显微镜技术和显微镜在临床检验中的应用习题.doc

第二章 显微镜技术和显微镜
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习 题
习题参考答案

习 题 名词解释 选择题 简答题
一、名词解释
1．光学显微镜
2．荧光显微镜
3、相衬显微镜
4．暗视野显微镜
5．偏光显微镜
6．激光扫描共聚焦显微镜
7．倒置显微镜
8．紫外光显微镜
9．电子显微镜
10．透射电子显微镜
11．扫描电子显微镜
12．超高压电子显微镜
13．扫描隧道电子显微镜
14．分辨率
15．放大率
16．数值孔径
17．显微摄影术
18．景深与焦长
19．视野
20. 齐焦
21．像差
22．色差
二、选择题
【A型题】 在五个选项中选出一个最符合题意的答案（最佳答案）。
1．在光学显微镜下所观测到的细胞结构称为( )
A．显微结构
B．超微结构
C．亚显微结构
D．分子结构
E．微细结构
2．研究细胞的亚显微结构一般运用( )
A．显微镜技术
B．电子显微镜技术
C．放射自显影技术
D．离心技术
E．共焦激光扫描显微镜技术
3．研究组织或细胞显微结构的重要技术是( )
A．显微镜技术
B．电镜技术
C．离心技术
D．电泳技术
E．放射自显影技术
4．分离细胞内不同细胞器的重要技术是( )
A，显微镜技术
B．电镜技术
C．离心技术
D．电泳技术
E．放射自显影技术
5．用显微镜观测细胞时，应选择下列哪种目镜和物镜的组合在视野内所看到的细胞数目最多( )
A．目镜10×，物镜4×
B．目镜10×，物镜10×
C．目镜10×，物镜20×
D．目镜10×，物镜40×
E．目镜15×，物镜40×
6．在物镜里增长一个相位板和在聚光镜上增长一个环形光阑的显微镜是( )
A．透射电镜
B．扫描电镜
C．荧光显微镜
D．暗视野显微镜
E．相衬显微镜
7．关于光学显微镜，下列有误的是( )
A．是采用日光作光源，将微小物体形成放大影像的仪器
B．细菌和线粒体是光镜能清楚可见的最小物体
C．由光学系统、机械装置和照明系统三部分组成
D．可用于观测细胞的显微结构
E．光学显微镜的分辨率由目镜决定
8．关于光学显微镜的使用，下列有误的是( )
A．用显微镜观测标本时，应双眼同睁
B．按照从低倍镜到高倍镜再到油镜的顺序进行标本的观测
C．使用油镜时，需在标本上滴上镜油
D．使用油镜时，需将聚光器降至最低，光圈关至最小
E．使用油镜时，不可一边在目镜中观测，一边上升载物台
9．适于观测细胞复杂网络如内质网膜系统、细胞骨架系统的三维结构的显微镜是( )
A．普通光学显微镜
B．荧光显微镜
C．相衬显微镜
D．激光扫描共聚焦显微镜
E．暗视野显微镜
10．关于激光扫描共聚焦显微镜，下列有误的是( )
A．以单色激光作为光源
B．激光变成点光源后聚焦到标本成为点照明
C．点光源激光束在标本的整个焦平面进行光点扫描后在荧光屏上成像
D．图像信息要经电脑三维重建解决
E．所用标本须经超薄切片
11．下面对透射电镜描述不对的的是( )
A．运用泛光式电子束和透射电子成像
B．观测细胞内部超微结构
C．发展最早
D．性能最完善
E．景深长、图像立体感强
12．重要用于观测活细胞中有规则的纤维结构如纺锤丝、染色体以及纤维丝等构造的光学显微镜是( )
A．荧光显微镜
B．相衬显微镜
C．普通显微镜
D．暗视野显微镜
E．偏振光显微镜
13．关于相衬显微镜，下列有误的是( )
A．运用了光的衍射和干涉特性
B．可使相位差变成振幅差
C．所观测的标本要经固定解决
D．一般使用高压汞灯作光源
E．装有环形光阑、相位板等部件
14．光学显微镜的分辨率(最小分辨距离)是( )
A．0.1µm
B．0.2µm
C．0.3µm
D．0.4µm
E．0.5µm
15．关于光学显微镜的分辨率，下列有误的是( )
A．是光学显微镜的重要性能指标
B．也可称为分辨本领
C．与照明光的波长成反比
D．指分辨出标本上两点间最小距离的能力
E．显微镜的分辨率由物镜决定
16．分别使用光镜的低倍镜和高倍镜观测同一细胞标本相，可发现在低倍镜下( )
A．相较小、视野较暗
B．相较小、视野较亮
C．相较大、视野较暗
D．相较大、视野较亮
E．相及视野的亮度均不改变
17．适于观测小细胞或细胞群体复杂而精细的表面或断面的立体形态与结构的显微镜是( )
A．普通光学显微镜
B．荧光显微镜
C．相差显微镜
D．扫描电子显微镜
E．透射电镜
18．适于观测细胞内超微结构的显微镜是( )
A．透射电镜
B．普通光学显微镜
C．荧光显微镜
D．相差显微镜
E．暗视野显微镜
19．关于荧光显微镜，下列哪项有误( )
A．其光源通常为高压汞灯或氙灯
B．必需装备为激发滤片和压制滤片
C．根据光化荧光的原理设计制造的
D．可用于观测固定细胞和活细胞
E．使用时应在较明亮的环境中进行
20．关于电子显微镜，下列哪项有误( )
A． 组织或细胞观测前均需经超薄切片
B．分为透射式和扫描式两大类
C．分辨率可达0.3nm
D．运用电子束作照明源
E．在荧光屏上成像
21．下列哪种显微镜需将标本进行超薄切片并经醋酸铀等染料染色后才干观测( )
A．扫描式电子显微镜
B．透射式电子显微镜
C．扫描隧道显微镜
D．荧光显微镜
E．相差显微镜
22．电子散射少、对样品损伤小、可用于观测活细胞的电子显微镜是( )
A．普通透射电镜
B．普通扫描电镜
C．超高压电镜
D．扫描透射电镜
E．扫描隧道显微镜
23．关于透射式电镜，下列哪项叙述是错误的( )
A．由德国科学家Ruska等发明
B．以电子束作为光源
C．电子透过标本后在荧光屏上成像
D．分辨率较高
E．适于观测细胞的外观形貌
24．关于扫描式电镜，下列哪项有误( )
A． 20世纪60年代才正式问世
B．景深长，成像具有强烈立体感
C．电子扫描标本使之产生二次电子，经收集放大后成像
D．标本无需经超薄切片即可观测
E．适于观测细胞的内部构造
25．适于观测细胞表面及断面超微结构三维图像的仪器是( )
A．普通光镜
B．荧光显微镜
C．相差光镜
D．扫描电镜
E．透射电镜
26．适于观测培养瓶中活细胞的显微镜是( )
A．透射电镜
B．扫描电镜
C．荧光显微镜
D．倒置显微镜
E．相差显微镜
27．要将视野内的物像从右侧移到中央，应向哪个方向移动标本( )
A．左侧
B．右侧
C．上方
D．下方
E．以上都可以
28．当显微镜的目镜为10X，物镜为10X时，在视野直径范围内看到一行相连的8个细胞。若目镜不变，物镜换成40X时，则在视野中可看到这行细胞中的　　　　　　　　　　　　　　　　　　( )
A．2个
B．4个
C．16个
D．32个
E．64个
29．收集轰击样品所产生的二次电子经转换放大后在荧屏上成像的显微镜是( )
A．透射电镜
B．扫描电镜
C．荧光显微镜
D．倒置显微镜
E．相差显微镜
30．下列哪种组成不是荧光显微镜的结构元件( )
A．激发光源
B．二组滤光片
C．二色镜
D．聚光镜
E．环形光阑
31．用于透射电镜的超薄切片厚度通常为( )
A．50 nm ～100nm
B．0.2μm
C．10μm
D．2nm
E．100μm
32．人们需要观测立体感很强的细胞内的三度（维）空间的微细结构，需要( )技术
A．光镜技术
B．透射电镜
C．扫描电镜
D．超高压透射电镜
E．免疫荧光镜技术
33．用荧光染料标记的抗体解决细胞后在荧光显微镜下对细胞中特殊分子进行定位属于( )
A．放射自显影技术
B．免疫荧光显微镜技术
C．免疫电镜技术
D．液相杂交技术
E．原位杂交技术
34．关于超薄切片，下列( )有误
A．厚度在50nm～100nm的切片称为超薄切片
B．通过超薄切片可将一个细胞切成100片～200片
C．制备超薄切片需使用专门的器械——超薄切片机
D．超薄切片常用玻璃制成的刀切成
E．组织细胞样品被切片之前常需双重固定但无需包埋
35．关于扫描隧道显微镜(STM)，下列( )叙述错误
A．STM是IBM苏黎世实验室的 Binnig等人在1981年发明的
B．为扫描探针显微镜的一种，具有高分辨本领
C．仅可在真空条件下工作
D．依靠一极细的金属针尖在标本表面扫描来探测标本的形貌
E．可直接观测到 DNA、RNA和蛋白等生物大分子
36．落射式荧光显微镜的吸取滤片应安装在( )
A．激发滤片与分色镜之间
B．物镜与分色镜之间
C．光源与激发滤片之间
D．分色镜与目镜之间
E．物镜与载玻片之间
37．下面哪一种措施与提高显微镜分辨能力无关( )
A．使用波长较短的光源
B．使用折射率高的介质
C．扩大物镜直径
D．使用放大倍率较高的目镜
E．提高分辨本领
38.透射电镜的反差取决于样品对( )的散射能力
A．二次电子
B．入射电子
C．样品质量厚度
D．样品重量
E．样品性质
39．某学生在显微镜下观测标本切片，当转动细调节螺旋时，有一部分细胞看得清楚，另一部分细胞较模糊，这是由于( )
A．反光镜未调节好
B．标本切得厚薄不均
C．细调节螺旋未调节好
D．显微镜物镜损坏
E．聚光镜光圈大小不适合
40．仅仅反映固体样品表面形貌信息的物理信号是( )
A．背散射电子
B．二次电子
C．吸取电子
D．透射电子
E．俄歇电子
41．如图所示，1、2为物镜长度，3、4为目镜长度，5、6为观测时物镜与标本切片间距离，哪种组合情况下，显微镜的放大倍数最大( )

1 2 3 4 5 6
A．1、3、5
B．2、4、6
C．2、3、5
D．2、4、5
E．2、3、4
42．在光学显微镜下，观测透明的、染色较浅的细胞时，必须注意做到( )
A．把光圈缩小一些，使视野暗一些
B．把光圈开大一些，使视野暗一些
C．把光圈缩小一些，使视野亮一些
D．把光圈开大一些，使视野亮一些
E．以上全不是
43．在普通光学显微镜下，一个细小物体若被显微镜放大50倍，这里“被放大50倍”是指该细小物体的( )
A．体积
B．表面积
C．像的面积
D．长度或宽度
E．像的长度或宽度
44．电子枪产生的电子是( )
A．入射电子
B．透射电子
C．弹性散射电子
D．二次电子
E．俄歇电子
45．用来显示组织和细胞的内部超微结构像的电子为( )
A．入射电子
B．透射电子
C．弹性散射电子
D．二次电子
E．吸取电子
46．下面哪种电镜可以在观测结构的同时，对组织细胞内的元素成分进行分析( )
A．透射电镜
B．扫描电镜
C．扫描隧道显微镜
D．超高压透射电镜
E．原子力显微镜
47．下面哪项不是超高压电子显微镜的优点( )
A．可用于观测厚切片
B．可以提高分辨率
C．可提高图像质量
D．结构复杂
E．减少辐射损伤范围
48．电子枪由( )组成
A．阴极、阳极
B．阴极、栅极
C．阳极、栅极
D．阴极、阳极、栅极
E．正极、负极、栅极
49．二次电子检测系统不涉及( )
A．收集体
B．显像管
C．闪烁体
D．光电倍增管
E．视频放大器
50．扫描电镜的反差是由( )决定的
A．二次电子产率
B．反射电子产率
C．吸取电子产率
D．俄歇电子产率
E．特性X射线产率
【X型题】 每题的备选答案中有两个或者两个以上的对的答案。
1．物象在低倍镜（10×）下清楚可见，换高倍镜（40×）后看不见了，这是由于( )
A．玻片放反了
B．高倍物镜故障
C．物象不在视野正中央
D．焦距没调好
E． 低倍物镜故障
2．在普通光镜上可用于调节视野内光线强弱的装置有( )
A．通光孔
B．反光镜
C．光阑
D．聚光镜
E．目镜
3．常用于观测细胞超微结构的仪器是( )
A．荧光显微镜
B．相衬显微镜
C．扫描电镜
D．透射电镜
E．暗视野显微镜
4．普通光镜上决定放大倍数的部件有( )
A．目镜
B．物镜
C．反光镜
D．聚光镜
E．光阑
5．普通光镜上的下列物镜中哪些不能浸在香柏油中使用( )
A．4×物镜
B．10×物镜
C．40×物镜
D．45×物镜
E．100×物镜
6．透射电镜所具有的特性有( )
A．分辨率高
B．放大倍数高
C．成像立体感强
D．标本须超薄
E．标本表面喷镀金属膜
7．扫描电镜的基本特性是( )
A．可见细胞表面的三维形态
B．成像立体感强
C．标本须超薄
D．标本表面喷镀金属膜
E．放大倍数高
8．在电镜下所观测到的细胞结构称为( )
A．显微结构
B．超微结构
C．亚显微结构
D．微细结构
E．电镜结构
9．电镜标本制备时常用的固定剂( )
A．锇酸
B．戊二醛
C．丙酮
D．联苯胺
E．过碘酸
10．荧光显微镜以紫外线为光源，通常采用落射式照明，是由于( )
A．如采用柯拉式照明，紫外线会伤害人的眼睛
B．紫外线穿透能力较弱
C．紫外线可通过镜筒中安装的双向反光镜
D．视野背景很暗
E．整个视场均匀照明
11. 适于观测无色透明活细胞微细结构的光学显微镜是( )
A．相衬显微镜
B．暗视野显微镜
C．荧光显徽镜
D．偏振光显微镜
E．普通显微镜

三、简答题
1．简述光学显微镜的工作原理。
2．简述光学显微镜的结构组成。
3．物镜和目镜在工作条件和技术规定上有哪些不同？
4．光学显微镜的性能参数有哪些？这些参数间的影响和制约关系如何？
5．简述医学检查中常用的荧光显微镜的原理、结构及用途。
6. 简述荧光显微镜的使用注意事项。
7．简述相衬显微镜的工作原理、结构特点及其重要用途。
8．简述偏光显微镜的结构特点、工作原理及其重要用途。
9．简述激光扫描共聚焦显微镜的工作原理。
10．简述激光扫描共聚焦显微镜的结构特点在医学领域的重要用途。
11. 电镜的基本类型有哪些？各有什么特点？
12．扫描电镜有哪些特点？
13．电镜由哪几个重要部分组成？对成像质量影响较大的部件有哪些？
14．光学显微镜与电子显微镜的重要区别是什么?
15．扫描隧道显微镜是纳米生物学研究工具，为什么能用来观测活的生物样品？

习题参考答案

一、名词解释
1．光学显微镜：简称光镜，是运用日光照明将小物形成放大影像的精密光学仪器，由光学系统、机械装置和照明系统三部分组成。光学系统由物镜和目镜组成，其核心是物镜和目镜中的两组透镜，其放大成像的机理是先由物镜形成放大的实像，再由目镜进一步放大成虚像，最后在人眼中形成实像。
2．荧光显微镜：荧光显微镜是以紫外线为光源来激发生物标本中的荧光物质，产生能观测到的各种颜色荧光的一种光学显微镜。
3．相衬显微镜：是把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，用于观测活细胞和未染色的标本的一种特殊显微镜。
4．暗视野显微镜：是运用特殊的聚光镜使照明光线斜射而不能直接进入物镜，形成暗视野，那些通过标本散射的光线才干进入物镜放大，在黑暗的背景中呈现标本明亮的轮廓的显微镜。
5．偏光显微镜：是运用光的偏掁特性，对具有双折射性(即可以使一束入射光经折射后提成两束折射光)的晶态、液晶态物质进行观测和研究的重要光学仪器。
6．激光扫描共聚焦显微镜：以单色激光作为光源的一种特殊光学显微镜。其物镜和聚光镜互相共焦点，使得只有从标本焦面发出的光线聚焦成像，而焦面以外的漫射光不参与成像，改变焦平面，可获得细胞或原标本不同层次的图像，从而得到样品的三维结构图像。
7．倒置显微镜：当观测活体标本时，需要把照明系统放在载物台及标本之上，而把物镜组放在载物台器皿下进行放大成像的显微镜，又称生物培养显微镜。
8．紫外光显微镜：使用紫外光源进行照明的显微镜。
9．电子显微镜：简称电镜，是运用波长很短的电子束作为照明光源，通过电子流对细胞样品的透射或反射及电磁透镜的多级放大而在荧光屏上成像的大型精密仪器。
10．透射电子显微镜：简称透射电镜，是运用电子枪发出的高速电子束照射超薄的生物样品，收集透射电子流经电磁透镜的多级放大后成像的仪器。
11．扫描电子显微镜：简称扫描电镜，是一种重要用于观测组织细胞表面或细胞内断面的电镜。其工作原理是从电子枪发出的电子束经电磁聚光镜汇聚成极细的电子探针，并在细胞样品表面逐点扫描，收集样品表面产生的二次电子再经转换、放大，最终在荧光屏同步扫描成像。
12．超高压电子显微镜：生成电子束的电压超过500kV的电子显微镜。
13．扫描隧道电子显微镜：当原子尺度的针尖在不到一个纳米的高度上扫描样品时，此处电子云重叠，外加电压（2mV～2V），针尖与样品之间产生隧道效应而有电子逸出，形成隧道电流，通过隧道电流获取显微图像的电子显微镜。
14．分辨率：也称分辨本领，指分辨物体细微结构的的能力。
15．放大率：或称放大倍数是指显微镜经多次成像后最终所成(放大的)像的大小相对于原物体大小的比值。
16．数值孔径：又叫镜口率，是物体与物镜间媒质的折射率n与物镜孔径角的一半(β)正弦值的乘积。
17．显微摄影术：是运用显微照相装置，把显微镜视野中所观测到物件的细微结构真实地记录下来，以供进一步分析研究之用的一种技术。
18．景深与焦长：在成一幅清楚像的前提下，像平面不变，景物沿光轴前后移动的距离称“景深”。景物不动，像平面沿光轴前后移动的距离称“焦长”。
19．视野：视野又称视场，是指通过显微镜所能看到的标本所在空间的范围。
20. 齐焦：当某一物镜调焦清楚后，变换其它物镜时，也能基本保证焦距适当、成像清楚。
21. 像差：光学仪器不也许使物点发出而进入系统的所有光线都是沿着高斯光学的抱负光路成像，从而导致成像在形状方面的缺陷，称之为像差。
22. 色差: 是一种由白光或复色光在即使严格满足高斯条件下也存在的特殊类型的成像缺陷。当用白光或复色光经透镜成像时，会因各种色光存在着光程差而导致颜色不同、位置不重合、大小不一致的不同成像效果，从而导致像和物体的较大失真。
二、选择题
【A型题】
1．A 2．B 3．A 4．C 5．A 6．E 7．E 8．D
9．D 10．E 11．E 12．E 13．C 14．B 15．C 16．B
17．D 18．A 19．E 20．A 21．B 22．C 23．E 24．E
25．D 26．D 27．B 28．A 29．B 30．E 31．A 32．D
33．B 34．E 35．C 36．D 37．D 38．B 39．B 40．B
41．C 42．A 43．D 44．A 45.B 46.C 47.D 48.D
49.A 50.A
【X型题】
1．ABCD 2．BCD 3．CD 4．AB 5．ABCD 6．ABD
7．ABD 8．BC 9．AB 10．BE 11.ACD

三、简答题
1．简述光学显微镜的工作原理。
答：显微镜是由两组会聚透镜组成的光学折射成像系统，是运用光学原理，把人眼所不能分辨的微小物体放大成像，供人们提取物质微细结构信息的光学仪器。把焦距较短、靠近观测物、成实像的透镜组称为物镜，而焦距较长，靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜。被观测物体位于物镜的前方，被物镜作第一级放大后成一倒立的实像，然后此实像再被目镜作第二级放大， 得到最大放大效果的倒立的虚像，位于人眼的明视距离处。
2．简述光学显微镜的结构组成。
答：基本结构涉及光学系统和机械系统两大部分。光学系统是显微镜的主体部分，涉及物镜、目镜、聚光镜及反光镜等组成的照明装置。机械系统是为了保证光学系统的成像而配置的，涉及调焦系统、载物台和物镜转换器等运动夹持部件以及底座、镜臂、镜筒等支持部件。照明设立的重要部件有光源、滤光器、聚光镜和玻片等。
3．物镜和目镜在工作条件和技术规定上有哪些不同？
答：显微镜的物镜、目镜各由数只组成一套，物镜和目镜间的不同组合构成不同的放大倍率。物镜采用转换器调换，显微镜的物镜应满足齐焦规定，即调换物镜后，不需要重新调焦就能看到物体的像。为此，不同倍率物镜的共轭距应为常数。目镜采用插入式调换，目镜的相对孔径很小，一般为1/20～1/40。显微镜的目镜是在窄光束、大视场的条件下工作的。
4．光学显微镜的性能参数有哪些？这些参数间的影响和制约关系如何？
答：显微镜的性能参数重要有放大率、数值孔径、分辨率、视场、景深、镜像亮度、镜像清楚度、工作距离和机械筒长。显微镜的数值孔径与其放大率成正比，与分辨率、景深成反比，它的平方与图像亮度成正比。因此，使用较大数值孔径的物镜，其放大率和分辨本领较高，但视场、景深、工作距离较小。
5．简述医学检查中常用的荧光显微镜的原理、结构及用途。
答：荧光显微镜是以紫外线为光源来激发生物标本中的荧光物质，产生能观测到的各种颜色荧光的一种光学显微镜。
荧光显微镜是由光源、滤色系统和光学系统等重要部件组成。荧光显微镜与普通光学显微镜重要区别在于光源和滤光片不同。通常用高压汞灯作为光源，可发出紫外线和短波长的可见光；滤光片有二组，第一组称激发滤片，位于光源和标本之间，仅允许能激发标本产生荧光的光通过(如紫外线)；第二组是阻断滤片，位于标本与目镜之间，可把剩余的紫外线吸取掉，只让激发出的荧光通过，这样既有助于增强反差，又可保护眼睛免受紫外线的损伤。光学系统重要有反光镜、聚光镜、目镜、物镜、照明系统等组成。
荧光显微镜可用于观测检测细胞中能与荧光染料特异结合的特殊蛋白、核酸等，其标本染色简便、荧光图像色彩鲜亮，并且敏感度较高。
6. 简述荧光显微镜的使用注意事项。
答：使用荧光显微镜时应注意以下事项：①观测对象必须是可自发荧光或已被荧光染料染色的标本；②载玻片、盖玻片及镜油应不含自发荧光杂质；③选用最佳的滤片组；④荧光标本一般不能长期保存，若连续长霎时间照射(特别是紫外线)易不久褪色。因此，如有条件则应先照相存档，再仔细观测标本；⑤启动高压汞灯后，不得在15分钟内将其关闭，一经关闭，必须待汞灯冷却后方可再启动。严禁频繁开闭，否则，会大大减少汞灯的寿命；⑥若暂不观测标本时，可拉过阻光光帘阻挡光线。这样，即可避免对标本不必要的长时间照射，又减少了开闭汞灯的频率和次数；⑦较长时间观测荧光标本时，最佳戴能阻挡紫外光的护目镜，加强对眼睛的保护。
7．简述相衬显微镜的工作原理、结构特点及其重要用途。
答：相衬显微镜的基本原理是把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，使各种结构变得清楚可见。光线透过标本后发生折射，偏离了本来的光路，同时被延迟了1/4λ（波长），假如再增长或减少1/4λ，则光程差变为1/2λ，两束光合轴后干涉加强，振幅增大或减小，提高反差。
相衬显微镜的结构特点：①环形光阑（annular  diaphragm）　位于光源与聚光镜之间，作用是使透过聚光镜的光线形成空心光锥，聚焦到标本上；②相位板（annular phaseplate）　在物镜中加了涂有氟化镁的相位板，可将直射光或衍射光的相位推迟1/4λ，并能吸取直射光(背景光)的光强，使直射光与衍射光的光强趋于一致，能更好地突出干涉的效果。
相衬显微镜重要用于观测活细胞和未染色的标本。
8．简述偏光显微镜的结构特点、工作原理及其重要用途。
答：是运用光的偏掁特性，对具有双折射性(即可以使一束入射光经折射后提成两束折射光)的晶态、液晶态物质进行观测和研究的重要光学仪器。
偏光显微镜是在一般显微镜的基础上增添了使普通光线转变成偏振光和检测偏振光的装置或观测干涉图样的特殊透镜，即光源前有偏振片（起偏器），使进入显微镜的光线为偏振光，镜筒中有检偏器（一个偏振方向与起偏器垂直的起偏器），这种显微镜的载物台是可以旋转的。当载物台无样品时，无论如何旋转载物台，由于两个偏振片是垂直的，显微镜里看不到光线。而放入旋光性物质后，由于光线通过这类物质时发生偏转，因此旋转载物台便能检测到这种物体。移相装置是偏光显微镜在使用过程中不可缺少的附件。全波片、半波片及1/4波片可以使通过波片的偏振光分别延迟2π、π和π/2的相位。而补偿器则可连续调节使通过的偏振光相位发生连续改变。移相装置对观测光的偏振性质是十分必要的。
运用偏光显微镜可以清楚地观测到纤维丝、纺锤体、胶原、染色体、卵巢、骨骼、毛发、活细胞的结晶或液晶态的内含物、神经纤维、肌肉纤维等的细微结构等。
9．简述激光扫描共聚焦显微镜的工作原理。
答：激光扫描共聚焦显微镜运用单色激光扫描束通过照明针孔形成点光源，对标本内焦平面上的每一点进行扫描，标本上的被照射点，在检测器的检测针孔处成像，由检测针孔后的光电倍增管逐点或逐线接受，迅速在计算机监视器屏幕上形成荧光图像，照明针孔与检测针孔相对于物镜焦平面是共轭的。焦平面的点同时聚焦于照明针孔和检测针孔，焦平面以外的点不会在检测针孔处成像，这样得到的共聚焦图像是标本的光学横断面，克服了普通荧光显微镜图像模糊的缺陷。此外在显微镜的载物台上加一个微量步进马达，可使载物台沿着Z轴上下移动，将样品各个层面移到照明针孔和检测针孔的共焦面上，样品的不同层面的图像都能清楚地显示，成为连续的光切图像。
10．简述激光扫描共聚焦显微镜的结构特点及其在医学领域的重要用途。
答：激光共聚焦显微镜是在荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置，运用计算机进行图像解决，使用紫外或可见光激发荧光探针，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像。此外在其载物台上加一个微量步进马达，可使载物台沿着Z轴上下移动，将样品各个层面移到照明针孔和检测针孔的共焦面上，样品的不同层面的图像都能清楚地显示，成为连续的光切图像。
激光扫描共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope，LSCM)具有高灵敏度、高分辨率、高放大率等特点。在医学领域重要用于细胞三维重建、细胞定量荧光测定、细胞内钙离子、pH值和其它离子的动态分析、细胞间通讯和膜的流动性等过程的研究。
11. 电镜的基本类型有哪些？各有什么特点？
答：电镜的基本类型有透射电子显微镜与扫描电子显微镜。射电子显微镜与扫描电子显微镜都用于放大与分辨微小结构，这两种技术通过标本对电子束的影响来探测标本结构。透射电子显微镜的电子束穿过标本，聚焦成像于屏幕或显像屏上，扫描电子显微镜的电子束在标本表面进行扫描，反射的电子聚焦成像于屏幕或显像屏。透射电子显微镜用于研究超薄切片标本，有极高分辨率，可给出细微的胞内结构。扫描电子显微镜可以反映未切片标本的表面特性。
12．扫描电镜与透射电镜相比有哪些特点？
答：① 可以直接观测样品表面的结构，样品的尺寸可大至120mm×80mm×50mm；② 样品制备过程简朴，不用切成薄片；③样品可以在样品室中作三度空间的平移和旋转，因此，可以从各种角度对样品进行观测；④景深大，图像富有立体感。扫描电镜的景深较光学显微镜大几百倍，比透射电镜大几十倍；⑤图像的放大范围广，分辨率也比较高。可放大十几倍到几十万倍，它基本上涉及了从放大镜、光学显微镜直到透射电镜的放大范围。分辨率介于光学显微镜与透射电镜之间，可达3nm；⑥电子束对样品的损伤与污染限度较小；⑦ 在观测形貌的同时，还可运用从样品发出的其他信号作微区成分分析。
13．电镜由哪几个重要部分组成？对成像质量影响较大的部件有哪些？
电子显微镜重要由电子光学系统(电子透镜和电子枪)、真空系统、供电系统、机械系统和观测显示系统等几部分组成。
对成像质量影响较大的部件有电子透镜和电子枪。电子透镜存在各种像差，这是影响成像质量的重要因素。在实际设计中，是通过适当缩小口径、提高加速电压、增大电极圆筒或线圈直径及减低放大率来减少球差，通过减少电子的初速度、提高加速电压和稳定电源电压来减少色差的。
14．光学显微镜与电子显微镜的重要区别是什么?
答：①照明源不同。电镜所用的照明源是电子枪发出的电子流，而光镜的照明源是可见光。由于电子流的波长远短于光波波长，故电镜的放大及分辨率显著高于光镜。②透镜不同。电镜中起放大作用的物镜是电磁透镜，而光镜的物镜则是玻璃磨制而成的光学透镜。电镜中的电磁透镜共有三组，分别与光镜中聚光镜、物镜和目镜的功能相称。③成像原理不同。在电镜中，作用于被检样品的电子束经电磁透镜放大后打到荧光屏上成像或作用于感光胶片成像。其电子浓淡的差别产生的机理是，电子束作用于被检样品时，入射电子与物质的原子发生碰撞产生散射，由于样品不同部位对电子有不同散射度，故样品电子像以浓淡呈现。而光镜中样品的物像以亮度差呈现，它是由被检样品的不同结构吸取光线多少的不同所导致。④所用标本制备方式不同。电镜观测所用组织细胞标本的制备程序较复杂，技术难度和费用都较高，在取材、固定、脱水和包埋等环节上需要特殊的试剂和操作，最后还需将包埋的组织块切成超薄标本片。而光镜观测的标本则一般置于载玻片上，如细胞涂片标本，细胞滴片标本等。
15．扫描隧道显微镜是纳米生物学研究工具，为什么能用来观测活的生物样品？
答：扫描隧道显微镜可在真空、大气、常温等不同环境下工作，甚至可将样品浸在水和其它溶液中，不需要特别的制样技术。这些特点特别合用于研究生物样品和在不同实验条件下对样品表面的评价。由于没有高能电子束，探测过程对样品表面没有破坏作用(如辐射， 热损伤等)，所以能对生理状态下生物大分子和活细胞膜表面的结构进行研究，样品不会受到损伤而保持完好。