吸附、分配、离子交换和排阻作用高效液相色谱法 2005 ch.p2005 ch.pp除另有规定外，HPLC法选用的柱温为室温，检测器为紫外吸收检测器。n检测器还有二极管阵列检测器、荧光检测器、示差折光检测器、蒸发光散射检测器、电化学检测器和质谱检测器等。高效液相色谱法 2005 ch.p2005 ch.pn不同的检测器对流动相的要求不同。n例:采用紫外检测器，所用流动相应至少符合紫外-可见分光光度法项下对溶剂的要求；采用低波长检测时，还应考虑有机相中有机溶剂的截止使用波长，并选用色谱级有机溶剂。n蒸发光散射检测器和质谱检测器通常不允许使用含不挥发盐组分的流动相。高效液相色谱法 2005 ch.p2005 ch.p流动相 由于C18链在水相环境中不易保持伸展状态，故对于十八烷基硅烷键合硅胶为固定相的反相色谱系统，流动相中有机溶剂的比例通常不应低于5，否则C18链的随机卷曲将导致组分保留值变化，造成色谱系统不稳定。高效液相色谱法 2005 ch.p2005 ch.pn正文中各品种项下规定的条件除固定相种类、流动相组成、检测器类型不得改变外，其余如色谱柱内径、长度、固定相牌号、载体粒度、流动相流速、混合流动相各组成的比例、柱温、进样量、检测器的灵敏度等，均可适当改变，以适应具体的色谱系统并达到系统适用性试验的要求。n须用特定牌号填充剂方能满足分离要求的，可在该品种项下注明高效液相色谱法 2005 ch.p2005 ch.pn色谱系统的适用性试验通常包括分离度、理论板数、重复性和拖尾因子等四个指标。其中，分离度和重复性是系统适用性试验中更具实用意义的参数。n按各品种项下要求对色谱系统进行适用性试验，如达不到要求，可对色谱分离条件作适当的调整。铅镉砷汞铜测定法一 2005 ch.pn一、原子吸收分光光度法n用原子吸收分光光度法测定中药中有害元素铅、镉、砷、汞、铜n铅、镉的测定（石墨炉法）n砷的测定（氢化物法）n汞的测定（冷吸收法）n铜的测定（火焰法）铅镉砷汞铜测定法二 2005 ch.pn二电感耦合等离子体质谱法n用电感耦合等离子体质谱仪测定中药中有害元素砷、镉、铅、汞、铜。n仪器由等离子体电离部分和四极杆质谱仪组成。铅镉砷汞铜测定法三 2005 ch.pn要检测5种有害元素的品种 甘草 白芍 西洋参 黄芪 限度:铅百万分之5 镉千万分之3 砷百万分之2 汞千万分之2 铜百万分之20水分测定法 2005 chpn第一法 烘干法适用于不含或少含挥发性成分 的药品n第二法 甲苯法适用于含挥发性成分的药品n第三法 减压干燥法适用于含挥发性成分的贵重药品n第四法 气相色谱法酸败度测定法 2005 chpn酸败是指油脂或含油脂的种子类药材，在贮藏期间发生复杂的化学变化，产生游离脂肪酸、过氧化物和低分子醛类、酮类等分解产物，因而出现特异臭味。n检查酸值、羰基值和过氧化值药材的酸败程度。农药残留量测定法 2005 ch.pn采用气相色谱法测定药材或制剂中部分有机氯、有机磷和除虫菊酯类农药。n检测有机磷农药12种：硫磷 乐果 氧化乐果 甲基对硫磷 敌敌畏 久效磷 乙硫磷 马拉硫磷 杀扑磷 甲胺磷 二嗪农 乙酰甲磷胺 n除虫菊酯类农药：顺式氯氢菊酯 氰戊菊酯 溴氰菊酯注射剂有关物质检查法 2005 ch.pn检查蛋白质、鞣质、树脂、静脉注射液还要控制草酸盐、钾离子、n列入注射剂的必检项目甲醇量检查法 2005 chpn用气相色谱法检查酒剂中的甲醇量的方法n要求甲醇、乙醇及内标物质峰的分离度符合规定n限度修改为0.05%（ml/ml）浸出物测定法 2005 chpn水溶性浸出物测定法分为冷浸法和热浸法；n醇溶性浸出物以各品种项下的规定浓度的乙醇代替水作为溶剂；n挥发性醚浸出物测定法；n新版药典不设甲醇浸出物测定及正丁醇提取物测定等。鞣质含量测定法 2005 chpn鞣质含量测定应避光操作n采用比色法n对照品为没食子酸，用水作溶剂，磷钼钨酸显色剂，标准曲线法，在760nm的波长处测定吸收度。n测定法：先测总酚，再测不被吸收的多酚，n鞣质含量总酚量不被吸收的多酚量n2000版药典五倍子、地榆、石榴皮测定鞣质含量电感耦合等离子体质谱法n仪器包括以下部件:进样系统 电感耦合等离子体(ICP)离子源 质量分析器和检测器组成 实现ICP和质谱的联用,主要用于元素分析与元素价态分析电感耦合等离子体质谱法n定义电感耦合等离子体质谱法是将被测物质用电感耦合等离子体离子化后,按离子的质荷比分离,测量各种离子谱峰的强度的一种分析方法n等离子体是由自由电子、离子和中性原子或成分组成,总体上成电中性的气体,其内部温度高达几千度至一万度电感耦合等离子体质谱法n测定过程样品由雾化器雾化后由载气携带,从等离子体焰炬中央穿过,迅速被蒸发、电离并通过离子引入接口或采样锥导入到质量分析器,样品在极高温度下完全蒸发和解离n用途仅适用于元素分析n电离的百分比高,该条件下化合物的分子结构已被破坏,因此几乎对所有的元素均有较高的检测灵敏度,膏药软化点测定法n用于测定膏药在规定条件下受热软化时的温度情况,按照规定的方法膏药因受热下坠达25mm时的温度n用于检测膏药的老嫩程度,并可间接反映膏药的黏性中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 目的 2005 ch.pn质量标准分析方法验证目的：证明采用的方法适合于相应检测要求 方法验证用于：建立药品质量标准时 工艺变更 处方变更时 原分析方法进行修订时 中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 项目 2005 ch.pn需要验证的项目:鉴别试验 限量检查 含量测定 中药制剂中其他需控制成分的测定 (如残留物、添加剂等）中药制剂溶出度、释放度等检查中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 方法比较 2005 ch.pn现行方法 2005版药典一部方法 回收率 准确度（回收率）仪器精密度 精密度(重复性中间精密度 重复性 重现性)专属性 检测限 定量限 线性关系和 线性 线性范围 范围和耐用性 中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 准确度 2005 ch.p n一、准确度一、准确度(Accuracy)n指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率(%)表示。用于定量分析 加样回收测定的方法 在已知被测成分含量的供试品中,再精密加入一定量的已知纯度的被测成分对照品,依法测定,用实测值减去供试品中的量,再除以加入对照品的量计算加收率中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 准确度 2005 ch.p 报告的数据：实测值 供试品中待测成分量 对照品加入量计算:回收率%=（C-A）B 100%数据要求：3个浓度，9个数据 或同一浓度6个测试结果 计算相对平均标准偏差（RSD%）或可信限中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 准确度 2005 ch.p 注意:加样回收试验一般中间浓度对照品的加入量与所取供试品被测成分含量之比约为1:1 供试品中被测成分的量与对照品的加入量之和必须在线性范围内中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 精密度 2005 ch.pn二、精密度二、精密度（Precision）n指在规定的测试条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。n一般用偏差、标准偏差或相对标准偏差或可信限表示。中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 精密度 2005 ch.p精密度包括以下三个方面的含义。重复性重复性(Repeatability)(Repeatability)取同一浓度的样品 用6个测定结果或3个浓度9个测定结果中间精密度中间精密度(Intermediate precision)(Intermediate precision)不同日期、不同人、不同设备重现性重现性(Reproducibility)(Reproducibility)不同实验室的复核检验，得出重现性结果中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 专属性专属性 2005 ch.p n三、专属性三、专属性（Specificity）n专属性系指在其他成分可能存在下，采用的方法能正确测定出被测物的特性。n1.鉴别应能与可能共存的物质或结构相似化合物区分 阴性不干扰试验n2.含量测定和限量检查以不含被测组分的供试品试验，说明方法的专属性中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 专属性 2005 ch.p 鉴别:应提供显微鉴别、色谱鉴别或光谱鉴别等图象或图谱说明其专属性n含量测定与限量检查:色谱法、光谱法等应附代表性图谱并标明相关成分在图谱中的位置,必要时可采用二极管正列检测或质谱检测,进行峰纯度检查中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 检测限检测限 2005 ch.p n四、检测限四、检测限（Limit of Detection，LOD)n系指试样中被测物能被检测出的最低量。n1.直观法用一系列已知浓度供试品进行分析,试验可能被可靠检出的最低浓度或量n可用于非仪器方法也可用于仪器分析方法中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 检测限检测限 2005 ch.p 2.信噪比法仅适用于能显示基线噪音的分析方法.即把已知低浓度供试品测出的信号与空白样品测出的信号进行比较,算出能被可靠检测出的最低浓度或量,一般以信噪比为3:1或2:1时相应浓度或注入仪器的量确定检测限数据要求附测试图谱，说明测试过程和检测限结果检出限例：银杏酸检出限测定0.05mg/ml进样10ul(0.5 g)响应值大于3s0.005mg/ml进样30ul(0.15g)响应值约等于3s中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 定量限定量限 2005 ch.p五、定量限五、定量限（Limit of Quantitative,LOQ）指供试品中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果应具一定准确度和精密度。用于限量检查和定量测定方法研究时，应确定定量限。中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 线性线性 2005 ch.p 六、线性（Linearity）在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。可用一贮备液经精密稀释,或分别精密称样制备一系列供试样品的方法进行测定,至少5个浓度的样品以测得的响应信号作为被测物浓度的函数作图,观察是否呈线性,再进行线性回归中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 线性线性 2005 ch.p 数据要求：回归方程、相关系数、线性图测得响应值样品浓度 中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 范围范围 2005 ch.p 七七.范围（范围（Range）能达到一定精密度、准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。范围应根据分析方法的具体应用和线性、准确度、精密度结果及要求确定.对有毒药、特殊功效的成分,其范围应大于被限定含量的区间.溶出度或释放度中溶出量的范围应定为限度的20%中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 范围范围 2005 ch.p 建议考察值：含量标示为1-10%，考察的范围为30%30%；含量标示小于1%，考察的范围为50%50%；生马钱子 含士的宁应为1.20-2.20%1.20-2.20%建议考察范围0.84-2.86%0.84-2.86%马钱子粉 含士的宁应为0.78-0.80%0.78-0.80%建议考察范围0.39-1.23%0.39-1.23%中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 范围范围 2005 ch.p 实验项目限度范围含量测定标示量90-110%90-110%80-120%80-120%杂质检查限度值限度值的50-120%50-120%溶出度限度值限度值的20%20%含量均匀度测试浓度测试浓度的70-130%70-130%中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 耐用性耐用性 2005 ch.p 八、耐用性八、耐用性（Robustness）在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度，为把方法用于常规检验提供依据。开始研究分析方法时，就应考虑其耐用性。如果测试条件要求苛刻，则应在方法中写明。经试验,应说明小的变动能否通过设计的系统适用性试验,以确何方法有效 中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 耐用性耐用性 2005 ch.pn典型的变动因素有:被测溶液的稳定性,样品提取次数、时间等.n液相色谱中典型的变动因素有流动相的组成比例、pH值,不同类型的色谱柱、柱温、流速等n气相色谱的变动因素有不同品牌的色谱柱、固定相、担体、柱温、进样口和检测器温度等n薄层色谱的变动因素有不同厂牌的薄层板、点样方法、展开温度和相对湿度等的变化中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 2005 ch.p中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 2005 ch.p n与国际协调方法接轨（ICH）n规范中药分析方法验证的实验内容n中药质量标准分析方法验证指导原则对分析方法验证的项目、内容、实验方法和数据要求更为规范和严格。n该原则收载了ICHICH分析方法验证的全部项目，中药质量标准分析方法验证中药质量标准分析方法验证 2005 ch.p ICH人用药品注册技术规范国际协调会 I International nternational C Conference on onference on H Harmonization of Technical Requirements armonization of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for for Registration of Pharmaceuticals for Human UseHuman Use中药注射剂安全性检查法应用指导原则 2005 ch.pn为确保中药注射剂临床使用的安全性和制剂质量可控性而定。n检查限值可按以下项目内容要求进行研究。异常毒性检查 降压物质检查 过敏反应检查 溶血与凝聚检查 热原检查 细菌内毒素检查 中药注射剂安全性检查法应用指导原则 2005 ch.p收载的几种检查方法 异常毒性检查法 降压物质检查法 过敏反应检查法 溶血与凝聚检查法 热原检查法 细菌内毒互检查法 中药注射剂安全性检查法应用指导原则 2005 ch.pn1.1.异常毒性检查异常毒性检查n制定本检查限值前,需先求得中药注射剂单次给药的半数致死量（LD50）和最低致死量（LD5），并了解其毒性反应症状。给药途径为静脉注射或其他注射途径，观察时间为72小时或更长。n如中药注射剂静脉注射按常规速度（0.05-0.1ml/s）每只小鼠0.8ml,20只仍未见死亡或毒性反应，可以该剂量作为异常毒性检查限值。中药注射剂安全性检查法应用指导原则 2005 ch.pn2.2.降压物质检查降压物质检查n确定供试品对麻醉猫能否引起血压下降及降压值与剂量间的相关性。n小剂量注射液一般根据临床用药剂量估算供试品的剂量限值。n大剂量中药注射剂如静脉注射原液2ml/kg剂量未见降压反应,此剂量可以作为给药限值。n凡有可能产生类组胺样急性降血压反应的静脉注射剂均应进行降压物质检查。中药注射剂安全性检查法应用指导原则 2005 ch.pn3.3.过敏反应检查过敏反应检查n观测供试品对豚鼠腹腔注射（或皮下注射）和静脉给药急性毒性反应。n根据豚鼠毒性反应剂量和临床反应剂量确定豚鼠致敏剂量和攻击剂量。一般致敏以腹腔注射为主,攻击以静脉注射为主.中药注射剂安全性检查法应用指导原则 2005 ch.pn预试验应取至少9只豚鼠，分3组，三次致敏后，在首次致敏日后14日、21日、28日进行攻击以确定攻击或抗体滴度试验,以确定最佳反应时间。n必要时，预试验采用半成品进行致敏和攻击研究，以确定该注射剂成分和工艺有无致敏的可能性。如无,可考虑不进行过敏反应检查.中药注射剂安全性检查法应用指导原则 2005 ch.pn4.溶血与凝聚检查n观察供试品原液和稀释液有无溶血和凝集反应,按溶血和凝聚检查法试验,同时设供试品管,如为阳性反应，应测定无反应的最小稀释度，结合该药品临床用法用量,以确定检查稀释限值。中药注射剂安全性检查法应用指导原则 2005 ch.pn5.热原检查n家兔热原检查剂量应为人用每公斤体重每小时最大供试品剂量的1-3倍n供试品若非等渗,应进行调整n热原检查剂量不应使家兔体温下降或产生毒性反应,由此而干扰热原检查时,应采取缓慢注射等措施,如仍不能消除干扰,应尽可能采用内毒素检查法中药注射剂安全性检查法应用指导原则 2005 ch.pn6.细菌内毒素检查n其限值按细菌内毒素检查法要求确定,由于工艺成分复杂可变因素多等原因,计算限值时可根据临床用药情况作必要调整,适当提高限值要求n由于中药注射剂干扰因素多,研究时应尽可能使用不同厂家、品牌的鲎试剂进行干扰试验,如干扰较大应采用热原试验.品种情况一.鉴别 2005 Ch.pn药材及饮片n项目 总数 修订 新增 删除n显微 346 3 33 2n理化 172 0 9 68nTLC 342 10 114 0nGC 0 0 0 0nHPLC 5 0 5 0 nUV 12 0 0 1n总计 877 13 161 71品种情况 一.鉴别 2005 Ch.pn植物油脂和提取物鉴别n项目 总数 修订 新增 删除n显微 0 0 0 0n理化 15 0 0 3nTLC 15 0 9 0nGC 0 0 0 0nHPLC 0 0 5 0 nUV 1 0 0 0品种情况 一.鉴别 2005 Ch.pn成方制剂和单味制剂鉴别n项目 总数 修订 新增 删除n显微 290 170 34 1n理化 107 1 5 65nTLC 1165 21 539 7nGC 10 0 4 2nHPLC 3 0 2 1 nUV 1 0 0 0n总计 1576 192 584 76品种情况 二.检查 2005 Ch.p 项目 原有(药材+成药)新增(药材+成药)总数(药材+成药)TLC 6+5 1+7 7+12 HPLC 1+0 1+0 2+0 UV 3+0 1+4 4+0氮测定法氮测定法 1+0 0+0 1+0 水分水分 48+0 178+0 226+0 总灰分总灰分 86+0 135+0 221+0酸不溶灰分酸不溶灰分 28+0 130+0 158+0 总计总计 197+5 480+7 677+12品种情况 三.药材含量测定 2005 Ch.pn药材饮片植物油脂和提取物n项目 总数 修订 新增 删除nHPLC 180 15 113 0nTLC 13 0 4 11nGC 14 1 7 0n分光光度法 23 1 12 10n容量法 31 0 5 5n重量法 5 0 1 2n挥发油测定 25 0 2 1n总计 293 17 144 29品种情况 三.制剂含量测定 2005 Ch.pn项目 总数 修订 新增 删除nHPLC 338 30 281 0nTLC 32 3 12 12nGC 23 3 19 0n分光光度法 18 0 3 9n容量法 13 0 3 0n重量法 5 0 1 1n挥发油测定 3 0 0 1n氮测定法 5 1 1 0n总计 482 37 320 23中药材 2005 Ch.pn新增中药材及饮片27个 人工牛黄 山银花 山楂叶 川射干 天山雪莲 天然冰片 云芝 木通 水飞蓟 母丁香 瓦松 西瓜霜 朱砂根 关黄柏 灯盏细辛 红景天 杜仲叶 苦地丁 独一味 穿山龙 贯叶金丝桃 粉葛 黄藤 蜂胶 矮地茶 体外培植牛黄 菝葜中药材 2005 Ch.pn新增饮片6个 大蓟炭 荆芥炭 荆芥穗 荆芥穗炭 炒瓜萎子 绵马贯众炭 新增植物油脂和提取物5种 广藿香油 莪术油 连翘提取物 银杏叶提取物 黄芩提取物 中药材 2005 Ch.pn中药材品种修订情况:黄柏 黄柏 黄皮树Phellodendron chinense 关黄柏 黄檗Phellodendron amurense葛根 葛根 野葛Pueraria lobata(Willd.)Ohwi 粉葛 甘葛藤Pueraria thomsonii Benth金银花 金银花 忍冬Lonicera japonica 山银花 灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides 华南忍冬 Lonicera confuse 红腺忍冬 Lonicera hypoglauca中药材 2005 Ch.p肉苁蓉、紫草紫草品种项下收二个种肉苁蓉 肉苁蓉 Cistanche deserticola 管花肉苁蓉 Cistanche tubulosa紫草 新疆紫草Arnedia euchroma(Royle)Arnedia euchroma(Royle)内蒙紫草 Arnedia guttata Bunge 中药材 2005 Ch.pn中药材药用部位修订情况n三七药用部位由根修订为根和根茎n人参项下删去了山参和生晒山参的定义n细辛药用部位全草修订为用根,删去地上部位n大蓟 地上部分或根地上部分n菊苣 地上部分地上部分或根中药材 2005 Ch.pn增加杂质、水分、酸不溶灰分、灰分的检查:n山药、葛根等炮制项下删去硫磺熏制工艺n将在2005版药典增补本中增加二氧化硫残留量测定法中药材 2005 Ch.pn进行HPLC梯度洗脱的品种有：人参、三七、西洋参、金银花、牵牛子、桑叶等n建立两项HPLC含量测定的品种有：丹参（丹参酮A与丹酚酸B）、甘草、肉苁蓉等中药材 2005