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实验诊断学总结
第一章 总论
概念
[1] 临床检验：以离体的血液、体液、排泄物等为标本，通过试剂、仪器等进行检测,并对检测的过程进行全面的质量控制，最终得到可靠的检测结果或数据.
[2] 实验诊断:通过临床检验得到的信息为预防、诊断、治疗和预后评价所作的临床医学活动。
[3] 床边检验:在病人医疗现场进行的临床检验.
[4] 参考值或参考范围:参考值是指对抽样的个体进行某项目检测所得的值；参考范围是指所有抽样组测得值的平均值加减其标准差。
[5] 质量控制:为保证临床检验结果质量（满足医生/客户要求）而采取的一系列检查、控制手段
第二章 血液检查Examination of Blood

Key points:
1. 血液有形成分的组成
2 .红细胞、血红蛋白参考值及增加与减少的临床意义
3 .白细胞参考值及增加与减少的临 床意义
4 .血小板的参考值及增加与减少的临床意义
5 .何谓核左移、核右移
6 。全自动血细胞分析仪的临床应用
一、血液：不断地流动于人体的循环系统中，直接或间接参与全身各个组织器官的新陈代谢、功能调节及维持人体内、外环境间的平衡,完成各项生理功能活动.二、1。 血液有形成分的组成
血细胞 占全血40～50%，称之有形成分
1。白细胞 中性粒细胞、 淋巴细胞、单核细胞、 嗜酸性粒细胞、 嗜碱性粒细胞
2。红细胞 （主要成分是血红蛋白）
3.血小板
三．血液一般检查General Examination of Blood（血常规）1、一些缩写
Erythrocyte count （RBC） 红细胞计数
Hemoglobin determination (Hb) 血红蛋白测定
Leukocyte count (WBC) 白细胞计数
Differential leukocyte count白细胞分类
Platelet count （ PLT) 血小板计数
新生儿特点:红、白细胞都比成人高，红细胞呈“生理性巨幼红细胞贫血”的表现，白细胞呈感染的表现（粒细胞增高并左移）
2、红细胞计数 Erythrocyte Count
方法:显微镜计数法；全自动血细胞分析仪计数法
操作：用等渗稀释液将血液作 200 倍稀释，滴入血细胞计数板中静止 1—2 min，于高倍镜下计数 5 个中方格红细胞总数，经换算即得每升血液中血红细胞数。
公式：RBC/L= 5个中方格总数×5×10´200×106
报告格式：Δ。ΔΔ×1012/L3。81×1012 /L
参 考 值
(男)4。0～5.5×1012/L(女）3。5～5。0×1012/L（新生儿）6。0～7。0×1012/L
各种红细胞的形态
3．相关检测
［1］．平均红细胞容积（MCV)：MCV=红细胞比容/红细胞数
红细胞数参考值: 80—94fl
[2］．红细胞比容测定（Hct)：抗凝全血经离心沉淀后，测得下沉的红细胞在全血中所占容积的百分比值.
参考值男性42-49% 女性 37-48％
[3]．平均红细胞血红蛋白量（MCH）：指平均每个红细胞内所含血红蛋白的量。MCH=血红蛋白（g/l）/红细胞百万数/µl 参考值: 26—32pg ［4］．平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC)：指平均每升红细胞中所含血红蛋白浓度参考值: 310—350g/LMCHC=血红蛋白（g/L）/ 红细胞比容(％）×100g/L[5］．红细胞容积分布宽度 （RDW）：RDW=S。D。/ 平均红细胞体积
平均红细胞体积参考值：11。5—14.5％
RDW 的统计学实质是红细胞大小的变异系数 CV RDW〈14％
类型 MCV MCH MCHC 临床类型
大细胞贫血 〉100 〉32 310—350 巨幼细胞贫血
正常细胞贫血80—94 26—32 310—350 AA急性失血性贫血，溶血性贫血，骨髓病性贫血
单纯小细胞贫血 〈80 〈26 310-350 慢性炎症性贫血肾性贫血
小细胞低色素贫血 〈80 〈26 <300 缺铁性贫血,铁粒幼细胞性贫血，珠蛋白生成障碍性贫血，慢性失血性贫血
4．临床意义：
(红细胞增加）
相对性增高：各种原因导致的血浆容量减少，使红细胞相对增多.剧烈呕吐、严重腹泻、大面积烧伤、多汗、多尿。
绝对性增高：由于缺氧而致红细胞代偿性增多，红细胞增多的程度与缺氧程度成正比
生理性：胎儿、新生儿、高原地区居民、剧烈体力劳动、情绪激动时，红细胞可一过性增多
病理性:严重慢性心、肺疾患,如阻塞性肺气肿、肺源性心脏病、紫绀型先天性心脏病,真性红细胞增多症
（红细胞减少）
生理性：妊娠中、后期，血容量增加约 25 ％,引起血液稀释;6个月～2岁的儿童由于生长发育迅速,血容量急剧增加而致造血原料相对不足；老年人造血功能明显减低致红细胞减少;月经期暂时引起下降。病理性：各种类型贫血：如缺铁性贫血、巨幼红细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血、继发性贫血等。
5．网织红细胞计数及正常参考值：
[1］网织红细胞是晚幼红细胞脱核后,在完全成熟之前的过渡型红细胞。由于胞浆中尚存核糖体、核糖核酸等嗜碱物质，用煌焦油兰等染料进行活体染色后,胞浆中可见蓝绿或蓝色的网状结构,故名网织红细胞.
成人：0。5%-1。5%新生儿（<3月）：2％-6％
［2]网织红细胞计数的意义
增多：骨髓增生旺盛.常见于溶血性贫血，尤其是急性溶血性贫血(可达20％以上）、急性大失血.贫血治疗有效。如缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血，经相应治疗后1—2日即开始,1周左右达最高峰
减少：骨髓增生低下，如再生障碍性贫血、溶血性贫血有再生障碍危象时
6．白细胞测定
[1]白细胞计数LeukocyteCount
方法：显微镜计数法 、全自动血细胞分析仪法计数法：以 2％ 冰醋酸对血液作定量稀释,同时破坏红细胞。然后将悬液充入细胞计数池内，低倍镜计数 4 个大方格内白细胞总数。计算原则同红细胞。
原理（显微镜计数原理）:用 2 ％ 乙酸对血液作定量稀释，同时破坏红细胞。混匀并滴入计数室中，低倍显微镜下计数 4 大方格内的白细胞数，经换算得每升血液中白细胞总数。
公式：WBC/L = 4 格白细胞总数¸ 4×10×20×106
报告格式：Δ。ΔΔ×109/L
参考值：成人4。0～10.0 × 109/L；新生儿15。0～20.0 × 109/L
临床意义
（白细胞增高)
生理性增高：见于妊娠期、分娩时、新生儿；剧烈运动、淋浴;严寒、高温；午后高于清晨；饮食后高于饮食前等;
病理性增高:急性感染如肺炎、扁桃体炎、急性阑尾炎.严重组织损伤、大量细胞破坏。如术后12~76h，WBC常 〉10.0×109/L；急性心肌梗死后1～2d,常见WBC明显增高;急性溶血亦见WBC增多，增多成分以中性分叶核粒细胞为主。急性大出血：如脾脏破裂或宫外孕输卵管破裂后，WBC迅速增多常达20.0×109/L.这可能是应激状态、或内出血一过性缺氧。急性中毒：如安眠药、滴滴畏中毒， WBC可高达20×109/L以上，代谢性酸中毒。如糖尿病、酮体症、酸中毒及慢性肾炎尿毒症时,也常见WBC增多，均以中性粒细胞为主。白血病及恶性肿瘤:急、慢性白血病、肝癌、胃癌等肿瘤细胞可产生促粒细胞生成素，并能吸引骨髓储备池WBC释放。
(白细胞减少）
某些革兰氏阴性杆菌感染如伤寒、副伤寒杆菌感染时，白细胞总数可低至2.0×109/L；病毒感染。某些血液病如再生障碍性贫血；巨幼红细胞性贫血；恶性网状细胞病 (恶组)；急性非白血性白血病。脾功能亢进破坏过多、脾素抑制骨髓生成；慢性理化损伤；电离辐射，如X线、放射性核素等；服氯霉素.自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮。
[2]白细胞分类计数与临床意义
中性粒细胞（neutrophil):游走、吞噬 50 ～ 70%
嗜酸性粒细胞（eosinophil)：致敏反应0.5 ~ 5％
嗜碱性粒细胞(basophil）：释放组织胺、肝素0 ～ 1％单核细胞（monocyte):吞噬、清除死亡细胞及异物3~8％
淋巴细胞(lymphocyte）：参与体液、细胞免疫20 ～ 40％
中性粒细胞Neutrophil
生理特性：渗出性、变形性、趋化性、吞噬性
骨髓 血液
分裂池 成熟池 储备池 边缘池循环池
4-5d 1—3d2-3d
核左移:原粒早幼粒中幼粒/晚幼粒杆状核/杆状核分叶核/分叶核细胞核左移：周围血中杆状核粒细胞增多甚至出现晚幼粒、中幼粒、早幼粒等细胞时均称为核左移
杆状核粒细胞增多:6%:轻度左移;10%:中度左移；25%：重度左移或称为类白血病反应
类白血病反应：患儿男， 2。5岁，日本籍,于10天前因受冷而发热，自测体温38℃(腋下），无畏寒、头痛、呕吐、腹泻，就诊于当地医院，血常规 WBC 28。9×109/L,阿莫西林0。125g 3/日治疗,无明显好转，4天后患儿面、背及双上肢皮肤反复出现散在红色丘疹，停药否无区别.1999年7月5日急诊住我院。实验室检查，血象：Hb110g/L， WBC 23×109/L,血小板 121×109/L，幼稚型异常淋巴 56％，成熟淋巴 21%,嗜酸性粒细胞2％,中性粒细胞 21％，骨髓穿刺二次,骨髓细胞分类象同血涂片象.
细胞核右移：正常人周围血中性粒细胞以三叶核者为主，若五叶者超过5％ 时为核右移,此时常伴有白细胞总数减少.一过性地出现核右移是正常现象。如在疾病进行期突然出现核右移的变化，则表示预后不良
中性粒细胞临床意义生理性增高：见于妊娠期、分娩时、新生儿期;剧烈运动、热水浴;严寒、高温；午后高于清晨；饮食后高于饮食前等
病理性增高:急性感染；严重组织损伤；急性大出血；急性中毒;白血病及恶性肿瘤病例：患者朱全妹，女性，47岁,因砖墙砸伤腰骶臀部致左下肢活动受限伴腰骶臀部皮肤发紫5天于2001—12—04由急诊收治入院。
1．创伤性失血性休克 2．腰骶部、髂后部、右臀后部皮肤严重挫擦伤伴皮下积血 3．骨盆严重骨折 4．会阴部、肛门严重挫裂伤
血常规检查结果:Hb：92g/L RBC:3.0×1012/L PLT:271×109/L
WBC:32。7×109/L:中幼粒细胞： 2％ ；晚幼粒细胞：5％
杆状核粒细胞:35% ；多核粒细胞：45% ;淋巴细胞：9％ 单核细胞： 4％
中性粒细胞减少：某些革兰氏阴性杆菌感染;某些血液病;脾功能亢进；慢性理化损伤；自身免疫性疾病
淋巴细胞Lymphocyte
病理性增多见于：病毒性感染；某些慢性感染；各类淋巴细胞性白血病
淋巴细胞减少见于:接触放射线；应用肾上腺皮质激素及肾移植术后、AIDS
单核细胞Monocyte单核细胞病理性增多见于：心内膜炎、疟疾、黑热病；急性感染的恢复期;活动性肺结核及粟粒性结核;慢性单核细胞白血病
嗜酸性粒细胞Eosinophil
增高见于:过敏性疾病;寄生虫病;皮肤病;慢性嗜酸性白血病及淋巴瘤
7．血小板计数platelet
是由骨髓中成熟巨核细胞生成；在止血过程中起着重要的作用
计数方法:显微镜计数法;全自动血细胞分析仪法
参考值100~300×109/L
临床意义
血小板增多 〉 400×109/L；见于血小板增多症、慢性粒细胞增多症、真性红细胞增多症、骨髓纤维化、脾切除等。
血小板减少 〈 100×109/L；见于血小板减少紫癜（ITP)、再生障碍性贫血、急性白血病、X射线照射.
病例 患者：女32岁已婚 ,有一8岁女儿，无业
主述:经常头痛、疲乏、失眠。右肋骨下疼痛，胸骨疼痛。患者长期服用减肥药,无间断
血液检验结果：
ØWBC：15。4×109/L RBC：5.53×1012/L
ØNC: 85.2% Hb: 150g/L
ØLC: 11。6% PLT： 1321 ×109/L
ØMO: 1.8％ RDW: 17.8 ％
ØEOS: 0。9％ BAS： 0。5%
8．血红蛋白测定
方法：氰化高铁血红蛋白法全自动血细胞分析仪
原理：除Hbs外，多种血红蛋白（Hb）均可被高铁氢化钾氧化成高铁血红蛋白（Hi），再与CN— 结合生成稳定的棕红色氧化高铁血红蛋白（HiCN),在540nm处有一吸收峰
9、全自动血细胞分析仪多项参数测定仪器组成:1。主机 2 终端机3 打印机
阅读报告:1.18、23 项参数中英文报告2.图解3. 警告标志4。 含义报告
库尔特原理：孔径阻抗细胞计数原理
白细胞自动化分类
二项式分类 粒细胞和非粒细胞
三项式分类 淋巴、中性粒细胞和中间细胞
五项式分类 嗜中、嗜碱、嗜酸、淋巴、单核细胞
第三章 贫血

Key points
1，贫血的检验诊断标准
2，贫血发病病因分类
3，何谓WCV｜、RDW
4，巨幼细胞性贫血的发生原因
5，缺铁性贫血血象特征
一、贫血总论
1．贫血Anemia：
是一种症状,是指人体单位体积循环血中，红细胞计数、血红蛋白含量和红细胞比积低于正常参考值-—即称为贫血
2．RBC：主要功能：携带O2、运输CO2
膜组成:膜糖、膜脂、膜蛋白
膜结构:不对称性、流动性、骨架
膜功能：物质运输、抗原性、变形性、免疫功能
Hb:是红细胞中的运输蛋白,主要功能是吸收肺部大量CO2并输送到身体各组织
Hct:是指抗凝全血经离心沉淀后,测得下沉的红细胞在全血中所占容积的百分比值
3．贫血各系统的表现：
全身软弱无力、疲乏困倦、皮肤粘膜苍白
呼吸及循环系统:心悸、气短、心率加快、呼吸加重等,严重者发生心力衰竭
消化系统：食欲不振、腹胀、恶心、呕吐、消化不良、腹泻或便秘等泌尿生殖系统：尿可出现少量蛋白，肾功能轻度减低，甚至发生尿少、尿闭和急性肾功能衰竭
神经系统：头痛、头晕、畏寒、反应迟钝、耳鸣、眼花
4．贫血的病因与发病机制分类
红细胞生成减少：骨髓造血功能障碍、红细胞生成素产生缺陷、造血物质缺乏或失利用
红细胞破坏增多：
红细胞内在异常:膜缺陷、酶缺陷、珠蛋白链生成异常、阵发性睡眠性血红蛋白尿
红细胞外在异常:免疫性、机械性、化学与物理、感染、单核吞噬细胞系统功能亢进
红细胞丢失过多：急性、慢性失血
贫 血 分 类
贫血发病病因分类
缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血
溶血性贫血、血红蛋白病
红细胞膜缺陷致溶贫
自身免疫性溶贫
阵发性睡眠性血红蛋白病
红细胞形态分类
类型 MCV（f l） MCH （pg)
大细胞型＞100 ＞32
正常 80 ～ 94 26 ～ 32
单纯小细胞＜80 ＜26
小细胞低色素＜80 ＜26
红细胞骨髓增生特点分类
骨髓增生活跃性贫血：缺铁性、溶血性、失血后贫血
骨髓增生不良性贫血：原发性及继发性再生障碍性贫血
巨幼红细胞性贫血：
营养性巨幼红细胞性、恶性贫血
贫血的诊断
了解贫血程度、类型、病因
询问病史、体格检查、实验室诊断
5、贫血的检验诊断
血红蛋白含量Hb
轻度:成年男性〈120g/L；成年女性<110g/L
中度：<90g/L 重度:〈60g/L
红细胞计数
RBC(男）4。0～5。5×1012/L；（女）3。5～5。0×1012/L；(新生儿）6.0～7.0×1012/L
红细胞比积
HCT成年男性:41~ 53%;成年女性： 36 ~ 46％
周围血涂片检查
有助于贫血的形态学检查；可观察红细胞的大小、呈多染色性、红细胞发育成熟、中央淡染区、异型红细胞.
二、贫血各论
1、缺 铁 性 贫 血Iron deficiency Anemia
是由于体内用来制造 Hb 的贮存铁已被用尽，红细胞生成受到障碍而引起的典型的小细胞低色素性贫血。此为贫血中最常见的类型，可发生于各年龄组，但以育龄期妇女和婴幼儿尤为多见
血象:实验室检查
典型的小细胞低色素性贫血
Hb含量、红细胞计数均低于正常
红细胞中心淡染区扩大、或呈环状
血涂片中多见椭圆形、靶形红细胞
MCV、MCH均降低
网织红细胞未治疗前: 1—2%;
铁剂治疗后 7—10 天可达“高峰”
骨髓象：
骨髓增生活跃或明显活跃
红系增生明显，粒：红降低或倒置
各阶段的红细胞都较正常为小
中幼与晚幼红细胞显得特别小
铁染色细胞外铁消失
白细胞和血小板系统无改变
血液化学检查
血清铁的含量明显减少
血清铁蛋白的含量明显减少
运铁蛋白饱和度（％）明显减少
骨髓细胞外铁检查
在酸性环境中,加入20%亚铁氢化钾，而产生的普鲁士蓝反应。此为敏感的可靠的诊断方法,凡是缺铁性贫血，细胞外铁均减少
贫血病历：患者王婷艳,女性，8岁,因面色苍白、疲乏无力、头晕、心悸和心率加快，于1998年8月收住我院.患者在外院经铁剂治疗近半年，症状无改变。
血常规检查结果：Hb：56 g/L；RBC：1。64×1012/L;MCV:63 FL；RDW：18。4 ％
血液涂片:RBC为典型小细胞低色素型，RBC中心淡染区域扩大,可见5％靶形细胞和形状不规则的RBC
2．巨幼细胞性贫血megaloblastic anemia
是指叶酸、维生素B12 缺乏或其他原因引起脱氧核糖核酸（DNA）合成障碍所致的一类贫血。DNA生物合成受累引起细胞核分裂障碍,致骨髓红细胞系发生巨型改变.我国以叶酸缺乏为多见.
病因和发病机理:叶酸、维生素B12在细胞核DNA合成过程中都是重要的辅酶,如缺乏则导致细胞核DNA合成受抑，细胞向G2期转变障碍,而阻滞在S期，而RNA合成量正常,主要分布于细胞浆内。因此出现细胞体积增大,胞浆成熟，胞核幼稚的“老浆幼核”现象
血象：实验室检查
大红细胞正色素性贫血
MCV、MCH通常增高
红细胞呈大卵圆形、形状不规则
可见有核红细胞、巨幼红细胞
红细胞内出现Howell-Jolly小体
白细胞、血小板计数都减低
中性粒细胞分叶过多，达6— 8叶
骨髓象：
有核细胞增生明显活跃
红系增生明显,粒：红比例 1:1
巨幼红细胞的出现为特点
染色质排列疏松细致呈“幼核老浆"象
粒系巨型变以晚幼粒、杆状核明显
再生障碍性贫血Aplastic anemia
再障是由多种病因引起的骨髓造血干细胞明显减少。其特点是外周血液中红细胞、粒细胞和血小板都明显减少。临床上常出现较重的贫血、感染和出血。
血象:实验室检查
正常细胞正常色素性贫血
三系细胞数量减少，程度不一
网织红细胞计数降低
白细胞数量减少,淋巴细胞相对增多
3．溶血性贫血Hemolytic anemia
是指红细胞破坏加速而骨髓造血功能代偿不足时发生的一类贫血
表现为三大特征：贫血、黄疸、脾肿大
实验室检查血象：
正常细胞正常色素性贫血；网织红细胞显著增加；血清间接胆红素增加出现黄疸
尿内尿胆原排泄增多;血浆、尿内出现游离Hb ;尿内含铁血黄素呈阳性
溶血原因分析的检验
膜缺陷：RBC渗透脆性 T、自身溶血 T、酸溶血 T 、蔗糖水溶血 T
酶缺陷:自身溶血 T及纠正 T、变性珠蛋白小体生成 T 、酶的活性测定
珠蛋白合成异常：血红蛋白电泳红细胞镰变 T 、异丙醇沉淀 T
免疫性溶血:抗人球蛋白 T 、冷凝集 T 、冷溶血 T
红细胞膜缺陷性贫血RBC Membran Deficiency Anemia
红细胞膜的病变:通透性、柔韧性、变形性
红细胞酶的缺陷：参与红细胞糖代谢酶
4．血红蛋白病Hemoglobinopathy
珠蛋白生成障碍性贫血:珠蛋白合成不足；地中海性、海洋性
异常血红蛋白病：珠蛋白一级氨基酸构成异常；碱基突变、基因缺失、重组、融合
第五章 骨髓细胞学检查

Key points:
血细胞发育演变一般规律；各系各阶段的正常骨髓象;
常用组织化学染色特点；骨髓细胞检查的临床意义
1、骨髓增生程度分级及其临床意义
2、粒红之比正常、增高及减少见于哪些情况
3、AML 与MDS BM 细胞学诊断标准
4、 ALL 各型的骨髓检查
第一节　血细胞的生成与发育Hematogenesis and Development
干细胞—— STEM CELL
1、自我更新能力 RENEWAL
2、高度增殖PROLIFERATION
3、多向分化潜能 PLURIPOTENTIAL
二、血细胞成熟规律The Maturation Law of Hemocytes
胞体：大→小（巨核细胞相反）
胞浆：(1)量　少→多(淋巴细胞例外）(2）颜色　深蓝→浅蓝→淡红→红细胞→橘红（3)颗粒　无→嗜天青（早幼）→特异性(中性、嗜酸、嗜碱） (basophilic myeloblast 核/质散在粗大紫黑色spots）
胞核:(1)大小　大→小
(2)核形　规则→不规则
（3）染色质　细致而疏松→粗而紧密
（4)核仁　有→无
（5）核膜　不明显→明显
核浆比：核大质少→核小质多（巨核细胞相反)
第二节 正常血细胞形态学
各系各阶段的正常骨髓象
第三节　常用血细胞化学染色检查
过氧化物酶染色
Peroxidase POX staining ↓
H202 +0→二氨基联苯胺→金黄沉淀
阳性：粒（强）单（弱、细）系。胞质中蓝黑 or 棕黑颗粒。苏丹黑(SBB）对脂类染色反应同POX;中性粒细胞碱性磷酸酶染色Neutrophil Alkaline phosphatase NAP
1。判断标准及分级
标准评分胞质中阳性染色颗粒
- 0分无
+ 1分少量或弥散浅色
++ 2分中等量或弥散 深色
+++ 3分较多或弥散较深色
++++ 4分充满大颗粒或弥散深色
2。NAP阳性正常成熟中性粒细胞
3。临床意义
增高：严重化脓性感染类白血病反应真红骨髓纤维化 ALL 慢粒急变　MM 再障恶性淋巴瘤原发性血小板减少性紫癜
减低： CML AML PNH 恶组
鉴别诊断： CML vs 类白血病反应 PNH vs AA ALL vs AML
碱性磷酸酶的表达
许多资料表明，rat、mice的桑格胚细胞和囊胚细胞均有AKP表达,Mice的EC和ES中均含有丰富的AKP.而在已分化的EC和ES中AKP呈弱阳性或阴性.猪、兔的桑格胚和早期囊胚AKP呈阳性.因此，AKP常用来作为鉴定EC或ES分化与否的标志之一。
糖原染色Periodic acid—Schiff reaction, PAS
正常:幼红:阴性巨核系、血小板：阳性早幼粒以下各期粒细胞渐强，均匀、红色。
判断标准胞质中红色颗粒
1.有核红细胞2.淋巴细胞
0 无0 无
+ 分散少数或色浅+ 有一圈
++ 1-2个浓颗粒环/弥散红色 ++ 有两圈
+++ 较粗颗粒小块/大块红色 +++ 有三圈
++++有红色大团块
其他染色
非特异性脂酶染色
中性~,α—醋酸萘脂酶 NAE
酸性～，酸性醋酸萘脂酶 ANAE
碱性～，α-丁酸萘酶 NBE
特异性脂酶染色
氯醋AS-D萘酚酯酶（NAS—DCE）染色
表P32
骨髓细胞铁染色
细胞外铁(储存铁)：骨髓铁以含铁血黄素形式贮存于网状细胞细胞内铁:BM中、晚幼红细胞内铁颗粒
BM铁染色的临床意义:
1。缺铁性贫血诊断、治疗指导
BM smear 细胞外铁消失铁粒幼细胞％下降。治疗后细胞外铁增加
2。铁粒幼细胞贫血诊断幼红细胞含铁粒粗而多
3.判断机体内铁贮存和利用骨髓贮铁用完细胞内外铁明显降低 or 消失。小细胞贫血而BM 内外铁正常or 增多铁利用障碍
4.MDS 铁粒幼比例增高出现环形铁粒幼细胞
5。非缺铁性贫血观察溶贫 AA leukemia BM 内外铁正常
第四节　骨髓细胞检查的临床意义
辅助造血系统疾病和造血相关疾病诊断 (MIC) ；鉴别诊断；治疗方案选择；疗效观察;复发预测；
一、造血系统疾病诊断、鉴别诊断、疗效观察
诊断:各种类型贫血和白血病 白细胞减少症　血小板减少性紫癜
鉴别诊断：全血细胞减少症：脾亢 巨幼红贫　恶性网状细胞症 非白血性白血病　AA ( aplastic anemia）
二、其他疾病诊断
MM 部分恶性肿瘤　转移癌
某些代谢障碍性疾病：高雪(Gaucher）症
尼曼－匹克（Nieman—Pick）病
某些寄生虫病：疟疾、黑热病
一、骨髓细胞学检查结果分析
1。骨髓增生程度：表P39
2。 有核细胞分类和粒/红比值(myeloid：erythroid M：E）
有核细胞分类计数计数200/500有核细胞,计算出各系统各阶段有核细胞百分数.
G：E=粒系总数/幼红总数 1。5—3。4：1
细胞分类计数时，巨核细胞另行单独计数
3。 正常骨髓象
粒系：增生活跃占有核细胞50%±
各阶段细胞形态正常，比例适当： 原粒〈2％ 中幼粒〈5％ 中晚幼粒各15% 嗜酸<5％ 嗜碱〈1%
红系：增生活跃占有核细胞20％±
各阶段形态正常，比例适当： 原红细胞<2％ 早幼红〈5％ 中晚幼红各10％
淋巴细胞：占有核细胞20%(儿童40％)，
单核及浆细胞各〈4% 大多为成熟阶段细胞
巨核细胞：易见，主要为产板巨原巨0~5％ 20～70％ 裸核0～30％ 血小板簇易见
非造血细胞：组织嗜碱\内皮细胞、网状细胞少量
特殊细胞及寄生虫：无
骨髓细胞检查报告例举
例一正常髓报告方式
1. 取材佳、制片、染色满意
2. 有核细胞增生活跃、粒：红＝2:1
3. 粒系原始粒以下各阶段比例正常，形态未见异
4. 红系各期比例正常、形态未见异常。
5. 淋巴系统正常.
6. 巨核系统全片查见20个，均为成熟形，散在成簇血小板易见.
意见：正常骨髓象。
例二　粒系:40％；红系:46％(中幼红20%,晚幼红26％）；粒:红0。87：1(粒红比倒置）
缺铁性贫血骨髓象
1. 取材佳、制片、染色尚可
2. 有核细胞增生明显活跃、粒:红＝0。87:1
3. 红系尤为活跃，以中晚幼红增生为主占46％，部分幼红细胞体积小，浆少偏兰,边缘残缺不齐,核固缩,成熟红细胞淡染区扩大，可见嗜多色红细胞。
4. 粒系相对欠活跃，余未见异常.
5. 淋巴系统大致正常.
6. 全片查见巨核细胞30个,均为成熟形，散在成簇血小板多见，细胞外铁（－），铁粒幼红细胞5%。
意见:骨髓象符合缺铁性贫血。
缺铁贫 地贫 铁粒幼贫 巨贫 AA 溶贫
外铁 — + ～++ +++ ~++++ ＋＋～＋＋＋＋
铁粒幼 0～30％↓ 30～90％ 50～90↑ 40～90 ↑
红细胞
颗粒分布 细小 多 粗大色深 粗大色深
色淡 1—5粒 出现环形铁粒 多至30粒
1—2粒
MDSMyeloidysplastic syndromes
1。Definition 全潜能造血干细胞(Totipotent hematopoitic stemm cell）水平上的恶性病变，致分化/成熟障碍而引起的一组克隆性造血系统疾病。特点是向白血病转化。
2。Type RA （refractory anemia）
RARS （~ with ring sideroblast） RAEB (~ with excess of blast） RAEB—t ( in transformation）
CMML(chronicmyelomonocytic leukemia
MDS的WHO骨髓象诊断标准:见表P49
TYPE BM
RA Without MD 原始细胞〈5% RS〈15％
With MD 上条+粒系和/巨核系MD
RARS Without MD 原始细胞<5％ RS³15％
With MD 上条+粒系和/巨核系MD
RAEB RAEB-I 原始细胞 5~10％
RAEB—I 原始细胞 11～20％
CMML 原始细胞0~20％
急性白血病原始细胞形态鉴别：见表P50
细胞原粒细胞原淋巴细胞原单核细胞
胞体（μm） 12～20 10～16 16~22
外形规则圆/椭圆规则圆形圆形或椭圆形/不规则有伪足
形态圆形/椭圆 圆/椭圆有切迹 圆/不规则可有凹陷折叠偏于胞浆一侧
细染色质细颗粒状； 颗粒状排列致密；纤维网状分布
均匀分布平薄感；浓染核膜及核仁;不匀起伏不平
胞着色浅周围更浓集着色较深
核膜不清楚最清楚较清楚
核核仁 2～5个 较小1～2个清楚 1～3个大而易见
细量少很少环绕于核周较多常见伪足
胞颜色淡/中蓝清彻淡/中蓝清彻灰蓝色半透明感
浆 Auer小体常见无 常见有时不止一条
ALL各亚型的细胞学特征：见表P51 明显 蜂窝状
不定
不定
胞浆空泡
深蓝
不定 有些深染
轻或中度
胞浆嗜碱
较多
不定 常较多
少
胞浆量
明显1 或多个小泡状
清楚 1或多个
不常见 /小而不清
核仁
较规则
不规则 凹陷
折叠常见

规则
偶有凹陷和折叠
核形
呈细点状均匀
疏松 每例
结构不一
较粗
每例结构较一致
核染色质
大细胞为主大小 较一致
大细胞为主
小细胞为主
细胞大小
III 型
II 型
I 型
细胞特征

Auer Claviform Body
Definition 散在于细胞质中,棒头状or 棒杆状。深红色，排列不整.最多见于多颗粒网状细胞。
表：P53、54
AML的形态学/免疫学分型
亚型 描述标准
M0 MPO阴性髓系标记阳性
M1 原始细胞>90%,MPO〉3％阳性
M2 原始细胞20%～90％ 单核系细胞〈20％
M3 早幼粒细胞样细胞，M3v
M4 原始20%~90% 单核系细胞20～80％
M5 原始细胞>80％，有单核系细胞
M6 BM幼红>50％原始细胞〉20 M6B BM
80％幼红 M6D BM 20 %细胞原始粒
M7 原巨核细胞.20%
Double 淋系与髓系细胞标记阳性
Phenotype
1. AML的形态学/免疫学分型
2. ALL各亚型的细胞学特征
3. MDS的WHO骨髓象诊断标准
4. 骨髓细胞外铁及铁粒细胞染色在缺铁性贫血诊断中的意义
血管壁结构与功能两项检查的意义
血小板在血栓与止血中的作用及其发挥途径
血小板计数正常值及其临床意义
根据发病机制可将出血性疾病分为哪两大类?它们的检查可归为哪两大类？各类包括哪些内容及其临床意义。
DIC诊断的初筛和确诊实验各有何内容？
患者男 22 岁工人因膝关节血肿伴血尿来院就诊
实验室检查:
1、          出血时间 1分钟
2、          凝血时间 20分钟
3、          血小板 150×109/L
4、          PT 12 S（对照11 s）
5、          KPTT 90S（对照35S）
6、         TT 18S(正常对照17S）
7、          尿常规检查RBC满视野/HP
试问： 1、          以上检查哪些项目不正常？
2、          可能是哪种出血性疾病？
3、          应进一步作何试验？
第六章 肾功能检测

Key points：
1。何谓肾小球滤过率？肾小球滤过功能检测有那些？
2.浓缩稀释试验检测是了解肾脏哪个部位受损伤，其正常值和临床意义是什么？(P。126）
名词解释
1。肾清除率
2。内生肌酐清除率（P。118）
第一节肾脏生理概述
一、肾脏的生理单位
肾单位
肾小球：毛细血管丛，肾小球囊
肾小管:近曲、远曲小管，髓袢(每侧100万个.）
二、肾脏的生理功能
(一）生成尿液，清除体内废物
1。 肾小球滤过作用：形成原尿（120ml/min)
2。 肾小管选择性重吸收:水、糖、电解质
3。 肾小管分泌和排泄作用：H＋、Ca＋＋等
（二）调节水电平衡
1。 Na、Cl、水的重吸收:肾小管
2. K的重吸收:近曲吸收、远曲排泌
3。 Ca、P的重吸收
（三)调节酸碱平衡
1。 HCO3－的主动重吸收:近曲小管
2。 H＋的排泌：远曲小管、髓袢
3。 NH3 ＋的排泌：髓袢
（四)内分泌功能
1。 肾素－血管紧张素－醛固酮系统
2. 1,25－二羟胆钙化醇（活性VitD3)
3. 促红细胞生成素、前列腺素和激肽
三、肾功能检查的目的
了解有无肾功能损伤、肾脏损失的程度和范围（累及肾小球、肾小管,或两者均累及）,借以制定治疗方案，观察其动态变化,判断预后。
第二节肾小球滤过功能试验
一、概述
（一)肾小球滤过率(GFR)
每分钟肾小球滤过液的产量
某种物质清除率＝U（尿浓度）´ V（尿量）/P(血浓度）
（二）影响GFR的因素
1。 肾小球通透性增加：炎症早期、缺氧
2。 肾小球通透性降低:炎症晚期、膜增生
3. 肾小球毛细血管压下降：大出血、休克
4。 肾小球囊内压变化：尿路梗阻
（三）检查方法
检查方法很多,需根据病情、病变部位，合理选择.
二、血尿素（blood urea，BU）的测定
（一)原理：BU是体内蛋白质的代谢产物,经肾小球滤过而随尿排出。肾小球滤过功能减退时，血BU浓度增高。
（二）方法：取静脉血检测.
（三）参考值：1.78~7.14 mmol/L
（四）临床意义
1。 肾性增高
1）不敏感，有效肾单位60～70％损伤;
2）慢性肾炎、肾盂肾炎、肾动脉硬化等；
3）尿毒症时有特殊价值，与病情成正比:
7。14~14.28 mmol/L