（高清正版）DB63_T 1942-2021青稞种子产地检疫规范.pdf

ICS 65.020.01 CCS B 16 DB63 青海省地方标准 DB 63/T 19422021 青稞种子产地检疫规范 2021-08-18 发布 2021-09-20 实施 青海省市场监督管理局 发 布 DB63/T 19422021 I 前 言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由青海省农业农村厅提出并归口。本文件起草单位：青海省农业技术推广总站。本文件主要起草人：黄霞、徐元宁、李洪明、李云龙、李白家、吴玉栋、白惠义、王桂兰、马吉权、王秀娟、徐淑华、秦建芳、谢春晖。本文件由青海省农业农村厅监督实施。DB63/T 19422021 1 青稞种子产地检疫规范 1 范围 本文件规定了青稞种子产地检疫的目标检疫性有害生物、繁育田环境要求、产地检疫、检疫处理、签发证书、档案管理的程序和方法。本文件适用对青稞种子进行产地检疫。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T 2289-2012 小麦矮腥黑穗病菌检疫检测与鉴定方法 SN/T 1154-2002 毒麦检疫鉴定方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 检疫性有害生物 对受其威胁的地区具有潜在经济重要性、但尚未在该地区发生，或虽已发生但分布不广并已进行官方防治的有害生物。3.2 产地检疫 在生长季节对植物和在收获后储藏期间对产品所进行的检疫，包括田间调查、现场检查以及室内检验、签证及疫情监督处理。4 目标检疫性有害生物 包括以下：小麦矮腥黑穗病 Tilletia controversa Khn；毒麦 Lolium temulentum L。5 繁育田环境要求 DB63/T 19422021 2 环境要求包括：从未发生或近三年未发生本文件第 4 章所列目标检疫性有害生物；周边 1000 m 内不种植小麦和大麦类作物；水源无检疫性有害生物；有机肥无检疫性有害生物。6 产地检疫 6.1 产地检疫受理 在播种前一月向当地农业植物检疫机构提交产地检疫申请，填写农业植物产地检疫申请书（见附录A），选用种子应附有相关检疫证明。6.2 田间检疫 6.2.1 检疫时期 拔节期、抽穗期、乳熟期分别进行1次田间调查。6.2.2 检疫方法 按照附录B规定的田间识别要点进行田间检疫。原原种繁育田应逐株调查检验。原种、良种繁种田棋盘式抽样检疫，样点面积为1 m2；大田面积小于等于0.3 hm2设10点，面积0.3 hm21 hm2设15点，面积1 hm23 hm2设20点，面积大于3 hm2设25点以上。对田间症状不能确定的样品，采回室内鉴定。6.2.3 检疫记录 按附录C要求填写农业植物检疫田间调查记录表，保留典型症状样本和影像资料。6.3 室内检疫 参见附录D规定的方法做室内检测，按附录E规定，填写农业植物检疫实验室检测报告单，留存样本和影像资料，并对试验样品及用具做除害处理。当地检疫部门无条件检疫的，可将样品递交上一级部门进行检测。7 检疫处理 经田间检疫或室内检疫发现目标检疫性有害生物的，当地植物检疫机构按规定上报，并按附录F规定，向繁种单位出具农业植物检疫疫情处理通知书。检疫机构指导繁种单位进行无害化处理。8 签发证书 经产地检疫合格，由当地植物检疫部门签发产地检疫合格证。9 档案管理 保存产地检疫的原始数据、表格、标本、图像等资料档案，保存期限不低于3年。DB63/T 19422021 3 A A 附 录 A（规范性）农业植物产地检疫申请书 表A.1给出了农业植物产地检疫申请书的内容，申请书附件见表A.2。表A.1 农业植物产地检疫申请书 编号：名称（盖章）地 址 联系人（签名）邮政编码 生产 单位（个人）联系电话 传 真 植物名称 产出用途 品种名称 见附件 种苗来源 见附件 种苗检疫证明编号 见附件 种植面积 总面积 预计产量 总产量 申请日期 种植地点 种植期限 从 年 月 日起，至于 年 月 日止。批件发送方式 来人领取 特快专递邮寄 普通邮寄 表A.2 申请书附件 对应产地检疫申请书编号：植物名称：序号 品种名称 种苗来源 种苗检疫证明编号 种植面积 预计产量 1 2 3 4 5 合计 联系人（签名）:单位（个人）（盖章）DB63/T 19422021 4 B B 附 录 B（规范性）青稞目标检疫性有害生物田间症状识别 B.1 小麦矮腥黑穗病 B.1.1 分类地位 真菌界，担子菌门，冬孢菌纲，黑粉菌目，腥黑粉菌科，腥黑粉菌属。B.1.2 危害特点 小麦矮腥黑穗病菌引起小麦矮腥黑穗病，青稞拔节后病株茎秆伸长受到抑制，病株明显矮化。病株穗子较长，较宽大，小穗小花增多，病穗外观比健穗肥大，有鱼腥臭味，各小花最后都成菌瘿，就是冬孢子堆，菌瘿黑褐色，籽粒为菌瘿所代替,严重减产，因病减产率一般为20%50%，严重发生的高达75%90%,疫麦的出粉率和面粉品质也明显降低。B.1.3 田间识别要点 病株矮化，高度为健株的1/42/3，在重病田可明显见到健穗在上面,病穗在下面，形成“二层楼”的现象；分蘖增多，病株分蘖一般比健株多一倍以上；小花增多，病穗宽展、小穗紧密，芒外张；小花成菌瘿。菌瘿黑褐色，近球形，较硬，不易压破，破碎后呈块状，有鱼腥味。在小麦生长后期，如水分多，病粒可胀破，使孢子外溢，干燥后形成不规则硬块。小麦矮腥黑穗病与其近似种小麦网腥黑穗病菌（Tilletia caries Tul）和小麦光腥黑穗病菌（Tilletia foetida Liro）田间典型症状区别见表B.1。表B.1 小麦矮腥黑穗病与小麦网腥黑穗病、小麦光腥黑穗病田间典型症状比较 症症 状状 小麦矮腥黑穗病小麦矮腥黑穗病 小麦网腥黑穗病小麦网腥黑穗病、光腥黑穗病光腥黑穗病 株 高 极度矮化，可为健株的 1/42/3 较健株稍矮 分 蘖 增多，可比健株多一倍以上 较健株略多 穗部特征 1.病穗宽展，小穗、小花明显增多 2.病粒整个变为孢子堆（菌瘿），近球形，较硬 1.病穗略短，小穗、小花略有增多，颖壳略开张 2.病粒整个变为孢子堆（菌瘿），麦粒状，不硬，易破 B.1.4 传播途径 以菌瘿混杂在种子中间或者冬孢子附着在种子表面进行远距离传播。也可通过被冬孢子污染的包装材料、运载工具等远距离传播。疫区的孢子可随着风雨、河水和灌溉水传到临近无病区。B.2 毒麦 B.2.1 分类地位 DB63/T 19422021 5 植物界，被子植物门，单子叶植物纲，禾本目，禾本科，黑麦草属。B.2.2 危害特点 毒麦籽粒在种皮和糊粉层之间有内生真菌寄生，产生毒麦碱等真菌毒素，人畜误食后发生中毒事故，轻者头晕、昏迷、呕吐、痉挛，严重者因中枢神经系统麻痹而死亡。同时，严重影响小麦的品质和产量，可导致青稞减产6.7%15.2%。B.2.3 识别要点 株高50 cm110 cm，比青稞矮10 cm15 cm；茎直立丛生，无毛光滑，具3节4节，不易倒伏；叶鞘较疏松，长于节间，叶鞘基部常呈紫红色；穗轴呈波浪形弯曲，每小穗有小花4朵7朵，以5花为多，排成两列；外稃椭圆形，顶端膜质透明，芒自顶端稍下方伸出，内稃与外稃等长，脊上具有微小纤毛；颖果被内、外稃紧包，呈椭圆形，灰褐色，无光泽，紧贴于稃片内，不易剥落。B.2.4 生活史 毒麦为一年生或越年生草本，以幼苗或种子越冬。在我国中北部地区，10月中下旬出苗，比大麦稍晚，翌年5月底6月初成熟。毒麦的生活力很强，在室内贮藏2年仍有萌发力，在土内10 cm深处尚能出土。B.2.5 传播途径 由落在土壤里的籽粒传播，主要以小穗、花混杂于原粮或种子间随原粮调运或者引种传播。DB63/T 19422021 6 C C 附 录 C（资料性）农业植物检疫田间调查记录表 表C.1给出了农业植物检疫田间调查记录表的内容。表C.1 农业植物检疫田间调查记录表 名 称 受检 单位（个人）联 系 人 联系电话 植物名称 产出用途 品种名称 种苗来源 种苗检疫证明编号 生育期 调查面积 调查日期 调查地点 目标有害生物 调查方法 不需要实验室检验：调查结论 需要实验室检验：备 注 当事人（签名）检疫员（签名）检疫机构（盖章）年 月 日 DB63/T 19422021 7 D D 附 录 D（资料性附录）青稞检疫性有害生物实验室检验方法 D.1 小麦矮腥黑穗病 D.1.1 冬孢子形态特征 小麦矮化腥黑穗病菌的冬孢子为棕黄色至红棕色星球形、椭圆形或不规则形，具网状饰纹和无色到淡色的胶质鞘，直径16 m25 m，网脊高度较高，70%集中在1.5 m2.5 m，孢壁外包被有1.5 m5 m的透明胶质鞘。在4 5，散射光条件下，置于2%的水琼脂上，三周后开始萌发。萌发时形成先菌丝（担子），在其顶端产生初生小孢子（担孢子），初生小孢子经“H”形交配后产生次生小孢子。D.1.2 镜检鉴定 按照NY/T 2289-2012第8.2条要求，开展冬孢子镜检鉴定。按表D.1鉴定区分小麦矮腥黑穗病菌及其近似种小麦网腥黑穗病菌、小麦光腥黑穗病。表 D.1 小麦矮腥黑穗病与小麦网腥黑穗病、小麦光腥黑穗病冬孢子比较 类别 小麦矮腥黑穗病 网腥黑穗病 光腥黑穗病 冬孢子大小（m）1625 1420 网目直径（m）35 24 无 网脊高度（m）1.433 0.51.42 无 临界网脊高度指数值（m）0.95 0.95 无 网脊特征 尖而长 钝而短 无 胶质鞘厚度（m）1.55 2 无 不孕细胞 无色至淡黄色 无色 冬孢子萌发温度（）38，10 1522，25 冬孢子产生的担孢子数 约 50 个 48 D.1.3 冬孢子萌发生理学鉴定 按照NY/T 2289-2012第8.3条要求，开展冬孢子萌发生理学鉴定。D.1.4 Q-PCR检测 按照NY/T 2289-2012第8.4条要求，开展Q-PCR检测。D.2 毒麦 D.2.1 形态特征 D.2.1.1 小穗 DB63/T 19422021 8 每小穗含3朵8朵小花，以5花为多；小穗轴长1mm1.5mm，表面裸露微糙，有时见纵向浅纹；小穗长8mm26mm，宽3mm5mm；除顶生小穗具外颖外，其余的外颖均退化；内颖长于小穗、背轴，披针形，具狭膜质的边缘，脉纹59脉，长8mm10mm，宽1.5mm2.0mm。D.2.1.2 小花（带稃颖果）船形，略宽阔，具长芒，腹面中部隆起，长6mm9mm，宽2.28mm2.80mm，厚1.5mm2.5mm；稃片淡黄色或黄褐色；内、外稃顶端较尖；外稃披针形，具5脉，背面较平直，腹面显著弓隆，先端急尖，基盘狭窄而截平，顶端膜质透明；芒自外稃顶端下方约0.5mm处伸出，长约10mm；内稃约与外稃等长，具2脊，两边脊上具窄翼和微小的纤毛，近中部通常有横皱纹和纵沟；带稃颖果为内、外稃所紧贴，不易剥离。D.2.1.3 颖果 果长4 mm6 mm，宽1.8 mm2.5 mm，厚1.5 mm2.5 mm；颜色黄褐色灰褐色；卵圆形，背面凸起，腹面弓隆，腹沟宽而浅，先端无毛；胚部卵圆形或近圆形；种脐微小，凹陷；毒麦千粒重为10 g13 g。D.2.2 镜检鉴定 按照SN/T 1154-2002第6.3.2条要求，对疑似样品开展鉴定。按表D.2区分鉴定毒麦与其近似种。表 D.2 毒麦及其近似种鉴定特征比较表 种名 毒麦 长芒毒麦 田毒麦 黑麦草 多花黑麦草 波斯黑麦草 学名 Lolium temulentum L Lolium temulentum var.longiaristatum Parnell Lolium temulentum var.arvense Bab Lolium perenne L Lolium multiflorum Lam Lolium persicum Boiss.Hohen 花序 穗状 穗状 穗状 细长穗状 细长穗状 细长穗状 小穗数 819 1213 1315 535 538 220 小花数 46 611 78 711 1012 56 芒长 mm 10 10 2.5 无 5 或 10 715 形状 椭圆形，整个果体不等厚，背面平直，腹面弓形隆起。椭圆形，整个果体不等厚，背面平直，腹面弓形隆起。短椭圆形，整个果体不等厚，背面平直，腹面显著呈弓形。细长椭圆形，整个果体等厚，背面平直，腹面中部略凹。细 长 椭 圆形，整个果体等厚，腹面无弓隆。细长椭圆形，整个果体等厚，腹面无弓隆。颖 果 大小 mm 长 69 宽 22.8 厚 1.5.5 长 79 宽 2 厚 2 长 57 宽 22.25 厚 1.52.25 长 4.57 宽 1.251.5 厚 0.5 长 4 宽 11.3 厚 0.5 长 4.56.5 宽 1.52 厚 1 千粒重 g 1013 910 819 819 819 819 D.2.3 PCR 检测方法 利用设计合成的1对特异性寡聚核苷酸引物(前引物:5-TAG GTG AAC CTG CGG AAG GA-3和后引物:5-TGC TTA AAC TCA GCG GGT GG-3),对送检样品进行PCR特异性扩增试验。DB63/T 19422021 9 E E 附 录 E（规范性）农业植物检疫实验室检测报告单 表E.1给出了农业植物检疫实验室检测报告单的内容。表E.1 农业植物检疫实验室检测报告单 名 称 受检 单位（个人）联 系 人 联系电话 名 称 送样 单位 联 系 人 联系电话 植物名称 抽样日期 收 样 人 收样日期 抽样地点 目标有害生物 检验方法：检验结果：备 注：检验人（签名）：审核人（签名）：检验机构（盖章）年 月 日 注：本单一式三份，检验单位、受检单位和检疫机构各一份。DB63/T 19422021 10 F F 附 录 F（规范性）农业植物检疫疫情处理通知书 表F.1给出了农业植物检疫疫情处理通知书的内容。表F.1 农业植物检疫疫情处理通知书 名称 受检 单位（个人）联系人 联系电话 植物（货物）名称 类型用途 数 量 种植（存放）地点 检验结果 处理意见 检疫员（签名）：检疫机构负责人（签名）：检疫机构（盖章）年 月 日 注：本通知书一式两联，第一联交受检单位（个人），第二联留植物检疫机构 _