高中生物实验涉及的显色反应96744教学教材.doc

高中生物实验涉及的显色反应
实验名称
鉴定（或提取）对象
试剂
颜色
备注
生物材料
糖类的鉴定
淀粉
碘液
蓝色

脱色的叶片
还原糖（葡萄糖、果糖、麦芽糖）
斐林试剂
砖红色
现配现用，甲乙液等量混匀后加入，水浴加热
含还原糖量高的白色
或近白色的植物组织、尿液等
蛋白质的鉴定
蛋白质
双缩脲试剂
紫色
先加A液后加B液，摇匀使用
豆浆、牛奶、鸡蛋清
脂肪的鉴定
脂肪
苏丹Ⅲ/Ⅳ
橘黄色/红色
需用高倍镜观察
花生种子等含脂肪较多的种子
DNA、RNA的鉴定
DNA
二苯胺
蓝色
需要水浴加热
鸡血细胞
甲基绿
绿色

口腔上皮细胞
RNA
吡罗红
红色

口腔上皮细胞
有丝分裂（减数分裂）
染色体（染色质）
醋酸洋红/龙胆紫/改良苯酚品红染液等碱性染料
红色/紫色/红色

洋葱根尖分生区（有丝分裂）
蝗虫的精母细胞（减数分裂）
观察线粒体
线粒体
健那绿染剂
蓝绿色

活细胞（常用口腔上皮细胞）
叶绿体中色素的提取和分离
叶绿体色素
无水乙醇（提取）、
层析液（分离）
色素带从上到下：
橙黄色的胡萝卜素、
黄色的叶黄素、
蓝绿色的叶绿素a、
黄绿色的叶绿素b
加入二氧化硅是为了研磨得更充分；碳酸钙可防止在研磨中色素被破坏
新鲜的绿叶
酵母菌呼吸方式探究
酒精
酸性条件（浓硫酸95%-97%）下的重铬酸钾溶液
灰绿色

酵母菌（无氧条件）
CO2
澄清的石灰水
浑浊

酵母菌（无氧、有氧）
溴麝香草酚蓝
由蓝变绿变黄
高中生物实验中酒精和盐酸的用法

其他试剂及用法
实验
试剂
目的
鉴定脂肪
体积分数为50%酒精
洗去浮色（洗去染液）
观察ＤＮＡ和ＲＮＡ在细胞中分布
８％的盐酸
１.改变细胞膜通透性，使染色剂迅速进入细胞
２.使染色体中ＤＮＡ与蛋白质分离利于甲基绿与ＤＮＡ结合
叶绿体色素提取
无水乙醇
溶解色素，提取色素
观察细胞有丝分裂
解离液（１５％盐酸：体积分数９５％的酒精＝１：１）
使组织细胞相互分离开
低温诱导植物染色体数目变化
卡诺氏液
固定细胞形态

体积分数为９５％酒精
冲洗残留液
解离液（１５％盐酸，９５％酒精）
解离
土壤小动物类群丰富度
体积分数７０％酒精
杀死保存小动物，防止腐烂，成为标本
DNA粗提取与鉴定
体积分数为95%酒精
溶解杂质析出DNA
（1）班氏糖定性试剂：为蓝色溶液。和葡萄糖溶液混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。
（2）20%的肝脏研磨液、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁：用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。（新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶）
（3）3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液：用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。
（4）层析液：(成分：20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成，也可用93号汽油)可用于色素的层析，即将色素在滤纸上分离开。
（5）二氧化硅：在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入，可使研磨充分。
（6）碳酸钙：研磨绿色叶片时加入，可中和有机酸，防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。
（7）0.3 g/mL的蔗糖溶液：相当于30%的蔗糖溶液，比植物细胞液的浓度大，可用于质壁分离实验。
（8）0.1 g/mL的柠檬酸钠溶液：与鸡血混合，防凝血
（9）氯化钠溶液：①可用于溶解DNA。当氯化钠浓度为2 mol/L、 0.015 mol/L时DNA的溶解度最高，在氯化钠浓度为0.14 mol/L时，DNA溶解度最低。②浓度为0.9%时可作为生理盐水。
（10）胰蛋白酶：①可用来分解蛋白质。②可用于动物细胞培养时分解组织使组织细胞分散开。
（11）秋水仙素：人工诱导多倍体试剂。用于萌发的种子或幼苗，可使染色体组加倍，原理是可抑制正在分裂的细胞纺锤体的形成。
（12） 台盼蓝使死细胞染成蓝色
原理：正常的活细胞，细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝，使之不能够进入胞内；死细胞或细胞膜不完整的细胞，胞膜的通透性增加，可被台盼蓝染成蓝色。
应用：区分活细胞和死细胞；检测细胞膜的完整性。
（13）.吲哚酚试剂与维C溶液呈褪色反应
原理：吲哚酚即2，6-二氯酚靛酚钠，其水溶液为蓝紫色，维C具有还原性，能将其褪色。
维生素C溶液在中性条件下可使吲哚酚试剂由蓝色变成无色，在酸性条件下可使吲哚酚试剂由蓝色变成粉红色。也可以用氯化铁溶液代替吲哚酚试剂，维生素C溶液可把黄色的氯化铁溶液还原成无色的氯化亚铁溶液。
应用：可用于检测食品营养成分中是否含有维生素C。
（14）.亚硝酸盐的检测出现玫瑰红
原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。
应用：将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。
（15）.脲酶的检测
原理：细菌合成的脲酶可以将尿分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，使PH升高，从而使酚红指示剂变红。
应用：在以尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂，培养某种细菌后，看指示剂变红与否可以鉴定这种细菌能否分解尿素。
（16）.伊红美蓝检测大肠杆菌
原理：在伊红美蓝培养基上，大肠杆菌的代谢产物（有机酸）与伊红美蓝结合使菌落呈深紫色。
应用：用滤膜法测定水中大肠杆菌的含量。
（17）.刚果红检测纤维素分解菌
原理：刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素分解菌分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。
应用：筛选纤维素分解菌。

调差方法

1.调查种群密度 度的方法

样方法：使用范围为大多数植物，某些身体微小，不易标记，活动范围小的动物，例如蚯蚓等土壤动物

标志重捕法：使用范围为哺乳类、爬行类、两栖类、鱼类、昆虫类等动物

2.调查群落丰富度的方法：测定土壤（水）中小动物的丰富度，就常用取样器取样法。

3.研究光合作用和呼吸作用氧和碳元素的来源去向；研究分泌蛋白的分泌途径；T2噬菌体侵染大肠杆菌的实验常用同位素标记法

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