金黄色葡萄球菌的生物学特性省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx

金黄色葡萄球菌生物学特征及判定关键点第1页1.形态与染色：2.培养特征：金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上经典菌落为金黄色，周围有显著溶血环，部分菌落也可呈灰白色或柠檬色。在高盐甘露醇平板上呈淡黄色。革兰氏阳性，成单、双、短链接或不规则葡萄状排列。革兰氏阳性，成单、双、短链接或不规则葡萄状排列。第2页3.生化反应：n金黄色葡萄球菌：触酶（+）、DNA酶（+）、血浆凝固酶（+）、分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和甘露醇。4.判别关键点：第3页4.1 金黄葡萄球菌与表皮葡萄球菌及腐生葡萄球菌判别：试验试验金葡金葡表葡表葡腐生腐生血浆凝固酶+-甘露醇发酵+-新生霉素敏感 敏感（S）敏感（S）耐药（R）DNA酶+-第4页4.2葡萄球菌与微球菌判别：试验试验葡萄球菌葡萄球菌微球菌微球菌形态球型，葡萄状以四联为主，且菌体较大葡萄糖O/FFO或-呋喃唑酮敏感（S）耐药（R）第5页4.3葡萄球菌与链球菌判别：葡萄球菌葡萄球菌链球菌链球菌排列以葡萄状为主以链状为主形态圆形椭圆形触酶+-第6页4.4主要凝固酶阳性葡萄球菌判别：金葡金葡中间型中间型家畜家畜溶血+-甘露醇发酵+-透明质酸酶+-+第7页5.葡萄球菌常规判定流程：革兰氏阳性球菌触酶葡萄糖发酵链球菌科血浆凝固酶微球菌金黄色葡萄球菌凝固酶阴性葡萄球菌第8页6.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测（MRSA）n临床和试验标准化研究所（临床和试验标准化研究所（CLSI-简称简称NCCLS）对）对MRSA判定标准作了修改，取消用苯唑西林对判定标准作了修改，取消用苯唑西林对MRSA检测。现用头孢酊检测，判定标准以下：检测。现用头孢酊检测，判定标准以下：nMRSA:头孢酊：头孢酊：20mm为敏感，为敏感，19mm为耐药为耐药（用（用K-B法）法）MRSA对各种光谱强效抗菌药品呈多重对各种光谱强效抗菌药品呈多重耐药性，耐药性，MRSA表明对全部青霉素，头孢霉素，碳青表明对全部青霉素，头孢霉素，碳青霉烯类及霉烯类及-内酰胺药内酰胺药/-内酰胺酶抑制剂类抗生素耐内酰胺酶抑制剂类抗生素耐药。一旦被药。一旦被MRSA感染，对临床治疗是非常棘手问题，感染，对临床治疗是非常棘手问题，已引发人们高度重视。已引发人们高度重视。第9页7.血浆凝固酶试验操作步骤n7.1玻片法：n 取人或兔血浆喝盐水各滴分别置清法载玻片上，挑取待检验菌菌落分别与血浆及盐水混合，如血浆中有显著颗粒出现而盐水中无自凝现象为阳性。n7.2试管法：n 取试管2支，分别加入0.5ML血浆（经生理盐水1:4稀释），挑取菌落数个加入测定管充分研磨混匀，用已知阳性菌加入对照管，37n水浴34小时，血浆凝固为阳性。第10页8.葡萄糖O/F试管操作步骤n 从平板上挑取少许细菌，同时穿刺接种于2支O/F试管中，其中1支滴加液体石蜡，覆盖液面高度为0.30.5CM。经37培养48小时后，观察结果。仅开放管产能为氧化反应（O），两管都产能为发酵反应（F），两管均不变为产碱性。第11页9.新生霉素敏感试验操作步骤：n将细菌制成0.5麦氏单位菌液，用棉拭子沾取菌液密封涂布于普通琼脂平板表面或M-H琼脂平板，待菌液稍干，以无菌镊子搁置于含5ug/片新生霉素纸片，3537孵育1620小时观察结果。抑菌圈直径16mm为敏感（S），抑菌圈直径16mm为耐药（R）。第12页10.甘露醇发酵试验操作步骤：n 将纯培养细菌用接种针接种至甘露醇生化管中，置3537孵育箱孵育。18二十四小时后，观察结果。若细菌能分解甘露醇者指示剂呈酸性改变。不分解者培养基无改变。第13页谢谢观赏第14页