JJF 1815-2020Ⅱ级生物安全柜校准规范-(高清原版）.pdf

中华人民共和国国家计量技术规范J J F1 8 1 52 0 2 0级生物安全柜校准规范C a l i b r a t i o nS p e c i f i c a t i o nf o rC l a s s B i o s a f e t yC a b i n e t s 2 0 2 0-0 1-1 7发布2 0 2 0-0 4-1 7实施国 家 市 场 监 督 管 理 总 局 发 布市场监管总局市场监管总局级生物安全柜校准规范C a l i b r a t i o nS p e c i f i c a t i o nf o rC l a s sB i o s a f e t yC a b i n e t sJ J F1 8 1 52 0 2 0 归 口 单 位:全国生物计量技术委员会 主要起草单位:中国计量科学研究院 参加起草单位:浙江省计量科学研究院苏州市计量测试院江苏省计量科学研究院北京市计量检测科学研究院 本规范委托全国生物计量技术委员会负责解释J J F1 8 1 52 0 2 0市场监管总局市场监管总局本规范主要起草人:隋志伟(中国计量科学研究院)高运华(中国计量科学研究院)参加起草人:余笑波(浙江省计量科学研究院)厉 龙(苏州市计量测试院)崔宏恩(江苏省计量科学研究院)王晓阳(北京市计量检测科学研究院)沙跃兵(浙江省计量科学研究院)J J F1 8 1 52 0 2 0市场监管总局市场监管总局目 录引言()1 范围(1)2 引用文件(1)3 术语和计量单位(1)3.1 生物媒介(1)3.2 生物危害(1)3.3 交叉污染(1)3.4 产品保护(1)3.5 气流(1)3.6 生物安全柜标称宽度(2)3.7 生物安全等级(2)3.8 生物安全柜(3)3.9 流速标称值(3)3.1 0 伞形罩排气连接(3)3.1 1 直接排气连接(3)3.1 2 高效过滤器(3)3.1 3 多分散气溶胶(3)3.1 4 工作区(4)3.1 5 工作台(4)3.1 6 前窗(4)3.1 7 前窗操作口高度(4)3.1 8 保护因子(4)4 概述(4)5 计量特性(5)6 校准条件(6)6.1 环境条件(6)6.2 校准用标准器及配套设备(6)7 校准项目和校准方法(8)7.1 外观检查(8)7.2 下降气流流速(8)7.3 流入气流流速(9)7.4 气流模式(1 1)7.5 洁净度(1 2)7.6 照度(1 2)7.7 噪声(1 3)J J F1 8 1 52 0 2 0市场监管总局市场监管总局7.8 高效/超高效过滤器检漏(1 4)7.9 人员、产品和交叉污染保护(1 6)8 校准结果表达(2 2)9 复校时间间隔(2 2)附录A 碘化钾法(2 3)附录B 校准原始记录格式(2 8)附录C 校准证书(内页)格式(3 2)附录D 级生物安全柜校准结果的测量不确定度评定示例(3 3)J J F1 8 1 52 0 2 0市场监管总局市场监管总局引 言本规范的编写以J J F1 0 0 12 0 1 1 通用计量术语及定义、J J F1 0 7 12 0 1 0 国家计量校准规范编写规则和J J F1 0 5 9.12 0 1 2 测量不确定度评定与表示为基础和依据。校准方法及计量特性等主要参考了B SE N1 2 4 6 9:2 0 0 0 生物技术 微生物安全柜的性能标准(B i o t e c h n o l o g yP e r f o r m a n c ec r i t e r i a f o rm i c r o b i o l o g i c a l s a f e t yc a b i n e t s)、N S F/AN S I 4 92 0 1 8 生物安全柜 设计、结构、性能和现场认证(B i o s a f e t yC a b i n-e t r yD e s i g n,C o n s t r u c t i o n,P e r f o r m a n c e,a n d F i e l d C e r t i f i c a t i o n)、I S O 1 4 6 4 4-1:2 0 1 5 洁净室及相关受控环境 第1部分:依据粒子浓度对空气洁净度分级(C l e a n-r o o m sa n da s s o c i a t e dc o n t r o l l e de n v i r o n m e n t s P a r t1:C l a s s i f i c a t i o no fa i rc l e a n l i n e s sb yp a r t i c l ec o n c e n t r a t i o n)、B S5 7 2 6-3:1 9 9 2 微生物安全柜规范 第3部分:安装后性能规范(M i c r o b i o l o g i c a l s a f e t yc a b i n e t s P a r t 3:S p e c i f i c a t i o nf o rp e r f o r m a n c ea f t e ri n s t a l l a t i o n)、WS2 3 32 0 1 7 病原微生物实验室生物安全通用准则、Y Y0 5 6 92 0 1 1级生物安全柜。本规范为首次发布。J J F1 8 1 52 0 2 0市场监管总局市场监管总局级生物安全柜校准规范1 范围本规范适用于级生物安全柜的校准,级和级生物安全柜相同原理部分的校准可以参照本规范执行。2 引用文件本规范引用了下列文件:B SE N1 2 4 6 9:2 0 0 0 生物技术 微生物安全柜的性能标准(B i o t e c h n o l o g yP e r-f o r m a n c ec r i t e r i a f o rm i c r o b i o l o g i c a l s a f e t yc a b i n e t s)N S F/AN S I 4 92 0 1 8 生物安全柜 设计、结构、性能和现场认证(B i o s a f e t yC a b i n e t r y:D e s i g n,C o n s t r u c t i o n,P e r f o r m a n c e,a n dF i e l dC e r t i f i c a t i o n)I S O1 4 6 4 4-1:2 0 1 5 洁净室及相关受控环境 第1部分:依据粒子浓度对空气洁净度分级(C l e a n r o o m sa n da s s o c i a t e dc o n t r o l l e de n v i r o n m e n t s P a r t1:C l a s s i f i c a t i o no f a i r c l e a n l i n e s sb yp a r t i c l ec o n c e n t r a t i o n)B S5 7 2 6-3:1 9 9 2 微生物安全柜规范 第3部分:安装后性能规范(M i c r o b i o l o g i c a ls a f e t yc a b i n e t s P a r t 3:S p e c i f i c a t i o n f o rp e r f o r m a n c ea f t e r i n s t a l l a t i o n)WS2 3 32 0 1 7 病原微生物实验室生物安全通用准则凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本规范;凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本规范。3 术语和计量单位B SE N1 2 4 6 9:2 0 0 0、N S F/AN S I 4 92 0 1 8和I S O1 4 6 4 4-1:2 0 1 5中界定的及以下术语和定义适用于本规范。3.1 生物媒介 b i o l o g i c a l a g e n t s【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】一切微生物和生物活性物质。3.2 生物危害 b i o h a z a r d【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】由生物媒介导致的直接或潜在的危险。3.3 交叉污染 c r o s sc o n t a m i n a t i o n【B SE N1 2 4 6 92 0 0 0】目标物外的物质意外进入目标物。3.4 产品保护 p r o d u c tp r o t e c t i o n【B SE N1 2 4 6 92 0 0 0】生物安全柜防止来自外部空气中的污染物通过前窗操作口传播进入安全柜工作区。3.5 气流 a i r f l o w3.5.1 下降气流流速 d o w n f l o wv e l o c i t y【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】来自生物安全柜上方经高效过滤器过滤的垂直向下流向工作区的气流流速,提供产1J J F1 8 1 52 0 2 0市场监管总局市场监管总局品和交叉污染保护。单位:米每秒,符号:m/s。3.5.2 下降气流流速栅格 d o w n f l o wv e l o c i t yp r o f i l e【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】在预设的网格上对单点下降气流流速进行测量和取平均值。通过工作区的气流流速可作为均匀气流流速计算平均值,当分隔成2个及以上区域时对每个区域气流流速计算平均值。3.5.3 单向气流 u n i d i r e c t i o n a l a i r f l o w【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】均速气流沿相同方向单程通过一个区域,以降低气溶胶产生的潜在交叉污染。3.5.4 流入气流 i n f l o w【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】从室内通过前窗操作口进入安全柜前窗下侧泄流槽的气流,为防止安全柜工作区内产生的气溶胶泄漏提供一个空气屏障。3.5.5 非均匀下降气流 n o n-u n i f o r m(z o n e d)d o w n f l o w【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】下降气流流速栅格由几个连续区域组成,不同区域平均气流流速不同。单位:米每秒,符号:m/s。3.5.6 均匀下降气流 u n i f o r md o w n f l o w【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】下降气流流速栅格中各点流速都大致相同。单位:米每秒,符号:m/s。3.6 生物安全柜标称宽度 b i o s a f e t yc a b i n e tn o m i n a lw i d t h【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】两边内侧壁之间的宽度,有助于确定所需的下降气流流速栅格间距和人员保护狭缝采样器定位。单位:米,符号:m。3.7 生物安全等级 b i o s a f e t y l e v e l s【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】微生物和生物医学实验室生物安全准则概括了涉及传染性微生物和实验动物工作中四个生物安全等级所包括的基本要素。根据对人员、环境和社会的保护程度确定等级。标准微生物学操作适用于所有实验室,特殊的微生物操作增强了工作人员安全和环境保护,并强调需要增加防护等级降低生物媒介的风险。注:1 生物安全一级(b i o s a f e t y l e v e l 1,B S L 1)适用于操作所有特性都已清楚并且已证明不会导致健康成人疾病的生物媒介,该生物媒介对实验人员和环境的潜在危害小。实验室不需要和建筑中的正常行走区隔离。研究通过标准微生物学操作在公开的实验台面上进行。不需要有特殊需求的安全保护措施,但可以通过适当的风险评估来确定。实验人员需要经过由科研人员指导的专业实验程序培训。【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】2 生物安全二级(b i o s a f e t y l e v e l 2,B S L 2)建立在B S L 1之上,适用于对人和环境有中度潜在危险的生物媒介,与B S L 1的区别在于:实验人员均需接受过病原因子操作方面的特殊培训,并由有资格的科研人员指导;进行实验时限制进入实验室;所有可能产生传染性气溶胶或飞溅物的实验均应在生物安全柜中或其他物理防护设备中进行。【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】3 生物安全三级(b i o s a f e t y l e v e l 3,B S L 3)适用于临床、诊断、教学、研究或者生产设施操作中存在可能通过吸入途径暴露导致严重或潜在致命疾病的生物媒介。实验人员应在处理致病性和可能使人致死的病原因子方面受过专业培训,并由对该病原因子操作有经验的且有资格的科研人员指导。该等级的二级屏障包括对进出实验室和通风条件进行控制,使实验室释放的传染性气溶胶最小化。【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】2J J F1 8 1 52 0 2 0市场监管总局市场监管总局4 生物安全四级(b i o s a f e t y l e v e l 4,B S L 4)适用于操作的生物媒介具有极高危险性并且能够造成危及生命的疾病,通过气溶胶传播或操作的相关生物媒介传染风险不明。生物媒介之间具有接近或相同抗原关系必须在B S L 4这个等级上操作直到获得足够的数据以确认在该等级继续操作或重新指定等级为止。实验室工作人员必须经过对处理高度危险生物媒介进行专业和熟练的培训。实验室工作人员必须了解标准和特殊做法中一级防护和二级防护的功能。所有实验室工作人员和主管必须有能力处理需要B S L 4防护的生物媒介及其程序。实验室的进出由实验室主管根据机构条例进行控制。B S L 4实验室有两种类型:一种是所有操作生物媒介的实验必须在级生物安全柜中进行的安全柜实验室;一种是人员必须穿正压防护服的防护服实验室。B S L 4安全柜实验室和B S L 4防护服实验室均具有特殊的工程设计特点,可防止微生物被传播到环境中。【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】3.8 生物安全柜 b i o s a f e t yc a b i n e t(B S C)【B SE N1 2 4 6 92 0 0 0】生物安全柜是一种负压过滤排风柜,可防止操作者和环境暴露于实验过程中产生的生物气溶胶污染。3.9 流速标称值 n o m i n a l s e tp o i n tv e l o c i t i e s【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】由生产厂商设计的安全柜正常工作和通过人员、产品、交叉污染保护及稳定性测试时设置的下降气流和流入气流流速。单位:米每秒,符号:m/s。3.1 0 伞形罩排气连接 c a n o p yc o n n e c t i o n【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】生物安全柜和外部排气系统之间通过一个或多个开口或间隙进行排气连接。3.1 1 直接排气连接 d i r e c t c o n n e c t i o n【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】生物安全柜和外部排气系统之间直接进行没有设计间隙或开口的气密排气连接。3.1 2 高效过滤器 h i g he f f i c i e n c yp a r t i c u l a t ea i r(HE P A)f i l t e r【N S F/AN S I4 92 0 1 8】一种一次性的、具有延伸/褶皱介质的干燥型过滤器。其特征为:坚硬的外壳装满褶状物;对于直径为0.3m的微粒 如用加热方法产生的单分散邻苯二甲酸二辛酯(D O P)烟 雾 微粒 或 相 当 的 微粒过 滤效 率 不 低 于9 9.9 9%;根 据I E S T-R P-C C 0 0 7(J型)低效测定粒径范围为0.1m0.2m或0.2m0.3m的微粒过滤效率不低于9 9.9 9%;根据I E S T-R P-C C 0 0 7(K型)低效测定粒径范围为0.1m0.2m或0.2m0.3m的微粒过滤效率不低于9 9.9 9 5%;清洁的过滤器在额定气流下工作时,最大压降为2 5 0P a;当用光散射中值粒径0.7m、几何标准偏差2.4的多分散气溶胶进行扫描测试时,透过率不超过0.0 1%。注:超高效过滤器 u l t r a-l o w-p e n e t r a t i n ga i r(U L P A)f i l t e r是一种一次性的、具有延伸/褶皱介质的干燥型过滤器。其特征为:坚硬的外壳装满褶状物;根据I E S T-R P-C C 0 0 7低效测定粒径范围为0.1m0.2m或0.2m0.3m的微粒过滤效率不低于9 9.9 9 9%;对于相同额定气流,U L P A过滤器可能具有比HE P A/U L P A过滤器更高的气流阻力,应注意确保其降压时与电机/风机容量相兼容;清洁的过滤器在额定气流下工作时,最大压降为2 5 0P a;当用光散射中值直径0.7m、几何标准偏差2.4的多分散气溶胶进行扫描测试时,透过率不超过0.0 1%。【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】3.1 3 多分散气溶胶 p o l y d i s p e r s ea e r o s o l【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】3J J F1 8 1 52 0 2 0市场监管总局市场监管总局光散射中值粒径为0.7m,几何标准偏差为2.4的气溶胶。3.1 4 工作区 w o r ka r e a【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】安全柜内进行操作的区域,即安全柜内部右侧到左侧、从后侧到前窗内侧,高于前窗玻璃下沿约5c m到工作台面的区域。3.1 5 工作台 w o r kt r a y【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】由生产厂商确定的工作区下方作为用户活动的工作台面,与工作区不同。3.1 6 前窗 s a s h【N S F/AN S I 4 92 0 1 8】位于生物安全柜前部的固定或滑动玻璃窗,在操作者和工作区之间形成屏障。3.1 7 前窗操作口高度 f r o n t a c c e s so p e n i n gh e i g h t【YY0 5 6 92 0 1 1】生物安全柜前窗玻璃下沿到工作台边缘的距离。单位:米,符号:m。3.1 8 保护因子 a p e r t u r ep r o t e c t i o nf a c t o r【B SE N1 2 4 6 92 0 0 0】在开放工作台上产生的空气传播污染物的暴露量与在安全柜内产生相同分散的空气传播污染物暴露量的比值,用Ap f表示。4 概述生物安全柜(b i o s a f e t yc a b i n e t,B S C)是一种负压过滤排风柜,可防止操作者和环境暴露于实验过程中产生的生物气溶胶污染,广泛应用在医疗卫生、疾病预防与控制、食品卫生、生物制药,环境监测,以及各类生物实验室等领域,是保障生物安全和环境安全的重要基础。生物安全柜分为三级:级生物安全柜、级生物安全柜和级生物安全柜。根据微生物和生物医学实验室生物安全准则中所述的功能设计,生物安全柜可用于操作B S L 1至B S L 4的生物媒介,其中仅在最高防护水平实验室操作B S L 4生物媒介,级和级生物安全柜只在具有正压防护服的最高防护水平实验室中使用。级生物安全柜用于对人员和环境保护,不提供产品保护。人员保护需要至少0.3 8m/s的流入气流流速将未过滤的室内空气通过前窗操作口和工作台表面进入安全柜前窗下侧泄流槽;排出气流经HE P A/U L P A过滤后排出安全柜保护环境。级生物安全柜(以下简称安全柜)(A 1、A 2、B 1、B 2和C 1)依赖气流形成的部分屏障系统提供人员、环境和产品保护,如表1所示。由安全柜前栅格栏形成的向内和向下的气流组合提供人员和产品保护。经HE P A/U L P A过滤的下降气流朝工作台表面流动,然后被吸入前后进气格栅,从而将产品的侧向交叉污染降至最小。排出气流经HE P A/U L P A过滤后排出安全柜保护环境。按照设计使用时,安全柜排出气流可以再循环到实验室(A 1和A 2型)或通过伞形罩排气连接排风管(A 1和A 2型)排出。B 1型和B 2型安全柜的排气必须通过密封安全管排放到室外。所有级安全柜都适用于开展B S L 1至B S L 3的实验操作。如果级安全柜用于B S L 4防护服实验室开展B S L 4实验操作时,工作人员必须穿正压防护服。级安全柜可为细胞培养繁殖提供必需的无菌工作环境,也可用于制备非挥发性抗肿瘤药物或化学治疗药物。根据循环排风机制和排风选择的不同以及内部结构设计级生物安全柜分为-A 1、-A 2、-B 1、-B 2和-C 1五种类型。级生物安全柜的分型及其特点见表1。4J J F1 8 1 52 0 2 0市场监管总局市场监管总局表1 级生物安全柜的分型及其特点安全柜类型流入气流平均流速/(m/s)循环排风机制排风选择适用范围-A 10.3 8循环随型号变化,内部为负压室内 排 气/伞 形罩 排 气 连 接 排风管如果化学风险评估允许,用于进行挥发性化学品实验时,必须连接到外部排气系统-A 20.5 1循环随型号变化,内部为负压室内 排 气/伞 形罩 排 气 连 接 排风管如果化学风险评估允许,用于进行挥发性化学品实验时,必须连接到外部排气系统-B 10.5 1循环随型号变化,循 环 小 于5 0%,内部为负压室外 排 气/直 接排气连接排风管如果化学风险评估允许,可用于挥发性化学品实验-B 20.5 1外排1 0 0%,内部为负压室外 排 气/直 接排气连接排风管如果化学风险评估允许,可用于挥发性化学品实验-C 10.5 1循 环 小 于5 0%,外 排 大 于5 0%,内部为负压室内 排 气/伞 形罩 排 气 连 接 排风管如果化学风险评估允许,用于进行挥发性化学品实验时,必须连接到外部排气系统 级生物安全柜专为高度传染性微生物媒介和其他危险操作设计,可为环境和工作人员提供最大的保护。其气密性外壳具有带安全锁的观察窗,需用钥匙才能打开。可通过以下任何一种方式进出安全柜:通过安全柜底部的一个双层通道盒;也可通过即时消毒的双门直通箱(其双门集成高压灭菌器和具有双重密封连接机制的便携式接触点可实现即时消毒)。供气和排气均通过HE P A/U L P A过滤,排气时须通过两道HE P A/U L P A过滤才能向外排出,通过安全柜外部排气系统维持气流,根据生产厂商的压力设计标准,安全柜内保持负压。受到实验室条件所限时可能需要选择一个排风扇,该排风扇通常应与设备通风系统的排风扇分开。安全柜排气系统需要配备一个合适的报警系统,以便在设备排气系统发生故障时通知安全柜用户并关闭安全柜排气系统。人员通过与柜体密闭连接的手套在安全柜内实施操作。如果橡胶手套/套筒破裂,安全柜排气系统应提供流入气流进入安全柜臂筒,在安全柜臂筒中心线测到流入气流流速应不小于0.5 1m/s。工作区不考虑湍流或交叉污染。5 计量特性级生物安全柜各项计量性能指标见表2。5J J F1 8 1 52 0 2 0市场监管总局市场监管总局表2 级生物安全柜的主要计量特性指标计量特性计量特性指标下降气流流速下降气流平均流速应在(0.2 50.4)m/s之间,各测量点实测值与平均流速(非均匀下降时为其区域平均流速)相差均应不超过2 5%或0.0 8 1m/s(取较大值)流入气流流速流入气流平均流速应符合表1流入气流平均流速的规定洁净度当需要保护受试样本时,洁净级别应达到I S O5级(当粒径大于或等于0.5m时悬浮粒子最大浓度限值为35 2 0m-3),即每个采样点测得的粒子浓度平均值和9 5%置信上限(U C L)均不超过I S O5级的最大浓度限值照度平均背景照度不大于1 6 0l x时,安全柜平均照度应不小于6 5 0l x,每个照度实测值应不小于4 3 0l x噪声实际噪声应不大于7 0d B高效/超高效过滤器检漏光度法:可扫描检测过滤器在任何点的漏过率不超过0.0 1%;不可扫描检测过滤器在任何点的漏过率不大于0.0 0 5%计数法:粒子数不超过1 0/L(粒径0.5m);当现场检测时,当大气环境尘埃浓度难以达到不小于3 00 0 0/L(粒径0.5m)时,检测到的粒子数应不大于3/L(粒径0.5m);对于在排风高效过滤器出风侧无法用扫描法检漏的安全柜,在高效过滤器出风面后的负压管道中检漏时检测到的粒子数应不大于1/L(粒径0.5m)注:以上技术指标不用于合格性判别,仅供参考。6 校准条件6.1 环境条件6.1.1 环境温度:(1 53 0);6.1.2 湿度:7 0%RH。6.2 校准用标准器及配套设备6.2.1 级钢卷尺级钢卷尺测量范围至少为(030 0 0)mm,分度值为1mm,最大允许误差为(0.3mm+21 0-4L),式中L是钢卷尺的长度,当长度不是米的整数倍时,取最接近的较大的整数倍。6.2.2 风量计由带有传感元件的捕获罩组成,用于测量气体的流量。测量范围为(4 0 40 0 0)m3/h,最大允许误差为(3%读数+1 2m3/h)。6.2.3 风速仪测量范围至少为(02)m/s,最大允许误差为0.0 1 5m/s或示值的3%(取较大值)。6J J F1 8 1 52 0 2 0市场监管总局市场监管总局6.2.4 烟雾发生装置包括烟雾发生器及烟雾剂,提供可视烟雾(包括水雾和油雾)。6.2.5 尘埃粒子计数器测量的尘埃粒径范围至少为(0.31 0)m,计数最大允许误差为2 0%F S。6.2.6 照度计测量范围至少为(010 0 0)l x,最大允许误差为1 0%。6.2.7 声级计测量范围至少为(4 01 0 0)d B,最大允许误差为1d B,分辨力为1d B,有“A”计权模式。6.2.8 高效过滤器检漏仪由气溶胶发生器和光度计组成。气溶胶发生器压力调至最小1 4 0k P a,使用D O P或与之相当的液体发生气溶胶;气溶胶发生器喷嘴浸入液体的深度应不超过2 5mm;气溶胶发生器的压力计量程为(0 5 5 0)k P a,分辨力为7k P a,最大允许误差为 7k P a,气溶胶发生器的压力计应经过计量校准。光度计为线性或对数刻度,可以将过滤器上游气流中浓度为1 0g/LD O P(或相当液体)多分散气溶胶微粒标示为1 0 0%,能检测0.0 0 1%同一气溶胶微粒,并且经过计量校准。6.2.9 高效过滤器计数检漏仪由气溶胶发生器、颗粒稀释器及计数检漏仪(配有手持式扫描采样探头)三部分组成。气溶胶发生器产生冷态、多分散的气溶胶,如D E H S,气溶胶粒径在(0.30.5)m范围内的集中度7 0%,气溶胶喷雾浓度为21 09P/L,经过计量校准。颗粒稀释器稀释倍率7 0,经过计量校准。计数检漏仪采样量2 8.3L/m i n,检漏粒径通道包括0.3m、0.5m、1m、3m、5m、1 0m,检漏粒径0.3m,最大计数浓度1.51 04P/L,扫描速度在(35)c m/s,探头与过滤器出风面间距(23)c m,经过计量校准。6.2.1 0 智能生物安全柜生物检测仪(微生物法)由1路喷雾器、2路狭缝采样器、6路撞击采样器及1个干扰圆筒组成。撞击采样器的采样流 量 范 围 为(1 2.31 2.6)L/m i n,最 大 允 许 误 差 为2.5%,分 辨 力 为0.1L/m i n,可盛2 0m L无菌稀释液。狭缝采样器的采样流量为2 8L/m i n,最大允许误差为 1.4L/m i n,分辨力为0.1L/m i n。喷雾器能在5m i n内释放出(5 8)1 08C F U/m L枯草芽孢杆菌芽孢计数标准物质(或粘质沙雷氏菌标准物质);能释放出9 4%6%的单细胞芽孢计数标准物质(或粘质沙雷氏菌标准物质);气溶胶喷射速率为0.5m/s,允许误差为0.0 5m/s;可盛5 5m L的(58)1 08C F U/m L枯草芽孢杆菌芽孢计数标准物质(或粘质沙雷氏菌标准物质)菌液。干扰圆筒的外径为6 3mm两端封闭的不锈钢或铝质圆筒,长度要适合安全柜前后尺寸,圆筒用于模拟手臂对安全柜气流的干扰。6.2.1 1 生物安全柜质量检测仪(碘化钾法)由气溶胶发生器、空气采样器、干扰圆筒、皮氏培养皿及过滤膜等组成。气溶胶发生器:可以产生气溶胶,转速2 80 0 0r/m i n,最大允许误差为5 0 0r/m i n,经过计量7J J F1 8 1 52 0 2 0市场监管总局市场监管总局校准。空气采样器:利用负压采集样品,前部入口的空气流量为1 0 0L/m i n,经过计量校准。干扰圆筒:直径(6 06 5)mm,长度应超出安全柜工作面宽度1 5 0mm。皮氏培养皿:直径5 5mm。过滤膜:直径2 5mm,孔径3m。6.2.1 2 微生物定量标准物质枯草芽孢杆菌(A T C C 9 3 7 2或N C T C 1 0 0 7 3)芽孢计数标准物质 或粘质沙雷氏菌(A T C C 8 0 3 9)标准物质,相对扩展不确定度不大于3 0%。注:在进行微生物实验前,实验人员应佩戴生物防护口罩和穿戴生物防护服,并在实验结束后对实验场所进行严格消毒,确保环境和安全柜中目标菌株检测为0。6.2.1 3 9 0培养皿含营养琼脂培养基、胰蛋白胨大豆琼脂培养基或其他适合普通微生物生长的无抑制剂和添加剂的培养基。6.2.1 4 多分散气溶胶邻苯二甲酸二辛酯(D O P)或与之相当的液体即可以产生与D O P气溶胶颗粒尺寸分布相同气溶胶颗粒的液体,例如:聚-烯 烃(P AO),癸 二 酸 二(2-乙 基 己)酯(D EH S)、聚乙二醇以及药物级的轻矿物油。7 校准项目和校准方法7.1 外观检查安全柜应正确安装,工作环境符合安全柜校准条件,结构完整,表面光洁,照明系统、风机及排风系统运转正常,无影响正常工作的缺陷和机械损伤。产品铭牌需清晰、完整、牢固,正确标示产品型号、出厂编号、生产厂家及标称气流流速等。安全柜前窗开启高度超过或低于前窗操作口标称高度时,声音报警器应报警,联锁系统启动。当开启高度回到标称高度,报警声音和联锁系统应自动解除。7.2 下降气流流速在生产厂商定义的工作区上方高于前窗操作口标称高度上沿1 0 0mm的水平面上确定测量点或区域位置,多点测量穿过该平面或各区域的下降气流流速。厂商的使用说明应包括下降气流网格或区域界限的位置以及各自测量点。使用不会使气流模式变形的夹具将风速仪探针准确定位在各测量点进行测量。下降气流网格或区域应满足:测量点最少应有3排或由区域限定,测量点等距分布,形成的正方形栅格应满足(1 0 02 0 0)mm(1 0 02 0 0)mm,如图1所示;对于标称宽度不小于0.9m的安全柜,每排或每区域最少应有7个测量点,每个测量点重复测量3次;对于标称宽度小于0.9m的安全柜,每排或每区域最少应有4个测量点,每个测量点重复测量3次;由测试点周长界定的面积应不小于平面总面积的3 0%;测试区域边界与安全柜的内壁及前窗操作口的距离为1 5 0mm;当安全柜的尺寸无法满足网格平面面积不小于3 0%的要求时,格栅间距应从距安全柜的内壁及前窗操作口1 5 0mm处开始算起;如果测试区域边界距安全柜的内壁及前窗操作口1 5 0mm,上述正方形格栅间距不满足不小于1 0 0mm的间隔要求,每排或每区域最少应有4个等距离测量点,每个测量点重复测量3次;当安全柜倾斜的前窗具有不止一个标称高度时,可能存在的不同下降气流网格或区域都应满足上述要求。8J J F1 8 1 52 0 2 0市场监管总局市场监管总局图1 下降气流流速测量示意图 记录所有测量点的测量值并按照公式(1)计算平均下降气流流速。下降气流流速的单点测量偏差按照公式(2)或者公式(3)进行计算。D F=13nni=13j=1D Fi j(1)D Fi=133j=1D Fi j-D F(2)D Fir e l=133j=1D Fi j-D FD F1 0 0%(3)式中:D F 平均下降气流流速,m/s;D Fi 下降气流流速的单点测量偏差,m/s;D Fir e l 下降气流流速的单点测量相对偏差,%;D Fi j 每个测量点单次测量的下降气流流速,m/s;n 测量点的数量。7.3 流入气流流速流入气流流速测试用风量计法或风速仪法,优先采用风量计法。7.3.1 风量计法安全柜前窗开启至标称高度,运行安全柜,把安全柜操作口左侧用挡板和密封条遮住,右侧安装风量计,风量计的风罩和安全柜柜体接触部位也用密封条做好密封,待示值稳定后读取风量计示值5次,得到左侧遮挡时的气流流量;取下风量罩,同样的操作方法可得到右侧遮挡时的气流流量,取左右分别遮挡时所有流入气流流量的平均值作为流入气流的平均流量。应注意,不要影响气流通过风量计入口;使用级钢卷尺测量前窗操作口的长度和高度;流入气流的平均流量(m3/h)除以前窗操作口面积(m2),9J J F1 8 1 52 0 2 0市场监管总局市场监管总局得到流入气流平均流速(m/s),流入气流平均流速按照公式(4)进行计算。I F=136 0 0n l h2i=1nj=1Qi j(4)式中:I F 平均流入气流流速,m/s;Qi j 每个测量位置单次测量的气体流量值,m3/h;l 前窗操作口的长度,m;h 前窗操作口的高度,m;n 每个位置不同的测量次数,n5。7.3.2 风速仪法(备选)通过风速仪测量前窗操作口流入气流流速。流入气流流速测量示意图见图2。计算流入气流流速的步骤为:如果生产厂商说明应关闭循环风机,则关闭安全柜的循环风机;安全柜前窗开启至标称高度;用风速仪在前窗操作口平面的两排点测量气流流速,第一排在前窗操作口上沿下约开启高度2 5%的位置,第二排在前窗操作口上沿下约开启高度7 5%的 位 置;测量 点 间 隔 约1 0 0 mm,距 前 窗 操 作口 的 侧 边 接 近但 不 小 于1 0 0mm测试,每个测量点重复测量3次,用所有测量值的平均值表示流入气流流速,平均流入气流流速公式(5)进行计算。I F=13nni=13j=1I Fi j(5)式中:I F 平均流入气流流速,m/s;I Fi j 每个测量点单次测量的流入气流流速,m/s;n 测量点的数量。图2 流入气流流速测量示意图01J J F1 8 1 52 0 2 0市场监管总局市场监管总局7.4 气流模式7.4.1 下降气流测试烟雾沿工作台面的中心线,在前窗操作口顶端以上1 0 0mm的高度从安全柜的一端到另一端,观察(目视或拍照录像)记录烟雾流动,安全柜工作区内的气流应向下,应不产生漩涡和向上气流且无死点。7.4.2 观察窗气流测试烟在观察屏后2 5mm,在前窗操作口顶端以上1 5 0mm高度从安全柜的一端到另一端,观察(目视或拍照录像)记录烟雾流动,安全柜工作区内的气流应向下,应不产生漩涡和向上气流且无死点,柜中无气流逸出。7.4.3 前窗操作口边缘气流测试烟在安全柜外大约3 8mm处沿着整个前窗操作口的周边经过,观察(目视或拍照录像)记录烟雾流动,安全柜前窗操作口的整个周边气流应向内,且流入气流应不进入工作区。7.4.4 滑动窗密闭性测试烟在前窗玻璃内距工作区顶部5 0mm处的安全柜两侧壁之间经过,观察(目视或拍照录像)记录烟雾流动,柜中无气流逸出。7.5 洁净度安全柜开机工作1 0m i n;洁净度的采样边界距离内表面或前窗1 0 0mm,尘埃粒子计数器的采样口置于工作台面向上2 0 0mm高度位置。采样点按图3布置,每个采样点重复采样3次,最小采样量为8.5L/次。按照公式(6)和公式(9)计算每个采样点粒子浓度平均值和总平均值的9 5%置信上限(U C L),计算结果作为洁净度测试结果。表3中给出了计算9 5%置信上限(U C L)所用的t分布值,也可以使用计算机自带统计程序给出的t分布值。图3 洁净度测试测量点布置11J J F1 8 1 52 0