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生物仪器分析原理与方法绪论省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx

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1、生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH生物仪器分析原理与方法 生命科学学院微生物学教研室 杨继红第1页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH生物分析仪器原理与方法教学介绍一、教学内容二、讲课方式三、学习参考资料四、考试及成绩计算第2页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH一、教学内容绪论第1章 PCR及荧光定量PCR第2章 凝胶成像设备第3章 近红外成像设备第4章 紫外交联仪和杂交炉第5章 电转化仪和电融合仪第6章 洗板机和酶标仪第7章 离心机和离心技术第8章 荧光显微镜技术第9章 分光光度计第10章 气相色谱

2、第11章 液相色谱第12章 IKTA纯化系统第13章 双向电泳第14章 变性梯度凝胶电泳第15章 毛细管电泳第16章 超净工作台与生物安全柜第3页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH二、讲课方式二、讲课方式l课堂教学n讲授内容以教材为主;n讲课采取PowerPoint课件;n课堂提问、小测验、期末考试(闭卷);n仪器操作l课外辅导课外辅导n个别交谈n电话nE-mail第4页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH三、学习参考资料l当代生物科学仪器分析入门当代生物科学仪器分析入门,徐金森主编,化学工业出版社,徐金森主编,化学工业出版社,。l

3、当代生物化学与分子生物学当代生物化学与分子生物学仪器与设备仪器与设备,雷东风编著,雷东风编著,科学出版社,科学出版社,。l生命科学仪器使用技术教程生命科学仪器使用技术教程,滕利荣,孟庆繁主编,科学出滕利荣,孟庆繁主编,科学出版社,版社,。l离心分离离心分离,金绿松,林元喜主编,化学工业出版社,金绿松,林元喜主编,化学工业出版社,。l生物化学仪器分析与试验技术生物化学仪器分析与试验技术,周先碗,胡晓倩编,化学工,周先碗,胡晓倩编,化学工业出版社,业出版社,。l当代仪器分析在生物医学研究中应用当代仪器分析在生物医学研究中应用,钱小红,谢剑炜主编,钱小红,谢剑炜主编,化学工业出版社。化学工业出版社。

4、l生物化学仪器分析基础生物化学仪器分析基础,曹成喜主编,化学工业出版社,曹成喜主编,化学工业出版社,。第5页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH四、考试及成绩计算l考试:闭卷或开卷n期末考试:时间在课程结束后l成绩计算 总成绩=期末70%+平时30%l平时成绩n考勤n平时小测验:n提问:当面提问、网上提问,科学问题第6页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH绪 论一、科学仪器主要作用二、仪器分析介绍三、定量分析方法评价指标四、痕量分析与微量分析五、生物学仪器简述第7页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJHl科

5、学仪器是科学研究取得突破性、革命性进展先决条件。以交通工具发展改变为例以交通工具发展改变为例横横向向改改进进(从从车车体体入入手手,运输能力产生量改进)运输能力产生量改进)马车马车纵纵向向飞飞跃跃(从从动动力力入入 手手,运运输输能能力力产产生生质质飞飞跃跃)第8页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH一、科学仪器主要作用l科学技术是第一生产力,科学仪器是第一生产力三要素之一,在科学技术创新事业以及在促进社会生产力发展中起着带头作用、主导作用,是发展社会生产力排头兵。科学仪器对科技创新、国民经济发展、国防建设和小康社会建设都含有主要支撑和推进作用。科技部副部长刘燕华

6、 从科学试验精密测试分析,到人体健康、食品、环境诊疗探测,从航空、航天、海洋与各种极端条件探测,到院子、分子、纳米等围观水平测试,从武器装备到反恐、国家安全领域等,都离不开科学仪器应用。中国科学院杜祥琬副院长第9页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH1、科学仪器促进科学技术发展l科学上发觉和技术上创造是从对事物观察开始:l对事物精细观察就要借助于科学仪器,尤其是在自然科学和工业生产领域更是如此。在对事物观察、测试基础上经过分析推导,形成认识。到这一阶段还只能是假说、学说。l实践是检验真理唯一标准,只有在经过测试和考评,才能真正形成科学,所以说在科学发展哪一阶段都离

7、不开测试。l国家中长久科学技术发展规划指出,仪器仪表和测试是新技术革命先导和基础。第10页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH1、科学仪器促进科学技术发展 科学是从测量开始,没有测量就没有科学,最少是没有准确科学、真正科学。化学家、计量学家门德列耶夫 仪器是认识世界工具;科学是用斗量禾学问。用斗去量禾就对事物有了深入了解、准确了解,就形成科学。我国“两弹一星”元勋王大珩院士 Nothing begets good science like development of a good instrument(发展一个好仪器对于一门好科学贡献超出了任何其它事情)。英国著

8、名科学家H.Pavy 当代科学进步越来越依靠仪器发展。1991年诺贝尔化学奖得主R.R.Ernst第11页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH1、科学仪器促进科学技术发展 New directions in science are launched by new tools much more than by new concepts.The effect of a concept-driven revolution is to explain old things in new ways.The effect of a tool-driven revolutio

9、n is to discover new things that have to be explained(由新工具开创科学新方向远比由新概念开创科学新方向要多得多。由概念驱动革命影响是用新概念去说明旧事物。而由工具驱动革命影响是去发觉需要说明新事物)美国能源部出色科学家R.F.Hirsch博士第12页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH1、科学仪器促进科学技术发展l科学发展史一再证实,许多主要科学分支确实立和发展归功于主要科学仪器装置研制成功。l极谱仪创造产生了极谱学,色谱仪创造产生了色谱学,光谱仪创造产生了光谱学,质谱仪创造产生了质谱学,没有哈勃望远镜就难以进

10、行天体科学研究,天体科学上许多重大发觉都是依靠哈勃望远镜观察而得到。扫描隧道显微镜创造对纳米科技兴起和发展能够说起到决定性作用第13页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH哈勃望远镜创造揭开了人类对星系研究序幕 电子显微镜创造彻底处理了微观研究领域放大率不足问题 科学进步在很大程度是被科学仪器创造所推进科学进步在很大程度是被科学仪器创造所推进。l科学仪器是开展科学研究和实现创造创造必要伎俩。第14页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH1、科学仪器促进科学技术发展l据统计,20世纪授予诺贝尔奖项目中,物理学科项目标68.4、化学学科项目标

11、74.6%、生物医学学科项目标90都直接与试验相关或本身就是试验项目,这些试验都是借助各种先进仪器完成。l从20世纪初到现在,诺贝尔奖颁发给仪器创造、发展与相关试验项目达27项之多。第15页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH第16页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH2、科学仪器是经济发展推进力倍增器l美国商务部在1992年公布过调查结果:美国仪器仪表产业产值只占美国社会总产值4,而因为仪器仪表事业发展拉动相关经济部门产值到达社会总产值66!l仅仅在美国,天天就用各种分析仪器完成2.5亿次分析检测工作,美国每年仅用于分析测试费用就高

12、达500亿美元!第17页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH3、科学仪器是可连续发展确保和指路标 l20世纪后期,因为科学仪器科技和产业(主要是分析仪器)发展,人类突然感觉到了环境污染对人类社会和经济可连续发展重大意义和严重影响。发觉了大气层臭氧空洞产生、发展及其危害以及厄尔尼诺现象、温室效应、热带雨林破坏等等生态平衡问题产生、发展及其危害发觉和监测全部这一切危及人类社会和经济可连续发展甚至人类本身生育、遗传、疾病、生存基础大问题,都是直接依靠当代分析检测科技和当代科学仪器(分析仪器)发展和广泛应用。第18页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教

13、研室YJH4、科学仪器是打破贸易壁垒强有力工具l我国已加入WTO,世界各国关税壁垒这一老武器已被种种“技术壁垒”、“绿色壁垒”所取代,“农药残留指标”、“重金属元素指标”、“抗生素残留”等理由使我国传统大宗出口禽蛋肉产品、粮食及食品,甚至蔬菜、蜂蜜、茶叶频频被欧、美、日等国市场拒之门外,除了种种或明或暗政治、经济原因,主要原因之一是我国当代分析检测技术和高灵敏度分析仪器水平落后!第19页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH5、科学仪器是确保国家安全利剑l近年来超级霸权国家横行世界国际政治态势发展,也有分析检测(包含控制)科技和仪器发展基础和水平原因。依仗其准确检测

14、、控制技术和仪器鹤立鸡群高度发展水平,超级霸权主义者处处挥舞其“灵巧炸弹”、“准确打击”、“反导系统”,在“零伤亡战争”呵护下横行全球。第20页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH6、科学仪器是打击犯罪有力伎俩l弥漫全球贩毒、吸毒恶浪、假冒伪劣产品、金融欺诈等等已成为当今国际社会毒瘤,也急需更先进检毒侦查技术和仪器、快速可靠质检技术和对应分析检测仪器。第21页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH7、科学仪器是开展生命科学研究支撑l医学正在经历一个由经验、技艺变为科学过程,要把医学由经验、技艺变为科学,要依靠仪器仪表,要依靠测试。仪器与

15、测试技术是了解人体和生物生命机理和探测疾患主要伎俩。没有良好测试伎俩,包含各种植入人体内部传感器,是不可能洞察人体和生物奥秘。l对于祖国传统医学中医学、中草药更是如此。中医学、中草药积累了多少代人心血和经验,是人类宝贵文化遗产。中医学关于将人作为一个整体见地,相关如经络、针灸、号脉等学说与实践都是非常宝贵,但也存在怎样将它们由经验、技艺变为科学并深入深化、扩大问题,而全部这一切都靠测试,靠仪器仪表。第22页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJHX射线衍射技术促进DNA双螺旋结构发觉第23页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJHX射线衍射技

16、术促进DNA双螺旋结构发觉第24页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJHPCR技术使基因克隆简便易行lMullis在1983年春天一个周五晚上,他开车带着女友前往乡间小屋度周末。在蜿蜒乡间公路上开着车,一段DNA重复复制景像,在他脑海里冒了出来。第25页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJHl 东南大学从属中大医院毛曦教授从事发育生物学教学、科研二十余年,在国内外资料上从未看到过脑干细胞诱导分化出神经细胞末梢突出物形貌,世界各类文件上该细胞末梢突出物示图均是手工绘制。分析测试中心电镜室王克宇同志为毛教授观察到了大鼠神经细胞末梢突出物形貌。

17、毛教授非常欣喜,称这是一项重大发觉,是世界上第一张该细胞形貌照片,对细胞、神经学等方面研究有重大意义,他们很快将发表含有这一重大突破结果,在世界范围公开该细胞形貌照片。第26页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH科学仪器使人类基因组计划提速l人类基因组计划与曼哈顿原子弹计划、阿波罗登月计划并称科学史上三大计划。l人类基因组由大约30亿碱基对组成,分布在23对染色体上,大约含6万多个基因。人类基因组测序方法及其效率测序方法测序方法 年代年代 测序方式测序方式 所需时间所需时间 所需经费所需经费 常规凝胶电泳法 1990 手工 30亿美元 毛细管电泳法 自动 3年 3

18、亿美元 微流控芯片 自动 100天 50万美元 第27页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH第二节 仪器分析介绍一 仪器分析和分析化学1、什么是仪器分析?l仪器分析是指采取比较复杂或特殊仪器设备,经过测量物质一些物理或物理化学性质参数及其改变来获取物质化学组成、成份含量及化学结构等信息一类方法。n这些方法普通都有独立方法原理及理论基础。第28页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH2、分析化学化学分析、仪器分析l分析化学是研究物质组成、状态和结构科学,它包含化学分析和仪器分析两大部分。n化学分析是指利用化学反应和它计量关系来确定被测物质

19、组成和含量一类分析方法。测定时需使用化学试剂、天平和一些玻璃器皿。n仪器分析是以物质物理和物理化学性质为基础 建立起来一个分析方法,测定时,经常需要使用比较复杂仪器。u仪器分析产生为分析化学带来革命性改变,仪器分析是分析化学发展方向。第29页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH3、仪器分析特点(与化学分析比较)l灵敏度高,检出限量可降低。如样品用量由化学分析mL、mg级降低到仪器分析g、L级,甚至更低。适合于微量、痕量和超痕量成份测定。l选择性好。很多仪器分析方法能够经过选择或调整测定条件,使共存组分测定时,相互间不产生干扰。l操作简便,分析速度快,轻易实现自动化

20、。l相对误差较大。化学分析普通可用于常量和高含量成份分析,准确度较高,误差小于千分之几。多数仪器分析相对误差较大,普通为5%,不适合用于常量和高含量成份分析。l需要价格比较昂贵专用仪器。第30页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH表表1.1 常量分析、半微量和微量分析常量分析、半微量和微量分析第31页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH4、仪器分析与化学分析关系l仪器分析与化学分析区分不是绝正确,仪器分析是在化学分析基础上发展。少仪器分析方法原理,包括到相关化学分析基本理论;不少仪器分析方法,还必须与试样处理、分离及掩蔽等化学分析伎俩

21、相结合,才能完成份析全过程。l仪器分析有时还需要采取化学富集方法提升灵敏度;有些仪器分析方法,如分光光度分析法,因为包括大量有机试剂和配合物化学等理论,所以在不少书籍中,把它列入化学分析。第32页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH二 仪器分析方法1、光学分析法l凡是以电磁辐射为测量信号分析方法均为光学分析法。可分为光谱法和非光谱法。l光谱法则是以光吸收,发射和拉曼散射等作用而建立光谱方法。这类方法比较多,是主要光分析方法。l非光谱法是指那些不以光波长为特征信号,仅经过测量电磁幅射一些基本性质(反射,折射,干涉,衍射,偏振等)。第33页生物仪器分析原理与方法第一章

22、 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH2、电分析化学方法l电化学分析法是依据物质在溶液中电化学性质建立一类分析方法。以电讯号作为计量关系一类方法,主要有五大类:n电导法n电位法n电解法n库仑法n伏安法n极谱法第34页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH3、色谱法l色谱法是以物质在两相(流动相和固定相)中分配比差异而进行分离和分析方法。主要有:n气相色谱法n液相色谱法第35页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH4、其它仪器分析方法质谱:l依据物质带电粒子质荷比在电磁场作用下进行定性、定量和结构分析方法。热分析:l依据物质质量、体积、热导

23、、反应热等性质与温度之间动态关系来进行分析方法是热差分析法。放射分析:l依据物质放射性辐射来进行分析方法同位素稀释法,中子活化分析法。第36页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH三、仪器分析发展概况l仪器分析三次巨大变革n第一次变革:20世纪初,分析天平创造,借助于物理化学溶液溶液理论发展(四大平衡建立)。n第二次变革:20世纪40年代以后,物理电子发展,各种仪器分析方法相继建立。n第三次变革:现在当代科学技术和生产发展,计算机使用,尤其微型计算机发展,给仪器分析带来全新革命。第37页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH20世纪世纪4

24、0 50年代兴起材料科学,年代兴起材料科学,60 70年代发展起来环境年代发展起来环境科学都促进了分析化学学科发展。科学都促进了分析化学学科发展。80年代以来,生命科学发展年代以来,生命科学发展也促进分析化学一次巨大发展。仪器分析是分析化学主要组成也促进分析化学一次巨大发展。仪器分析是分析化学主要组成部分,也随之不停发展,不停地更新自己,为科学技术提供更部分,也随之不停发展,不停地更新自己,为科学技术提供更准确、更灵敏、专一、快速、简便分析方法。准确、更灵敏、专一、快速、简便分析方法。如生命科学研究进展,需要对多肽、蛋白质、核酸等生物如生命科学研究进展,需要对多肽、蛋白质、核酸等生物大分子进行

25、分析,对生物药品分析,对超微量生物活性物质,大分子进行分析,对生物药品分析,对超微量生物活性物质,如单个细胞内神经传递物质分析以及对生物活体进行分析。如单个细胞内神经传递物质分析以及对生物活体进行分析。1.仪器分析发展仪器分析发展第38页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH信息时代到来,给仪器分析带来了新发展。信息时代到来,给仪器分析带来了新发展。计算机与分析仪器结合,出现了分析仪器智能化,计算机与分析仪器结合,出现了分析仪器智能化,加紧了数据处理速度。它使许多以往难以完成任务,加紧了数据处理速度。它使许多以往难以完成任务,如试验室自动化,图谱快速检索,复杂数学统

26、计可轻如试验室自动化,图谱快速检索,复杂数学统计可轻而易举得于完成。信息采集和变换主要依赖于各类传而易举得于完成。信息采集和变换主要依赖于各类传感器。这又带动仪器分析中传感器发展,出现了光导感器。这又带动仪器分析中传感器发展,出现了光导纤维化学传感器和各种生物传感器。纤维化学传感器和各种生物传感器。第39页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH联用分析技术已成为当前仪器分析主要发展方向。将几个联用分析技术已成为当前仪器分析主要发展方向。将几个方法结合起来,尤其是分离方法(如色谱法)和检测方法(红方法结合起来,尤其是分离方法(如色谱法)和检测方法(红外光谱法、质谱法、

27、核磁共振波谱法、原子吸收光谱法等)结外光谱法、质谱法、核磁共振波谱法、原子吸收光谱法等)结合,聚集了各自优点,填补了各自不足,能够更加好地完成试合,聚集了各自优点,填补了各自不足,能够更加好地完成试样分析任务。样分析任务。联用分析技术:联用分析技术:气相色谱气相色谱质谱法(质谱法(GCMS)气相色谱气相色谱质谱法质谱法质谱法(质谱法(GCMSMS)气相色谱气相色谱原子发射光谱法(原子发射光谱法(GCAED)液相色谱液相色谱质谱法(质谱法(HPLCMS)第40页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH2.前景展望前景展望(1)生命科学研究对分析化学提出高要求生命科学研究

28、对分析化学提出高要求活体分析,单细胞分析,基因分析,及药品检测活体分析,单细胞分析,基因分析,及药品检测等等(2)环境监测及控制环境监测及控制自动化自动化 智能化智能化 微型化微型化第41页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH四四 怎样学习仪器分析怎样学习仪器分析1.理论与实际相结合理论与实际相结合2.掌握仪器使用、原理、特殊性掌握仪器使用、原理、特殊性第42页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH一、标准曲线一、标准曲线标准曲线是被测物质浓度或含量与仪器响应信号标准曲线是被测物质浓度或含量与仪器响应信号关系曲线。关系曲线。线性范围线性

29、范围 标准曲线直线部分所对应被测物质浓标准曲线直线部分所对应被测物质浓度(或含量)范围。度(或含量)范围。特点:选择分析方法应有较宽线性范围。特点:选择分析方法应有较宽线性范围。第二节第二节 定量分析方法评价指标定量分析方法评价指标第43页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH 标准曲线绘制标准曲线绘制标准曲线是依据标准系列标准曲线是依据标准系列(或含量或含量)和其对应响和其对应响应信号测量值来绘制。应信号测量值来绘制。一元线性回归法一元线性回归法 y=a+bxb 为回归系数即斜率为回归系数即斜率 a 为截距为截距第44页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学

30、院微生物学教研室YJH相关系数相关系数r 在分析化学上,相关系数是用来表征被测物质浓在分析化学上,相关系数是用来表征被测物质浓度(或含量)度(或含量)x与其响应信号值与其响应信号值y之间线性关系好坏程之间线性关系好坏程度一个统计参数。度一个统计参数。当当|r|=1时,时,y与与x之间存在着严格线形关系。之间存在着严格线形关系。|r|越靠近越靠近1,则则y与与x 之间线形关系就越好。之间线形关系就越好。第45页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH二、灵敏度二、灵敏度 物质单位浓度或单位质量改变引发响应信号值改变程物质单位浓度或单位质量改变引发响应信号值改变程度,称为

31、方法灵敏度,用度,称为方法灵敏度,用 S 表示。表示。灵敏度也就是标准曲线斜率,斜率越大,方法灵敏度也就是标准曲线斜率,斜率越大,方法灵敏度就越高。灵敏度就越高。第46页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH三、精密度三、精密度精密度是指使用同一方法,对同一试样进行屡次精密度是指使用同一方法,对同一试样进行屡次测定所得测定结果一致程度。测定所得测定结果一致程度。精密度惯用测定结果得标准偏差精密度惯用测定结果得标准偏差 s 或相对标准偏差或相对标准偏差(sr)量度。)量度。第47页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH四、准确度四、准确度

32、试样含量测定值与试样含量真实值试样含量测定值与试样含量真实值(或标准值或标准值)相符合程度称为准确度。准确度惯用相对误差量度。相符合程度称为准确度。准确度惯用相对误差量度。Er=x 100%五、检出限五、检出限某一方法在给定置信水平上能够检出被测物质某一方法在给定置信水平上能够检出被测物质最小质量,称为这种方法对该物质检出限,以浓度表最小质量,称为这种方法对该物质检出限,以浓度表示称为相对检出限,以质量表示称为绝对检出限。示称为相对检出限,以质量表示称为绝对检出限。第48页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH对于光学分析法,能够与空白信号区分最小信号对于光学分析法

33、,能够与空白信号区分最小信号XL由下式确定:由下式确定:式中:式中:为为 白信号平均值;白信号平均值;sb为空白信号指标偏差;为空白信号指标偏差;k为依据一定置信水平确定系数,为依据一定置信水平确定系数,IUPAC(国际纯粹(国际纯粹与应用化学联合会)提议与应用化学联合会)提议 k 值取值取3。能产生净响应信。能产生净响应信号为号为被测物质浓度或质量就是方法对该物质检出限,用被测物质浓度或质量就是方法对该物质检出限,用 D 表示。表示。第49页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH方法灵敏度越高,精密度越好,检出限就越底。方法灵敏度越高,精密度越好,检出限就越底。检

34、出限是方法灵敏度和精密度综合指标,它是评价检出限是方法灵敏度和精密度综合指标,它是评价仪器性能及分析方法主要技术指标。仪器性能及分析方法主要技术指标。第50页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH13 痕量分析与微量分析痕量分析与微量分析l 20世纪世纪70年代以前,把待测物含量在年代以前,把待测物含量在1ppm以下叫做痕量分析。以下叫做痕量分析。l 20世纪世纪70年代以后,把待测物含量在年代以后,把待测物含量在1ppb以下叫做微量分析。以下叫做微量分析。l 痕量分析是指含量而言,对象是待测物含痕量分析是指含量而言,对象是待测物含量多少。当代分析技术能够到达量多少

35、。当代分析技术能够到达10_12,10_15。10_18(mol/l 或或 g/g),甚至能够测定单个分子,),甚至能够测定单个分子,单个原子,单个细胞。单个原子,单个细胞。第51页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH13 痕量分析与微量分析痕量分析与微量分析l 微量分析是对取样量而言,不是指含量。微量分析是对取样量而言,不是指含量。过去指对固体取样量在过去指对固体取样量在1mg以下;当代分析化以下;当代分析化学要求:固体取样量在学要求:固体取样量在10g以下以下;液体取样量液体取样量在在10l 以下,叫微量分析。以下,叫微量分析。l 但微量分析对待测物含量没有要

36、求。一样但微量分析对待测物含量没有要求。一样是微量分析,含量能够是是微量分析,含量能够是100%,99%,也能,也能够是够是10_6或或10_9级。级。第52页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH13 痕量分析与微量分析痕量分析与微量分析l 如对金属如对金属Cu,一样是微量分析,能够测定,一样是微量分析,能够测定Cu含量,也能含量,也能够测定够测定Cu里杂质。里杂质。l 在当代分析化学中,微量分析取样量愈来愈少,像微量在当代分析化学中,微量分析取样量愈来愈少,像微量分析。在美国,血液分析只允许取一滴血,化验出分析。在美国,血液分析只允许取一滴血,化验出20各种成各

37、种成份,分析时间在份,分析时间在3min左右,现在有些分析取样只取一个细胞,左右,现在有些分析取样只取一个细胞,分析分析10种成份以上,有些分析取样只取一个细胞核。种成份以上,有些分析取样只取一个细胞核。l 取样量只取一个细胞,一个细胞核,对于发展生命科学,取样量只取一个细胞,一个细胞核,对于发展生命科学,生物科学,癌科学十分有意义。生物科学,癌科学十分有意义。第53页生物仪器分析原理与方法第一章 绪论生命科学学院微生物学教研室YJH13 痕量分析与微量分析痕量分析与微量分析l经惯用到质量单位:经惯用到质量单位:l毫克毫克 10_3 gl微克微克 10_6 g l纳克纳克 10_9 gl皮克皮克 10_12 gl飞克飞克 10_15 g l阿克阿克 10_18 g 第54页

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