DB37_T 4342-2021 川蔓草种子收集与保存技术规范.pdf

ICS 65.150 CCS B 51 37 山东省地方标准 DB 37/T 43422021 川蔓草种子收集与保存技术规范 Technical specifications for seed collection and storage in Ruppia sinensis 2021-03-11 发布 2021-04-11 实施 山东省市场监督管理局 发 布 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由山东省海洋局提出并组织实施。本文件由山东省海洋标准化技术委员会归口。本文件起草单位：威海虹润海洋科技有限公司、中国科学院海洋研究所、荣成峻鹏生物科技有限公司。本文件主要起草人：周毅、张晓梅、顾瑞婷、徐少春、杨红生、王培亮、王军杰。川蔓草种子收集与保存技术规范 1 范围 本文件规定了川蔓草种子收集、保存的原则和技术方法等要求。本文件适用于川蔓草种子收集与保存工作。2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 海草 seagrass 可完全生活在海水中的高等被子植物，隶属于泽泻目（Alismatales）。注：我国分布的海草包括四科，分别是鳗草科（Zosteraceae），丝粉草科（Cymodoceaceae），水鳖科（Hydrocharitaceae）和川蔓草科（Ruppiaceae）。3.2 川蔓草 Ruppia sinensis 生活在海湾以及咸水、半咸水生境的一年生或多年生被子植物，属于川蔓草科，川蔓草属（Ruppia）。3.3 生殖枝 flowering shoot/reproductive shoot 海草进入花期/繁殖期后，发育形成花和种子等生殖器官的茎枝。3.4 营养枝 vegetative shoot 不进行有性繁殖过程的茎枝。4 种子收集和保存原则 优先选择面积较大的川蔓草床作为种子来源。4.1 应提前做好本底调查，确定目标草床的种子成熟期和休眠期，以明确种子采集最佳时间和保存方4.2 法。种子采集时应合理调整采集量。4.3 外观黑色且质地坚硬的种子一般均具有活力，宜进行保存。4.4 5 收集 生殖枝种子收集 5.1 5.1.1 采集时间 5.1.1.1 生殖枝的采集应在种子开始成熟、但尚未脱落时进行，即大部分种子已颗粒饱满而外壳坚硬。5.1.1.2 不同地理种群的种子成熟时间存在差异：a)黄河口地区：7 月9 月；b)威海地区：9 月10 月。5.1.2 采集 5.1.2.1 徒步采集 种子大量成熟季节，当川蔓草床水深低于1 m时，可徒步进入草床，直接用孔径不大于0.5 mm的细筛轻轻横扫川蔓草冠层，使带有川蔓草种子的果柄或花序轴落入筛子。5.1.2.2 行船采集 当川蔓草床面积较大且水深大于1 m时，可行船进入川蔓草床，控制船速，用工具捞取冠层的生殖枝部分。采集时应控制采集量、避免过度干扰草床。5.1.3 运输 采集的生殖枝宜进行冷藏运输。运输时间较短时（6 hr）亦可采用常温避光运输，注意保持生殖枝湿润状态。5.1.4 暂养 将川蔓草生殖枝置于自然海水池中暂养，1 m3水体暂养生殖枝湿重应不超过2 kg。自然光照，保持通氧，水温不宜超过25。每日换水并充分搅动生殖枝，以避免堆积缺氧，造成种子腐烂。5.1.5 种子收集 川蔓草生殖枝完全衰败后，将水体内腐败的组织碎屑捞出并反复筛洗，收集碎屑内的种子。沉积物种子收集 5.2 5.2.1 沉积物采集 当错过生殖枝收集时，可在川蔓草花期结束、种子成熟脱落进入底泥且未萌发时，挖取草床表层10 cm以浅的沉积物，以收集其中包含的川蔓草种子。5.2.2 沉积物运输 采集的沉积物宜进行冷藏运输。5.2.3 种子收集 在海水中用不小于1.5 mm的大孔径网筛和不大于0.5 mm的小孔径网筛分别去除较大和较小的颗粒杂质，人工挑选完整且坚硬的种子。沉积物筛洗过程需要大量海水，可在现场或有条件的实验室内进行。收集记录 5.3 种子收集过程中，应记录时间、地点、采集方法、采集量以及后续处理细节，并填写种子采收记录表（见附录A中表A.1、表A.2）。6 保存 运输过程中的保存 6.1 6.1.1 水环境运输 种子置于海水中，海水温度不超过4，种子密度应小于20万粒/L，每天对水体进行观察，出现浑浊时应及时换水。换水频率宜为两天一次，且所换水体需进行提前预冷到同等温度。6.1.2 干燥环境运输 种子置于空气中，空气相对湿度不高于40%，且温度不超过20。该方法宜用于3 d内的短时运输，当进行大于7 d的较长时间运输时，可能会造成部分种子活力降低。种子的室内保存 6.2 6.2.1 干燥保存 保存过程中川蔓草种子表面保持相对干燥，且维持环境相对湿度不高于40%，无直接光照，温度不高于4。保存期限不宜超过6个月。6.2.2 湿法保存 将川蔓草种子置于盐度为2040的人工海水或灭菌的自然海水中，温度控制在0 1，避光保存。每月换水一次以上，人工海水和容器应在同等温度下预冷4 h以上。保存过程中应定期观察，防止水体出现结冰现象。抗菌剂的使用 6.3 在种子短期和长期保存过程中，可加入浓度不小于2 ppm的纳米银或硫酸铜等抗菌剂。保存记录 6.4 种子保存过程中，应记录保存编号、采收编号、保存地点、保存方法、起止时间、种子量、管理人等，并填写种子保存记录表（见附录A中表A.3）。A A 附录A （资料性）川蔓草种子收集记录报表格式 表A.1表A.3给出了川蔓草生殖枝种子采集、底泥种子采集及种子保存记录表。表A.1 川蔓草生殖枝种子采收记录表 采收 编号 生殖枝采集（记录人_）生殖枝暂养（记录人_）种子收集（记录人_）地点 方法 日期 重量（kg）地点 条件 起止日期 收集日期 种子量(kg)表A.2 川蔓草底泥种子采收记录表 采收编号 底泥采集（记录人_）底泥处理与种子收集（记录人_）地点 日期 体积（m3）地点 日期 种子量(kg)表A.3 川蔓草种子保存记录表 保存编号 采收编号 保存地点 保存方法 起止时间 种子量(kg)管理人