洁净室人员行为规范-洁净室的清洁及消毒.ppt

洁净室人员行为规范洁净室的清洁及消毒,洁净室的清洁及消毒,洁净室的设计特点洁净室的污染来源污染的控制清洁计划洁净室清洁三原则消毒剂的选择清洁程序洁净室的验证及监测,1、厂房的设计,洁净室的特点,表面光滑、易于清洁、无死角；不同洁净度级别的房间有足够的压差；天花板密封；100级区无地漏、其它区域地漏应液封；设置更衣室；更衣室安装过滤器；更衣室的洁净度级别与高级别的房间相同；门设计成连锁；HVAC系统有报警装置；气流流型有效。,2、洁净室污染的来源,2.1污染物特性,活性尘埃、非活性尘埃的污染,2.1.1尘埃的特性,02m：漂浮在空气中2100m：随空气流动，降落缓慢100m：降落在表面上,粒子动力学,2.1.2活性尘埃的特性,活性尘埃的大小,1mm,10m,1m,10m,病毒,细菌,红细胞,原生生物,2.1.2活性尘埃的特性,细菌：0.25m细菌酵母菌：约5m霉菌：10m几个m湿度温度生长因素营养素氧气PH,2.1.2活性尘埃的特性,生长曲线,水和水溶液自然原材料（动植物来源）常见微食物生物的木制材料存在环人和动物上/内（皮肤、口腔/喉部、肠道）境空气地面衣服,常见微生物的存在环境,2.2污染物的来源,2.2.1污染物的来源-外部空气,人和工业活动空气中，地面行驶的车辆占5.7%的灰尘采石、炼钢、水泥制造和面粉等生产的工业性粉尘占34%燃烧如汽车尾气、火力发电厂排出的烟尘、木材燃烧的烟雾占57%自然现象：风、火山喷发、海啸等动植物：花粉、腐败物、孢子、微生物、头发、皮肤未经任何处理的外部空气510811010particles0.1m/m3,2.2.2污染物的来源-物品,原材料水其它物品等,2.2.3污染物的来源-设备、厂房,设备金属粒子氧化物其他污染物,2.2.4污染物的来源-工作人员,人员引起的污染占洁净室污染的80%；生产工具和设备：15%；洁净室本身和过滤器缺陷：5%；身着工作服人员，剧烈活动106particles0.1m/second，2105/secondforparticlesof0.5m着装和行为合适粒子减少至10到100。,2.2.4污染物的来源-工作人员,服装皮肤头发嘴巴和鼻子化妆品咳嗽：700000尘粒喷嚏：1400000尘粒1分钟交谈：1500020000尘粒,2.2.4污染物的来源-工作人员,来自皮肤的粒子皮屑成年男性10万1000万粒子/分钟10g/天3.5kg/年,2.3洁净室分级,药品生产洁净室的空气洁净度等级,各种分类的关系,3、洁净室污染的控制,污染的控制,3原则预防外来污染物的进入连续地消除产生的污染限制污染的产,预防外来污染物的进入,空气过滤正压气锁灭菌和净化,连续地消除污染,流速流型层流,限制污染产生,工作服行为和姿势设备和厂房的设计清洁和消毒,3.1预防污染物的进入,3.1.1空气过滤,初效过滤器初阻力3mm水柱计数效率（对0.3m的尘埃）20%主要对象是10m的尘埃用于新风过滤,3.1.1空气过滤,中效过滤器初阻力10mm水柱计数效率（对0.3m的尘埃）20%90%主要对象是110m的尘埃用于高效过滤器之前,3.1.1空气过滤,亚高效过滤器初阻力15mm水柱计数效率（对0.3m的尘埃）90%90.9%主要对象是5m的尘埃,3.1.1空气过滤,高效过滤器初阻力25mm水柱计数效率（对0.3m的尘埃）99.97%主要对象是1m的尘埃对细菌的穿透率为0.0001%，对病毒的穿透率为0.0036%，所以，通过高效过滤器的空气可视为无菌。,3.1.2正压,保持房间正压洁净室级别不同的相邻房间之间的静压差5Pa洁净室与室外大气的静压差10Pa空气由洁净级别较高的房间向较低的房间流动,3.1.3气锁,2个功能预防污染物的进入人流、物流不破坏压差,3.1.4灭菌/净化,灭菌种类湿热灭菌干热灭菌射线环氧乙烷无菌过滤,3.2连续地消除产生的污染,流量,考虑输入的过滤空气量与房间的体积唤起次数20次/hour(10000级)15次/hour(100000级）,流型,必须持续地排除被污染的空气预防涡流层流水平层流垂直层流,安全柜,安全柜（NFX44-201）Type前面部分敞开空气流入安全柜以保护操作者和环境,安全柜,安全柜（NFX44-201）Type负压，前面部分敞开保护操作者环境生物风险低或中等也保护产品在操作和操作者之间产生一道屏障保护操作，空气单向向下流动安装高效过滤器保护环境,安全柜,安全柜（NFX44-201）Type完全密封戴手套操作新空气经过高效过滤空气出口安装高效过滤器负压保护操作者和环境,3.3限制污染的产生,3.3.1人员,着装保护药品不被人员的污染无菌服，维护良好并正确穿戴无破缝，无污迹系好衣扣无头发或衣服外漏,3.3.1人员,100000级区的着装盖住头发和胡须10万级专用工作服专用鞋或鞋套,3.3.1人员,10000级区的着装罩住头发和胡须紧袖口高领工作衣、裤或连体工作服专用鞋或鞋套材料不产生尘粒无私人衣服,3.3.1人员,100级区着装兜帽口罩无尘灭菌手套灭菌工作鞋材料不脱落尘粒无私人衣服每次进入更换灭菌工作服,3.3.1人员,更衣SOP书面描述严格执行,3.3.1人员,更衣程序,换鞋脱衣洗手戴帽戴口罩穿洁净工作服镜前检查着装洗手戴工作手套戴保护镜消毒手套进入洁净室,3.3.2行为和姿势,在无菌区的工作必需人员方可进入无菌区不快速移动避免不必要的移动避免从层流区附近走过，至少离开1米所有掉在地面上的物品均应认为已被污染接触物品前应对手套消毒不要触摸口罩揉鼻子去更衣室揉鼻子更换手套和口罩,3.3.2行为和姿势,在洁净区的工作不要坐着不要靠住肘部不要在层流下面的工作台上休息,3.3.2行为和姿势,在洁净区的工作休息时，站着手臂顺着身体下垂不要把双手放在臀部休息时，坐着双手放在膝盖上不要交叉双手或双脚,3.3.2行为和姿势,在洁净区的工作必要时才讲话不要通过气锁讲话使用电话,3.3.2行为和姿势,在洁净室的行为正确的行为（续）搬运物料时，总是将手放在其底部；搬运物料时总是放在腰部以上位置以减少污染；总是戴上口罩以减少来自口腔的污染；机械和设备的维修保养必须有规律地进行；洁净室和洁净室内物品的清洁是很重要的；操作人员必须始终保持其工作区清洁和整齐。,3.3.2行为和姿势,在洁净室的行为良好的行为很关键，记住：穿着正确；移动正确；行动正确；工作正确。,3.3.2行为和姿势,在洁净室的行为不正确的行为不要因为不正确的着装而散播身体的粒子；不要因为没有手套的手接触表面和物料而引起交叉污染；不要在洁净室内脱去洁净室工作服；不要用手指擦头发或身体其他部位；不要在患感冒或其他疾病期间进洁净室工作；,3.3.2行为和姿势,在洁净室的行为不正确的行为不要在洁净室吃、喝、抽烟或读报等；不要在洁净室内戴首饰和手表；不要在洁净室使用错误的擦布或清洁物料；不要在洁净室快速地走、移动、转身；不要从前面走进操作者并隔着工作台讲话；,3.3.2行为和姿势,在洁净室的行为不正确的行为不要靠在工作台、产品或其他物料上；不要把手、手臂和手肘放在工作台上休息；不要搬运物料的顶部；不要在工作台上滑动物品；不要再使用掉在地上的工具和物品。,3.3.3设备,100级和其他区域之间无连续的传送带；维护和维修在洁净室外进行；维修后进行清洁、消毒或灭菌；生产用水的制备和分配符合要求；注射用水在80或65以上保温循环。,3.3.3设备,设备设计符合要求；经过验证；按计划进行维护；批准后使用。,4、清洁计划,第一阶段,清洁空气管道；对洁净区进行粗清洁（可见的尘粒）；最初的更衣程序。,第二阶段,安装HEPA过滤器；精清洁；平衡HVAC系统。,第三阶段,精清洁；建立并开始监测程序；完善更衣程序；HVAC系统已经平衡,第四阶段,精清洁：根据监测结果完善或常规化；环境监测；更衣程序常规化。,第五阶段,验证；常规清洁程序；环境监测。,清洁计划,从开始到第五阶段结束大约需要23个月；从第二阶段到第三阶段的进度决定于空调厂家；从第四到第五阶段大约需要46周。,5、洁净室清洁三原则,洁净室清洁三原则,原则一：总是用灭菌的纯化水或注射用水和新鲜过滤得清洁剂：所有过滤的清洁剂必须盛装在清洁并灭过菌的容器中，并正确贴签；把预先过滤的清洁剂存放在洁净室中可减小污染的风险。,洁净室清洁三原则,原则二：总是使用清洁的清洁工具和物料以避免将污染物带入洁净室：不锈钢表面较好，塑料表面易划痕并滞留尘粒和微生物；不要使用带木柄的清洁工具，因其易脱落尘粒；毛刷易断且滞留微生物，不宜使用；拖布和抹布应用与洁净室相适应并不易产生脱落纤维的物料制成；抹布应粘附尘土和细菌，且只使用一次；洁净室使用的真空吸尘器应安装HEPA过滤器并定期测试。,洁净室清洁三原则,原则三：清洁过程中不得增加洁净室的污染物：按照SOP要求，使用正确的清洁工具和物料，避免产生任何污染；正确的清洁顺序；正确的行为。,6、消毒剂的选择,消毒剂的选择,清洁剂消毒剂的选择消毒液的配制及使用常用的消毒剂的特性影响消毒效果的因素,清洁剂,清洁剂：市售家用洗洁精或其他适宜的清洁剂。要求：无毒、无腐蚀性溶解脏物降低表面张力浓度：按说明书要求浓度配制,消毒剂的用途,抑制细菌杀灭细菌抑制真菌杀灭真菌杀灭病毒杀灭芽孢,消毒剂的作用机理,破坏RNA/DNA：氯化物，过氧化氢，甲醛；使蛋白质变性：乙醇，戊二醛，石炭酸；裂解细菌细胞膜：季铵盐类；与酶结合：洗必泰。,对消毒剂的敏感性,G+细菌敏感G-细菌真菌和酵母菌胞膜病毒细菌芽孢无胞膜病毒不敏感,常用的消毒剂（1）,高效消毒剂：能杀灭细菌芽孢和真菌孢子在内的各种微生物。含氯或碘的消毒剂；过氧化物：过氧化氢、过氧乙酸；醛类：甲醛、戊二醛；臭氧；环氧乙烷。,常用的消毒剂（2）,中效消毒剂：可杀灭除细菌芽孢以外的各种微生物。醇类：乙醇、异丙醇；酚（石炭酸）。低效消毒剂：指能杀灭一般细菌繁殖体、部分真菌和亲脂性病毒。洗必泰；新洁尔灭。,消毒剂的选择,理想的消毒剂广谱效果快既是清洁剂，又是消毒剂不易受脏物和其他物质的影响在较宽的浓度范围内有效无残留不易产生抗性对人体无害对设备无腐蚀性稳定价廉,消毒剂选用,地面和工作台面的消毒：季铵盐类化合物与酚或次氯酸盐交替使用，避免产生耐药性不锈钢表面：70%乙醇或异丙醇手：70%乙醇或异丙醇洗必泰,影响消毒效果的因素,微生物类型固有的抗性无胞膜病毒芽孢获得的抗性细胞膜的改变微生物的数量：数量多，不易杀灭有更多的有机物蛋白凝聚,影响消毒效果的因素,干扰物质蛋白质和脏物：活性氯、洗必泰、乙醇、醛类和季铵类；肥皂：洗必泰、季铵类；硬水：季铵类、碘化物。,影响消毒效果的因素,PH：许多消毒剂在一定的PH范围内活性较高酸性：活性氯化物、石炭酸；碱性：季铵类、醛类、洗必泰。一些消毒剂在过低或过高PH时不稳定低PH：活性氯；高PH：戊二醛、过氧乙酸、过氧化氢。,影响消毒效果的因素,温度：一般为温度升高，活性增加。消毒液存放高效消毒剂失活快，如活性氯溶液，过氧化氢；低效消毒剂易产生耐药菌株，如假单胞菌属对季铵盐类消毒液易产生耐药菌株。,影响消毒效果的因素,消毒剂浓度浓度和消毒效果通常不呈线性关系；浓度越低，通常效果越差；太低的浓度会诱导产生抗性；乙醇在60%80%浓度范围内效果较好。,消毒剂的优点-缺点,正确配制和使用消毒液,配制前除菌过滤；用灭菌的纯化水或者射用水配制消毒液；按说明书要求的浓度配制消毒液；不要将剩下的消毒液倒入新配制的消毒液中；选择合适的消毒剂，不要照搬；临用新配；不要混合不同种类的消毒液；轮换使用消毒剂。,消毒液中有细菌生长的原因,使用了不正确的浓度；用被污染的水配制消毒液；脏的容器；不相容的容器；与另一种不相容的消毒剂或清洁剂混合；消毒液放置时间太长；被有机物灭活。,7、清洁程序,7、清洁程序,7.1洁净室清洁人员的要求7.2清洁区域的划分及清洁顺序7.3清洁方法及清洁程序,7.1洁净室清洁人员的要求,清洁(cleaning)：指除去肉眼可见的污染物。消毒(disinfection)：在表面清洁后用于杀灭多种微生物，使其数量减少到可接受的水平。灭菌(sterilization)：杀灭所有的微生物。,7.1洁净室清洁人员的要求,洁净室清洁人员洁净室工作人员应具备的两个特点：能胜任工作能与同伴的配合所有清洁人员首先必须经过培训以了解洁净室基本原则，如：为什么洁净室是必须的？为什么污染是很危险的？洁净室是如何工作的？为什么说洁净室更衣是必要的？,7.1洁净室清洁人员的要求,洁净室清洁人员培训还应包括正确的洁净室程序：良好的人员卫生的重要性如何正确的穿着工作服为什么移动应慢、轻？洁净室内行为不正确可能导致什么结果？培训必须包括：专门的清洁及消毒技术为什么始终都应按照清洁SOP进行操作？清洁、消毒和最终产品之间的关系洁净室行为中应该做的和不应该做的培训必须使所有清洁人员完全明白洁净室的污染必须清除并不允许再次引入。,7.2清洁区域的划分及清洁顺序,清洁对象正压区域清洁顺序负压区域清洁顺序洁净室清洁顺序,清洁对象,外环境系统建筑物周围环境外墙面及玻璃窗内环境系统非洁净区技术夹层地面、设备、管道；各楼层走廊、地面、门窗、天花板；电梯、楼梯；各办公室；洗手间、更衣间,清洁对象,内环境系统洁净区100级房间；10000级房间；100000级房间；300000级房间；气锁、传递窗；人流、物流通道；洗手池。,清洁对象,内环境系统洁净区内各种设备及管道生物安全柜；冰箱、水浴箱；灭菌器、干烤箱；生物反应罐；洗瓶机、烘干机；分装机、压盖机；接入洁净室的各类管道；,正压区域清洁顺序,洁净室气锁走廊气锁无级别区压力+压力+压力+压力+压力0清洁消毒顺序：ABCDE,负压区域清洁,洁净室气锁走廊气锁走廊气锁压力-压力-压力-压力-压力+压力+清洁消毒顺序：FEDCAB,洁净室内清洁消毒顺序,天花板、墙壁、与墙壁连接的物体、管道、台面、设备、地面；从上往下，由里到外清洁；不要在已清洁过的地面上走动。,7.3清洁方法及清洁程序,清洁方法,真空吸尘清洁真空吸尘器仅对大粒子有效干擦干擦可能脱落粒子，通常仅用于擦干潮湿表面潮湿擦拭大多数清洁和除污必须通过湿或潮湿擦拭来完成,清洁程序及技术,总是将一定数量的清洁剂加入到水中，不要将水加入到清洁剂中；总是以重叠的长直线方向擦拭，而不要做转圈的刮擦动作；总是从最干净的区域向最脏的区域清洁；总是从按气流方向由过滤器向外、向下清洁；每擦一次都应将抹布折叠，露出干净的一面；清洁液应倒在抹布上，而不应到或喷在待清洁的表面；,清洁程序及技术,清洁时应特别注意不要损伤HEPA滤器或其他敏感的设备；粗的污物通常用装有HEPA的吸尘器从所有区域除去；然后用粘有适宜清洁剂的湿或潮湿的抹布擦或拖布拖；只有在已清洁过的表面上才能进行消毒；清洁控制板及元件时，所有电源均应关闭；,清洁程序及技术,除非特许，清洁液决不允许流入设备；所有的清洁液在用后须倒掉；清洁人员的正确行为在洁净室中是至关重要的；所有的清洁活动必须记录在清洁工作日志上。,标准清洁操作程序(SOP)应包括的内容,1、目的2、范围清洁的房间3、参考GMP验证文件技术文件,标准清洁操作程序(SOP)应包括的内容,4、职责谁来做？做什么？5、材料洁具清洁剂消毒剂6、程序每个步骤,标准清洁操作程序(SOP)应包括的内容,7、取样与检测取样计划取样方案测试方法样品标示于运输可接受的标准8、频率清洁检测,标准清洁操作程序(SOP)应包括的内容,9、记录卡标签10、不符合的处理,清洁频率,取决于对洁净室尘粒和微生物监测的结果（空气、表面）；符合GMP要求；理论天花板以下的墙面，清洁频率应高于理论天花板以上的墙面；分装区域每一批分装后都应及时进行清洁；所有清洁区域的地面、桌面、设备表面、门把手每天至少清洁一次；孵箱、冰柜、层流柜内部的清洁应由操作人员负责，而非清洁部门。,清洁频率举例,8、洁净室的清洁验证及监测,洁净室的清洁及消毒验证的主要步骤,确定关键点；在每天结束清洁后的分析结果；分析上午的测试结果；是否符合法规要求；必要时改进清洁程序；建立内部标准。,确定关键点,靠近产品的地方；与产品接触的表面；与产品接触的物品周围的表面；气流流型；活动频繁的地方；其他,分析每天工作结束清洁后的测试结果,取得采样点分布图；绘制每个采样点测试结果的柱状图；核对其均匀性根据采样点；根据采样日期。,分析上午工作开始前的测试结果,取得采样点分布图；绘制每个采样点测试结果的柱状图；核对其均匀性根据采样点；根据采样日期,是否符合法规要求,统计分析，核对结果位于限度之内：工作结束清洁后；上午工作开始前。,定义内部标准,工作结束清洁后的标准；上午工作开始前的标准；统计分析X+3SD为最大值X=平均值；SD=(X1-X)2+(Xn-X)2n-1建立清洁动态图，便于对不同时间的定义；建立警戒水平和行动水平：警戒水平：X+2SD；行动水平：X+3SD。,进行验证测试,清洁后尽快进行；上午工作前；每个测试至少进行30次。,结论,每次上午测试结果符合内部标准；每次工作结束清洁后测试结果符合内部标准；验证通过。,结论,如果上午测试结果不符合要求，验证未通过。如果上午测试结果符合要求，但是下午测试结果不符合，应进行调查。如果找到原因，并采取纠正措施，可能通过验证。如果未找到原因，将不可能通过验证。,环境监测,微生物检测尘粒监测警戒和行动水平调查和报告,环境监测,目的减少经济损失，起到预防作用；法规要求。,微生物监测,对整个生产区进行常规监测取样关键区非关键区：监测频率可低于关键区监测方法室内空气：悬浮菌、沉降菌地板、墙面、台面和设备表面：接触平皿，试纸法,微生物监测,微生物的鉴别通常见到的细菌还是偶然发现与培养基无菌灌装和产品无菌试验阳性的微生物是否有关培育的温度和时间培养基灵敏度试验培养基无菌试验,如何监测空气中的微生物？,定量检测浮游菌离心式采样器：常用，手提式非定量检测沉降菌90mm培养皿，30min(GB50243-97)90mm培养皿，4h(EUGMP),如何监测表面的微生物？,试纸法：藻酸钙试纸，25cm2接触平皿法：55mm直径(EUGMP)2433cm2(USP1116)ATP法：快速，敏感性低,尘粒监测,监测可能影响产品质量的环境和设备监测与产品接触的压缩空气和其他气体如氮气、二氧化碳等方法：粒子计数采样点数采样量,GB50243-97,GB50243-97每次采样的最少采样量,环境监测,结果分析：G+球菌：人G+芽胞杆菌：清洁、空气G-杆菌：水、不良卫生、耐药菌株酵母菌：食物、不良卫生、空气霉菌；木料、食物,警戒和行动水平,建立警戒和行动水平无菌生产区每个点都应建立警戒和行动水平警戒和行动水平是根据监测结果确定并作为趋势分析的基础警戒和行动水平的建立应有足够的证据环境监测趋势分析定期对监测结果进行分析和评估，以确认在各区域或各点是否有变坏的趋势,警戒和行动水平,趋势报告超过行动水平时应进行原因调查调查应在报告中反映出来报告应经管理人员审核、批准，并分发给所有与无菌生产有关的关键人员报告还应包括将采取的纠正措施以及对相关产品处置的建议,环境监测,报告监测日期房间号取样点培养基平皿种类参考标准监测结果应采取的措施签名日期,小结,常规性的检测；对粒子和微生物都进行检测；对整个生产区域进行检测；针对检测结果进行趋势分析，结果超出限度时应及时采取必要的措施；文件：计划、记录、报告。,参考文献,USP1116对洁净室的微生物学评估ISO14698-1：洁净室和其他控制区微生物污染控制，第一部分一般原则ISO14698-2：洁净室和其他控制区微生物污染控制，第二部分微生物检出数据的评估及解释ISO13408-1：卫生产品无菌工艺，第一部分一般原则,一、尘粒及细菌污染（1）大气中的尘粒：烟、灰尘、花粉、雾；皮肤屑；纤维、植物、纺织品、纸张、木头、腐植质。（2）污染来源：自然现象、风、火及灰、建筑材料、地面尘埃、有机物、植物、花粉、腐败物、孢子、微生物、头发、皮肤等。（3）设备：金属粒子、氧化物等；（4）人及工业活动：燃烧、排气、烟草、衣服、鞋、轮胎、土木工程等。例如：对于一个200万人口的城市，每天：鞋的磨损为1.5吨；轮胎的磨损为8吨；抽烟者产生的粉尘为8吨。,（5）来自人的尘粒污染：衣服、皮肤、头发、嘴巴和鼻子、化妆品等。（6）来自口腔的污染：0.5m尘粒咳嗽700，000尘粒喷嚏1，400，000尘粒1分钟的交谈：150002000尘粒（7）来自外部空气的污染：a、未经任何处理的外部空气510811010尘粒0.1m/m3b、身穿工作服剧烈活动,106尘粒0.1m/秒2105尘粒0.5m/秒c、穿合适的服装且符合要求可减少至10100个尘粒（8）微生物污染的来源随空气进入、随物料进入、人员带入,