液相色谱常见问题.pptx

液相色谱常见问题及解决方法解决方案溶剂的过滤溶剂的过滤溶剂的过滤溶剂的过滤 滤膜类型：滤膜类型：聚四氟乙烯滤膜聚四氟乙烯滤膜：适用于所有溶剂，酸和盐。适用于所有溶剂，酸和盐。醋酸纤维滤膜：醋酸纤维滤膜：不适用于有机溶剂，特别适用于水基溶剂。不适用于有机溶剂，特别适用于水基溶剂。尼龙尼龙6666滤膜：滤膜：适用于绝大多数有机溶剂和水溶液，可以用于强酸，不适用于绝大多数有机溶剂和水溶液，可以用于强酸，不适适 用于二甲基甲酰胺。用于二甲基甲酰胺。再生纤维素滤膜：再生纤维素滤膜：蛋白吸收低，同样适用于水溶性样品和有机溶剂蛋白吸收低，同样适用于水溶性样品和有机溶剂液相色谱容易出问题的部件维护流程图吸滤头单向阀柱塞密封圈线路过滤器手动进样器检测器液相色谱容易出问题的部件单向阀结构单向阀结构抛光面透明塑料垫片宝石球吸液冲程排液冲程出口单向阀进口单向阀泵头流动相单向阀原理单向阀原理吸液冲程排液冲程出口单向阀进口单向阀泵头液相色谱容易出问题的部件故障故障1 1：宝石球粘附于垫片：宝石球粘附于垫片表现：泵无法吸液或排液，流路不通表现：泵无法吸液或排液，流路不通措施：措施：1 1）用针筒抽出口单向阀以产生负压，）用针筒抽出口单向阀以产生负压，使宝石球与垫片分开使宝石球与垫片分开 2 2）拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超声）拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超声波清洗波清洗 单向阀单向阀液相色谱容易出问题的部件故障故障2 2：宝石球或塑料垫片受污导致密封不好：宝石球或塑料垫片受污导致密封不好表现：系统压力波动大表现：系统压力波动大措施：拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超措施：拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超 声波清洗声波清洗单向阀单向阀故障：堵塞故障：堵塞现象：系统压力波动大或压现象：系统压力波动大或压 力偏高力偏高措施：措施：5 5稀硝酸，超声波清稀硝酸，超声波清 洗洗判断依据：关闭排液阀，断开出判断依据：关闭排液阀，断开出口管路，设定流速口管路，设定流速1mL/min1mL/min，如压力如压力33kgf/cmkgf/cm2 2，则可能堵则可能堵塞。塞。线路过滤器线路过滤器排液阀压力传感器线路过滤器流动相液相色谱容易出问题的部件延长柱寿命方法：延长柱寿命方法：延长柱寿命方法：延长柱寿命方法：倒冲柱倒冲柱倒冲柱倒冲柱 换过滤片换过滤片换过滤片换过滤片 修补柱头修补柱头修补柱头修补柱头 液相色谱容易出问题的部件液相色谱容易出问题的部件柱的补修柱的补修分 析 柱 的 维 护1、在使用新柱之前，最好用强溶剂在低流量下(0.2-0.3 ml/min)冲洗 30 mins，长时间未用的分析柱也要同样 处理2、定期使用强溶剂冲洗柱子3、使用缓冲盐时，要先用低浓度含水有机溶剂冲洗，再用纯有机溶剂冲洗4、净化样品5、分离条件6、不使用时，要盖上盖子，避免固定相干枯7、使用预柱8、避免流动相组成及极性的剧烈变化9、避免压力脉冲的剧烈变化液相色谱容易出问题的部件脱气：脱气：除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡 气泡对测定的影响：气泡对测定的影响：1 1）泵中气泡使液流波动，改变保留时间和峰面积）泵中气泡使液流波动，改变保留时间和峰面积 2 2）柱中气泡使流动相绕流，峰变形）柱中气泡使流动相绕流，峰变形 3 3）检测器中的气泡产生基线波动）检测器中的气泡产生基线波动其他问题