基于SSR构建中国主栽草莓品种指纹图谱.pdf

北京农学院学报2 0 2 4，39（1）：7-12Journal of Beijing University of Agriculturehttp:/doi:10.13473/ki.issn.1002-3186.2024.0102基于SSR构建中国主栽草莓品种指纹图谱蔡露莹1，刘松，聂兴华1，杨海清，曹庆芹1，李虎臣1，肖婷婷1，李日俭4*，张卿1*（1.北京农学院植物科学技术学院，北京10 2 2 0 6；2.北京市农业技术推广站，北京10 2 2 0 0；3.北京市平谷区果品产业服务中心，北京10 12 0 0；4.北京拉森农业发展有限公司，北京10 2 2 0 0）摘要：【目的】利用SSR分子标记构建中国主栽草莓品种的DNA指纹图谱，为保护育种者权益和实现草莓资源的高效鉴定提供基础数据。【方法】以中国目前主栽的草莓品种（7 0 个）为材料，采用荧光毛细管电泳技术对2 8个SSR分子标记进行评估，利用筛选后的高效SSR标记构建草莓品种的DNA指纹图谱。【结果】从2 8 对引物中选出了5对多态性较高、重复性较好的核心引物。核心引物共检测出40 个等位位点，平均每对引物检测出8 个等位位点；共检测到142 个带型，平均每对引物检测出2 8.4个带型；各标记的多态信息含量（PIC）为0.7 90.8 7，平均PIC值为0.8 3；聚类分析结果表明，草莓品种之间的相似系数范围为0.6 50.97。【结论】成功构建了具有唯一对应关系的7 0 个草莓品种的DNA指纹图谱，为未来草莓品种的资源保护和利用推广提供数据支撑。关键词：SSR；指纹图谱；草莓品种鉴定；毛细管电泳中图分类号：S668.4文章编号：10 0 2-318 6（2 0 2 4)0 1-0 0 0 7-0 6 文献标志码：AThe fingerprint of main strawberry varieties in China wasconstructed based on SSR molecular markerCAI Luying,LIU Song”,NIE Xinghua,YANG Haiqing,CAO Qingqin,LI Huchen,XIAO Tingting,LI Rijian4,ZHANG Qingl(1.College of Plant Science and Technology,Beijing University of Agriculture,Beijing 102206,China;2.Beijing AgriculturalTechnology Extension Station,Beijing 102200,China;3.Beijing Pinggu District Peoples Government Fruit Office,Beijing 101200,China;4.Beijing Lasen Agriculture Development Co.,LTD,Beijing 102200,China)Abstract:Objective Constructing the DNA fingerprints of the main strawberry varieties in China using SSR molecularmarkers to provide fundamental data for the protection of the rights and interests of breeders and the efficient identification ofstrawberry resources.MethodsJ Using the current mian strawberry varieties(70 in total)currently planted in China as materi-als,28 SSR molecular markers were evaluated by fluorescence capillary electrophoresis technology,and DNA fingerprints ofstrawberry varieties were constructed by using screened high-efficiency SSR markers.ResultsJ Five pairs of core primers withhigh polymorphism and good repeatability were selected from the 28 pairs of primers.A total of 40 alleles were detected by thecore primers,with an average of 8 alleles per primer pair.A total of 142 bands were detected,averaging 28.4 bands per primerpair.The polymorphic information content(PIC)of the markers ranged from 0.79 to 0.87,with an average PIC value of 0.83.Celuster analysis-results showed that the similarity coefficients between strawberry varietie ranged 0.65 to 0.97.ConclusionThe DNA fingerprints of 70 strawberry varieties with unique correspondence have been successfully constructed,which willprovide data support for resource conservation and use promotion of strawberry varieties in the future.收稿日期：2 0 2 3-11-2 0基金项目：北京市自然科学基金资助项目（6 2 12 0 0 6）第一作者：蔡露莹，女，硕士研究生，研究方向为果树种质资源创新与利用，Tel：[phone]，E-m a il：通信作者：张卿，副教授，主要从事果树种质资源创新和高效栽培技术，Tel：[phone]，E-ma i l：z h a n g q i n ;李日俭，果树工程师，Tel：[phone]，E-m a i l：l i r i j i a n 2 0 0 9 139.c o m8北京农学院学报第39卷Keywords:Simple sequence repeat;fingerprints;identification of strawberry varieties;capillary electrophoresis栽培草莓（FragariaXananassa）于17 50 年左右在欧洲首次培育，是北美的F.virginiana 和南美的F.chiloensis偶然杂交而成的异源八倍体。其果实鲜美红嫩，香气浓郁，酸甜可口，含有丰富的维生素C、花青素、单宁等抗氧化物质，目前已成为全球广为栽培的主要水果之一2 。据农业农村部统计，2 0 2 1年中国草莓稳居全球最大草莓生产国和消费国的位置3。目前，全世界已登记的草莓品种有2000多种，国家草莓种质资源圃（北京和南京）保存的栽培草莓品种超过40 0 份以上，近年来自主选育的国产品种数量超过引进品种，但主栽品种仍以日本品种红颜和美国品种甜查理为主。中国草莓种植区分布十分广泛，主产区主要分布在辽宁、山东、安徽、江苏和河北等地，近年来北京、四川、新疆等地区草莓种植发展也很快，其他地区均为小面积种植。中国草莓产业仍存在一些问题，如草莓品种多代繁育后易出现品种退化问题；育苗行业普遍存在的同名异物、同物异名问题5；草莓产业中时有发生的品种侵权问题6 。这些问题严重影响了草莓品种选育，扰乱了草莓产业市场秩序，损坏了育种者、种植户和企业的利益。编号名称No.Name1阿尔滨2卡布里洛3常得乐4蒙特瑞5圣安德瑞斯6森格纳7爱莎8白雪公主9宝交早生10昌黎红鸡心11达赛莱克特12点雪13粉佳人14粉玉1号15粉玉2 号16弗杰利亚17甘露18海丽甘19海丽姬20韩韵21黑珍珠22红星23红颜24红玉简单重复序列标记（Simple sequence repeat，SSR)具有多态性丰富和稳定性好等特点，国内外学者开发了大量SSR标记用于草莓品种鉴定、遗传多样性分析及指纹图谱构建，如忻雅等7 通过7 对引物构建了2 6 个草莓品种的指纹图谱，但不能完全区分。王壮伟等8 通过4对核心引物对38 个欧美草莓品种进行指纹图谱构建，其中2 9个草莓品种可以完全与其他品种区分开。黄志城9 等通过2 0 对引物将96 个草莓品种区分开来。以往研究所用分子标记数量较多，成本较大或不能完全区分应试品种。为提高分子鉴定效率和节约成本，用较少的分子标记区分较多的草莓品种，该研究对目前已知的SSR分子标记进一步筛选，并对所收集的品种资源进行DNA指纹图谱构建、聚类分析，为实现草莓的高效鉴定，新品种选育及育种者权益保护提供技术支持。1材料与方法1.1试验材料从北京市昌平区的拉森峡谷农业发展（北京）有限责任公司采集到共7 0 个草莓品种（表1）。每个品种所对应的编号、名称、来源以及种苗种植的位表1草莓品种信息表Tab.11Information on strawberry varieties collected来源编号OriginNo.美国25美国26美国27美国28美国29德国30意大利31中国32日本33中国河北34法国35日本36中国37中国38中国39西班牙40中国丹东41中国上海42中国上海43中国44日本45中国河北46日本47中国名称Name华硕华艳火焰冀九京藏香京承红京滇红京留香京泉香京桃香晶玉静红久香乙女美十三弥生姬妙香7 号宁丰宁玉黔莓1号黔莓2 号黔莓5号全明星来源Origin中国郑州中国郑州中国云南中国河北中国北京中国北京中国北京中国北京中国北京中国北京中国湖北中国北京中国上海日本美国日本中国中国江苏中国江苏中国贵州中国贵州中国贵州美国编号No.4849505152535455565758596061626364656667686970名称Name日本四季容莓3号申琪申阳申怡圣诞红石莓11号石莓7 号石莓8 号石莓9号硕丽桃熏甜查理通州公主夏红香野幸香艳红艳丽越心越秀章姬中莓3号来源Origin日本中国中国上海中国中国韩国中国石家庄中国石家庄中国石家庄中国石家庄中国日本美国中国中国日本日本中国北京中国沈阳中国浙江中国浙江日本中国2024年第1期蔡露莹等：基于SSR构建中国主栽草莓品种指纹图谱9置、数量都登记在册。目前收集到的品种中有46 个来源于中国，8 个来源于美国，12 个来源于日本，来源于意大利、德国、法国、西班牙的品种各1个。每份材料取嫩叶36 片，用保鲜袋封存并带回，经液氮冷冻后，低温保存于一8 0 供后期提取DNA时使用。1.2试验方法1.2.1DNA提取采用上海迈跟生物科技有限公司生产的广谱性植物DNA提取试剂盒提取草莓叶片基因组DNA,然后采用1%琼脂糖凝胶电泳检测DNA完整度，并使用Nano drop2000c对DNA样品的浓度和纯度进行测定10 ，将合格的DNA样品稀释至2 0 50 mg/L后在一2 0 条件下保存以用于后续的PCR试验。1.2.2荧光毛细管电泳SSR-PCR扩增PCR扩增采用2 0 L反应体系：8.4LddHz0,10L2Taq Plus PCR Master Mix(Biomed,北京),0.1 L 10mol/L正向引物、0.3L10mol/L反向引物,0.2L含荧光标记（FAM,HEX,ROX或TAMRA）的M13引物（擎科，天津），1 LDNA底物。反应程序为：9 5预变性3min，9 5变性30 s，52 退火30s,72延伸1min，35个循环，最后7 2 延伸10min,10条件下保存。将带有不同荧光标记的PCR扩增产物混合，并通过ABI3730XLDNA测序仪进行毛细管电泳分析，得到混合物中的片段位置信息，然后使用GeneMarkerV2.2.0软件读取具体的片段信息并进行分析11。1.2.3SSR引物筛选通过文献搜集到2 8 对引物，对6 个差异较大的品种进行毛细管电泳检测，最终从2 8 对引物中选出5对峰值清晰无杂峰、多态性较高且两两引物位点互补的引物作为核心引物（表2),退火温度56 58。1.3数据处理1.3.1指纹图谱构建使用GeneMarkerV2.2.0软件读取检测到的位点信息并进行人工校对12 ，将位点信息进行组合，得到不同的带型，再将同一品种在不同引物下所对应的带型结合起来即为该品种名称No.大小/bpNXY01.228249NXY02188221NXY06215236NXY19249272NXY24215279Mean表2 引物名称及序列Tab.1Primers name and sequence名称 Primer name序列(5-3)Primer sequences(5-3)F:GGAATCCAAGTTACAGGCTTCANXY01R:AAGGAGCCTCTCCAATAGCTTCF:CACGAGGCCTTGTCTTCTTTGTANXY02R:GCTCCAGCTTTATTGTCTTGCTF:CCCCACCCTAAACTAACCCAANXY06R:CGACGAGGATGAAGAAGAGCF:TGACAAACATTCAACCACACNXY19R:GTGCCCTCAGAAGACTACCF:AAATCCTGTTCCTGCCAGTGNXY24R:TGGTGACGTATTGGGTGATG的DNA指纹图谱。1.3.2遗传多样性分析根据Nei方法计算引物PIC值(其中Pi为第i等位变异的频率)C13：PIC=1-ZPi?2。1.3.3聚类分析将得到的“bp”格式数据转换为Ntsys 2.1-pc软件所要求的数据格式。利用Ntsys2.1-pc软件的SM方法（Simple matching)计算其遗传相似系数，然后使用相似系数SAHNClustering和非加权成对算术平均法（UPGMA）对其进行聚类分析,最后通过 Tree plot 将聚类分析的结果生成树状图14122结果与分析2.1遗传多样性分析从2 8 对引物中选出了5对多态性较高、重复性较好的核心引物，利用这5对核心引物对草莓品种进行PCR扩增，并对扩增产物进行荧光毛细管电泳检测（表3，图1)，共检测出44个等位位点，检测到的等位位点数量为6 10 个，平均每对引物检测出8个等位位点；共检测到140 个带型，每对引物下的带型数为1452 个，平均每对引物检测出2 8 个带型；不同引物的多态信息含量(PIC)为0.7 90.8 7，平均PIC值为0.8 3，说明这些引物多态性较高，可用于对这些草莓品种进行多态性分析。表 3 5对 SSR 引物的扩增信息Tab.3Amplification information of 5 SSR primers带型数等位基因数Na有效等位基因数Ne1462751183028观测杂合度Ho期望杂合度He多态信息含量PIC50.6590.511010669987.80.808.20.851 80.410.874.70.730.82960.280.826 30.520.78410.792.70.842.30.8681.0.81680.814.70.826910A4000180190200210 220 230 240 250 260 270280B50003000圣诞红(韩国)2.00010001803000红颜(日本)2.00010001804.000森格纳（德国)30002000100002.2聚类分析根据SSR引物扩增结果数据，对7 0 个草莓品种进行聚类分析（图2）。结果显示，7 0 个草莓品种之间的遗传相似系数范围为0.6 10.97。在遗传相似系数为0.6 1时，7 0 个草莓品种被分为两大类群，第I类群包含6 6 份材料，其中，华硕在相似系北京农学院学报1801904.000常得乐（美国）3.000200010000231237190200210 220190200210220230240 250260270280237240244249图1引物NXY01在部分草莓样品(A)和部分引物在常得乐(B)的扩增峰图Fig,1 Amplification peaks of primer NXYO1 in some strawberry samples(A)and some primers in Chandler(B)第39卷20021022023024249237240242492302402502602702802312424924025026027028018019050004.0003.0002.00010000180190600040002.000数为0.6 4时就与其他品种分开，推测华硕与其他品种的亲缘关系较远；第类群仅包含4份材料，分别是昌黎红鸡心、韩韵、“弗杰利亚、“宁丰”，除了弗杰利亚 来自西班牙，其他三个品种均来自中国。在类群I中，部分品种如石莓1号和香野、越心和越秀以及全明星和申阳之间200210220188194197200210220230240250260270280NXY0621221222723237230207210240250260NXY02270280324432935948848345869551388404824433695438242328424302640.610.650.69Fig.2UPGMA tree map of strawberry varieties based on SSR markers0.73图2 基于SSR标记的草莓品种UPGMA树状图0.770.810.850.890.930.972024年第1期的相似系数都接近0.97,推测他们可能具有较近的亲缘关系，调查发现，越心 和越秀均来自浙江省农业科学院园艺研究所，属于姊妹品种。聚类结果表明，大部分地理区域位置相近或相同的品种被聚在一起，但也有少部分地理区域位置较远的草莓品种被聚在一起，如来自日本的乙女（38 号）和来自美国的甜查理（6 0 号）被聚到第I类群的小亚群中；来自来自西班牙的弗杰利亚（16 号）与来自中国的宁丰（42 号)被聚到了第2 类群的小亚群中，造成这种现象的原因很可能是地区间引种后进行杂交育种。2.3DNA指纹图谱构建DNA指纹图谱编码方式参考了前人的方法15,该研究引物NXY06下的带型种类过多，因此，没有沿用前人用数字19 和字母AZ(对10个以上的带型种类进行记录)来进行编码的方式，编号名称No.Name1阿尔滨2卡布里洛3常得乐4蒙特瑞5圣安德瑞斯A11B2C38D9E86森格纳7爱莎8白雪公主9宝交早生10昌黎红鸡心11达斯莱克特A1B22C18D9E212点雪13粉佳人14粉玉1号15粉玉2 号16弗杰利亚17甘露18海丽甘19海丽姬20韩韵21黑珍珠22红星23红颜24红玉3讨论和结论由于中国的草莓种植户引种渠道不同、且各个蔡露莹等：基于SSR构建中国主栽草莓品种指纹图谱表4草莓品种的指纹图谱编码Tab.4Fingerprint coding of strawberry varieties指纹信息编号名称Fingerprint informationNo.A5B20C48D8E625华硕A3B1C8D13E826华艳A11B14C47D11E827火焰A4B20C11D9E2028冀九29京藏香A5B8C4D14E730京承红A5B15C22D14E731京滇红A6B17C8D15E132京留香A9B10C24D17E233京泉香A11B17C3D8E2634京桃香35晶玉A9B9C30D16E1036静红A11B26C16D9E1737久香A9B17C23D17E638乙女A9B17C10D7E2A11B8C14D4E1239美十三A11B14C34D14E540弥生姬A11B6C17D11E1241妙香7 号A13B8C48D14E29A13B8C27D14E842宁丰A13B13C43D3E1443宁玉A1B8C4D14E2844黔莓1号A9B9C1D15E11A8B8C17D7E1345黔莓2 号A9B17C6D14E1A1B11C7D7E1246黔莓5号A7B9C15D9E8A10B1C20D7E2747全明星A12B17C9D13E2411而是选择使用纯数字来对中国现有的草莓品种进行DNA指纹图谱信息进行编码。由于每对引物在70个品种中都可扩增出不同的峰型，每个品种在不同引物下的峰值数据构成不同的带型，按照峰值数量从少到多（相同峰值数量则按照峰值数目由小到大），分别将带型记为1、2、3，无位点信息的记为0。将引物编号与不同品种在该引物下的带型编号组合起来，即为该品种的指纹图谱。如编号为1的草莓品种阿尔滨在引物NXY01下的带型为2 37/246/249，按照排列规律该带型排名5，结合引物NXYO1的编号为A,因此该品种在引物NXYO1下所对应的指纹图谱编码为A5,用同样的方法得到其他引物下的指纹图谱编码，分别为B20、C48、D 8、E6，则阿尔滨的指纹图谱编码为A5B20C48D8E6。以此类推，得出7 0 个草莓品种的指纹图谱编码（表4)。指纹信息NameFingerprint informationA9B8C31D17E3A11B22C44D14E9A9B22C23D12E9A9B23C20D14E21A13B8C21D1E22A13B25C21D14E7A8B4C32D14E2A9B22C11D11E8A9B22C41D7E8A9B22C49D14E2A1B17C33D6E3A9B18C39D13E14A13B5C43D15E16A10B16C36D13E8A11B21C2D11E8A9B17C26D15E3A13B17C2D5E5A5B17C12D14E2地区之间相互引种，导致中国的草莓品种之间容易出现同物异名或同名异物现象。因此，呕须一种方法来将中国目前现有的草莓栽培品种给区分开来，编号No.48日本四季49容莓3号50申琪51申阳52申怡53圣诞红54石莓11号A9B9C13D14E2955石莓7 号56石莓8 号57石莓9号58硕丽59桃熏60甜查理61通州公主62夏红63香野64幸香65艳红66艳丽67越心68越秀69章姬70中莓3号名称NameFingerprintinformationA2B3C42D9E19A5B9C12D7E8A13B21C50D4E23A7B17C12D2E25A5B17C2D9E15A9B7C25D14E1A7B23C19D14E8A7B19C5D9E6A7B21C24D17E8A9B17C20D7E28A11B24C46D9E8A1B17C45D10E15A6B17C29D10E23A13B0C21D7E18A9B9C13D5E8A9B1C23D7E8A5B0C40D14E2A9B18C37D7E29A13B12C35D13E5A13B12C35D14E4A3B7C21D7E8A13B8C28D5E9指纹信息12该研究通过构建中国主栽草莓品种的DNA指纹图谱数据库，为区分中国现有的栽培草莓品种提供了有效的方法。而建立高效的草莓品种DNA指纹图谱不仅可以为草莓新品种选育奠定基础，有助于草莓新品种的申报，还可用于保护品种知识产权、维护生产者和育种者权利以及种质资源的管理16 该研究首先从多对引物中选出多态性较好、重复性较高的5对引物，对7 0 个草莓品种进行分析，并按照引物编号依次对各个引物下的带型编码进行排列,形成各个品种独有的指纹信息，成功构建了中国现有草莓品种的DNA指纹图谱数据库。该研究的编码方式参考了前人的方法15，但根据具体的研究数据做了调整，最后选用了引物编号与带型编码进行组合的方式。刘国霞等19 采用引物编码与带型编号互相组合的方式成功建立了8 4份草莓品种的指纹图谱。针对引物NXY02在品种“夏红”和“艳红”没有带型信息的情况，将其编码为BO，这样更易辨认，也更为直观。前人已利用分子标记对草莓种质遗传多样性进行了较多分析，由于研究材料和方法的不同，其遗传多样性程度有些许差异。如韩柏明等17 利用18对引物对9 6 份草莓资源的研究发现草莓资源的相似系数在0.6 2 1.0 0；陈坚等18 用10 对SSR引物对福建省主栽草莓资源进行遗传多样性分析发现，品种间的遗传相似系数为0.6 2 0.8 9；刘国霞等191选用18 对SSR引物建立了8 4份分别来自欧美、日韩及中国的草莓品种的遗传关系，发现品种间遗传相似系数范围为0.6 10.9 9；而该研究通过5对引物对7 0 个草莓品种的遗传信息进行了分析，结果表明，7 0 个草莓品种之间的遗传相似系数范围为0.6 30.9 7，与前人研究结果大致相似，说明中国现有的草莓栽培品种亲缘关系较近，可能与新品种的选育方式有关。另外,该研究筛选出了多态性较高、重复性较好的5对引物，与前人研究相比，效率更高，成本也更少。通过本研究聚类分析发现，中国选育的大多数品种与国外品种混杂在一起，其可能原因是中国主栽草莓品种都直接或间接来源于欧美品种，导致遗传基础狭窄，这也在一定程度上表明草莓品种的亲缘关系远近与其是否来自同一地区不存在必然的联系。该研究基于SSR荧光毛细管电泳技术，筛选出变异位点丰富的5对引物，并成功构建了7 0 个草莓品种的DNA指纹图谱，且图谱更加精细,更有利于对草莓资源进行区分。综上，本研究结果可为供试北京农学院学报草莓资源深人研究及有效利用提供有用信息，为草莓品种的高效鉴定以及新品种选育提供数据支撑。参考文献：1JDIAZ-LAARAA,STEVENS K A,KLAASSEN V,et al.Se-quencing a strawberry germplasm collection reveals new viralgenetic diversity and the basis for new RT-qPCR assaysJJ.Viruses,2021,13(8)1442.2 肖桂林，管自豪，张思思，等.7 3份草莓种质资源表型性状的遗传多样性分析及在湖北省的综合评价J.果树学报，2 0 2 3，40(8):1546-1558.3王鸣谦，薛莉，赵珺，等.世界草莓生产及贸易现状J.中国果树,2 0 2 1(2)：10 4-10 8.4王晓梅.黑龙江设施草莓高效生产关键技术J.农业工程技术,2 0 2 1,41(2 2):6 7-6 9.5种伟.北京传统果树主要优良老品种资源与发展建议门.中国种业，2 0 2 1,319（10）：2 5-30.6 王鹏，王月，王文晓，等.我国草莓新品种权保护现状与分析J.中国果树，2 0 2 3（4)：12 9-135.汇7 J忻雅，阮松林，马华升，等.基于SSR和SCAR标记的草莓主栽品种指纹图谱构建及亲缘关系分析.江西农业大学学报，2 0 13,35(0 2)：30 7-312.8 王壮伟，赵密珍，袁骥，等.38 个欧美草莓栽培品种SSR指纹图谱的构建J.果树学报，2 0 11，2 8（6）：10 32-10 37.黄志城，石敬韩，庞夫花，等.基于SSR标记的草莓品种DNA指纹图谱的构建及应用J.分子植物育种，2 0 17，15（8）：3097-3116.10王瑞云，季煦，陆平，等.利用荧光SSR分析中国糜子遗传多样性J.作物学报，2 0 17，43（4）：530-548.11苏群，王虹妍，刘俊，等.基于 SSR荧光标记构建睡莲核心种质J.园艺学报，2 0 2 3,50（10）：2 12 8-2 138.12NEI M.Analysis of gene diversity in subdivided populationsJJ.Proceedings of the National Academy of Sciences of theUnited States of America,1973,70(12):3321-3323.13AMRATE P K,SHRIVASTAVA M K,BHALE M S,et al.I-dentification and genetic diversity analysis of high-yielding charcoalrot resistant soybean genotypes LJ.Scientific Reports,2023,13:8095.14 GAO P,MA H Y,LUAN F S,et al.DNA fingerprinting ofChinese melon provides evidentiary support of seed qualityappraisalLJJ.PLoS ONE,2012,7(12):e52431.15 WU B M,ZHONG Y,WU QQ,et al.Genetic diversity,pedi-gree relationships,and a haplotype-based DNA fingerprintingsystem of red bayberry cultivarsJJ.Frontiers in Plant Sci-ence,2020,11:563452.16李志强，吴超，贺熙勇，等.基于SSR标记的澳洲坚果种质资源DNA指纹图谱的构建J.果树学报，2 0 2 2，39（11）：2028-2035.17韩柏明，赵密珍，王静，等.基于SSR标记的草莓品种亲缘关系分析J.植物遗传资源学报，2 0 13，14（3）：42 8-433.18陈坚，郑益平，郭文杰，等.福建省草莓主栽与引进品种的SSR分子标记鉴定J.福建农业学报，2 0 18，33（2）：150-15319刘国霞，张全芳，杨雪，等.八倍体草莓DNA指纹图谱的构建与初步遗传分析J门.中国农业大学学报，2 0 2 3，2 8（2）：35-42.第39卷