DB35_T+1599-2016白僵菌防治林业害虫技术规程-(高清版）.pdf

ICS 65.020.40 B 65 DB35 福建省地方标准 DB35/T 15992016 白僵菌防治林业害虫技术规程 Technical regulation for controlling forest pest by using Beauveria spp.2016-08-22 发布 2016-11-22 实施福建省质量技术监督局 发 布 福建省地方标准 白僵菌防治林业害虫技术规程 DB35/T 15992016*2017 年 1 月第一版 2017 年 1 月第一次印刷 DB35/T 15992016 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 防治对象.1 4 剂型选择.1 5 质量检测.2 6 施用环境条件.2 7 防治适期.2 8 施菌方法.2 9 防治效果调查.3 附录 A（资料性附录）白僵菌剂型质量参数.5 附录 B（资料性附录）白僵菌菌剂质量检测方法.6 参考文献.9 DB35/T 15992016 II 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009标准化工作导则 第 1 部分：标准的结构和编写给出的规则编写。本标准由福建省林业厅提出并归口。本标准起草单位：福建省林业有害生物防治检疫局、福建省林业科学研究院、泉州市林业有害生物防治检疫站、福建省南安市林业局白僵菌厂。本标准主要起草人：王玲萍、蔡守平、钟景辉、蔡国贵、陈德兰、陈昌谋、苏文晶。DB35/T 15992016 1 白僵菌防治林业害虫技术规程 1 范围 本标准规定了林业上应用白僵菌（Beauveria spp.）的防治对象、剂型选择、质量检测、施用环境条件、防治适期、施菌方法和防治效果调查。本标准适用于白僵菌防治林业害虫技术应用与效果检查。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 1605-2001 商品农药采样方法 GB/T 16150-1995 农药粉剂、可湿性粉剂细度测定方法 GB/T 25864-2010 球孢白僵菌粉剂 LY/T 1681-2006 林业有害生物发生与成灾标准 3 防治对象 包括但不限于马尾松毛虫、云南松毛虫、刚竹毒蛾、木麻黄毒蛾、松茸毒蛾、竹镂舟蛾、竹篦舟蛾、竹绒野螟、黑足角胸叶甲、茶丽纹象、黄脊竹蝗、浙江黑松叶蜂、叶蝉和叶螨类等食叶害虫，多纹豹蠹蛾、松墨天牛、星天牛、光肩星天牛、桑天牛、桃红颈天牛、萧氏松茎象等钻蛀性害虫，竹笋禾夜蛾、浙江双栉蝠蛾、竹笋象、油茶象、白蚁类、蛴螬类、蝼蛄类和地老虎等地下害虫。4 剂型选择 4.1 白僵菌剂型 主要有粉剂（包括高孢粉、低孢粉）、可湿性粉剂、油剂和菌条。通常将白僵菌粉剂和可湿性粉剂统称为菌粉。各剂型主要质量参数参见附录A。4.2 剂型选择 4.2.1 粉剂和可湿性粉剂：直接喷粉或配成菌液喷雾防治食叶害虫、钻蛀性害虫成虫，制成粘膏防治钻蛀性害虫的幼虫，制成菌土防治地下害虫。4.2.2 油剂：配成菌液防治食叶害虫、钻蛀性害虫成虫，制成粘膏防治钻蛀性害虫的幼虫。4.2.3 菌条：用于防治钻蛀性害虫的成虫。DB35/T 15992016 2 5 质量检测 选择保质期内、合格、高效、适用的白僵菌剂型。对调入或库存期内的白僵菌剂型可抽样进行质量检测，各剂型质量检测方法参见附录B。6 施用环境条件 防治非隐匿性害虫时，宜在气温15 30，相对湿度在80%100%的天气条件施用。在气温20 25、相对湿度在95%以上，施药后仍有24 h48 h以上潮湿天气时施放效果最佳。防治地下害虫时，土壤含水量宜在5%以上。宜选择微风、雨后或有露水天气的早晚进行，尽量避开蜜蜂、蚕、五倍子蚜等资源昆虫饲养与开发应用的区域。7 防治适期 根据不同林业害虫生活史，做好发生时期和发育进度的调查监测。选择在标靶害虫低龄期且轻、中度发生时施放。林业害虫发生程度按照LY/T 1681-2006规定要求执行。8 施菌方法 8.1 喷粉法 8.1.1 机动喷粉 低孢粉用量7.50 kg/hm211.25 kg/hm2，用控制机动喷粉机喷粉门的办法喷撒。高孢粉用量0.23 kg/hm20.45 kg/hm2，使用滑石粉等按照1:100的比例充分混匀、稀释后采用机动喷粉机进行林间喷粉。宜在上风口沿林道、山脊顺风喷撒。8.1.2 放粉炮 将白僵菌低孢粉加炮芯加工包装成粉炮（一般0.13 kg/个），轻度以下发生的林分施放粉炮15 个/hm230 个/hm2，中度发生的林分施放粉炮30 个/hm260 个/hm2，重度发生的林分施放粉炮不少于60 个/hm2。宜在低矮林分中使用。使用时可在高位上风处，人工点着引线后，将粉炮抛向林冠上空；或用长竹竿挑着，点着后迅速举至林冠高度。8.1.3 放高炮 将白僵菌高孢粉加中心爆管生产成药包（一般1.50 kg/个），每个药包辐射面积0.4 hm20.6 hm2。采用高压气动布撒设备，根据爆管的不同延期时间将药包发射到预定位置的林冠上方爆炸。尤为适宜在地形、地貌复杂，不易到达的林区使用。DB35/T 15992016 3 8.2 喷雾法 8.2.1 菌液配制 8.2.1.1 粉剂和可湿性粉剂 在低孢粉中加入少量水和0.05%洗衣粉，浸泡搓洗15 min后，用双层纱布或80目尼龙纱网过滤一次，再用定量的水二次过滤，除去滤渣即可。高孢粉或可湿性粉剂可不需过滤，直接加水调匀，或在菌液中加入0.05%洗衣粉作为孢子分散助剂，配成所需浓度的孢子液。8.2.1.2 油剂 使用0号柴油稀释后，配成所需浓度的孢子液。8.2.2 浓度与用量 配制成1107 个孢子/mL1108 个孢子/mL的菌液喷雾防治。常量喷雾375 L/hm2750 L/hm2，超低容量喷雾4.50 L/hm26.00 L/hm2。8.2.3 喷雾要求 配制好的菌液在2 h内使用。根据地形地貌和害虫发生情况，采用带状、点状、小块状的方法，将菌液均匀喷洒到林间或树干上。8.3 其它施菌法 8.3.1 飞机喷洒法：森林害虫发生面积大，山高林密，人烟稀少的林区，可采用飞机进行喷洒高孢粉或超低容量喷洒白僵菌油剂。高孢粉喷粉量 0.15 kg/hm20.30 kg/hm2，油剂的用量为 0.30 L/hm20.45 L/hm2。8.3.2 挂放菌条：将菌条螺旋式缠绕寄主植物树干 1 圈以上。该方法可与引诱剂配合使用，在诱捕器周边树干挂设。8.3.3 粘膏法：用棉花球蘸白僵菌菌液或白僵菌高孢粉与废糖蜜 1100 配比制成的粘膏，塞入蛀孔内，用于防治钻蛀于树干内的害虫。8.3.4 菌土法：将菌粉按一定比例与细土进行混合，制成含菌量为 0.1108 个孢子/g0.5108 个孢子/g 的菌土，菌土用量为 750 kg/hm2，施入树木基部周围土壤。8.4 混合使用法 白僵菌可与阿维菌素、苏云金杆菌、核多角体病毒等生物或微生物农药混合，1 kg低孢粉加生物或微生物农药0.1 kg；也可与敌百虫、吡虫啉、溴氰菊酯等化学杀虫剂混合使用，化学杀虫剂占比1%2%，最多不超过10%。不得与杀菌剂混用。9 防治效果调查 9.1 调查时间 应用白僵菌防治前、防治后15 d和防治后30 d，各调查1次林间害虫的虫口密度。DB35/T 15992016 4 9.2 调查方法 9.2.1 样株法 适用于叶部害虫和枝干害虫。在防治区选择有代表性林分设1块2块标准地详查。按100 hm2不少于2块、1000 hm2不少于5块、10000 hm2不少于15块设置标准地。标准地面积为0.2 hm2（50 m40 m），采用对角线或平行线抽样法抽取20株作为调查标准株。叶部害虫在标准株上、中、下部，东、南、西、北方向，各选取50 cm标准枝一枝进行检查。对匿居于树干内的害虫幼虫，调查样株中下部，在有新鲜虫粪处做好标记，防治后，查看原标记处有无新的虫粪排出，进而判定是否死亡。9.2.2 样方法 适用于地下害虫。在防治区每1 hm2采用“Z”字形或棋盘式设置9个样方。每样方面积不低于1 m2。调查时根据害虫种类，调查地上和地下危害情况，需挖开土层，翻挖深度为30 cm左右。9.3 计算公式 根据调查结果，按式（1）计算林业害虫虫口减退率。100(%)BCBA.(1)式中：A虫口减退率，%；B防治前虫口密度，单位为头每统计单位（头/株、50cm标准枝、段、m2等）；C防治后虫口密度，单位为头每统计单位（头/株、50cm标准枝、段、m2等）。DB35/T 15992016 5 附 录 A（资料性附录）白僵菌剂型质量参数 白僵菌剂型质量参数见表A.1。表A.1 白僵菌剂型质量参数 粉剂 控制 指标 高孢粉 低孢粉 可湿性粉剂 油剂 菌条 外观 浅黄白色疏松粉末，无团块。白色或浅灰白色粉末，无团块。浅黄白色疏松粉末，无团块。褐色流动体。培养基附着在条状的纤维织物材料上培养的菌剂，表面浅黄白色疏松粉末。含孢量 1000108 个/g 100108 个/g400108 个/g 500108 个/g 2108 个/cm2 活孢率 90%90%90%80%90%含水率 10%10%8%10%水分 4%细度 全部通过 160 目筛 全部通过 35 目筛全部通过 160 目筛 悬浮率 80 贮存稳定性 在 4 下贮存 12 个月，活孢率不低于标准 80%；在 25 下贮存 6 个月，活孢率不低于标准 70%。DB35/T 15992016 6 附 录 B（资料性附录）白僵菌菌剂质量检测方法 B.1 采样 白僵菌粉剂、可湿性粉剂、菌条采样按照GB/T 1605-2001中“固体制剂采样”方法进行，用随机数表法确定采样的包装件；最终采样量应不少于300 g。白僵菌油剂采样按照GB/T 1605-2001中“液体制剂采样”方法进行。用随机数表法确定抽样的包装件数：最终取样量应不少于200 mL。B.2 鉴别试验 B.2.1 菌种鉴别 当对鉴别结果有怀疑或争议时，应到具有菌种认证资质的单位，将在菌种保藏中心的生产菌种及母药与模式菌种描述进行对照，由两名以上的专家确认后，出具菌种鉴定报告，作为仲裁依据。B.3 含孢量的测定 B.3.1 试剂和溶液 吐温80（V/V 0.1%溶液）。所用试剂均为分析纯。B.3.2 仪器设备及玻璃器皿 生物显微镜（物镜目镜倍数不低于400），分析天平（精度1/10000），血球计数板（精度1/4000.1 mm，规格2516）及配套盖玻片，精密定时电动搅拌器（3000 rpm/min5000 rpm/min）或高速振荡器，三角烧瓶（容量500 mL1000 mL）等。B.3.3 测定步骤 B.3.3.1 试样溶液的配制 B.3.3.1.1 白僵菌粉剂、可湿性粉剂：用精度为千分之一的天平准确称取低孢粉1.000 g或高孢粉0.100 g或可湿性粉剂0.500 g，置1000 mL三角瓶中，加蒸馏水300 mL，再加0.30 mL吐温-80。置搅拌器（3000 rpm/min5000 rpm/min）搅拌或振荡器（180 r/min）振荡20 min，然后加蒸馏水至500 mL，再搅拌或振荡5 min，使孢子充分分散，制成孢子悬浮液。B.3.3.1.2 白僵菌油剂：首先将样品充分搅拌均匀，称取样品1 g于烧杯中，准确加入一定量纯净柴油，充分搅拌或振荡使之悬浮成为1000倍均匀菌液。B.3.3.1.3 白僵菌菌条：任意抽取培养好的白僵菌菌条，在其上剪下方形的一小块（10 cm10 cm），分别放入装有200 mL蒸馏水的500 mL三角瓶中，加适量吐温-80，用搅拌器搅拌或振荡20 min，将菌条上的孢子全部洗下分散，制成孢子悬浮液。DB35/T 15992016 7 B.3.3.2 测定 取2516规格的血球计数板，盖上配套的专用盖玻片，用吸管吸取配制好的悬浮液沿盖玻片的边缘滴入，使孢子液恰好充满盖玻片与载玻片之间，以孢子液不入槽为度，多余的孢子液用滤纸吸去，放在显微镜载物台上静置1 min2 min，待浮动的孢子静止后，放大400倍检视计数。在规划格区内，计四周及中央的5个中格（即80个小格）的孢子量。每中格四周如有压线的孢子，数上线不数下线，数左线不数右线，每样品重复点样计数35次，取其平均值。样品浓度以5个中格总孢子数100左右为宜，如果不合适可以稀释样品调节成此浓度。B.3.3.3 计算 试样中含孢量X1按式（B.1）计算：nQNKX8010461.(B.1)式中：X1含孢量，单位为个孢子/g；K 总稀释倍数；Q 检测样品重量或面积，单位为克（g）或平方厘米（cm2）；N n次计数的总孢子数，单位为个；n 计数次数。B.3.3.4 允许差 两次平行测定结果相对标准差不大于平均数的10%。B.4 孢子萌发率的测定 孢子萌发率测定参考GB/T 258642010中测定方法。B.5 含水率测定 B.5.1 仪器及设备 扁形称量瓶：40 mm，电热恒温干燥箱：105 2，干燥器。B.5.2 试验步骤 称取样品0.5 g1 g（精确至0.01 g），置于预先称重的称量瓶中，将此瓶放入105 2 电热干燥箱内干燥，1 h后取出，在干燥器中冷却至室温，称重。B.5.3 测定结果 试样中含水率X3%按式（B.2）计算。mmmX13(%).(B.2)DB35/T 15992016 8 式中：m样品的重量，单位为克（g）；m1干燥后试样重量，单位为克（g）。B.6 细度的测定 白僵菌粉剂、可湿性粉剂细度测定按照GB/T 16150-1995中干筛法进行。B.7 白僵菌油剂悬浮率测定 将样品用零号新鲜柴油稀释成30倍菌液倒入200 mL具塞量筒中，至200 mL刻度线，盖上瓶塞上下颠倒30次，立即放入30 水浴中，恒温30 min后立即轻轻取出，不能振荡，接水流减压管，将瓶中菌液由上液面逐渐向下吸出，盛于烧杯中(上悬液)直至20 mL刻度线为止。瓶中剩余物为下悬液。控制水流，使整个抽吸过程在15 s20 s内完成。用称量过的滤纸分别过滤上下悬液并将其在105 下烘1 h，取出冷却后称重。重复3次，取平均值。悬浮率按式（B.3）计算。100(%)CBBA.(B.3)式中：A悬浮率，%；B上悬液滤质干重，单位为克（g）；C下悬液滤质干重，单位为克（g）。B.8 贮存稳定性 将试样分别在4 2 贮存12个月、在25 2 下贮存6个月后，参照B.4方法测定活孢率。DB35/T 15992016 9 参 考 文 献 1 SN/T 23742009 绿僵菌、白僵菌生物农药检验操作规程 2 DB11/T 11292014 生物防治产品应用技术规程 杨扇舟蛾颗粒体病毒 3 DB13/T 9442008 苗圃地下害虫综合防治技术规程 4 李运惟等.白僵菌的生产和应用M.北京：中国林业出版社，1981.5 国家林业局森防总站.林用药剂药械使用技术M.北京：中国林业出版社，2014._