实验室生物安全省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx

试验室生物安全试验室生物安全第1页材料起源：试验室生物安全手册第2页总述一、试验室生物安全概述一、试验室生物安全概述二、试验室生物安全相关法律法规二、试验室生物安全相关法律法规三、病原微生物风险等级与危害等级分类三、病原微生物风险等级与危害等级分类四、试验室生物安全四、试验室生物安全分级分级五、五、生物安全防护试验室设施和设备要求生物安全防护试验室设施和设备要求六、药品微生物试验室生物安全防护六、药品微生物试验室生物安全防护第3页试验室生物安全概述试验室生物安全概述常见术语1、试验室生物安全：试验室生物安全：是指以试验室为科研和是指以试验室为科研和工作场所时，工作场所时，防止危险生物因子造成试验室防止危险生物因子造成试验室人员暴露、向试验室外扩散并造成危害综合人员暴露、向试验室外扩散并造成危害综合办法。办法。2、生物因子 ：一切微生物和生物活性物质。3、病原体：可使人、动物或植物致病生物因子。第4页试验室生物安全概述试验室生物安全概述常见术语4、危险：伤害发生概率及其严重性综合。5、危险废弃物 ：有潜在生物危险、可燃、易燃、腐蚀、有毒、放射和起破坏作用对人、环境有害一切废弃物。6、气溶胶：悬浮于气体介质中固态或液态微小粒子（粒径普通为 0.001-100m）形成相对稳定分散体系。第5页试验室生物安全概述试验室生物安全概述试验室感染可控性：试验室感染可控性：严格执行生物安全相关法律法规，加强和重视试验室安全监督管理，是能够预防和控制试验室感染事试验室感染事故发生。详细：领导重视领导重视：生物安全意识、态度和责任。科学管理科学管理：条例、预案、完善、可行。可靠硬件可靠硬件：设备齐全、设施过硬、完善验证。高素质队伍高素质队伍：培养、提升、坚持。标准和程序标准和程序：不停完善、SOP。第6页试验室生物安全概述试验室生物安全概述试验室生物安全屏障试验室生物安全屏障：当试验室工作人员所处理试验对象含有致病微生物及其毒素时，经过使用个体防护装置（一级屏障）、试验室设计建造（二级屏障）和严格遵从标准化工作及操作程序（三级屏障）等综合办法:1、确保试验室工作人员不受试验对象侵染。2、确保周围环境不受其污染。第7页试验室生物安全概述试验室生物安全概述试验室生物安全管理要求试验室生物安全管理要求：国家对试验室生物安全管理 省、市对试验室生物安全管理 从事病原微生物工作机构对试验室生物安全管理 单位生物安全管理委员会 试验室安全责任人 试验室安全员 生物安全手册第8页试验室生物安全概述试验室生物安全概述生物安全手册生物安全手册：（1）个人安全防护器材使用程序（2）病原微生物试验室使用及管理制度（3）试验室设施安全检验和维护制度（4）试验操作技术规程论证和审批制度（5）菌（毒）种使用和保留制（6）试验设备安全检测校准和使用程序（7）试验操作程序（8）紧急情况及意外事故处理和汇报程序（9）污物及废弃物处理程序第9页试验室生物安全相关法律法规试验室生物安全相关法律法规1、，国务院380 号令医疗废物管理条例2、2004年，国务院424号令病原微生物试验室生物安全管理条例。3、GB194892004试验室生物安全通用要求，已修订为版，并于207月1日实施。4、GB503462004生物安全试验室建筑技术规范，已修订为2011版，并于207月1日实施第10页试验室生物安全相关法律法规试验室生物安全相关法律法规5、年，卫生部第45号令可感染人类高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理要求。6、20，卫生部第50号令人间传染高致病性病原微生物试验室和试验活动生物安全审批管理方法。7、20，卫生部人间传染病原微生物名目8、，卫生部WS2332002微生物和生物医学试验室生物安全通用准则。第11页试验室生物安全相关法律法规试验室生物安全相关法律法规9、，农业部第302号令兽医试验室生物安全管理规范10、年，农业部第52号令高致病性动物病原微生物试验室生物安全管理审批方法。11、年，农业部第53号令动物病原微生物分类名目12、年，农业部第503号公告高致病性动物病原微生物菌（毒）种或者样本运输包装规范。13、国家食品药品监督管理局生物安全柜YY05692006，已修订为2011版，于206月1日执行。第12页试验室生物安全相关法律法规试验室生物安全相关法律法规14、，国家环境保护总局第32号令病原微生物试验室环境安全管理方法。15、年8月，国家科技部令第15号高等级病原微生物试验室建设审查方法第13页试验室生物安全相关法律法规试验室生物安全相关法律法规到当前为止，由国家、科技部、卫生部和药监局、农业部、环境保护部和国家质量监督检验检疫总局等各行政主管部门已颁布实施与试验室生物安全相关法律法规、技术标准大约有近20项。系统地规范和要求了病原微生物试验室建设标准、审批、管理、设施、安全设备、人员等要求。主要有：1、病原微生物分类管理要求 2、试验室分级管理要求 3、试验室生物安全管理要求 4、高等级生物安全试验室系列审批要求第14页病原微生物风险等级与危害等级分类病原微生物风险等级与危害等级分类1 1、病原微生物风险等级分类、病原微生物风险等级分类 第一类病原微生物 第二类病原微生物 第三类病原微生物 第四类病原微生物统称为高致病性病原微生物统称为高致病性病原微生物第15页病原微生物风险等级与危害等级分类病原微生物风险等级与危害等级分类2 2、病原微生物风险等级分类依据、病原微生物风险等级分类依据病原微生物传染性传染性、感染后对个体或者群体危害程度危害程度将病原微生物分：一类一类是指能够引发人类或者动物非常严重疾病非常严重疾病微生物，以及我国还未我国还未发觉或者已经宣告毁灭发觉或者已经宣告毁灭微生物。二类二类是指能够引发人类或者动物严重疾病严重疾病，比较轻易直接直接或者间接间接在人与人、动物与人、动物与动物间传输传输微生物。第16页病原微生物风险等级与危害等级分类病原微生物风险等级与危害等级分类2 2、病原微生物风险等级分类依据、病原微生物风险等级分类依据病原微生物传染性传染性、感染后对个体或者群体危害程度危害程度将病原微生物分：三类三类是指能够引发人类或者动物疾病，但普通情况下对人、动物或者环境不组成严重危害，传输风险有限，试验室感染后极少引发严重疾病，而且具备有效治疗和预防办法微生物。四类四类是指在通常情况下不会引发人类或者动物疾病微生物。第17页病原微生物风险等级与危害等级分类病原微生物风险等级与危害等级分类3 3、病原微生物危害等级分类病原微生物危害等级分类（GB19489）危害等级I （低个体危害，低群体危害）：不会造成健康工作不会造成健康工作者和动物致病细菌、真菌、病毒和寄生虫等生物因子。者和动物致病细菌、真菌、病毒和寄生虫等生物因子。危害等级 (中等个体危害，有限群体危害)：能引发人或动能引发人或动物发病，但普通情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会物发病，但普通情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引发严重危害病原微生物。试验室感染不造成严重疾病，具备引发严重危害病原微生物。试验室感染不造成严重疾病，具备有效治疗和预防办法，而且传输风险有限。有效治疗和预防办法，而且传输风险有限。第18页病原微生物风险等级与危害等级分类病原微生物风险等级与危害等级分类3 3、病原微生物危害等级分类病原微生物危害等级分类（GB19489）危害等级III（高个体危害，低群体危害）：能引发人类或动能引发人类或动物严重疾病，或造成严重经济损失，但通常不能因偶然接触而物严重疾病，或造成严重经济损失，但通常不能因偶然接触而在个体间传输，或能使用抗生素、抗寄生虫药治疗病原微生物。在个体间传输，或能使用抗生素、抗寄生虫药治疗病原微生物。危害等级 (高个体危害，高群体危害)：能引发人类或动物能引发人类或动物非常严重疾病，普通不能治愈，轻易直接或间接或因偶然接触非常严重疾病，普通不能治愈，轻易直接或间接或因偶然接触在人与人，或动物与人，或人与动物，或动物与动物间传输病在人与人，或动物与人，或人与动物，或动物与动物间传输病原微生物。原微生物。第19页病原微生物风险等级与危害等级分类病原微生物风险等级与危害等级分类4 4、病原微生物危害等级分级依据病原微生物危害等级分级依据 GB19489-试验室生物安全通用要求，分级依据：微生物致病性；传输方式和宿主范围；含有有效预防办法；含有有效治疗办法。第20页试验室生物安全试验室生物安全分级分级依据所操作生物因子危害程度和采取防护办法，将试验室生物安全防护水平分为四级，一级防护水平最低，四级防护水平最高。1、一级生物安全防护试验室一级生物安全防护试验室 （BSL-1BSL-1和ABSL-1试验室）基础试验室2、二级生物安全防护试验室二级生物安全防护试验室 （BSL-2BSL-2和ABSL-2试验室）基础试验室3、三级生物安全防护试验室三级生物安全防护试验室 （BSL-3BSL-3和ABSL-3试验室）防护试验室4、四级生物安全防护试验室四级生物安全防护试验室 （BSL-4和ABSL-4试验室）最高防护试验室第21页试验室生物安全试验室生物安全分级分级 1、BSL1试验室试验室 适合用于试验对象已知对健康成年人无致病作用，已知对健康成年人无致病作用，对试验室工作人员和环境潜在危害很小。防护水平最低,普通建筑物即可。第22页试验室生物安全试验室生物安全分级分级 2、BSL2试验室 2.1适合用于：试验对象对人和环境含有 中等潜在危害。如：(1)含漱液、血清和血液等样品诊疗检测(2)溶液、固定或用其它方法处理灭活病毒和/或无传染性病毒基因片段(3）常规细菌和毒素检测(4）能产生气溶胶样品处理(5）临床样品包装、分装(6）离心管和离心机转头封闭与开启第23页试验室生物安全试验室生物安全分级分级 2、BSL2试验室 2.2、特殊情况:（1）致病微生物气溶胶或溅出操作（2）处理高浓度或大容量感染性材料 2.3、要求：在生物安全柜或物理抑制设备中进行，并使 用个体防护设备。第24页试验室生物安全试验室生物安全分级分级3、BSL3试验室适合用于：主要经过呼吸路径使人传染上严重甚至是致死疾病致病微生物及其毒素（如禽流感），通常已（可）有预防传染疫苗。艾滋病病毒研究（血清学试验除外）-自成隔离区有出入控制或为独立建筑物。第25页试验室生物安全试验室生物安全分级分级3、BSL3试验室设备结构：第26页试验室生物安全试验室生物安全分级分级4、BSL4试验室戏称为魔鬼试验室第27页试验室生物安全试验室生物安全分级分级第28页试验室生物安全试验室生物安全分级分级4、BSL4试验室第29页试验室生物安全试验室生物安全分级分级5、病原微生物风险等级与生物安全分级、病原微生物风险等级与生物安全分级BSL1：第四类病原微生物BSL2：第三类病原微生物BSL3：第二类病原微生物BSL4：第一类病原微生物试验设施、设备要求应与所开展检测微生物要求一致。人间传染病原微生物名目（卫生部）要求药典包括阳性药典包括阳性菌活菌操作应在菌活菌操作应在BSL-2BSL-2试验室进行试验室进行第30页人间传染病原微生物名目人间传染病原微生物名目 （卫生部（卫生部）药品检验相关细菌药品检验相关细菌药品检验相关细菌药品检验相关细菌危害程度危害程度第31页生物安全防护试验室设施和设备要求生物安全防护试验室设施和设备要求1、BSL-1试验室试验室(1)、应有预防节肢动物和啮齿动物进入设计。(2)、每个试验室在靠近出口处应设洗手池。(3)、在试验室门口处应设挂衣装置，个人便装与试验室工作服分开设置。(4)、试验室墙壁、天花板和地面应平整、易清洁、不渗水、耐化学品和消毒剂腐蚀。地面应防滑，不得铺设地毯 (5)、试验台面应防水，耐腐蚀、耐热。(6)、试验室如有可开启窗户，应设置纱窗。参考 (7)、应有适当消毒设备。第32页生物安全防护试验室设施和设备要求生物安全防护试验室设施和设备要求2、BSL-2试验室试验室挡鼠板：进门处。水池：门口设洗手池、感应龙头。门扇：可自闭、有可视窗、外开。可开窗：防虫纱窗地墙顶：防滑、平整、易清洁、不渗水、耐擦拭、耐腐蚀。试验台：防水，耐腐蚀、耐热。足够空间：摆放存放物品专用工作服；应戴乳胶手套。II级生物安全柜 高压蒸汽灭菌器温度：18-28湿度：30-70%噪声：60dB（A）照度：300LX标示：出入及各种警示标识第33页生物安全防护试验室设施和设备要求生物安全防护试验室设施和设备要求3、生物安全柜（、生物安全柜（BSC）(1)概念：概念：用来保护操作者本人，试验室环境及试验材料，使其防止暴露于操作过程中产生感染性气溶胶感染性气溶胶和溅出物溅出物而设计负压排气柜。负压排气柜。(2)执行标准执行标准 YY0569生物安全柜 YY0569二级生物安全柜第34页生物安全防护试验室设施和设备要求生物安全防护试验室设施和设备要求3、生物安全柜（、生物安全柜（BSC）（3 3）I I 级生物安全柜级生物安全柜适合用于样品不需保护工作第35页生物安全防护试验室设施和设备要求生物安全防护试验室设施和设备要求3、生物安全柜（、生物安全柜（BSC）（4 4）级生物安全柜级生物安全柜A型型(B3)30%外排进入环境30%外界空气补充70%经过滤后循环使用第36页生物安全防护试验室设施和设备要求生物安全防护试验室设施和设备要求3、生物安全柜（、生物安全柜（BSC）（5 5）级生物安全柜级生物安全柜B2型型100%100%外排进入环境100%100%外界空气补充无循环使用气流无循环使用气流第37页生物安全防护试验室设施和设备要求生物安全防护试验室设施和设备要求3、生物安全柜（、生物安全柜（BSC）（6 6）级生物安全柜级生物安全柜B1型型70%外排进入环境70%外界空气补充30%过滤后循环使用第38页生物安全防护试验室设施和设备要求生物安全防护试验室设施和设备要求3、生物安全柜（、生物安全柜（BSC）（7 7）级生物安全柜级别差异级生物安全柜级别差异生物安全柜工作口平均进风速m/s循环风百分比（%）排风百分比（%）连接方式II级A1A10.380.517030可排到房间或套管连接处外排型A2A20.517030B1B10.513070密闭连接，硬管B2B20.510100密闭连接，硬管可排到房间或套管连接处第39页生物安全防护试验室设施和设备要求生物安全防护试验室设施和设备要求3、生物安全柜（、生物安全柜（BSC）（8 8）级生物安全柜防护特征比较级生物安全柜防护特征比较第40页生物安全防护试验室设施和设备要求生物安全防护试验室设施和设备要求3、生物安全柜（、生物安全柜（BSC）（9 9）级生物安全柜选择级生物安全柜选择 级生物安全柜4 个级别对微生物气溶胶防护性能是一样。正常情况下，级生物安全柜使用寿命为5年，假如使用全新风级B2型生物安全柜，其使用寿命会缩短。频繁更换HEPA，也会严重影响工作。第41页生物安全防护试验室设施和设备要求生物安全防护试验室设施和设备要求3、生物安全柜（、生物安全柜（BSC）（9 9）级生物安全柜选择级生物安全柜选择 选择选择级级A型还是型还是B型型生物安全柜关键：是取决于操作人员是否会用到取决于操作人员是否会用到挥发性有害物质或放射性物质挥发性有害物质或放射性物质原因来决定，而不是病原微生物原因。原因来决定，而不是病原微生物原因。当操作挥发性或有毒化学试剂时，不应该使用级A型生物安全柜。第42页生物安全防护试验室设施和设备要求生物安全防护试验室设施和设备要求3、生物安全柜（、生物安全柜（BSC）（9 9）级生物安全柜选择级生物安全柜选择 级B1B1型生物安全柜用于操作少许挥发性化学试剂和放射性核素。级B2B2型生物安全柜是全排放型安全柜，在需要操作大量放射性核素和挥发性化学试剂时，必须使用级B2B2型生物安全柜。第43页生物安全防护试验室设施和设备要求生物安全防护试验室设施和设备要求3、生物安全柜（、生物安全柜（BSC）（9 9）生物安全柜操作注意事项生物安全柜操作注意事项将试验器具放置于安全柜中，紫外灭菌15分钟后，通风10-15分钟。检测气流是否正常。规范有序进行试验，即双手迟缓双手迟缓进入前面开中，等候约1分钟，等安全柜调整完成后才可对样品进行处理。防止手臂快速移动和频繁进出防止手臂快速移动和频繁进出安全柜，以免紊乱气流，同时防止试验材防止试验材料挡住风口料挡住风口。在生物安全柜内进行操作不能进行文字工作。第44页生物安全防护试验室设施和设备要求生物安全防护试验室设施和设备要求3、生物安全柜（、生物安全柜（BSC）（9 9）生物安全柜操作注意事项生物安全柜操作注意事项 操作应在安全柜中后部进行。前送格调栅前送格调栅不得被试验材料堵住，以防干扰气流，可能使试验材料受到污染，人员暴露。因为剩下培养基可能会使微生物生长繁殖，所以在试验结束时，包含仪器设备在内生物安全柜里全部物品都应去除表面污染，并移出安全柜。试验完成，用适当消毒剂清洁安全柜内部。紫外灭菌15分钟，通风10-15分钟后关闭安全柜。第45页生物安全防护试验室设施和设备要求生物安全防护试验室设施和设备要求3、生物安全柜（、生物安全柜（BSC）（9 9）生物安全柜操作注意事项生物安全柜操作注意事项 HEPA滤器不能截留化学气体，同时，挥发化学品可能损坏HEPA滤器。滤器风扇以及安全柜内插座可能产生电火花，假如在安全柜中操作易燃易挥发液体易引发火灾或者爆炸。操作易燃易挥发液体易引发火灾或者爆炸。生物安全柜在移动以及更换过滤器之前，必须去除污染。在使用生物安全柜时应穿着个体防护服。第46页药品微生物试验室生物安全防护药品微生物试验室生物安全防护1、基本标准、基本标准 确保试验操作人员安全。确保试验操作场所和周围环境安全。确保试验样品安全（不被染污）。确保试验仪器和设备正常运作安全。第47页药品微生物试验室生物安全防护药品微生物试验室生物安全防护 2 2、技术办法、技术办法 （1）样品隔离技术（机械、气幕）（2）定向流技术（负压系统）（3）消毒灭菌技术（物理、化学）第48页药品微生物试验室生物安全防护药品微生物试验室生物安全防护3 3、一级生物安全防护试验室一级生物安全防护试验室无须使用生物安全柜和专用特殊设备等。应穿工作服，手上有皮肤破损戴手套。操作中可能有危险物溅出应有适当防护。第49页药品微生物试验室生物安全防护药品微生物试验室生物安全防护4 4、二、二级生物安全防护试验室级生物安全防护试验室 实施限制人员进入制度，试验中限制出入；每日清洁试验台面，及时清理试验废弃物；应设可关闭带锁门，可使用感应式、肘开式或脚踏式等非手动操作水龙头；禁止在试验区饮食；标准微生物学试验操作规程，尤其要防止使用口吸式移液。第50页药品微生物试验室生物安全防护药品微生物试验室生物安全防护4 4、二、二级生物安全防护试验室级生物安全防护试验室 穿戴个人防护装备，防止含微生物液体溅出和降低气溶胶形成；配置生物安全柜、消毒锅、洗眼等装置；试验室工作区域外应有存放备用物品条件。试验室工作区域外应有存放备用物品条件。第51页药品微生物试验室生物安全防护药品微生物试验室生物安全防护5 5、三、三级生物安全防护试验室级生物安全防护试验室（1）必须安装级或以上生物安全柜，感染性材料操作应在生物安全柜中进行。（2）当操作不得不在柜外进行时，必须个体防护与使用物理抑制设备综合防护办法（3）在进行感染性组织培养、有可能产生感染性气溶胶操作时，必须使用个体防护设备（如呼吸保护装置等）。（4）入室工作前/后有专用更衣室，室内有必备品（消毒剂、冲洗液、药品等）。第52页药品微生物试验室生物安全防护药品微生物试验室生物安全防护6 6、四、四级生物安全防护试验室级生物安全防护试验室1、在级生物安全柜中进行操作。2、入室必须换上全套试验室服装。3、试验室必备配套装置与装备。第53页药品微生物试验室生物安全防护药品微生物试验室生物安全防护7 7、常见安全防护、常见安全防护第54页谢谢大家！第55页