花身副丽鱼性腺发育组织学观察与初步分析.pdf

引文格式：金方彭,左鹏翔,赵静霞,等.花身副丽鱼性腺发育组织学观察与初步分析J.云南农业大学学报(自然科学),2024,39(2):7075.DOI:10.12101/j.issn.1004-390X(n).202309019花身副丽鱼性腺发育组织学观察与初步分析*金方彭，左鹏翔，赵静霞，吴俊颉*(云南省渔业科学研究院，云南昆明650111)摘要:【目的】掌握花身副丽鱼(Cichlasoma managuense)的性腺分化和发育规律，系统描述其各期精巢和卵巢的形态结构、特征及变化。【方法】利用石蜡切片对花身副丽鱼性腺发育的结构和时相进行研究。【结果】花身副丽鱼的精巢和卵巢发育分为 6 个时期，约 30 日龄性腺出现分化。卵巢发育属于分批不同步型，为分批不同步产卵，第期最早出现在 34 日龄；第期出现在 64 日龄；第期分为前、中、后期，分别出现在 120、140、165 日龄；第期也分为前、中、后期，分别出现在 180、200、247 日龄；第期出现在 282 日龄，达到性成熟，此时鱼体质量为(9.702.20)g；之后逐渐进入第期。精巢属于小叶型，发育略晚于卵巢，第期出现在 64 日龄；第期出现在 110 日龄；第期出现在 180 日龄；第期出现在 320 日龄；第期出现在350 日龄，达到性成熟，此时鱼体质量为(40.7718.20)g；之后逐渐进入第期。【结论】花身副丽鱼的卵巢发育早于精巢且发育速度快于精巢，导致雌、雄成熟不同步，需要对雄鱼进行人工催产等技术加快精巢发育以提高人工繁殖效率。本研究对花身副丽鱼人工繁育和精准性别控制育种技术研究提供了数据支撑。关键词:花身副丽鱼；组织学观察；性腺发育；小叶型中图分类号:S917.4文献标志码:A文章编号:1004390X(2024)02007006Histological Observation and Preliminary Analysis of GonadalDevelopment in Cichlasoma managuenseJINFangpeng，ZUOPengxiang，ZHAOJingxia，WUJunjie(YunnanAcademyofFisherySciences,Kunming650111,China)Abstract:PurposeTograspthegonadaldifferentiationanddevelopmentlawofCichlasomamanaguense,andtosystematicallydescribethemorphologicalstructure,characteristicsandchangesofthetestisandovaryineachstage.MethodsParaffinsectionwasusedtostudythestructureandphaseofgonadaldevelopmentinC.managuense.ResultsThedevelopmentoftestisandovaryofC.managuensecouldbedividedintosixstages.At30-dayofage,thegonadsbegantodifferentiate.Thedevelopmentofovarybelongedtobatchasynchronytype,whichmeanttheegg-layingwasinbatchasynchrony.Stageofovarydevelopmentappearedat34-dayofage;stageappearedat64-dayofage;stagewasdividedintotheprimary,middleandlaterperiods,appearingat120-,140-and165-dayofage;stagewasalsodividedintotheprimary,middleandlaterperiods,appearingat180-,200-and247-dayofage;stageappearedat282-dayofage,reachingsexualmaturity,andthe收稿日期：2023-09-18修回日期：2024-04-15网络首发日期：2024-05-07*基金项目：云南省科技厅基础研究计划(201901U070005)；云南省科技厅基础研究专项(202401AT070091)。作者简介：金方彭(1987)，女，云南曲靖人，硕士，助理研究员，主要从事土著鱼生物多样性和遗传育种研究。E-mail：*通信作者 Correspondingauthor：吴俊颉(1987)，男，云南昆明人，博士，副研究员，主要从事分子遗传育种研究。E-mail：网络首发地址：https:/ appeared at 350-day of age,reaching sexual maturity,and the body weight was(40.7718.20)g;andthengotintostagegradually.ConclusionThedevelopmentofovaryofC.managuenseisearlierandfasterthanthetestis,resultingintheasynchronousmaturationofmaleandfemale.Itisnecessarytoacceleratethedevelopmentoftestisbyartificialinductionandothertechniquestoimprovetheefficiencyofartificialreproduction.ThisstudyprovidesdatasupportforC.managuensebreedingandresearchonprecisionsex-controlledbreedingtechniques.Keywords:Cichlasoma managuense;histologicalobservation;gonadaldevelopment;lobulartype生殖系统是鱼繁殖过程的中心，它有赖于生物早期性腺的正常形成和分化。鱼的繁殖体系分为生殖腺和生殖导管，生殖腺包括精巢和卵巢，生殖管道包括输精管和输卵管。通过性腺发育组织学的观察研究，可以摸清生殖腺在不同发育阶段的特性，对鱼类的强化育种、人工繁殖以及人为性别控制诱导时机的确定具有重大意义1-2。目前，对鱼类生殖腺发育的研究已有许多成果3-6。对于精巢类型，多数学者按照精细胞的排列方法将其分成小管型与小叶型7，且大部分鱼类精巢均为小叶型；而部分学者则是根据精小叶的排列方式将其分成壶腹型和辐射型6,8。对于性腺发育阶段的划分，常按照鱼类生殖细胞开始出现的时间将精巢划分成期，一般而言，硬骨鱼类精巢体积小，形状为细带或长囊状9-10；卵巢的发育时期一般是根据卵巢内不同时间卵母细胞的比例、形态和体积划分为期。花身副丽鱼(Cichlasoma managuense)隶属于鲈形目(Perciformes)慈鲷科(Cichlidae)丽体鱼属(Cichlasoma)，产地为尼加拉瓜，为产地肉食性鱼类，可控制河流湖泊小杂鱼的过度繁殖11-12；该鱼种肉质鲜美，可发展为经济鱼类。对于花身副丽鱼的研究主要集中于池塘养殖、繁殖技术、肌肉营养、苗种培育、养殖病害防治等方面12-16，但其性腺发育组织学研究还未见报道。一直以来，由于雌、雄花身副丽鱼成熟不同步导致难以人工繁殖，限制了该经济鱼类产业的可持续发展。本研究采用石蜡切片法观察花身副丽鱼性腺发育全过程，掌握其性腺发育及成熟规律并确定繁殖期，以期为其人工繁殖、人工性别控制技术及选育新品种提供数据支撑。1 材料与方法1.1试验材料供试材料取自西双版纳土著鱼繁育中心养殖场 2021 年刚出膜的仔鱼，在实验室培育 1 个月后取样，用丰年虫幼虫作为开口饵料，长至幼鱼期转投人工配合饲料，养殖期间定时吸污、换水，保持良好的生活环境。鱼苗开始出膜后每月随机抽样 30 尾，测量其全长、体长、体高、体质量等生物学指标，解剖后将性腺取出并用Bouins 液固定，用于制作组织切片。1.2试验方法参考顾海龙等6的方法制作切片。首先将固定好的样品进行梯度酒精脱水处理，再通过二甲苯进行透明处理，最后用石蜡包埋并连续切片，切片厚度约 5m。将制好的切片置于恒温箱烘烤至干燥，用二甲苯脱蜡，再用梯度酒精进行复水处理，采用 HE 染料进行染色，再依次进行脱水，最后透明并用中性树胶封片，在显微镜下观察和拍照记录。精巢和卵巢发育依据刘筠9的方法分为期，卵细胞发育依据楼允东17的方法分为 6 个时相。2 结果与分析2.1卵巢形态及组织学分期特征2.1.1期卵巢花身副丽鱼期卵巢出现在 34 日龄，此时尚不能清楚地观察到卵巢，解剖后在腹腔内隐约可以看到与鳔腔腹膜贴近的区域有条极细的透明线状结构，无法辨别雌雄。期卵巢内主要为第时相卵母细胞，处于卵原细胞阶段，细胞呈圆形、不规则多边形、椭圆形、三角形等形态，体第2期金方彭，等：花身副丽鱼性腺发育组织学观察与初步分析71积较小。细胞核大于细胞质，细胞核内有 1 个核仁，位于核中央(图 1a 和 1b)。2.1.2期卵巢期卵巢中主要存在第时相卵母细胞，此时正处于初始卵母细胞的状态，可分为前期与后期 2 个阶段。64 日龄花身副丽鱼的卵巢外观特征尚无法明确辨别，但在显微镜下可以看到性腺从腹部延伸至腹腔，并在腹腔分为 2 根极纤细的线状结构，外观几乎无色透明，2 条线的末端汇合并开口于体外。第时相卵母细胞前期，细胞体积明显增大，细胞质和细胞核增长，细胞形态不规则(图 1c)。100 日龄花身副丽鱼性腺发育处于第时相卵母细胞后期，细胞体积继续增大，细胞质的嗜碱性减弱，细胞已几乎近圆形，核仁数量继续增加，质膜外层形成由单层细胞排列组成的滤泡膜(图 1d)。2.1.3期卵巢第时相卵母细胞分为前、中、后期。前期出现于 120 日龄花身副丽鱼，此时卵巢显著变厚，通过解剖可观察到 1 条透明的线状物附着于鳔腔腹膜，而卵巢与腹膜间无任何组织粘连；卵母细胞趋于稳定，主要呈圆形，其前部细胞质出现一些大小不等的不规律气泡，且分布不均匀；细胞质酸性减小(染色浅于第时相卵母细胞)，染色分层，靠近细胞核的位置染色较浅，外围染色较深(图 1e)。140 日龄花身副丽鱼卵巢组织切50 ma)50 mb)50 mc)20 md)50 mq)50 mn)50 mr)50 mt)50 mw)200 mm)50 mx)50 me)n50 mf)nu50 mh)yg50 mi)yv50 mj)yg50 mg)yv50 mk)yg50 ml)zr50 mo)sg50 mp)ps50 ms)ss50 mv)sp10 mu)st注：a)和 b)期卵巢；c)第时相卵母细胞前期；d)第时相卵母细胞后期；e)第时相卵母细胞前期；f)第时相卵母细胞中期；g)第时相卵母细胞后期；h)第时相卵母细胞前期；i)第时相卵母细胞中期；j)第时相卵母细胞后期；k)和 l)期卵巢；m)期卵巢；n)和o)期精巢；p)和 q)期精巢；r)和 s)期精巢；t)和 u)期精巢；v)和 w)期精巢；x)期精巢。n.细胞核；nu.核仁；yv.卵黄泡；yg.卵黄颗粒；zr.放射带；sg.精原细胞；ps.初级精母细胞；ss.次级精母细胞；st.精子细胞；sp.精子。Note:a)andb)stageofovary;c)theprimaryperiodofoocytesinphase;d)thelaterperiodofoocytesinphase;e)theprimaryperiodofoocytesinphase;f)themiddleperiodofoocytesinphase;g)thelaterperiodofoocytesinphase;h)theprimaryperiodofoocytesinphase;i)themiddleperiodofoocytesinphase;j)thelaterperiodofoocytesinphase;k)andl)stageofovary;m)stageofovary;n)ando)stageoftestis;p)andq)stageoftestis;r)ands)stageoftestis;t)andu)stageoftestis;v)andw)stageoftestis;x)stageoftestis.n.nucleus;nu.nucleolus;yv.vacu-olusvitellioae;yg.yolkgranule;zr.zonaradiata;sg.spermatogonium;ps.primaryspermatocyte;ss.secondaryspermatocyte;st.spermatoblast;sp.sperm.图 1 花身副丽鱼性腺发育组织学观察Fig.1HistologyobservationofgonadaldevelopmentofCichlasoma managuense72云南农业大学学报第39卷片观察到中期第时相卵母细胞，其核仁紧贴核膜排列，细胞质中的空泡向外呈环状排列，数量增加(图 1f)，滤泡膜依然保持单一的构造。165日龄花身副丽鱼卵巢组织切片中观察到后期第时相卵母细胞，其体积明显增大，细胞核体积较前 2 个时期急剧减小，胞质内的空泡数量迅速增多，且连成更大的空泡，卵膜外部还新增了1 层排列整齐的滤泡细胞，并与先前的滤泡细胞一起构成了双层滤泡膜结构(图 1g)。2.1.4期卵巢180 日龄花身副丽鱼解剖后立即可辨认出卵巢，卵巢体积明显增大，呈灰黄色，内部充满相互粘连并被膜物质包裹的卵粒，为第时相卵母细胞，即进入生长晚期的初级卵母细胞，也分为前、中、后期。前期细胞体积仍在增大，胞质内的空泡相互融合，细胞核变形，核仁数量减少，出现粗大核仁，依然紧贴核膜(图 1h)。200220日龄卵母细胞已发展到第时相卵母细胞中期，空泡数量有所下降，取而代之的是大量被染成深色的卵黄颗粒，同时细胞出现多个染色环，靠近核的部分染色较淡，而在核内并没有明显的巨大核仁(图 1i)。247 日龄时，卵母细胞已达到第时相卵母细胞后期，其体积稍有缩小，细胞核体积也缩小，且核膜界限模糊不清，逐渐向动物极方向移动，而卵黄颗粒进一步融合扩大(图 1j)。2.1.5期卵巢282 日龄时，花身副丽鱼的卵巢已接近完全成熟并能产生灰黄色的卵粒，对其腹部施加压力，可以挤压出黄色透明的颗粒。卵巢内部包含大量独立且清晰可见的成熟卵子，其体积较期显著增大，并占据了腹腔的大部分空间。该期卵巢几乎全部是成熟的第时相卵母细胞，其核膜已被分解，核仁消失，细胞质布满了散落的黄色卵黄颗粒，空泡与卵黄颗粒相互交错排列(图 1k和 1l)。2.1.6期卵巢该时期成熟的卵细胞被排出体外后，卵巢还处于膨大松弛的状态，其体积还未完全缩小；卵巢内还有少数未被排出和吸收的卵子，多数卵母细胞已退化成第、时相卵母细胞(图 1m)。2.2精巢形态及组织学分期特征2.2.1期精巢64 日龄花身副丽鱼精巢处于期，位置与卵巢相似，解剖同样不能看出其形态，均为透明，呈细线状紧贴于花身副丽鱼腹面两侧且很难分离，无法直接判断雌雄。精巢被结缔组织分隔为精小叶，其形状不规则，内部是处于增殖期、体积较大、呈规则圆形的精原细胞，中间有 1 个被染成深色的核仁(图 1n 和 1o)。期精巢在花身副丽鱼发育过程中也仅出现 1 次。2.2.2期精巢110 日龄花身副丽鱼精巢处于期，其外观特征类似于期卵巢。精巢内部存在许多精小管，其细胞数量有所增加，包括原始生殖细胞、初始精母细胞及次级精母细胞，其中，初级精母细胞最多且体积相对较小，呈明显的圆形并具有深色的细胞核(图 1p 和 1q)。2.2.3期精巢180280 日龄花身副丽鱼精巢都处于期，精巢体积明显增大，解剖后可清晰地看到 2 条乳白色的细线，自腹腔前段伸出，在腹腔末端合在一起，开口于体外，精巢上血管清晰可见。精小管中充满由初级精母细胞增殖分化而来的次级精母细胞，还有一些初级精母细胞和精子细胞，次级精母细胞的细胞质较少，细胞核呈强嗜碱性，着色较初级精母细胞深(图 1r 和 1s)2.2.4期精巢320 日龄花身副丽鱼精巢比较发达，变粗呈囊状，较期精巢饱满，表面呈乳白色，两端稍显膨大，且其膨大部的发育早于中间部位。精小管内有大量富含酸性和弱阳离子性质的成熟精子和次级精母细胞；精子细胞已经没有明显的细胞质结构和核膜，其数量多于次级精母细胞，说明精巢内的精母细胞正在向成熟精子发育(图 1t 和1u)。2.2.5期精巢350 日龄时，花身副丽鱼精巢已完全发展至成熟状态(期精巢)，只需轻微按压其腹部就能看到白色的精液溢出。贮精囊呈现为充满脂肪的长型且颜色偏向乳白色，肉质丰满。一些精小囊已破开，大量成熟精子填满了精小囊内壁；精巢中的细胞也逐渐消减直至消失殆尽(图 1v 和 1w)。2.2.6期精巢期精巢是排精完成后形成的精囊，其形态已收缩且变软，表皮出现红色出血点，内部存有一些剩余精子，并同时存在次级精母细胞和部分第2期金方彭，等：花身副丽鱼性腺发育组织学观察与初步分析73初级精母细胞，已退化到期精巢阶段(图 1x)。3 讨论3.1花身副丽鱼的性腺分化本研究发现：花身副丽鱼卵巢的分化早于精巢，34 日龄花身副丽鱼卵巢腔形成，但 64 日龄才形成精小叶。卵巢腔与精小叶生成被视为卵巢及精巢初始分化的象征18，这一规律同样适用于花身副丽鱼和某些鱼类，如布氏罗非鱼19、黄颡鱼20、南方鲶21和线纹海马22，它们的卵巢分化均先于精巢。但是，长春鳊6和黄姑鱼23的性腺发育是精巢早于卵巢，松江鲈鱼的精巢发育速度超过卵巢3。可见，各种鱼类的性腺发育进程存在差异，且雌雄鱼的发育进程并不一致。3.2花身副丽鱼的产卵习性鱼类性腺发育特征和长期的自然选择密切相关，根据其卵母细胞发育一致性的特点，可将卵巢的发展分为 3 个类型：全局同步型、批次同步型和批次非同步型24。与同步型相比，批次非同步型卵巢在发育过程中经历所有卵母细胞生长阶段，生殖繁育时间较长，一年内可多次产卵24。一次性产卵鱼类易受外界环境的影响，而分批产卵的鱼类受外界因素影响较小，不会因为某些自然灾害而彻底丧失后代25。本研究表明：花身副丽鱼卵巢发育不同步，期卵巢内同时存在第时相卵母细胞，期卵巢又会出现第、时相卵母细胞，故判定其产卵类型为分批非同步型，这与布氏罗非鱼的卵巢研究结果19一致。此外，花身副丽鱼卵母细胞的发育存在同一批次鱼发育不一致的现象，有些鱼 64 日龄就发育到期卵巢，但有些鱼 120 日龄同时存在期和期卵巢，卵巢不同步的发育现象导致花身副丽鱼出现分批产卵现象。花身副丽鱼通常在下午产卵，产卵后由雌鱼和雄鱼共同守卫受精卵，且守护职责以雌鱼为主，卵为黏性卵，圆形、黄色、透明，分散排列在产卵处；当水温保持在 2628时，受精卵约 4d 即可孵化成仔鱼26。体质量约为50g 的雌鱼每次产卵 300500 粒，产卵 1d 后，除了其他与其共同生活的鱼类外，花身副丽鱼雄鱼和雌鱼也有食卵行为，因此，产卵后需及时将受精卵或亲本取出。3.3花身副丽鱼的精巢发育特点按照生精细胞在精巢内的分布特点，一般可将硬骨鱼类精巢分为小管型和小叶型27，精原细胞布满精小叶的精巢为小叶型，精原细胞仅分布于精小管前端的精巢为小管型。花身副丽鱼和鲤科鱼类特征相似，属小叶型。本研究显示：320日龄花身副丽鱼的精巢才处于期，而其卵巢约282 日龄就进入期，表明花身副丽鱼的性腺发育雌雄不同步，导致其繁殖效率较低，需对雄鱼进行人工催产等技术加快精巢发育，以提高人工繁育水平，但在生产和技术上的研究有待于进一步深入探讨。3.4花身副丽鱼的卵巢发育特点花身副丽鱼卵巢发育可归纳为卵原细胞期、初级卵母细胞小生长期、初级卵母细胞生长期、初级卵母细胞大生长期、成熟期和衰退期。花身副丽鱼的卵巢在发育到期时出现卵黄核。对纳木错裸鲤性腺发育的研究表明：卵黄核由密度很高的絮状颗粒团构成，其形成与卵母细胞核的营养物质密切相关，其内部物质很可能是核糖核蛋白体或微粒，它随发育进程裂开并进入细胞质28；对塔里木裂腹鱼的性腺研究发现：卵黄核的位置与卵黄颗粒的位置一致29；对鲈形目鱼类性腺发育的研究表明：卵黄核移动到卵周的皮质中发生破裂，随后卵黄颗粒才开始积累营养物质30。本研究发现：在花身副丽鱼卵巢中，随着液泡数量的增加而产生卵黄颗粒，并逐步积累于液泡层内部，最后填满胞质的一半区域并将液泡推至胞质外围；当进入期后，卵巢靠近核心位置出现空泡，而原本存在的卵黄核结构消失，锦江翘嘴鲌的第 3 阶段卵母细胞上31也存在这一现象；花身副丽鱼卵巢第时相卵母细胞中的空泡逐渐减少直至完全消失，卵黄颗粒占据全部卵巢空间，这一过程类似于萍乡红肉鲫卵巢的第时相卵母细胞32，但又区别于布氏罗非鱼卵巢的卵母细胞中既有空泡也有卵黄颗粒的现象19。4 结论花身副丽鱼卵巢的发育早于精巢且发育速度快于精巢，雌鱼 282 日龄达到性成熟，雄鱼 350 日龄达到性成熟，导致雌雄成熟不同步，这直接影响了其规模化人工繁殖。研究结果对花身副丽鱼人工繁育和精准性别控制育种技术研究提供了数据支撑，下一步需要对雄鱼人工催产等技术进行研究，以加快精巢发育，提高人工繁殖效率。74云南农业大学学报第39卷参考文献BLZQUEZ M,FELIP A,ZANUY S,et al.Criticalperiodofandrogen-induciblesexdifferentiationinatele-ostfish,theEuropeanseabassJ.JournalofFishBio-logy,2001,58(2):342.DOI:10.1006/jfbi.2000.1453.1STRSSMANN C A,NAKAMURA M.Morphology,endocrinology,andenvironmentalmodulationofgonad-al sex differentiation in teleost fishesJ.Fish Physiol-ogyandBiochemistry,2002,26(1):13.DOI:10.1023/A:1023343023556.2赵一杰,张美昭,温海深.松江鲈鱼性腺发育组织学观察J.海洋湖沼通报,2013(1):16.DOI:10.13984/37-1141.2013.01.003.3张静,黄进强,李亚亚,等.青鳉(Oryzias latipes)性腺分化与发育的组织学观察J.动物学研究,2013,34(5):464.DOI:10.11813/j.issn.0254-5853.2013.5.0464.4姜爱兰,王信海,蔺玉华,等.大鳞鲃性腺发育组织学观察J.天津农学院学报,2016,23(4):9.DOI:10.3969/j.issn.1008-5394.2016.04.003.5顾海龙,冯亚明,杨智景,等.长春鳊性腺发育组织学观察J.水产学杂志,2022,35(3):44.DOI:10.3969/j.issn.1005-3832.2022.03.007.6BILLARDR.Spermatogenesisandspermatologyofso-meteleostfishspeciesJ.ReproductionNutritionDve-loppement,1986,26(4):877.DOI:10.1051/rnd:19860601.7孟庆闻.鱼类比较解剖M.北京:科学出版社,1987.8刘筠.中国养殖鱼类繁殖生理学M.北京:农业出版社,1993.9施瑔芳.鱼类生理学M.北京:农业出版社,1994.10刘晨斌,徐革锋,黄天晴,等.鱼类性腺发育研究进展J.水产学杂志,2019,32(1):46.DOI:10.3969/j.issn.1005-3832.2019.01.009.11覃善恩.淡水石斑鱼人工生态健康养殖技术研究J.农业与技术,2017,37(3):139.DOI:10.11974/nyyjs.20170229059.12郭桐.淡水石斑鱼庭院繁殖技术J.渔业致富指南,2005(14):44.13黄海,杨宁,张希.淡水石斑鱼含肉率和肌肉营养成分分析J.水产科技情报,2012,39(2):87.DOI:10.3969/j.issn.1001-1994.2012.02.009.14周毅,唐瞻杨,钟欢,等.淡水石斑鱼苗种繁育技术J.科学养鱼,2018(4):8.DOI:10.14184/ki.issn1004-843x.2018.04.004.15李秋,罗晓东.淡水石斑鱼假单胞菌疾病防治J.河南水产,2021(1):13.16楼允东.组织胚胎学M.2版.北京:中国农业出版社,171980.陈兴汉,刘晓春,蒙子宁,等.尼罗罗非鱼仔鱼个体发育及性腺分化的发育J.热带生物学报,2012,3(3):197.DOI:10.15886/ki.rdswxb.2012.03.017.18刘奕,赵婷婷,胡隐昌,等.布氏罗非鱼性腺发育的组织学研究J.江西农业大学学报,2019,41(2):340.DOI:10.13836/j.jjau.2019041.19彭丽娜,卢建国,栾培贤,等.黄颡鱼(Pelteobagrusfulvidraco)性腺分化的组织学观察J.水产学杂志,2014,27(3):48.DOI:10.3969/j.issn.1005-3832.2014.03.011.20张修月,焦保卫,吴天利,等.南方鲶性腺分化的组织学观察J.动物学杂志,2005,40(1):41.DOI:10.3969/j.issn.0250-3263.2005.01.007.21陈美玲,符宏高,吴锐琼,等.线纹海马早期性腺发育的组织学形态分析J.福建师范大学学报(自然科学版),2022,38(6):69.DOI:10.12046/j.issn.1000-5277.2022.06.009.22马世磊,耿智,徐冬冬,等.黄姑鱼性腺发育的组织学观察J.浙江海洋学院学报(自然科学版),2014,33(2):129.DOI:10.3969/j.issn.1008-830X.2014.02.006.23张洁明,柳凌,郭峰,等.人工诱导日本鳗鲡性腺发育组织学研究J.中国水产科学,2007,14(4):593.DOI:10.3321/j.issn:1005-8737.2007.04.010.24黄雯晓,符文雅,潘帅,等.南海黄鳍金枪鱼性腺发育形态观察和组织学研究J.水产学杂志,2024,37(2):98.25李伟方,顾志华,徐慧敏.淡水石斑鱼人工繁殖及苗种培育试验J.科学养鱼,2005(4):8.26徐钢春,张呈祥,聂志娟,等.似刺鳊鮈的性腺发育组织学观察J.淡水渔业,2014,44(1):26.27何德奎,陈毅峰,蔡斌.纳木错裸鲤性腺发育的组织学研究J.水生生物学报,2001,25(1):1.DOI:10.3321/j.issn:1000-3207.2001.01.001.28何德奎,陈毅峰,陈自明,等.色林错裸鲤性腺发育的组织学研究J.水产学报,2001,25(2):97.DOI:10.3321/j.issn:1000-0615.2001.02.001.29魏杰,聂竹兰,李杰,等.塔里木裂腹鱼性腺形态学与组织学的研究J.大连海洋大学学报,2011,26(3):227.DOI:10.3969/j.issn.1000-9957.2011.03.007.30章龙珍,陈丽慧,庄平,等.长江口纹缟虾虎鱼繁殖季节的性腺组织学J.水产学报,2009,33(2):245.DOI:10.3321/j.issn:1000-0615.2009.02.011.31李忠利,巴家文,魏文燕,等.锦江翘嘴鲌性腺发育的组织学研究J.大连海洋大学学报,2019,34(4):519.DOI:10.16535/ki.dlhyxb.2019.04.009.32责任编辑：何謦成第2期金方彭，等：花身副丽鱼性腺发育组织学观察与初步分析75