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04限时规范特训
1【题文】.制备牛肉膏蛋白胨固体培育基的下列操作中,不正确的是( )
A.操作流程是计算、称量、溶化、灭菌和倒平板
B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同倒入烧杯中再加水、去纸
C.灭菌后向牛肉膏蛋白胨溶液中加2%琼脂,并使其溶解
D.将培育基冷却到约50℃时,在酒精灯火焰四周倒平板
【解析】琼脂加入到牛肉膏蛋白胨溶液中,溶化后再灭菌。
【答案】C
2.【题文】平板划线法和稀释涂布平板法是接种微生物的两种常用方法,下列描述正确的是( )
A.都要将菌液进行一系列的梯度稀释
B.平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培育基表面连续划线的操作
C.稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培育基进行培育
D.都会在培育基表面形成单个菌落
【解析】平板划线法不需要进行梯度稀释;稀释涂布平板法需要将不同稀释度的菌液滴加到固体培育基的表面;平板划线法和稀释涂布平板法都能在培育基表面形成单个菌落。
【答案】D
3.【题文】某学者欲争辩被石油污染过的土壤中细菌数量,并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是( )
A.利用平板划线法对细菌进行计数
B.用以石油为唯一碳源的培育基筛选
C.接受稀释涂布平板法分别菌种
D.称取和稀释土壤样品时应在火焰旁
【解析】分别细菌常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法,但平板划线法不能对细菌进行计数;筛选能分解石油的细菌,要以石油作为培育基中唯一的碳源; 筛选细菌的整个操作过程都需要在无菌条件下进行,所以应在火焰旁进行。
【答案】A
4.【题文】在做土壤中分解尿素的细菌的分别与计数试验时,甲组试验用以尿素为唯一氮源的培育基,乙组试验的培育基中的氮源除尿素外还含硝酸盐,其他成分都相同,在相同条件下操作,培育观看,则乙组试验属于( )
A.空白对比 B.标准对比
C.相互对比 D.条件对比
【解析】乙组和甲组试验的培育条件不同,形成了条件对比。
【答案】D
5.【题文】某同学学习完微生物的试验室培育后,要利用所学学问争辩水中微生物的状况。该同学为了调查湖水中细菌的污染状况而进行了试验。试验包括制备培育基、灭菌、接种及培育、菌落观看计数。请回答与此试验相关的问题:
(1)该同学所用培育基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培育供应了________和________。
(2)对培育基进行灭菌,应当接受的方法是________。
(3)为了尽快观看到细菌培育的试验结果,应将接种了湖水样品的平板置于________中培育、培育的温度设定在37℃。要使该试验所得结果牢靠,还应当同时在另一平板上接种________作为对比进行试验。
【解析】蛋白胨是源于动物的原料,含有维生素、糖和有机氮等养分物质,在培育基中主要作为氮源。试验室的灭菌方法一般有:灼烧灭菌(适用于接种工具的灭菌)、干热灭菌(适用于耐高温的、需要保持干燥的物品的灭菌)、高压蒸汽灭菌(适用于培育基等物品的灭菌)。要想使微生物快速地繁殖,就要置于适宜的条件下,特殊是适宜的温度下,所以要置于恒温培育箱中。对比试验就是要设置一个用无菌水接种的平板进行观看比较。
【答案】(1)氮源 碳源 (2)高压蒸汽灭菌 (3)恒温培育箱 无菌水
6.【题文】大肠杆菌是“明星菌”,在生物技术上常用作“工程菌”。某生物小组的同学利用试验室供应的某品系大肠杆菌及其他必需材料,对该品系大肠杆菌进行了培育、计数。
(1)大肠杆菌在生长过程中对各种养分成分所需的量不同,故制备培育基时各养分成分要有合适的________。
(2)在制备固体培育基进行倒平板操作时,平板冷凝后,甲同学将平板倒置,其缘由是____________________________________。
(3)乙同学接受平板划线法接种,获得单菌落后连续筛选,在每次划线之前都要灼烧接种环,其目的是_____________________。
(4)丙、丁同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。在对应稀释倍数为106的培育基中,得到以下两种统计结果:丙同学在该浓度下涂布了一个平板,统计的菌落数为230;丁同学在该浓度下涂布了3个平板,统计的菌落数分别为21、212、256,然后取其平均值163作为统计结果。请评价这两位同学的试验结果的有效性:
①丙同学的结果________,缘由是________________。
②丁同学的结果________,缘由是________________。
(5)戊同学在测定大肠杆菌的密度时发觉培育基上还有其他杂菌的菌落,由此他推断该品系大肠杆菌被污染了。他的推断是否精确 ?为什么?
________________________________________________________________________________________________________________。
【解析】(1)从培育基制备的重要原则入手分析,制备培育基时要留意把握各种养分物质的比例。(2)平板冷凝后培育皿盖上会分散水珠,凝固后的培育基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培育基表面的水分更好地挥发,又可以防止培育皿盖上的水珠落入培育基,造成污染。(3)灼烧接种环的目的是杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,以免对试验结果造成影响。(4)试验时,至少要涂布3个平板作为重复组,才能增加试验的说服力和精确 性,丁同学虽然涂布了3个平板,但其中一个平板上的菌落数与另外两个平板上的菌落数相差甚远,故不能取这3个平板上的菌落的平均值作为统计结果。(5)推断杂菌的来源时,只有排解其他可能的状况才能得出精确 的结论。
【答案】(1)比例 (2)培育皿盖上会分散有水珠,平板倒置可防止水珠落入培育皿中而造成污染,还可使培育皿表面的水分更好地挥发 (3)杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种 (4)①不合理 没有设置重复组,结果不具有说服力 ②不合理 一个平板上的计数结果与另外两个相差太远(或在操作过程中可能毁灭了错误,或只简洁地计算了平均值) (5)不精确 。由于不能确定杂菌是来自培育基还是来自培育过程
7.【题文】从自然菌样中筛选较抱负的生产菌种的一般步骤是:采集菌样→富集培育→纯种分别→性能测定。
(1)不同微生物的生存环境不同,获得抱负微生物的第一步是从适宜的环境中采集菌样,然后再按确定的方法分别、纯化。筛选嗜盐菌的菌样应从________环境中采集。
(2)富集培育指创设仅适合待分别微生物旺盛生长的特定环境条件,使其数量大大增加,从而分别出所需微生物的培育方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培育应选择________的培育基,并在________条件下培育。
(3)如图甲、乙是接受纯化微生物培育的两种接种方法接种后培育的效果图,请分析接种的具体方法。
获得图甲效果的接种方法是______________,获得图乙效果的接种方法是____________。
(4)配制培育基时各种成分在溶化后分装前必需进行________,接种前要进行________。在整个微生物的分别和培育中,确定要留意在________条件下进行。
【解析】采集菌样时必需考虑所分别的微生物的生理特性和相应的土壤特点。培育微生物时则要考虑它对养分的需要和对氧气、pH的不同要求。分析图甲和图乙不难得出相应的接种方法。配制培育基的步骤包括计算、称量、溶化、调整pH、分装、包扎、灭菌、倒平板等。
【答案】(1)海滩等高盐 (2)以淀粉为唯一碳源 高温
(3)稀释涂布平板法 平板划线法 (4)pH调整 高压蒸汽灭菌 无菌
8.【题文】尿素是一种重要的农业肥料,但若不经细菌的分解,就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多,同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下试验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培育基成分如下表所示,试验步骤如下图所示。请分析回答问题:
(1)此培育基能否用于植物组织培育?
_____________________________________________________,
理由是_______________________________________________。
(2)培育基中加入尿素的目的是______________,这种培育基属于________________培育基。
(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培育基中的________和________,试验需要振荡培育,缘由是____________________________________________________。
(4)转为固体培育时,常接受______________________(方法)接种,获得单菌落后连续筛选。
(5)下列材料或用具中:①培育细菌用的培育基与培育皿;②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管;③试验操作者的双手。
需要灭菌的是________;需要消毒的是________。(填序号)
(6)在进行分别分解尿素的细菌试验时,A同学从培育基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的试验结果产生的缘由可能有________(填序号)。
①由于土样不同 ②由于培育基污染 ③由于操作失误 ④没有设置对比
(7)在以尿素为唯一氮源的培育基中加入________,细菌合成的________将尿素分解为氨,pH增高,使指示剂变红色。
【解析】(1)微生物与植物生长所需的养分不完全相同,培育微生物的培育基不能用于组织培育。(2)培育基中加入尿素作唯一氮源,分解尿素的微生物可生长,这种培育基属于选择培育基。(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自尿素和葡萄糖。试验需要振荡培育增加溶氧量。(4)在固体培育基上接种用稀释涂布平板法或平板划线法。(5)灭菌要彻底毁灭微生物及其芽孢,如①或②。试验操作者的双手要消毒。(6)A同学从培育基上筛选出的菌落数与其他组相比偏多,缘由可能是土样不同、培育基污染、操作失误等,与是否设置对比无关。(7)由于细菌合成的脲酶将尿素分解为氨,pH增高,故在以尿素为唯一氮源的培育基中加入酚红指示剂将变红。
【答案】(1)不能 缺少植物激素(或缺少植物需要的各种养分) (2)筛选目的菌 选择 (3)尿素 葡萄糖
为目的菌供应氧气 (4)稀释涂布平板法(平板划线法)
(5)①② ③ (6)①②③ (7)酚红指示剂 脲酶
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