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高中生物实验涉及的显色反应96744教学教材.doc

1、高中生物实验涉及的显色反应 实验名称 鉴定(或提取)对象 试剂 颜色 备注 生物材料 糖类的鉴定 淀粉 碘液 蓝色 脱色的叶片 还原糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖) 斐林试剂 砖红色 现配现用,甲乙液等量混匀后加入,水浴加热 含还原糖量高的白色 或近白色的植物组织、尿液等 蛋白质的鉴定 蛋白质 双缩脲试剂 紫色 先加A液后加B液,摇匀使用 豆浆、牛奶、鸡蛋清 脂肪的鉴定 脂肪 苏丹Ⅲ/Ⅳ 橘黄色/红色 需用高倍镜观察 花生种子等含脂肪较多的种子 DNA、RNA的鉴定 DNA 二苯胺 蓝色 需要水浴加热 鸡血细胞 甲基绿 绿

2、色 口腔上皮细胞 RNA 吡罗红 红色 口腔上皮细胞 有丝分裂(减数分裂) 染色体(染色质) 醋酸洋红/龙胆紫/改良苯酚品红染液等碱性染料 红色/紫色/红色 洋葱根尖分生区(有丝分裂) 蝗虫的精母细胞(减数分裂) 观察线粒体 线粒体 健那绿染剂 蓝绿色 活细胞(常用口腔上皮细胞) 叶绿体中色素的提取和分离 叶绿体色素 无水乙醇(提取)、 层析液(分离) 色素带从上到下: 橙黄色的胡萝卜素、 黄色的叶黄素、 蓝绿色的叶绿素a、 黄绿色的叶绿素b 加入二氧化硅是为了研磨得更充分;碳酸钙可防止在研磨中色素被破坏 新鲜的绿叶 酵母

3、菌呼吸方式探究 酒精 酸性条件(浓硫酸95%-97%)下的重铬酸钾溶液 灰绿色 酵母菌(无氧条件) CO2 澄清的石灰水 浑浊 酵母菌(无氧、有氧) 溴麝香草酚蓝 由蓝变绿变黄 高中生物实验中酒精和盐酸的用法 其他试剂及用法 实验 试剂 目的 鉴定脂肪 体积分数为50%酒精 洗去浮色(洗去染液) 观察DNA和RNA在细胞中分布 8%的盐酸 1.改变细胞膜通透性,使染色剂迅速进入细胞 2.使染色体中DNA与蛋白质分离利于甲基绿与DNA结合 叶绿体色素提取 无水乙醇 溶解色素,提取色素 观察细胞有丝分裂 解离液(15%盐酸:体积分数

4、95%的酒精=1:1) 使组织细胞相互分离开 低温诱导植物染色体数目变化 卡诺氏液 固定细胞形态 体积分数为95%酒精 冲洗残留液 解离液(15%盐酸,95%酒精) 解离 土壤小动物类群丰富度 体积分数70%酒精 杀死保存小动物,防止腐烂,成为标本 DNA粗提取与鉴定 体积分数为95%酒精 溶解杂质析出DNA (1)班氏糖定性试剂:为蓝色溶液。和葡萄糖溶液混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。 (2)20%的肝脏研磨液、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁:用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。(新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶) (3)3%的可溶性淀粉

5、溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。 (4)层析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93号汽油)可用于色素的层析,即将色素在滤纸上分离开。 (5)二氧化硅:在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入,可使研磨充分。 (6)碳酸钙:研磨绿色叶片时加入,可中和有机酸,防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。 (7)0.3 g/mL的蔗糖溶液:相当于30%的蔗糖溶液,比植物细胞液的浓度大,可用于质壁分离实验。 (8)0.1 g/mL的柠檬酸钠溶液:与鸡血混合,防凝血 (9)氯化钠溶液:①可用于溶解DNA。当氯化钠浓度为

6、2 mol/L、 0.015 mol/L时DNA的溶解度最高,在氯化钠浓度为0.14 mol/L时,DNA溶解度最低。②浓度为0.9%时可作为生理盐水。 (10)胰蛋白酶:①可用来分解蛋白质。②可用于动物细胞培养时分解组织使组织细胞分散开。 (11)秋水仙素:人工诱导多倍体试剂。用于萌发的种子或幼苗,可使染色体组加倍,原理是可抑制正在分裂的细胞纺锤体的形成。 (12) 台盼蓝使死细胞染成蓝色 原理:正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。 应用:区分活细胞和死细胞;检测细胞膜的

7、完整性。 (13).吲哚酚试剂与维C溶液呈褪色反应 原理:吲哚酚即2,6-二氯酚靛酚钠,其水溶液为蓝紫色,维C具有还原性,能将其褪色。 维生素C溶液在中性条件下可使吲哚酚试剂由蓝色变成无色,在酸性条件下可使吲哚酚试剂由蓝色变成粉红色。也可以用氯化铁溶液代替吲哚酚试剂,维生素C溶液可把黄色的氯化铁溶液还原成无色的氯化亚铁溶液。 应用:可用于检测食品营养成分中是否含有维生素C。 (14).亚硝酸盐的检测出现玫瑰红 原理:在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。 应用:将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较,可以

8、大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。 (15).脲酶的检测 原理:细菌合成的脲酶可以将尿分解成氨,氨会使培养基的碱性增强,使PH升高,从而使酚红指示剂变红。 应用:在以尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂,培养某种细菌后,看指示剂变红与否可以鉴定这种细菌能否分解尿素。 (16).伊红美蓝检测大肠杆菌 原理:在伊红美蓝培养基上,大肠杆菌的代谢产物(有机酸)与伊红美蓝结合使菌落呈深紫色。 应用:用滤膜法测定水中大肠杆菌的含量。 (17).刚果红检测纤维素分解菌 原理:刚果红是一种染料,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当在含有纤

9、维素的培养基中加入刚果红时,刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素分解菌分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。 应用:筛选纤维素分解菌。 调差方法 1.调查种群密度 度的方法 样方法:使用范围为大多数植物,某些身体微小,不易标记,活动范围小的动物,例如蚯蚓等土壤动物 标志重捕法:使用范围为哺乳类、爬行类、两栖类、鱼类、昆虫类等动物 2.调查群落丰富度的方法:测定土壤(水)中小动物的丰富度,就常用取样器取样法。 3.研究光合作用和呼吸作用氧和碳元素的来源去向;研究分泌蛋白的分泌途径;T2噬菌体侵染大肠杆菌的实验常用同位素标记法 3

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