抗-M抗体对血型鉴定及临床输血的影响.pdf

155中国现代药物应用2024年2月第18卷第3期Chin J Mod Drug Appl,Feb 2024,Vol.18,No.3抗-M 抗体对血型鉴定及临床输血的影响李丽群【摘要】目的观察抗-M 抗体对血型鉴定及临床输血的影响。方法8500 例首次血型鉴定患者,通过微柱凝胶实验进行血型分析,采用抗人球蛋白实验(AT)对其进行抗体鉴定,采用放散实验、吸收实验消除不规则抗体的影响,使用交叉配血实验分析标本交叉配血结果,测定抗-M 抗体效价。结果血型鉴定时借助微柱凝胶法、全自动血型仪,结果显示 8500 份标本中,正反定型相符 8432 份,正反定型不符 68 份。其中 18 份正反定型不符典型标本,经开展反定型试管法结果可见,A、B、O 细胞管均呈阳性,而对照管结果呈阴性。去除标本中的 2、3、6、8、9、11、12、13、15、17、18 号,剩余 7 份抗-M抗体标本的患者行备血申请,分别与相应血型的供血者开展配血试验,利用盐水法,筛出阴性供血者,在借助凝聚胺配血试验,无凝集者提示配血成功。有 3 例患者进行交叉配血实验,接受了血液成分输注,如悬浮红细胞等,未见输血不良反应。评价疗效显示输注有效。结论明确因抗-M 类不规则抗体所致交叉配血不合或反定型不符的标本,经 2-巯基乙醇处理、吸收试验,可将其干扰消除,取得实验正确结果,并且在 4温度下,可使抗-M 类盐水抗体冷反应性检测率提高。【关键词】输血安全；抗-M 抗体；交叉配血；ABO 血型鉴定DOI：10.14164/11-5581/r.2024.03.042Influence of anti-M antibody on blood group identification and clinical transfusion LI Li-qun.Quanzhou First Hospital Affiliated to Fujian Medical University,Quanzhou 362000,China【Abstract】Objective To observe the influence of anti-M antibody on blood group identification and clinical transfusion.Methods 8500 patients with first-time blood typing were analyzed by microcolumn gel test,and their antibodies were identified by anti-globulin test(AT).The influence of irregular antibodies was eliminated by dispersion test and absorption test,and the results of cross matching of blood specimens were analyzed by cross-matching blood test to determine the titer of anti-M antibodies.Results Blood typing was done with the help of microcolumn gel method and automatic blood typing instrument,the results showed that out of 8500 specimens,8432 specimens were compatible with positive and reverse blood typing and 68 specimens were not compatible with positive and reverse blood typing.Among them,18 typical specimens with mismatched positive and reverse blood typing were found to have positive results in A,B,and O cell tubes through reverse typing test tube method,while the results of the control tube were negative.The specimens of 2,3,6,8,9,11,12,13,15,17,18 were removed,and blood preparation was applied for patients with the remaining 7 anti-M antibody specimens.Blood matching test was carried out on blood donors of corresponding blood types,and negative blood donors were screened by saline method,then with the help of coagulant amine blood matching test,the absence of agglutination suggested that the blood matching was successful.3 patients underwent cross-matching blood tests and received transfusions of blood components,such as suspended red blood cells,and no adverse reactions were observed.Evaluation showed that infusion was effective.Conclusion Specimens with cross matching incompatibility or reverse typing inconformity due to irregular anti-M antibodies can be processed with 2-mercaptoethanol and absorption test to eliminate their interference and obtain correct results,and the detection rate of the cold reactivity of anti-M saline antibodies can be increased at 4.【Key words】Blood transfusion safety;Anti-M antibody;Cross matching of blood;ABO blood typing1927 年 MNS 血型系统被发现,其为被识别的第二个血型系统,第一个是 ABO 血型系统,1933 年 Johnson和 Wolf 发现了抗-M 抗体,其为自然产生,相对常见,大部分为免疫球蛋白 M(IgM)抗体,37下不活跃,临作者单位：362000福建医科大学附属泉州第一医院经验交流床忽略了其在输血实践中的存在,于室温下大部分抗-M 抗体会有盐水凝集情况发生,属冷反应性的盐水凝集素,偶尔可在抗球蛋白阶段或 37有反应发生,可导致迟发性的溶血性输血反应1,2。本文 2021 年 156中国现代药物应用2024年2月第18卷第3期Chin J Mod Drug Appl,Feb 2024,Vol.18,No.31 月 2022 年 12 月发现由抗-M 抗体引发的 18 例正反定型不符情况,经对此类抗体检测结果展开分析,探究在临床治疗中抗-M 抗体的影响,如何及时发现,让输血安全提高,进而对 O 型红细胞加入后的影响展开分析,详细报告如下。1资料与方法1.1一般资料本院输血科于 2021 年 1 月 2022 年12 月收集首次血型鉴定的 8500 例患者,女性居多,年龄 492 岁,中位年龄 58 岁,大部分源自胃肠外科,部分源自其他科室,上述标本上清清亮,未见溶血。1.2方法1.2.1血型鉴定与抗体鉴定留取EDTA抗凝血2 ml,使用全自动微柱凝胶卡法、手工试管法对 ABO、RhD血型进行鉴定,按照说明书或者临床规定的相关操作方法进行鉴定。进行直接抗人球蛋白试验(DAT)和间接抗球蛋白试验(IAT),包括：使用试管法进行DAT,将 1 滴 5%三洗红细胞待检标与 1 滴免疫球蛋白 G(IgG)、C3d 抗人球蛋白试剂相互混合,进行离心后,结果呈阴性则结束实验,呈阳性为进行抗-IgG、抗-C3d；凝聚胺法：将血清分别与 3 份抗体细胞、5%三洗红细胞进行混合,比例为 21,在分别加入 0.6 ml低离子液后混匀,再将 2 滴凝聚胺加入进行离心,观察凝集情况,弃去上清后加入 2 滴解凝聚,轻摇后观察 1 min 内的凝集情况3,4。1.2.2不规则抗体影响实验热放散实验：室温四洗后的 1 ml DAT 阳性标本压积红细胞与 1 ml 生理盐水在水浴箱中放散,温度设置为 56,时间为 10 min,离心后取出放散液进行 IAT。酸放散实验：按照试剂说明书操作对放散液进行 DAT。吸收实验：使用抗-M 试剂检测阳性的 O 型压积红细胞与标本血清混合,比例为 11,冰箱温度设置为 4,吸收时间为 1 h,离心后取上清,对其进行 ABO 反定型5。1.2.3配血方法将患者的血清、5%三洗红细胞和献血者的血清、5%三洗红细胞进行交叉混合(血清：红细胞=21),使用凝聚胺法、盐水法、手工卡式法,具体操作如上6。1.2.4抗-M 抗体效价测定留取 23 ml 抗凝静脉血进行离心,分离出血清,使用盐水法,用生理盐水倍比稀释血清 100 l,再加入 50 l 5%O 型健康人的 M 抗原阳性红细胞悬液,在 4、24、37 环境分别放置 15 min,离心观察并记录红细胞凝集情况7。2结果2.1血型鉴定结果血型鉴定时借助微柱凝胶法、全自动血型仪,结果显示 8500 份标本中,正反定型相符8432 份,正反定型不符 68 份。仅抽取了 18 份典型标本结果展开分析,见表 1。经开展反定型试管法结果可见,A、B、O 细胞管均呈阳性,而对照管结果呈阴性。见表 2。经处理后,标本血清接受直接抗人球实验以及抗体筛查实验,其对应实验结果见表 3。2.2标本交叉配血结果在抽取的 18 份典型标本中,去除标本中的 2、3、6、8、9、11、12、13、15、17、18 号,剩余 7 份抗-M 抗体标本的患者行备血申请,分别与相应血型的供血者开展配血试验,利用盐水法,筛出阴性供血者,在借助凝聚胺配血试验,无凝集者提示配血成功。2.3实验室结果分析在抽取的 18 份典型标本中,3 例输血患者监测尿常规,结果显示胆红素、尿胆原均呈阴性,未见输血不良反应。评价疗效显示输注有效。见表 4。表 118 份典型标本初检结果分析份数B 细胞A1 细胞ctl抗-D抗-B抗-A54+2+04+04+93+3+04+4+024+3+04+0022+2+04+4+4+表 218 份典型标本血型鉴定结果份数自身对照O 细胞B 细胞A1 细胞抗-D抗-B抗-A502+4+2+4+04+903+3+3+4+4+0203+4+3+4+00202+2+2+4+4+4+157中国现代药物应用2024年2月第18卷第3期Chin J Mod Drug Appl,Feb 2024,Vol.18,No.3表 318 份典型标本血型结果分析标号病史输血史ABORh(D)直抗抗体筛选抗体类型多抗抗-IgG抗-C3d盐水法PolyIAT1消化道出血无O+000+0IgM2血小板减少无B+000+IgM+IgG3红斑狼疮无B+0+IgM+IgG4产前筛查无B+000+0IgM5风湿性心脏病无AB+000+0IgM6肠恶性肿瘤无B+000+IgM+IgG7肠恶性肿瘤无O+000+0IgM8中期妊娠无B+000+IgM+IgG9子宫恶性肿瘤无B+0+IgM+IgG10胃癌无B+000+0IgM11胃癌无A+000+IgM+IgG12肾恶性肿瘤无A+000+IgM+IgG13食管占位无B+000+IgM+IgG14体检无A+000+0IgM15体检无A+000+IgM+IgG16脑膜瘤无A+000+0IgM17结肠占位无AB+000+IgM+IgG18骨折无B+000+IgM+IgG表 418 份典型标本实验室结果分析标本标号 输血前 Hb(g/L)输注悬浮 红细胞(U)24 h48 h1 周后Hb(g/L)IBIL(mol/L)/TBIL(mol/L)Hb(g/L)IBIL(mol/L)/TBIL(mol/L)Hb(g/L)IBIL(mol/L)/TBIL(mol/L)10682755.6/11.1847.2/12.6904.0/8.77552705.9/13.9834.5/10.0843.5/9.21602729.2/15.0957.6/11.4865.0/7.6注：Hb：血红蛋白；IBIL：间接胆红素；TBIL：总胆红素3讨论MNS 血型系统涵盖了诸多红细胞,而一个红细胞可涵盖约 80 万 M 抗原,其密度十分充足,乃病毒、细菌补体的受体。抗-M 抗体中大多数为 IgM 抗体,无需补体激活,剩余少数为 IgG 型抗体血型,而同种免疫为之诱发因素,可引发血管外溶血反应,可在温度严格控制下检测上述两种类型的抗体,以此实施鉴别8。本文中对抗-M 抗体产生人群展开了分析,结果发现消化道出血、怀孕中和备孕、肿瘤患者、心脏手术患者4 类人群会有抗-M 抗体产生。而经认真调查显示,纳入病例无输血史,而细菌感染史大都存在。抗-M 抗体和冷凝集素(CA)致病机制十分类似,某些诱导因素下,低温程度下可展现特殊效用,其该作用十分关键,而其致病性多由热振幅(TA)决定,也就是和抗原作用最高温度(通常为 22 30),与效价无关9。抗-M 抗体热振幅越高,会增加诱导核心体温较低患者体内溶血,尤其是在各类体温限制的手术中,如心脏、神经手术等,其可发挥关键效用。因而,术前此类患者应联合会诊,输血科参与会诊,拟定手术策略,确保其个体化,避免将冷抗体激活,致灾难性事件发生,如溶血等。提示了实际临床检测期间,低温环境下检出抗-M 抗体的几率相对更高 10。不同于 CA 的是,还有 IgG 型抗-M 抗体存在,且其有 IgG 同种抗体一般特性存在,本文结果可见,18 份典型标本中,IgG 型抗-M 抗体存在 11 份,约占65.0%,大部分为免疫性病症、恶性肿瘤患者,然在正常人群中其大部分为天然抗体,说明一旦在免疫性病症、恶性肿瘤患者体内检测出抗-M 抗体,在低温、输血治疗执行期间,应格外重视配合型输血、温度等因素,若必要,可取 MN 血型同型血输注11。胎儿、新生儿 HDFN 中抗-M 抗体可对红系前体细胞产生抑制,以致新生儿有红细胞发育不全等情况出现,有关资料显示12,抗-M 抗体可引发新生儿溶血病(HDN),且无 HDN 典型特征,DAT 结果呈现阴性为其具体表现,处于新生儿期则表现为长期贫血。由于抗-M 抗体可将红系祖细胞破坏,极易出现孕早期流158中国现代药物应用2024年2月第18卷第3期Chin J Mod Drug Appl,Feb 2024,Vol.18,No.3产等情况,本文中就发现 1 例妊娠中期孕妇,由于该孕妇并未在本院继续检查,因而未能继续追踪其结果,有关文献指出,IgG 型抗-M 抗体存在于血清中可引发新生儿严重溶血、多次死胎,检测直抗结果为阴性,在给予M抗原阴性悬浮红细胞(1单位)后,胆红素数值降低,Hb 升高,二者程度均较为明显,病症好转,提示抗-M抗体致 HDFN 直抗结果最终可能为阴性,误诊、漏诊情况极易发生13。本文所选微柱凝胶卡属 ABO-CDE 卡,无 O 细胞孔,A、B 细胞二者均为反定型孔。本文纳入 8500 份标本,经检测可见,正反定型不符 68 份,从中抽取的18 份典型标本中,O 型标本 2 份,这 2 份标本微住凝胶卡数值显示,其正反定型不符合,经检测有含盐水类的不规则抗体存在,由于常规检测项目中并无反定型检测 O 细胞的项目,极易出现漏诊情况。人类遗传学曾记载,人群中 P1 抗原占比约为 34.28%,而 M 抗原约为 70.36%,Le(a+)占比约为 21.0%。需注意的是抗-Leb抗体、天然抗-M 抗体均可导致溶血性输血反应,献血者血清内若含有此抗体,则不适宜献血14。所以,在大批量检测血型时,将 O 细胞对照组加入能显著升高盐水类中不规则抗体检出率。而实践中,抗-M 抗体在不同条件下表现不同,有一定差异性存在,不同患者应给予不同管理,明确抗-M 抗体临床价值,需要开展热振幅检测、测定抗体类别、抗体滴定等15。因而,若需开展相关操作,如移植评估等,供体应行小规模检测,含抗体筛查、交叉匹配,确保了解供体抗体的水平,移植成功率提高。本文仅有 3 例患者接受了配合型对输注,并取得了确切疗效,无输血不良反应。因而,检测结果若显示输血者有潜在意义的抗体,即使未检测到此类抗体,红细胞输注时,还需关注确认无对应抗原,以免再次发生免疫应答。所以,结合抗-M 抗体自身不同特性,事前掌握自身有无抗-M抗体,对于疾病诊断、治疗手段选择、优选献血者均可发挥较好的参照效果。参考文献1 陈爱霞.血清不规则抗体筛查及 Rh 抗原检测对临床输血安全的影响.基层医学论坛,2022,26(13):86-88,91.2 李金平,张超.输血前 ABO 血型、Rh 血型鉴定及抗体筛查对临床输血安全的影响.养生保健指南,2021(39):1-2.3 张娣,孙辉.不规则抗体检测在临床用血及输血患者安全中的影响效果分析.饮食保健,2020,7(18):220-221.4 毋琦,李黎,郭虹霞,等.微柱凝胶法交叉配血检测联合微柱凝胶法不规则抗体筛查对临床输血安全的影响.临床医学,2020,40(5):27-29.5 毛凯,翟小燕,李晓雁,等.不规则抗体检测在临床用血及输血患者安全中的影响.西部医学,2019,31(9):1453-1456.6 韩敏.不规则抗体检验在输血中的临床意义以及对输血安全的影响分析.世界最新医学信息文摘(连续型电子期刊),2020,20(51):160,162.7 谢名娟.不规则抗体检测在临床输血中的应用效果及其对患者预后的影响分析.世界临床医学,2018,12(1):77-78.8 刘览,姚志祥,苏群.不规则抗体检验在临床输血中的检验效果及对患者治疗预后的影响研究.中国社区医师,2017,33(6):88-89.9 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