微生物检验实习报告.doc

实 习 报 告

实习名称
食品微生物检验实习
系 别
生物与化学工程系
年级专业
11级食品科学与工程专业
学生姓名
王磊（1140905035）
指导老师
王瑶琼、吴菲菲、黄大川

邵 阳 学 院
2013 年 12 月 10 日

一、实习时间、地点和实习单位
1.实习时间2013年11月18日—12月8日
2.实习地点：3栋104微生物实验室和3栋108无菌室
3.实习单位：邵阳学院生物与化学工程系
二、实习过程概述
11.18动员大会
11.18-20查找资料，制定实习计划表
11.20上交计划表，领器材，清理台面，清洗，烘干，包扎器材
11.21配制细菌培养基 ， 灭菌，倒平板。放入37℃恒温培养箱24h，检验是否灭菌彻底
11.22制备试样 ，十倍稀释，接种 培养
11.23观察，计数，清洗，烘干，包扎
11.24配制察氏培养基，灭菌，倒平板。放入37℃恒温培养箱24h，检验是否灭菌彻底
11．25 制备样品。十倍稀释，接种。培养
11.26观察
11.27观察， 计数，清洗，烘干。包扎
11.28配制察氏培养基，灭菌，倒平板。放入37℃恒温培养箱24h，检验是否灭菌彻底
11．29 制备样品。十倍稀释，接种。培养
11.30观察
12.1观察，
12.2观察
12.3观察
12.4观察，计数，清洗，烘干。包扎
12.5配制乳糖胆盐发酵管，灭菌，配制试样、接种，培养
12.6观察是否冒泡
三、实习内容
检测样品：香干
采样的方法：随机抽样法。
取25g样品，加225ml无菌水研磨均匀，依次进行十倍稀释。
实验原理：配制检验菌种培养基并包扎、消毒、灭菌；正确采集样品，处理样品（稀释、样品滴加、培养）；菌落观察与计数；数据处理、分析。
细菌的检测用LB培养基，酵母菌用察氏培养基，霉菌用察氏培养基，大肠菌群的检测用乳糖发酵培养基和EMB培养基
⑴香干中细菌含量的检测
检样

25g样品+225mL无菌蒸馏水，均质

10倍系列稀释

选择2~3个适宜的稀释度，各以0.3mL量加入灭菌的细菌培养基中均匀涂布

37℃，24h±2h

菌落计数

数据处理分析，报告

数据记录：
表一：样品中细菌的含量

注：每个平板加入0.3mL的稀释液
实验现象结果记录：细菌菌落颜色为白色，比霉菌和酵母菌落都要小，且形状多为圆形，
⑵香干中酵母菌含量的检测

10倍系列稀释
检样

25g样品+225mL无菌蒸馏水，均质

数据处理分析，报告
菌落计数

选三个合适的稀释度，各以0.3mL量加入灭菌的培养基中均匀涂布

28℃

数据记录：

注：每个平板加入0.3ml的稀释液
实验现象结果记录：酵母菌落颜色形状为白色表面细润的菌落，也存在少许红色的菌落

⑶香干中霉菌含量的检测
检样

25g样品+225ml无菌蒸馏水，均质

10倍系列稀释

选2~3个合适的稀释度，各以0.3ml量加入灭菌的察氏培养基中均匀涂布

28±1℃

菌落计数

数据处理分析，报告

霉菌的含量：

注：每个平板加入1ml的稀释液

实验现象结果记录：在孟加拉红培养基上长出的霉菌菌落,霉菌菌落有菌丝,菌落的颜色有灰色、黑色、黄色等。但培养基上除了霉菌菌落以外已有酵母菌菌落，酵母菌菌落为粉红色。
⑷香干中大肠菌群含量的检测

10倍系列稀释
检样
25g样品+225ml无菌蒸馏水，均质
大肠菌群阳性
大肠菌群阴性
产气
不产气
乳糖复发酵
EMB平板分离，镜检
产气
不产气
选三个合适的稀释度，各以1ml量加入灭菌的乳糖发酵管

37±1℃，48h±2h

数据记录：
表四:乳糖发酵管产气产酸现象
稀释度
10-1
10-2
10-3
试管一
产气, 由紫色变为黄色
不产气，由紫色变为黄色
不产气
试管二
产气, 由紫色变为黄色
不产气，由紫色变为黄色
不产气
试管三
不产气，由紫色变为黄色
不产气
不产气
注:各个稀释度加入1ml稀释液，杜氏小管中有气泡说明产气，培养基颜色由紫色变为黄色说明产酸。（溴甲酚紫为酸碱指示剂，pH5.2为黄色，pH6.8时为紫色）
四、实习收获和重要心得体会
首先，这次课程实习，我们主观能动性很大，自主设计实验方案，然后做实验，感觉很好！通过本次实习，我重新温习了微生物实验中基本培养基的制备与灭菌、无菌操作技术、纯培养技术、统计计数技术等主要微生物技术。
其次，对实验操作的一些基本技能得到强化。比如，棉塞的制作、培养基的配制、高压蒸汽灭菌锅的使用、无菌工作台的使用、十倍稀释法等微生物基本实验操作技术。以及独立生产去离子水。
最后，在本次实验中，我们也遇到了些许挫折。比如，实验室器材不够用，导致我们实验有稍许延后，影响实验心情。还有就是实验室器材确实很多，但可以用的很少，找不到自己想要的，也就是说器材管理方面很欠缺。建议加强微生物实验室仪器的管理。

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