食品防腐剂研究进展.doc

食品防腐剂的分析研究进展许丽君（重庆科技学院化学与生物工程学院商品质量检测技术2023级）摘要：综述了近几年来国内外有关食品防腐剂的分析研究状况，分析方法涉及高效液相色谱法、气相色普法、分光亮度法、薄层色谱法、荧光光谱分析等。关键词：分析方法，食品防腐剂，综述。中图分类号：文献标示码：防腐剂是食品在物理、生物化学和有害微生物等因素的作用下，会失去其固有的色、香、味、形而腐烂变质，而有害微生物的作用是导致食品腐败变质的重要因素；它也是一类以保护食品原有性质和营养价值为目的的食品添加剂1。目前食品防腐剂的种类很多，重要分为合成和天然防腐剂；常用的合成防腐剂以山梨酸及其盐、苯甲酸及其盐和尼泊金酯类等为代表，它门的特性特点我简朴的介绍一下：（1）山梨酸类有山梨酸、山梨酸钾和山梨酸钙三类品种。山梨酸除不溶于水外，使用时须先将其溶于乙醇或硫酸氢钾中，使用时不方便且有刺激性，故一般不常用；山梨酸钙FAO/WHO规定其使用范围小，所以也不常使用；山梨酸钾则没有它们的缺陷，易溶于水、使用范围广，我们经常可以在一些饮料、果脯、罐头等食品看到它的身影；在这里我重点介绍一下山梨酸钾：它为不饱和六碳酸；一般市场上出售的山梨酸钾呈白色或浅黄色颗粒，含量在98%-102%；无臭味、或微有臭味，易吸潮、易氧化而变褐色，对光、热稳定，相对密度1.363，熔点在270分解，其1%溶液的PH：78。山梨酸钾为酸性防腐剂，具有较高的抗菌性能，克制霉菌的生长繁殖；其重要是通过克制微生物体内的脱氢酶系统，从而达成克制微生物的生长和起防腐作用，对细菌、霉菌、酵母菌均有克制作用；其效果随PH的升高而减弱，PH达成3时抑菌达成顶峰，PH达成6时仍有抑菌能力，但最底浓度（MIC）不能底于0.2%，实验证明PH：3.2比PH2.4的山梨酸钾溶液浸渍，未经杀菌解决的食品的保存期短24倍。山梨酸、山梨酸钾和山梨酸钙它们三种的作用机理相同，毒性比苯甲酸类和尼泊金酯要小，日允许量为25mg/Kg，苯甲酸5倍，尼泊金酯的2.5倍是一种相对安全的食品防腐剂；在我国可用于酱油、醋、面酱类、果酱类、酱菜类、罐头类和一些酒类等等食品。（2）苯甲酸类有苯甲酸和苯甲酸钠二类；苯甲酸又称为安息香酸，故苯甲酸钠又称安息香酸钠。苯甲酸在常温下难溶于水，在空气（特别是热空气）中微挥发，有吸湿性，大约常温下0.34g/100ml；但溶于热水；也溶于乙醇、氯仿和非挥发性油。而苯甲酸钠在都使用苯甲酸钠；苯甲酸和苯甲酸钠的性状和防腐性能都差不多。我简朴介绍一下苯甲酸钠：苯甲酸钠大多为白色颗粒，无臭或微带安息香气味，味微甜，有收敛性；易溶于水（常温）53.0g/100ml左右，PH在8左右；苯甲酸钠也是酸性防腐剂，在碱性介质中无杀菌、抑菌作用；其防腐最佳PH是2.5-4.0，在PH5.0时5%的溶液杀菌效果也不是很好。苯甲酸钠亲油性较大，易穿透细胞膜进入细胞体内，干扰细胞膜的通透性，克制细胞膜对氨基酸的吸取；进入细胞体内电离酸化细胞内的碱储，并克制细胞的呼吸酶系的活性，阻止乙酰辅酶A缩合反映，从而起到食品防腐的目的。苯甲酸类在我国可以使用在面酱类、果酱类、酱菜类、罐头类和一些酒类等食品中，现在国家明确规定苯甲酸类不能使用在果冻类食品中；苯甲酸类毒性较大，国家限制了苯甲酸及其盐的使用范围，许多国家已用山梨酸钾取代。（3）尼泊金酯类（即对羟基苯甲酸酯类）有对羟基苯甲酸甲脂、对羟基苯甲酸乙脂、对羟基苯甲酸丙脂、对羟基苯甲酸丁脂等;其中对羟基苯甲酸丁脂防腐作用最佳，我国重要使用对羟基苯甲酸乙脂和丙脂，在日本使用最多的是对羟基苯甲酸丁脂。尼泊金酯类最大的特点是系列产品多，抑菌谱广；防腐机理是破坏微生物的细胞膜，使细胞内的蛋白质变性，并能克制细胞的呼吸酶系和电子传递酶系的活性。尼泊金酯的抗菌活性成分重要是分子态起作用，由于起分子内的羟基已被脂化，不在电离，而对位的酚基的电离常数很小，在溶液PH为8时，仍有60%以上呈分子状态存在，因此尼泊金酯类的抑菌作用在PH48较宽的范围内均有良好的效果。由于尼泊金酯类都难溶于水，所以通常是它们先溶于氢氧化钠、乙酸、乙醇中，然后使用。为更好发挥防腐作用，最佳是将两种或两种以上的该脂类混合使用。对羟基苯甲酸乙脂一般用于酱油和醋中，而对羟基苯甲酸丙脂一般使用在一些水果饮料和果蔬保鲜。使用时可以添加、浸渍、涂布、喷雾使用，将其涂于表面或使其吸附在内部。有无芽孢子和孢子等情况对防腐剂的防腐效果都有很大的影响。在使用等量的防腐剂条件下，食品污染越严重，原始菌数越多，防腐效果越差。相关资料显示从微生物的增殖过程来看，开始是缓慢的诱导期，过了诱导期，就急聚进入对数期，增殖非常旺盛。由于食品添加剂的作用和用量世界各国都有限制，它通常只是克制微生物，延长微生物增殖过程中的诱导期。因此防腐剂的使用为食品防腐提供了有效、简便、经济的方法。因此对食品中防腐剂的测定有重要意义。测定防腐剂的方法很多，如高效液相色谱法、气相色普法、分光亮度法、薄层色谱法、两点电位滴定法直接测定法等，本文对食品中防腐剂的常用测定方法进行了评述。1高效液相色谱法1.1LHJ增溶剂法邢沛然等2用LHJ增溶剂溶解样品测定山梨酸含量为027g/kg，而用水溶解样品其含量仅008ug/ml，提高三倍。也就是说用水作溶剂不能将果冻中的山梨酸和苯甲酸完全溶解在水溶液中，其测定结果与真值相差甚远。样品精密度实验山梨酸为59，苯甲酸为20。该方法山梨酸和苯甲酸回收率分别为967、907；最低检出限浓度为0.00015mg/ml。以上各项指标均符合分析化学规定，并且用LHJ增溶剂能将液相色谱仪管道柱子粘浮的有机物或无机物溶解，缩短了冲洗柱子的时间。许辉等3采用三氯甲烷从样品中直接一次提取山梨酸再以碳酸氢钠一次反萃取净化，在254nm处直接测定样品吸亮度并与标准进行比较定量可快速得到测定结果，此法具有操作简朴、快速、测定精密度高等特点。合用于水果汁、果酱、罐头、软饮料等食品中山梨酸及其钾盐的快速测定。1.2双检测器HPLC甜密索、苯甲酸、塘精和山梨酸是食品分析中的常规项目4。祁广建，沈国英等5采用双检测器HPLC同时测定甜密素，苯甲酸，糖精和山梨酸四种物质含量。本法具有操作简便，用洋量少分析周期短。其最小值的浓度分别为：甜密素25ugml，苯甲酸2ug/ml，糖精和山梨酸各为1ugml可满足食品卫生监督检测的需要。李秀婷6建立HPLC测定糖浆剂、舍剂中防腐剂(苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸乙酯)的方法。方法在酸性条件下，用乙醚提取糖浆剂、合剂中的防腐剂，提取液浓缩后采用液相色谱法进行测定。结果线性关系良好，分别为r=09999、r=09998、r=09996；平均回收率分别为981、954%、970%；RSD分别为：1.14%、2.31%、1.76%。结论测定方法简朴，专属性强，结果准确，重现性良好。1.3高效液相色谱分离法山梨酸，苯甲酸广泛地用作各种食品的防腐剂，使用量一般在052gkg。单独测定食品中的山梨酸、苯甲酸有多种方法7，但操作繁琐，分析时间长。许多文献报道了山梨酸、苯甲酸的气相色谱测定方法及苯甲酸、山梨酸的液相色谱测定方法，但因山梨酸、苯甲酸的极性较强，色谱峰易产生拖尾现象，且分离效果也受到影响。为此，周毅刚等8将样品用乙醚一石油醚萃取，在60水浴上蒸馏除去乙醚一石油醚，再在酸性介质中酯化，用高效液相色谱分离与测定。刘庆峰、张坤梅等9根据实际工作的需要，探讨高效液相色谱法同时测定食品中山梨酸钾、尼泊金乙酯和尼泊金丙酯的方法。张莉,张英宣10测定糕点类食品中的防腐剂、甜味剂。孙燕、张红宇11采用高效液相色谱法测定酱油中苯甲酸含量时运用两种前解决方法提取测定。结果表白直接稀释进样回收率为9881035，乙醚提取回收率为954984，两种方法相对偏差小于1O。虽有一定差异，但均符合检查规定。黄方取12采用乙酸铅、草酸钾一磷酸氢二钾沉淀体系预解决样品，建立了同时测定复杂样品中4种添加剂的方法，获得满意的结果。黎其万等13使用乙腈水混合溶剂萃取苯甲酸、山梨酸和糖精钠，用正己烷去酯，再结合固相萃取(SPEC18)新技术，建立了一种操作简朴，准确可靠的高油样品的解决方法。刘渭萍等14将酱油、醋样品定量稀释后，用针筒式水膜过滤器解决后，直接进样，进行液相色谱定量分析。用此方法进行了不同水平的加标回收率测试，证明方法快捷可靠，非常合用于大量样品的快速测定。顾蕴华等15研究将苯甲酸、山梨酸、咖啡因、糖精钠四种食品添加剂一次进样同时分析，节省了分析时间，省去了配制多种流动相的不便，同时提高了工作效率，通过对多种类型软饮料的测定，得到了令人满意的实验效果。张鹏、郑卫东等16研究采用高效液相色谱法同时测定面粉中过氧化苯甲酰和苯甲酸含量，直接用甲醇超声波提取面粉中过氧化苯甲酰和苯甲酸，过滤后即可直接进样同时分析，方法简便快速。戴维杰等17应用高效液相色谱法分离测定饮料、冷髓、蜜饯、糕点、酱菜等样品中糖精钠、苯甲酸钠、山梨酸钾3种添加剂的用量，这种方法具有分析速度快，分离效率高，测定结果准确等优点。林小葵18建立高效液相色谱同时测定酱油、醋、饮料中苯甲酸，山梨酸，对羟基苯甲酸酯类(乙酯和丙酯)的方法可供同行参考。用液相色谱法测定酱油、饮料、醋中苯甲酸，山梨酸，对羟基苯甲酸酯类等常用防腐剂，样品解决过程简朴，分析方法的灵敏度高，精密度及回收率均可满足实际工作的规定，应用于酱油、醋、饮料等产品的卫生质量监测，效果满意。2气相色普法2.1毛细柱气相色谱法国际GBT500929一l996规定测定饮料中防腐剂山梨酸、苯甲酸采用的第一法气相色谱法中使用的色谱柱是玻璃柱，但在实际工作中采用这种柱子进行分析检测时，色谱柱流失较大，并且溶剂峰拖尾也较严重，使得溶剂峰与山梨酸峰分离效果不好，从而导致最终定量结果不抱负。高晓杉等19提出用OVl701毛细柱检测饮料中山梨酸、苯甲酸使得溶剂峰与山梨酸、苯甲酸峰可以彻底分开，不仅分离效果好，分析速度也快，并且重现性也好，灵敏度高，定量也准确。本法山梨酸、苯甲酸测定的检出限为01mgkg，相对标准偏差小于3，样品加标回收率为8999。肖力,李关兵20用高效毛细管电泳法测定酱油中山梨酸的含量。殷德荣21研究的毛细管气相色谱法同时测定食品中山梨酸、苯甲酸、脱氢乙酸、尼泊金丙酯具有操作简便、分离效果好、检出限低、精密度高、结果准确的特点，能用于果汁、果酱、饮料、酱油、醋、酸奶等食品中防腐剂的测定。苯甲酸和山梨酸是常用于酱油中的食品添加剂，具有克制或杀灭微生物的作用，我国食品卫生标准严格规定了苯甲酸和山梨酸的使用限量。目前测定食品中苯甲酸和山梨酸普遍使用的国标法是填充柱气相色谱法22，也有采用内标法测定苯甲酸和山梨酸的报道，这些方法都是采用低极性低沸点的乙醚一石油醚混合液作为溶解萃取物残渣和配制标准溶液的溶剂。也有文献报道了使用毛细管柱气相色谱法测定食品中山梨酸和苯甲酸。由于毛细管色谱柱管径小，为避免过载，一般都要进行分流。而分梳后大部分被测物流失，大大减少了方法的灵敏度。而王文芳、董春洲23采用的FFAP石英毛细管柱，无水乙醇作溶解提取物溶剂，采用先不分流后分流的进样模式，既避免了被测物的大量流失，也避免了色谱柱过载。经对溶剂进行优化，改用极性较大沸点较高的乙醇作为溶解萃取物残渣和配制标准溶液的溶剂。不仅使方法的灵敏度高，准确性好，也大大提高了方法的精密度。样品平行测定的相对标准偏差均875。该方法可合用于酱油中苯甲酸和山梨酸的测定。赵笑虹等24采用毛细管气相色谱外标法测定酱油中防腐剂苯甲酸和山梨酸，样品回收率均在974-1031之间，标准线性关系良好，样品测定的相对标准偏差小，本方法具有简便、快速、准确的特点。本实验还表白，采用气相色谱外标法在产品监测方面，准确度、精密度、回收率、线性范围均能满足实际需要，并且与内标法相比，缩短了分析时间，是一种快速、灵敏、分离效果好，定量准确的定量分析方法。食品防腐剂具有杀灭或克制微生物增殖的作用而被广泛应用在各类食品、饮料中。在食品中添加适量的防腐剂虽然可防止变质，延长食品的保质期，但过量食用对人体有一定毒性。运用气相色谱法测定食品中脱氢乙酸、丙酸、苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸酯类(尼泊金酯)已有报道，但方法大多采用水蒸气蒸馏或低沸点溶剂提取，外标法定量其中的单一组分，并且操作繁琐费时费溶剂。目前尚未见到一次性同时简便、快速、准确测定食品中8种防腐剂的文献报道。鲍忠定等25探讨了用毛细管气相色谱内标法一次性同时测定8种防腐剂的可行性，结果令人满意。迪丽努尔马立克等26用毛细管气相色谱法实现了液状食品中4种防腐剂(对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯)的分离测定，以甲醇作为萃取剂和溶剂，采用毛细管气相色谱法分析食品中的对羟基苯甲酸酯类防腐剂，采用程穿升温条件可在4min之内实现快速分离和测定。其中测得各组分回收率为91.15107.7，检出限为0.5pgmL，线性范围为0.2ugmL80ugmL线性相关系数大于0.999。分离效率高，抗干扰能力强且定量较准确，是检测这几种防腐剂的一种较为抱负的方法。胡美珍等27采用毛细管电泳一紫外检测法，考察了波长，电压，缓冲试剂、浓度、pH对山梨酸、苯甲酸、糖精分离的影响，得到了优化的实验条件以硼砂20mmolL(pH=75)为运营缓冲溶液，20kV为分离电压，检测波长为230nm的电泳条件下，进样时间为10s，山梨酸、苯甲酸、糖精可在12min内实现分离山梨酸在5mgL一50mgL，苯甲酸在5mgL一50mgL，糖精在15mgL一150mgL范围内呈良好线性关系，迁移速度、峰面积相对标准偏差均小于45，(n=5)用上述方法对实际样品进行测定，回收率在95以上，方法简朴、快速，相对于其他分析方法，具有预解决简便，检测成本低等特点由此可见，毛细管电泳法在食品分析领域有良好的应用前景。2.2气相色谱法为准确测定食品中所台防腐剂是否超标，李树茂28采用气相色谱法检测食品中防腐剂含量即用附氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行分离测定，得出防腐剂的峰高，再与标准曲线比较定量，结果准确可靠。此方法与其他常用方法如滴定法、紫外光分析法、薄层色谱法等比较，尽管存在设备投入成本高和违规操作易燃易爆的隐患，但此设备使用范围广，使用寿命长，使用效率高而足以消除设备投入成本高的问题，并且通过严格操作规则完全能消除易燃易爆的隐患。更重要的是由于采用了计算机等自动化解决仪器，使它比其他常用方法更简便、更灵敏、更精确刘敏红等29将样品酸化后用乙醚提取山梨酸、苯甲酸，用带有氢火焰离于检测器的气相色谱仪进行分离测定保存时间定性培高定量。徐春祥30采用气相色谱法测定食品中的苯甲酸、山梨酸，通过对样品前解决过程的改善，以达成快速、准确地测定其含量的目的。气相色谱法测定饮料中的苯甲酸31具有出峰侠，蜂形对称无拖尾，灵敏度高，定量准确之特点。张艾华、张丽萍32测定食品中苯甲酸，灵敏度较高，选择性好，试剂和样品用量少，精密度和准确度均较高，有推广价值。应用气相色谱法测定食品中的苯甲酸。其测定值的变异系数在3367之间，加标回收率为806ll5O之间，最小检出量为10Fg。本法灵敏度较高、选择性好、分析速度较快。庞楠楠，迪丽努尔马力克等33建立了一种分离测定食品中6种常见防腐剂(山梨酸，苯甲酸，对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯)的简朴、准确的快速气相色谱方法，采用长10m，内径100an的HP一5熔融石英毛细管柱，在快速程序升温条件下，6种常见防腐剂的分析时间为13rnin。各组分平均回收率(n=3)为9645；检出限为12l0gmL；线性相关系数大于0994。该方法已用于实际食品中防腐剂的检测。在色谱分离中34，假如该组分的疏水性与环糊精空腔相近，且它们空间相匹配，客体组分就能紧密地嵌入环糊精空腔，产生较大的束缚力，相称于环糊精固有极性增强，故使组分分离效果好。可见，以p一环糊精聚台物作固定相，分离分析具有苯环的防腐剂，可以发挥独特的作用。由于干扰物质的存在及该方法技术条件的缺陷，导致检查结果不准确，有时原样品中主线没有添加苯甲酸及其钠盐，检测结果却检出强阳性。刘士江,刘建生35介绍了一种气相色谱法测定肉制品中山梨酸、苯甲酸的方法，对现行国标法的相关色谱条件进行了改善。改善方法分析结果准确，分析时间短，能将山梨酸、苯甲酸杂质完毕分离。2.3气相色谱内标法陈希中36在不改变国标中规定色谱条件下经大量实验筛选，用正癸酸作为内标物以内标法同时定量测定山梨酸和苯甲酸，标准回收率均在96103之间，样品测定的变异系数小，山梨酸为0529%，苯甲酸为0311%。方法简便可靠，减少因萃取、进样、溶剂损失等带来的误差。3色普法3.1纸色谱法快速分离液相色谱法在测定食品中苯甲酸钠或山梨酸钾时，经常要将它们与其它组分进行分离，目前对苯甲酸钠和山梨酸钾进行分离的方法重要有蒸馏法、萃取分离法和液相色谱法37-39。液相色谱法的分离效果虽较好，却必须要有液相色谱的分离设备，或填装色谱柱；蒸馏法和萃取分离方法不需要设备，但手续较为繁琐，并且分离效果稍差些。对一些含油脂较高的食品(如月饼、糕点等)，单用萃取法进行萃取分离时，萃取液中将具有大量的油脂，易污染色谱柱，不宜直接用于高效液相色谱进行测试。这类食品必须用蒸馏法分离或先用蒸馏法分离脂肪再用萃取法进行萃取浓缩。因此，杨达生、丘慧澄40根据混合物的各成分性质和结构上的不同，在滤纸上固定相和流动相间产生的吸附作用不同，这种物理化学现象的差异，用纸色谱法对食品中苯甲酸(钠)和山梨酸(钾)进行了测定。3.2薄层色谱分离样品经盐酸酸化后，用乙醚提取其中的苯甲酸、山梨酸。杨国光41将样品提取液浓缩、薄层色谱分离、展开后与标准比较，根据薄层板t苯甲酸、山梨酸的比移值进行定性和概略定量测定。经长期工作实践验证本方法灵敏度较高，重现性好，成本低，实验过程简便易操作适合于食醋中苯甲酸、山梨酸的测定。对羟基苯甲酸酯类是重要的防腐剂。广泛应用于食品、医药、调味品等朱玉、李永红42在总结前人工作的基础上以普通的硅胶60GF254为固定相苯：乙酸乙酯：冰醋酸(24：5：0.3)作展开剂采用薄层色谱法成功地将对羟基革甲酸甲酯(I)乙酯(I)、丙酯(I)丁酯()合成产物中未反映的酸与其酯分开并测定了各合成产物中酯的产率方法简朴、快速4液相色普法4.1液相色谱检测法液相色谱检测方法43在IDF139：1987的基础上，乳制品中的山梨酸、苯甲酸从偏碱性的样品水体系中通过沉淀的方法去除脂肪和蛋白质后，先用甲醇稀释，然后过滤。采用液相色谱方法，在反相色谱柱和紫外检测器于227nm处进行分离测定。与气相色普法相比，两者解决方法难易限度相称，相同水平的标准溶液添加回收，气相色谱法的回收率偏低；液相色谱法所用的紫外检测器灵敏度比气相色谱所用的FID检测器灵敏度高，可进行更低含量的检测；液相色谱在完全相同的样品环节和仪器条件下，可以同时完毕糖精钠项目的检测。仲岳桐44对方法进行改善，运用碱性溶液浸泡样品，用亚铁氰化钾和乙酸锌对油脂成分进行沉淀，最后过滤样品液后可以直接在液相色谱仪上进行测定，大大简化前解决环节，检测结果的精密度、准确度等都符合全国卫生防疫工作规范的规定，并且在前解决过程中完全避免了有机试剂的使用，对于工作人员的安全保护也有积极作用，可以在各类食品检测实验室中得到广泛的应用。刘青等45采用液相色谱方法，测定中药合剂、糖浆剂中苯甲酸、山梨酸和对羟基苯甲酸酯类防腐剂的含量，方法操作简便，稳定性好，精密度及回收率均可满足实际工作的规定，可以作为中药平常生产流程中质量控制的重要依据。4.2反相液相色谱方法赵榕等46建立同时测定抗氧化剂、防腐剂和甜味剂的反相液相色谱方法，以50mmolL磷酸二氢钾溶液作为流动相，采用梯度洗脱。结果：可在30min内将I1种组分完全分离并且测定。方法的线性范围：甜味剂0.5150ug/ml(r=0999709999)；防腐剂和抗氧化剂10300ug/ml(r=0.99960.9999)，回收率：780一1067，相对标准偏差为2.2一12.7，定性检出限：0.040.18mgkg，定量检出限：0.130.60mgkg。5离子色谱法苯甲酸、山黎酸等是最普遍的防腐剂。对它们的测定相称方便，也有很多方法而尼泊金系列的防腐剂如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯对羟基甲酸丁酯，虽然应用的范围没有苯甲酸、山梨酸那么广泛，但是在某些地方，它们却是不可替代的。因此，准确地测定它们的含量也是我们要解决的问题。由于离子色谱十分简朴、方便。蒋银土、朱岩等47故采用离子色谱紫外检测法进行测定并用于实际样品分析。6分光亮度法6.1紫外分光亮度法食品防腐剂苯甲酸的测定，通常采用乙醚提取碱滴定法和水蒸气蒸馏紫外分光亮度法测定，这两种方法测定程序复杂且周期长，回收率也较低。而葛会奇48在前人工作的基础上采用乙醚萃取紫外分光亮度法测定。样品分析结果表白：该方法简便准确、快速可行。经样品解决检查，该方法最小检出限为00010mgml回收率达98，测定全过程在1小时左右即可完毕，可见，紫外分光亮度法比较简便、准确、快速。苯甲酸和山梨酸均为共轭型有机化合物。在近紫外光区具有较强的吸取。高效液相色谱法显示。并通过实测证实。苯甲酸在230nm、山梨酸在263nm处具有最大吸取。另一方面。苯甲酸和山梨酸在水中具有适当的溶解度。苯甲酸在10时溶解度为021g100ml水，在20时为028g100ml水；山梨酸在20时溶解度为021g100ml水。在30时为025g100ml水。因此可将标样和样品解决成水溶液。采用紫外分光亮度计49。通过标准曲线法而实现酸性食品中苯甲酸(钠)和山梨酸(钾)含量的联合测定；该方法具有简便、快速的特点，可作为公司自控和商品检测的参考方法。李永飞，许敏燕等50研究了尼泊金复合酯作为防腐剂在酱油中的应用，结果表白在酱油中尼泊金复合酯的含量达成150ppm就能起到有效的抑茵作用，并且其浓度并不随时间的延长而减少。王淑军等51用分光亮度法和滤纸图片法研究7种尼泊金丁醋对四种细菌、四种酵母菌和两种霉菌的克制作用。结果表白，尼泊金丁醋对食品中常见污染菌有明显的克制作用，其中对酵母、霉菌的克制作用较强，而对细菌特别是芽抱轩菌克制作用较弱，其抑菌的MIC为0.01，该防腐剂热稳定性较好，12030min解决仍有良好的抑菌效果。石艳静，郑丽云52在应用GBT5009292023食品中山梨酸、苯甲酸的测定方法进行样品测定期，发现该方法的前解决繁琐且提取中易损失待测成分。为此，她们于2023年3月对该方法进行了改善，及用紫外分亮度法测保健食品中谷胱甘肽标准曲线呈良好的线性关系r=0999109994。选取三种样品平行测定7次，相对标准偏差都小于5。高、中、低三种浓度的加标回收率为98.2%1040。通过实验认为样品提取时间定为10min较为合适。方法操作简朴、快速、灵敏、准确。6.2荧光光谱分析芳香族化合物具有共轭的不饱和结构，能发生丌一丌*能级跃迁，其荧光强度较大这种体系中的丌电子共轭度越大，则丌电子非定域性越大，越易被激发，荧光也就越易发生，并且荧光光谱将向长波移动以激发光作为光源提供能量，使被测物基态分子获得能量后跃迁到激发态，从激发态的最低振动能层回到基态时，便产生荧光，通过荧光分析仪可以直接测出其荧光发射强度所以可以用直接测量法来测量苯甲酸的荧光发射强度，从而计算出试样中苯甲酸的含量。对苯甲酸含量的荧光光谱分析53探索最佳的测试条件，尽也许消除外界环境对实验结果的影响，该方法的最佳测试条件(激发波长225nm、发射波长310nm、溶液的pH值23)此法操作简便、准确、灵敏度高苯甲酸的回收率为99381023胡艾希等54将防腐剂(1)在醋酸铵一醋酸缓冲溶液中，释放的甲醛与乙酰丙酮反映生成二氢吡啶衍生物(2)；(2)在410nm有特性吸取，在510nm显荧旋光性。通过测定二氢吡啶衍生物的荧光强度可计算防腐剂(1)的含量。6.3神经网络一亮度法山梨酸和苯甲酸都是我国食品中最常用的防腐剂，而糖精钠是常用的甜昧剂。由于它们对人体均无任何营养价值，且过量食用对健康有害，卫生部门对它们的用量均有严格的规定。对于它们中的两者(侧苯甲酸和糖精钠或其它组合)进行测定，目前重要采用薄层色谱法，紫外可见分光亮度法和高效液相色谱法。由于三者在同一紫外区均有较强的吸取，且在同一食品中往往同时具有这三种组分，单独测定其中两种将难免引起测量误差。李东华,倪永年55通过对三者在紫外区吸取光谱性质的研究，不经分离，建立了它们的紫外分光亮度法的同时测定。在数据的解决上，采用径向人工神经网络对所得光谱数据进行解决苯甲酸、山梨酸和糖精钠的平均标准偏差分别为1.60、523和121。回收率大为95.0102O之间。结果表白，该方法具有灵敏度和准确度高，操作简朴等特点。将其应用于实际样的分析，在酸性条件下用乙醚作萃取剂对食品饮料中的三组分物质进行分离，消除食品饮料中常见组分对测定的干扰，获得了较为满意的结果。6.4卡尔曼滤波紫外亮度法卡尔曼滤波法是广泛采用的多元校正算法56-58；刘绍干等59曾用乙醚萃取多波长线性回归法同时测定酱油、食醋中的山梨酸和苯甲酸毛金武等60用乙酸乙酯作萃取剂、对比值导数波谱法进行了研究，由于该两法使用过多的乘法及除法计算，使得只含单一持测物时的误差增大。屈元雨等61拟用乙酸乙酯作萃取剂，Na2HPO4溶液为反萃取剂；用卡尔曼滤波法同时测定酱油、食酷中的山梨酸、苯甲酸，并与多波长线性回归法和比值导数波谱法进行了比较。结果表白，该法在两持测物浓度相差较大时有较高的准确度；且又能同时监测干扰物质的存在与否。6.5导数荧光法李永红等62研究了导数荧光光谱法同时测定对氨基苯甲酸反对氨基苯甲酸甲酯的新方法在乙醇厦正己烷的介质中，对氨基苯甲酸和对氨基苯甲酸甲酯的激发光谱与荧光光谱互相重叠，但在两者的一阶导数荧光光谱中，运用“零点交叉剥量法”(Zero-crossingmeasurement)可以同时测定对氨基苯甲酸和对氨基苯甲酸甲酯本文对各种测定条件进行了优选，方法快速、简便，不需要分离，可用于食品防腐剂中对氨基苯甲酸厦对氨基苯甲酸甲酯的同时测定。山梨酸常用作食品防腐剂，它毒性极大，国家规定汽水、汽酒中山梨酸的含量应低于0.2gks，酱油等调味品中应低于1.0gkg，浓缩果汁中应低于2.0kg，通常标准为0.21.0gkg63。山梨酸常用乙醚提取后进行测定，但不能与其它食品添加剂如苯甲酸、糖精钠等有效分离，因此，国家标准分析方法为薄层色谱法和气相色谱法64-66；而唐果东、宋远志67采用的导数光谱法刺定食品中的山梨酸，在265.8nm波长下测定样品，一阶导数峰峰高与样品溶液的浓度线性相关，该法快速、简便、可靠。7萃取法固相微萃取(SPME)是90年代发展起来的一种无溶剂、快速、简便、灵敏的新型样品前解决方法;萃取装置使用涂有色谱固定相或吸附剂的熔融石英丝，外套不锈钢管加以保护，形状象一支色谱进样器可方便地与气相色谱一质谱、液相色谱等联用,目前，这种方法被广泛的应用在环境、化学、生物等许多领域，有关SPME国内外已有很多报道。固相微萃取纤维多采用涂层型熔融石英丝,这种萃取头虽得到了广泛的应用，但也存在一定的局限性之处，如涂层技术复杂、耐热性差、自支持力不强、易损坏寿命短、吸附量有限等使其在应用上受到了限制,在应用体型纤维固相微萃取方法对苯、氯仿等进行研究分析的基础上，贾金平、冯雪等68运用自制活性炭纤维体型固相微萃取器对酱油中苯甲酸的测定方法进行了改善，简化了实验环节，提高了准确度。反复性和回收率实验表白仪器性能稳定，方法可靠度高。话性炭体型纤维也填补了传统沫层型吸附量小，制作工艺规定高的局限性。8波长K系数法苯甲酸、山梨酸是食品中常用的防腐剂，均有较大毒性。国家规定食品中山梨酸、苯甲酸含量的通常标准为0210gkg。国家卫生标准分析法常采用薄层色谱法、气相色谱法测定。唐果东等69采用双波长K系数法同时测定食品中苯甲酸和山梨酸，样品不需分离，当K系数拟定后，仅需将试液在两个波长处测得的A值代人相应的算式，求得A，代人线性回归方程，即可求得待测物质的浓度。这种测定方法可以在普通的紫外一可见分光亮度计上进行测定，有很大的实际应用价值。采用双波长K系数法同时测定食品中山梨酸和苯甲酸。山梨酸和苯甲酸的线性范围分别为O10mgL、O4OmgL样品测定的精密度分别为13%37%和14%44%；样品加标回收率分别为96.3%98.7%和96.0%102.2%。本法快速、简便、可靠。9单扫示波极谱法山梨酸(SA)是广泛使用的食品防腐剂。已往测定有眦法、比色法、cc法及HPLC法等。而张文德、赵纳鹏70研究发现在02molLNH4ACHAC(pH=57)底液中，SA与联氨反映生成酰肼产物并在电位(Ep)=126V(wSCE)处产生灵敏的还原波，其波高与SA浓度在一定范围内成正比。据此建立了单扫示波极谱法测定食品中SA的简便分析方法。极谱波及反映机理在本实验最佳条件下，单纯联氨或SA均不起波。当引入联氨后，SA迅速与联氨反映并在Ep=126V处产生一个灵敏的还原波。光谱扫描也证实该反映产物在最大波长265nm处有一个新的吸取峰，极大吸取波长较SA(波长255nm)红移10nm，吸亮度也增长1倍。阳离子、阴离子和非离子表面活性剂均使极谱波下降或消失，说明该波具有吸附性特性。经对极谱波行为和特性初步分析认为，该峰电流的产生是SA与联氨反映生成酰肼产物所致。10两点电位滴定法直接测定法71两点电位滴定法是一种简便、快速而准确测定苯甲酸钠的新方法。与其他方法相比，仪器价格低廉，操作简便，无污染，对人体无损害。两点电位滴定法可代替药典法用于苯甲酸钠含量的常规测定。对于极弱酸碱，计量点前滴定曲线较平坦，难以满足在较小滴定体积变化时，ApH变化03以上。因此，可在计量点后测定两点。实验证明，在pH25之后记录第一测量点(约计量点后10左右)，使pH变化03以上记录第二测量点，能获得满意的结果。美国药典、英国药典采用高氯酸非水滴定法测定苯甲酸钠的含量，经实验比较，两点法与高氯酸非水滴定法测定结果基本一致。两点法是一种测量pKl在l0左右的极弱碱的通用方法，值得推广。10展望综述以上各种检测方法，气相色谱虽然是一门很成熟的分析化学方法，但是对它的研究尚有待进一步进一步，从我援引的几十篇应用性论文看，在使用上是有参考意义的，但是有不少在水平上尚有提高的空间。这其中所用仪器设备比较便宜的是分光亮度计，而人工神经网络在食品分析行业也逐渐发展起来，人工神经网络在分析方法的条件优化、非线性校准、各种重叠峰的分离与解析、待测组分浓度预测等优点，运用人工神经网络分光亮度法对防腐剂进行分析也有很大的发展空间。期待一种更为简便快速、准确可靠、宜于向大众推广普及的检测方法，特别如对于偏远地区的群众(非专业人员)如何定性、定量检测食品中防腐剂的方法。参考文献：1何唯平,刘梅森.食品防腐剂概念.中国食品添加剂,2023,3740.2邢沛然，高学英，苗现林，韩永红，邓子波.LHJ增溶剂用于测定果冻中山梨酸，苯甲酸的研究一高效液相色谱法.检查杂志,2023,l4(6):713714.3许辉，米拉，潘国卿，武挨厚，赵志宏.食品防腐剂山梨酸的快速测定法.分析检测.4卫生部食品卫生监督检查所.食品卫生标准使用手册(食品卫生标准分册)第1辑1996:226,CB276086.5祁广建，沈国英，王毅，刘鹏春，张国祥，薄开宝.双检测器HPLC同时测定食品中甜密素、苯甲酸、糖精和山梨酸的含量.中国卫生检查杂志,2023,12(1):8283.6李秀婷.HPLC法测定糖浆剂、合剂中的防腐剂.海峡药学,2023,16(4):6869.7卫生部颁发.食品卫生检查方法(理化部分)技术标准出版牡1979:8084.8周毅刚,龙苏,王晓春,徐绍锐.高效液相色谱测定食品中苯甲酸、山梨酸含量.JommalofChinesePhysician,2023,3(3):1841869刘庆峰,张坤梅,钟碧罐,廖辉梅.高效液相色谱同时测定食品中山梨酸钾、尼泊金乙酯和尼泊金丙酯方法的研究.食品研究与开发,2023,22(4):2526.10张莉,张英宣.高效液相色谱法测定糕点类食品中的防腐剂、甜味剂.石河子大学学报,2023,22(3).11孙燕,张红宇.高效液相色谱法测定酱油中苯甲酸含量的两种前解决方法比较.中国调味品,2023,(7):5153.12黄方取.高效液相色谱法测定食品中的苯甲酸、山梨酸、糖精钠、安塞蜜.中国卫生检查杂志,2023,15(4):428.13黎其万,刘宏程,杨恺,周世萍等.高效液相色谱法测定油浸酱菜中的苯甲酸、山梨酸和糖精钠.食品与发酵工业,202314刘渭萍,李明,孙蕊.高效液相色谱法快速测定酱油、醋中的苯甲酸和山梨酸.辽宁化工,2023,33(7):421423.15顾蕴华,卢忠魁,卢刚.高效液相色谱法同时测定苯甲酸、山梨酸、咖啡因、糖精钠.中国饮食卫生与健康,2023,2(6):6869.16张鹏，郑卫东,马骏勇,孙成均.高效液相色谱法同时测定面粉中的过氧化苯甲酰和苯甲酸.现代防止医学,2023,32(8):975976.17戴维杰，钮伟民，陈瑛，诸晓岚.高效液相色谱同时测定食品中糖精钠、苯甲酸钠和山梨酸钾的含量.冷饮与速冻食品工业,2023,7(1):2526.18林小葵.饮料等食品中常用防腐剂的高效液相色谱测定法.防止医学情报杂志志,2023,21(2):248249.19高晓杉，李淑兰毛细柱气相色谱法测定饮料中的山梨酸、苯甲酸J饮料工业，2023，7(2)：4620肖力,李关兵.高效毛细管电泳法测定酱油中山梨酸的含量.分析测试学报,1997,16(3):7982.21殷德荣.毛细管气相色谱法同时测定食品中多种防腐剂.实用防止医学,2023,12(1):168.22GBT5009291996食品中山梨酸、苯甲酸的测定方法s23王文芳,董春洲.毛细管柱气相色谱法测定酱油中山梨酸和苯甲酸.公共卫生与防止医学,2023,16(1):4748.24赵笑虹,李秋荣,刘浩.酱油中防腐剂山梨酸和苯甲酸的气相色谱快速分析方法.化工中间体,2023,1(2):1820.25鲍忠定,许佳飞,许荣年,顾秀英.毛细管气相色谱内标法同时测定食品中8种防腐剂.分析化学,2023,32(2):270.26迪丽努尔马立克,龙萍,李琛琛,刘虎威.用气相色谱法测定液状食品中四种对羟基苯甲酸酯类防腐剂.新疆师范大学学报,2023,23(3):5153.27胡美珍，王文铮，张燕琴.毛细管电泳法分离测定食品中山梨酸、苯甲酸、糖精.上海师范大学学报,2023,33(3):6366.28李树茂.浅谈气相