资源描述
课题:4.1探究遗传物质的过程(2)
班级: 姓名: 学号:
学习目标
1、尝试学会提取DNA的方法及鉴定DNA的方法
2、留意提取DNA过程中2次加水的作用
课 前 预 习
备注
一、 认真阅读p56-57的“提取DNA”的正文,争辩此试验中的试验原理:
(1)DNA的 随NaCl的浓度变化而 ,DNA在 NaCl溶液中的溶解度最低。通过转变NaCl溶液的浓度,溶解在NaCl溶液中的DNA会析出来。
(2)DNA不溶于 溶液,部分 可以溶于酒精溶液,据此可将DNA进一步提纯。
(3)DNA遇到 ,沸水浴下呈 。
二、试验步骤
500ml烧杯→玻璃棒充分搅拌→将混合均匀的活鸡血置于4℃冰箱内静置1d,使血细胞沉淀
1.材料制备
0.1g/ml柠檬酸钠100ml
活鸡血180ml
2.方法步骤 取鸡血细胞液5~10ml+20ml 于50 ml
(1)提取血细胞核物质 搅拌5 min,用纱布过滤,取 ,滤液中
含 和其他核物质,如蛋白质
(2)溶解核内DNA:取滤液+ NaCl溶液40ml,玻璃棒沿 搅拌
(3)析出含DNA的粘稠物:向上述溶液中缓缓加入 ,并用玻璃棒轻轻地沿 方向搅拌,发觉有 消灭,当丝状物不再增加时,停止 (此时NaCl溶液相当于稀释到 )
(4)滤取含DNA的粘稠物:用多层纱布过滤,含 的粘稠物留在纱布上
(5)DNA粘稠物再溶解: 20ml2mol/LNaCl溶液 放在50ml烧杯中
+ 上述粘稠物 缓慢搅拌3 min
(6)过滤含DNA的2mol/LNaCl溶液:用2层纱布过滤, 中含DNA
(7)提取含杂质较少的DNA:上述溶液+ ,缓慢搅拌, 消灭
色丝状物,用玻璃棒将丝装物卷起。
(8)DNA鉴定:DNA遇到 沸水浴加热变 ,因此,可用
作为DNA的鉴定试剂
课 堂 研 讨
备注
1、用来提取DNA的动物血液,为何选用鸡血而不用猪、羊等哺乳动物的血液?
2、在制备鸡血细胞溶液过程中,要加入柠檬酸钠溶液有何作用?
联系生活想一想:此有何应用?
3、 第一次提取过滤时,为何要取其滤液?
4、 试验过程中加了蒸馏水几次?各有什么作用?当向滤液中加入蒸馏水到肯定量时,为何有丝状物消灭,这丝状物是什么?
5、每次用玻璃棒搅拌时,有何要求?为什么?
6、争辩:试画出DNA溶解度随着NaCl溶液的浓度变化的曲线图。
7、现在由于禽流感原因,鸡血很难采集,能否用植物细胞作为提取DNA试验材料,若能,又如何操作?
学 后 反 思
课题:4.1探究遗传物质的过程(2)
班级: 姓名: 学号:
课 堂 检 测
备注
1、对提取DNA过程中三次过滤的叙述中,不正确的是
A .第一次过滤后,核物质存在于滤出的固体物中
B.其次次过滤后,使用多层纱布,DNA存在于纱布上的黏稠物中
C.第三次过滤后,DNA存在于滤液中,可进一步除去非DNA 物质
D.上述BC均正确
2、下列操作中,对DNA的提取量影响较小的是
A.使鸡血细胞在蒸馏水中充分裂开,放出DNA等核物质
B.搅拌时,要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动
C.在“析出DNA黏稠物”时,要缓缓加蒸馏水,直至溶液中的黏稠物不再
增多
D.在用酒精沉淀DNA时,要使用冷酒精,甚至再将混合液放入冰箱中冷却
3、.对析出DNA黏稠物有关的叙述,不正确的是
A.操作时缓缓滴加蒸馏水,降低DNA的溶解度
B.在操作A时,用玻璃棒轻缓搅拌,以保证DNA分子完整
C.加蒸馏水可同时降低DNA和蛋白质的溶解度,两者均可析出
D. 当丝状黏稠物不再增加时,此时氯化钠的浓度相当于O.14 mol/L
4、在提取DNA过程中, 玻璃棒要轻缓沿一个方向搅拌,目的是
A. 为了省劲 B. 加快的DNA析出
C. 加大DNA的溶解度 D. 防止DNA结构被破坏,析出较多的DNA
5、在提取DNA过程中,加入酒精的目的是
A.溶解, DNA B. 除去DNA中的杂质
C.析出DNA D . 稀释溶液,降低浓度
6、鉴定DNA的试剂是
A 斐林试剂 B苏丹Ⅲ染液 C.双缩脲试剂 D.二苯胺
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课 后 巩 固
备注
1.选出能使DNA析出最彻底的一种和溶解度最高的一组氯化钠溶液
A.0.14 mol/L, 0.2 mol/L B.2 mol/L, 0.14 mol/L
C.0.15 mol/L, 2 mol/L D.0.14mol/L, 2 mol/L
2.DNA不溶解于
A.氯化钠 B. 氯化钾溶液 C.酒精溶液 D. 氯化镁溶液
3.初步析出DNA和提取较纯洁的DNA所用的药品的浓度及其名称分别是
①0.1g/mL柠檬酸钠溶液 ②2mol/L氯化钠 ③0.14mol/L氯化钠
④95%的酒精溶液 ⑤0.015mol/L氯化钠
A.①③⑤ B.③④ C.②④ D.②③④
4.关于DNA的粗提取与鉴定试验的表达哪项是错误的
A.向沉淀的血细胞中加水是为了提取DNA
B.氯化钠2mol/L时,DNA溶解度最大
C.向溶解的DNA烧杯中加蒸馏水是漂洗DNA
D.离心后除去血液中的上清液是为了除去杂质
5.关于DNA粗提取的试验材料的选择,
(1)经过多次试验效果的比较,最终选择鸡血做试验材料缘由是 。
(2)试验前由老师制备血细胞液供同学们作试验材料,而不用鸡全血,主要缘由是 。
(3)生活在牧区的人们,采集牛、羊和马血比较便利,若他们按试验要求完成试验步骤后,结果 ,这是由于这些动物和人类一样,成熟的红细胞中 ;但若改用动物肝脏作试验材料,试验能顺当进行,这是由于 。
(4)若选用动物肝脏作试验材料,提取之前,最好增加 程序,使组织细胞更易分别。
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