确证化学结构或组分研究资料撰写的基本要求讲课稿北京申报资料市公开课一等奖百校联赛特等奖课件.pptx

确证化学结构或组分确证化学结构或组分研究研究 资料资料撰写基本要求撰写基本要求 -申报资料申报资料 9第1页申报资料格式和内容申报资料格式和内容o 一一.新药化学结构式、分子式及分子量新药化学结构式、分子式及分子量o 二二.供确认化学结构用供试品纯度及检验纯度方供确认化学结构用供试品纯度及检验纯度方法法o 三三.确证化学结构方法确证化学结构方法o 理化常数理化常数o 元素分析元素分析o 紫外吸收光谱紫外吸收光谱o 红外吸收光谱红外吸收光谱o 核磁共振氢谱核磁共振氢谱o 核磁共振碳谱核磁共振碳谱o 质谱质谱o 差热分析差热分析o X-射线衍射谱射线衍射谱o 其它其它o四四.综合解析综合解析o五五.参考文件参考文件 第2页(一一)结构确证研究普通标准结构确证研究普通标准和要求和要求1.结构确证研究主要对象结构确证研究主要对象 2.结构确证研究基本方法结构确证研究基本方法 3.结构确证研究主要内容结构确证研究主要内容 4.结构确证研究普通要求结构确证研究普通要求第3页1.结构确证研究主要对象结构确证研究主要对象经化学全合成或半合成、微生物发酵以经化学全合成或半合成、微生物发酵以及从动、植物中提取原料药及从动、植物中提取原料药,包含新药、进包含新药、进口药和已经有国家标准药品口药和已经有国家标准药品.第4页o按起源：按起源：化学合成、半合成、天然产物中提取、发酵等化学合成、半合成、天然产物中提取、发酵等;o按组分：按组分：单一组分、多组分混合物单一组分、多组分混合物;o按分子量：按分子量：小分子化合物、大分子化合物小分子化合物、大分子化合物;o按结构特点：按结构特点：成成盐盐化化合合物物和和非非成成盐盐化化合合物物、手手性性化化合合物物和和非非手手性性化化合合物物、含结晶水含结晶水/溶剂和不含结晶水溶剂和不含结晶水/溶剂等溶剂等;第5页2.2.结构确证研究基本方法结构确证研究基本方法 化学方法：理化分析、元素分析、化学关联等化学方法：理化分析、元素分析、化学关联等 物理方法：波谱方法、衍射技术物理方法：波谱方法、衍射技术 a.a.射频波、微波与物质相互作用：核磁共振、电子顺磁共振等射频波、微波与物质相互作用：核磁共振、电子顺磁共振等 b.b.红红外外、可可见见、紫紫外外光光与与物物质质相相互互作作用用：红红外外光光谱谱、紫紫外外光光谱谱、拉拉曼光谱等曼光谱等 c.X c.X射线与物质相互作用：射线与物质相互作用：X X射线衍射等射线衍射等 d.d.电子与物质相互作用：质谱、电镜等电子与物质相互作用：质谱、电镜等 e.e.其它：热分析、原子吸收、原子发射等其它：热分析、原子吸收、原子发射等第6页3.3.结构确证研究主要内容结构确证研究主要内容 骨架结构：骨架结构：分子中各原子之间连接次序和方式分子中各原子之间连接次序和方式;构型：构型：分子中各原子之间空间相对位置分子中各原子之间空间相对位置;结晶水结晶水/结晶溶剂：结晶溶剂：与水、有机溶剂经过氢键等结合与水、有机溶剂经过氢键等结合;晶型：晶型：分子（或原子）在晶体中排列方式分子（或原子）在晶体中排列方式;第7页骨架结构骨架结构 例：氟吗西尼例：氟吗西尼第8页 骨架结构研究骨架结构研究:a.a.单晶单晶X X射线衍射射线衍射;b.b.常常规规方方法法，如如元元素素分分析析（或或高高分分辨辨质质谱谱）、UVUV、IRIR、NMRNMR（包包含含二二维维谱谱）、MSMS等组合等组合;应应依依据据化化合合物物骨骨架架结结构构特特点点及及其其复复杂杂程程度度、有有没没有有对对照照品品及及参参考考文文件件，合合理理选选取取测试项目。测试项目。第9页 构构 型型 几何构型几何构型:双键、环状化合物，惯用顺反（双键、环状化合物，惯用顺反（cistrans）或）或ZE表示表示 例：西尼地平例：西尼地平 （）-3-（2-甲氧基乙基）甲氧基乙基）-5-3-苯基苯基-2（E）-丙烯基丙烯基-2,6-二甲基二甲基-4-（3-硝基苯基）硝基苯基）-1,4-二氢二氢-3,5-吡啶吡啶二甲酸酯二甲酸酯第10页 例：拉米夫定例：拉米夫定 (2R-(2R-顺式顺式)-4-)-4-氨基氨基-1-(2-1-(2-羟甲基羟甲基-1-1，3-3-氧硫杂氧硫杂环戊环戊-5-5-基基)-1H-)-1H-嘧啶嘧啶-2-2-酮酮第11页 几何构型研究：几何构型研究：理化性质差异显著理化性质差异显著 a.理化常数，比如熔点等理化常数，比如熔点等;b.氢谱、碳谱氢谱、碳谱;c.红外光谱、紫外光谱等红外光谱、紫外光谱等;第12页光学异构：因为分子不对称性引发，光学异构：因为分子不对称性引发，惯用惯用D-L或或R-S表示。表示。例：例：那格列奈那格列奈 （）（）N-N-（反（反-4-4-异丙基环基甲酰基）异丙基环基甲酰基）-D-D-苯丙苯丙氨酸氨酸第13页 例：前列腺素例：前列腺素E1E1（1R1R，2R2R，3R3R）-3-3-羟基羟基-2-2-（E E）-（3S3S）-3-3-羟基羟基-1-1-辛烯基辛烯基-5-5-氧代环戊烷庚酸氧代环戊烷庚酸第14页 光学异构研究：光学异构研究：a.比旋度测定比旋度测定 b.手性柱色谱（手性柱色谱（HPLC、GC）c.核磁共振（核磁共振（NMR）d.单晶单晶X射线衍射（射线衍射（SXRD）e.旋光光谱（旋光光谱（ORD）f.圆二色谱（圆二色谱（CD）第15页 g.g.其它方法其它方法 对照品法对照品法依据对照品构型推定依据对照品构型推定 化学关联法化学关联法利用合成工艺分析利用合成工艺分析 比如，比如，左旋西替利嗪构型确证：左旋西替利嗪构型确证：手手性性柱柱色色谱谱定定位位（与与对对照照品品对对比比)、比比旋旋度度数数据据、光学纯度分析光学纯度分析第16页 晶型研究晶型研究:a.a.粉末粉末X-X-射线衍射法射线衍射法 b.b.红外光谱法、拉曼光谱法红外光谱法、拉曼光谱法 c.c.熔点法熔点法 d.d.热分析热分析 e.e.光学显微镜法光学显微镜法 第17页 无对照品和文件报道：无对照品和文件报道：考考查查不不一一样样结结晶晶条条件件下下（溶溶剂剂、温温度度、结结晶晶速速率率等等）制制备备样品熔点、红外光谱、粉末样品熔点、红外光谱、粉末X X射线衍射等射线衍射等;有对照品有对照品:对对比比自自制制药药品品与与已已上上市市药药品品熔熔点点、红红外外光光谱谱图图、粉粉末末X X射线衍射图谱等射线衍射图谱等;有文件报道有文件报道:对对文文件件资资料料进进行行分分析析，选选取取能能够够准准确确反反应应产产品品晶晶型型测测试试项项目目;第18页 结晶水结晶水/结晶溶剂研究结晶溶剂研究:a.a.元素分析元素分析 b.b.热分析热分析 c.c.干燥失重、水分检验干燥失重、水分检验 d.d.单晶单晶X-X-射线衍射射线衍射第19页 创新药：创新药：在在干干燥燥失失重重、水水分分测测定定研研究究基基础础上上，经经过过热热分分析析、元元素素分分析等确证样品分子中结晶水析等确证样品分子中结晶水/结晶溶剂数量结晶溶剂数量;已上市药品：已上市药品：采采取取适适当当分分析析方方法法对对样样品品进进行行分分析析，以以确确证证其其结结晶晶水水/结结晶溶剂情况与已上市产品一致晶溶剂情况与已上市产品一致;第20页4.结构确证研究普通要求结构确证研究普通要求第21页 对测试样品和对照样品要求：对测试样品和对照样品要求：测试样品测试样品:a.精制方法精制方法 b.纯度要求纯度要求 大于大于99.0%，杂质含量应小于，杂质含量应小于0.5%；对于手性药品，应增加对对映体、非对映体纯度要求，对于手性药品，应增加对对映体、非对映体纯度要求，普通普通 不低于不低于99.5%。第22页对照品对照品:a.正当起源证实正当起源证实 购得标准品购得标准品(已经有国家标准药品已经有国家标准药品)市售原料药市售原料药 市售制剂中提取得到原料药市售制剂中提取得到原料药 从正规试剂企业购得试剂等从正规试剂企业购得试剂等 b.精制方法精制方法 c.纯度检验纯度检验 第23页对图谱、数据要求对图谱、数据要求附附图图应应为为原原图图复复印印件件或或照照片片;图图谱谱及及图图谱谱上上标标识识、数数据据应应清清楚楚，并并有有完完整整检检测测日日期期、各各项项参参数数、测测试试条条件件、仪仪器器型型号号及及样样品品编编号号等等统统计。计。各各项项检检测测数数据据应应按按要要求求列列表表说说明明，注注明明其其次次序序。有有对对照照品品应应将将测测试试品品和和对对照照品品同同一一波波谱谱数数据据在在一一个个表表中中对对比比列列出出。如如有有可可作作参参考考文文件件数据，也可列在同一表中。数据，也可列在同一表中。质谱应附离子裂解图。质谱应附离子裂解图。第24页(二二)对不一样类别药品对不一样类别药品结构确证要求结构确证要求未知结构化合物：推论结构未知结构化合物：推论结构已知结构化合物：验证结构已知结构化合物：验证结构第25页 未在国内外上市销售原料药未在国内外上市销售原料药 按全新化学单体要求：推论结构按全新化学单体要求：推论结构 a.完成必要各项测试完成必要各项测试;b.应提供充分试验图谱和数据应提供充分试验图谱和数据;c.按新化合物要求进行图谱解析和综按新化合物要求进行图谱解析和综合解析合解析;如有参考文件资料，可提供作参考。如有参考文件资料，可提供作参考。第26页 已在国外上市销售但还未在国内销已在国外上市销售但还未在国内销售原料药或已经有国家标准原料药售原料药或已经有国家标准原料药按已知化学结构药品：验证结构按已知化学结构药品：验证结构 能够使用对照品能够使用对照品 能够参考文件能够参考文件 第27页a.有合格对照品化合物：有合格对照品化合物：提提供供测测试试样样品品和和对对照照品品在在完完全全相相同同条条件件和和同同一一仪仪器器上上测测得得各各项项图图谱谱和和数数据据，完完成成所所需需各各项项目目测测试试，若若二二者者完完全全相相同同，并并对对主主要要波波谱谱讯讯号号和和测测试试数数据据进进行行了了正正确确解解析，即可得出二者化学结构一致结论。析，即可得出二者化学结构一致结论。第28页 b.有详细文件数据化合物：有详细文件数据化合物：可可对对结结构构确确证证研研究究内内容容、方方法法提提供供线线索索，并并为为解解析析提提供供参参考考，不不过过不不能能作作为为结结构构确确证证研研究究充充分分证证据据，仍仍需需要进行较为详尽图谱解析和综合解析。要进行较为详尽图谱解析和综合解析。第29页 c.无对照品和文件数据化合物：无对照品和文件数据化合物：除除了了目目标标化化合合物物结结构构外外，缺缺乏乏其其它它支支持持性性资资料料，所所以以标标准准上上应应按按全全新新化化学学单单体体要要求求进进行行全全方方面面研研究究，提提供供充充分分试试验验图图谱谱和和数数据据，可可结结合合其其它它研研究究工工作作（比比如合成工艺路线确实定）以深入推论化合物结构。如合成工艺路线确实定）以深入推论化合物结构。第30页(三三)对特殊化学结构药对特殊化学结构药品结构确证要求品结构确证要求第31页1.立体异构体药品立体异构体药品 立体异构体：立体异构体：光学异构体光学异构体 a.对映异构体对映异构体 b.非对映异构体非对映异构体 几何异构体（顺、反异构体）几何异构体（顺、反异构体）第32页 手性药品手性药品-绝对构型和相对构型绝对构型和相对构型 a.单一对映体单一对映体-绝对构型绝对构型 比旋度测定比旋度测定 手性柱色谱手性柱色谱(手性手性HPLC和和GC)核磁共振核磁共振 单晶单晶X-衍射衍射 圆二色谱圆二色谱 旋光光谱旋光光谱第33页b.消旋体消旋体-有多个手性中心时要有多个手性中心时要求确定相对构型求确定相对构型;c.立体异构混合物立体异构混合物-确定异构体确定异构体组成和百分比组成和百分比;第34页“手性药品申报资料及审评关键手性药品申报资料及审评关键点点”(药审中心药审中心)应应注注意意确确证证产产品品立立体体构构型型。可可依依据据手手性性中中心心多多少少、文文件件数数据据是是否否充充分分、对对照照品品有有没没有有来来选选择择适适当当确确实实证证方方法法，必必要时可采取单晶要时可采取单晶X射线衍射进行确证。射线衍射进行确证。比比旋旋度度是是必必须须检检测测项项目目之之一一，已已知知起起始始原原料料构构型型和和化化学学合合成成方方法法立立体体选选择择性也可作为依据之一。性也可作为依据之一。第35页2.含有多晶型药品含有多晶型药品 晶型晶型:是指结晶物质晶格内分子排列形式。是指结晶物质晶格内分子排列形式。多晶型物质晶格内部分子间力差异可多晶型物质晶格内部分子间力差异可能引发药品各种理化性质改变，能引发药品各种理化性质改变，主要主要对熔点、溶解度及溶出速率、稳定性、对熔点、溶解度及溶出速率、稳定性、有效性影响有效性影响。第36页重点：重点：以适宜方法取得药品晶型数据。以适宜方法取得药品晶型数据。惯用方法：惯用方法：粉末粉末X-衍射法衍射法 红外吸收光谱法红外吸收光谱法 熔点熔点 热分析热分析 光学显微镜光学显微镜第37页 创新药品创新药品 a.不一样结晶条件下（溶剂、温度、不一样结晶条件下（溶剂、温度、结晶速率等）晶型一致性；结晶速率等）晶型一致性；b.不一样晶型是否影响药品活性和毒不一样晶型是否影响药品活性和毒性等性等;第38页 结构已知仿制药品结构已知仿制药品 a.力争与被仿制品保持一致；力争与被仿制品保持一致；尤尤其其是是被被仿仿制制药药为为晶晶型型选选择择性性药药品品，且且各各晶晶型型理理化化性性质质及及生生物物药药剂剂学学性性质质有有显显著著差差异异仿仿制制药药品品，要要重重点点确确定定与与被被仿仿制制品品种种晶晶型型完完全全一一致致性性（熔熔点点、红红外外吸吸收收光光谱谱、粉粉末末X射射线线衍衍射图等射图等)。b.重重点点关关注注难难溶溶性性固固体体口口服服制制剂剂晶型研究；晶型研究；第39页那格列奈晶型研讨会纪要那格列奈晶型研讨会纪要 （药审中心）（药审中心）在在临临床床前前，那那格格列列奈奈晶晶型型应应到到达达以以下下要求：要求：a.a.红红外外光光吸吸收收图图谱谱,应应能能清清楚楚分分辨辨出出晶晶型型特特征征吸吸收收峰峰，即即在在1714cm1714cm-1-1、1649cm1649cm-1-1、1542cm1542cm-1-1、1214cm1214cm-1-1处有强吸收峰；处有强吸收峰；b.b.粉粉末末-射射线线衍衍射射图图谱谱中中在在=4.82-=4.82-4.94.9处处不不得得出出现现型型衍衍射射峰峰，同同时时在在=19.6=19.6与与19.919.9两两个个强强衍衍射射峰峰应应能能够够识识别别（应分离）（应分离）c.c.熔点控制在熔点控制在137-141137-141范围内，熔距限定范围内，熔距限定为为 。第40页 在临床期间在临床期间,对那格列奈晶型进行以下工作对那格列奈晶型进行以下工作:a.a.熔点熔点:测定本品测定本品H H晶型与晶型与B B晶型分别晶型分别 以不一样百分以不一样百分比混合后熔点比混合后熔点,并进行差热分析试验工作并进行差热分析试验工作;b.b.溶解度溶解度:对对H H、B B晶型及熔点为晶型及熔点为170C170C左右第三左右第三种晶型分别进行溶解度测试种晶型分别进行溶解度测试;c.c.粉末粉末X-X-射线衍射谱射线衍射谱:对当前原料中在对当前原料中在19.619.6、19.9(19.9()衍射情况作深入研究衍射情况作深入研究;d.IR:d.IR:完成使用完成使用IRIR法控制法控制H H晶型中夹杂晶型中夹杂B B晶型方晶型方法学研究法学研究;与粉末与粉末X-X-射线衍射方法进行比较研究射线衍射方法进行比较研究,以提供制订生产用质量标准依据。以提供制订生产用质量标准依据。第41页3.合成多肽类药品合成多肽类药品氨基酸分析氨基酸分析（证实多肽组成是否正确）（证实多肽组成是否正确）；质谱测定（质谱测定（提供相对分子质量及序列信息）；提供相对分子质量及序列信息）；序列分析以及肽图测绘等；序列分析以及肽图测绘等；紫外：紫外：对含有生色团结构小肽有一定测试意义；对含有生色团结构小肽有一定测试意义；红外：红外：适合用于小肽（含三个氨基酸肽）、拟肽等；适合用于小肽（含三个氨基酸肽）、拟肽等；核磁共振：核磁共振：可对小肽结构提供部分信息；可对小肽结构提供部分信息；其它方法：其它方法：HPLC、比旋度测定等。、比旋度测定等。第42页药品结构中有半胱氨酸，应明确其药品结构中有半胱氨酸，应明确其状态（氧化态或还原态）；状态（氧化态或还原态）；药品结构中存在二硫键，应明确二硫药品结构中存在二硫键，应明确二硫键正确连接点；键正确连接点；结合合成工艺对中间体研究，对终产结合合成工艺对中间体研究，对终产品结构进行确证。品结构进行确证。第43页4.多糖类药品多糖类药品多糖结构描述包含多糖结构描述包含:o多糖分子量范围；多糖分子量范围；o多糖单糖组分；多糖单糖组分；o单糖连接点类型；单糖连接点类型；o单糖和糖苷键构型；单糖和糖苷键构型；o重复单位重复单位;第44页o确证方法：确证方法：单糖分离、判定：单糖分离、判定：纸色谱法、纸色谱法、TLC、HPLC、气、气-质联用技术等；质联用技术等；多糖相对分子量及分子量分布测定：多糖相对分子量及分子量分布测定：凝胶凝胶色谱法；色谱法；糖苷键连接方式及糖苷键位置：糖苷键连接方式及糖苷键位置：红外、核红外、核磁共振、化学反应后产物分析等磁共振、化学反应后产物分析等；第45页5.多组分药品多组分药品明明确确各各组组分分组组成成百百分分比比，对对影影响响药药效效和和毒毒性性主要成份主要成份进行结构确证。进行结构确证。可可使使用用经经典典提提取取方方法法或或其其它它分分离离技技术术，如如制制备备色色谱谱（TLC，HPLC），分分离离得得到到主主要要药药效效成成份份单单体体，按按单单体体项项目目要要求求进进行行化化学学结结构构确确证。证。在在组组分分多多，含含量量少少，难难于于得得到到单单体体时时，可可使使用用联联机机分分析析技技术术，如如气气一一质质联联用用（GCMS），液液质质联联用用（LCMS），气气付付利利叶叶红红外外联联用用（GCFTIR），质质质质联联用用（MSMS），辅助组分结构验证及定量分析。），辅助组分结构验证及定量分析。第46页6.不含金属元素有机盐类或不含金属元素有机盐类或复合物复合物应同时提供应同时提供成盐前后成盐前后两套波谱和试验数据。两套波谱和试验数据。对于一些波谱测定有困难或不易说明其结构对于一些波谱测定有困难或不易说明其结构盐或复合物，可测定药品酸根或碱基波谱，并盐或复合物，可测定药品酸根或碱基波谱，并结合其它试验项目进行确证。结合其它试验项目进行确证。第47页7.金属盐类和络合物金属盐类和络合物除除通通常常要要求求各各项项测测试试外外，还还应应提提供供确确证证分分子子中中金金属属元元素素种种类类、存存在在形形式式和和含含量量相相关关图图谱谱和分析数据。和分析数据。不不适适于于或或不不能能测测试试金金属属盐盐本本身身项项目目，能能够够用用成盐前酸分子或配位体对应测试结果进行佐证。成盐前酸分子或配位体对应测试结果进行佐证。第48页8.半合成化合物半合成化合物分分子子母母核核结结构构为为已已知知并并能能够够确确证证其其原原分分子子母母核核结结构构在在合合成成过过程程中中未未发发生生改改变变，可可适适当当简简化化对对母母核核部部分分结结构构确确实实证证工工作作。重重点点对对新新引引入入基基团团进进行行结结构构确确证证，能能够够结结合合原原料料结结构构和合成路线进行论证和说明。和合成路线进行论证和说明。如如包包括括构构型型确确证证，若若母母核核手手性性中中心心构构型型没没有有改改变变时时，重重点点在在于侧链和取代基中新引入手性中心构型确定。于侧链和取代基中新引入手性中心构型确定。第49页(四四)各项波谱和测试技术各项波谱和测试技术要求要求第50页1.1.红外吸收光谱红外吸收光谱(IR)(IR)基本原理：基本原理：分子中化学键振动能级跃迁。分子中化学键振动能级跃迁。主要应用：主要应用：a.a.判定化合物结构判定化合物结构 有对照品、标准图谱有对照品、标准图谱 b.b.推测化合物结构推测化合物结构 确定特征官能团、区分晶型等确定特征官能团、区分晶型等第51页 技术要求：技术要求：a.按药典要求方法校正和检定仪器；按药典要求方法校正和检定仪器；b.正确选择测试方法和条件正确选择测试方法和条件 固体样品首选溴化钾压片法；固体样品首选溴化钾压片法；离子交换离子交换-氯化钾压片；氯化钾压片；晶型改变晶型改变-糊法；糊法；c.准确、合理、充分图谱解析准确、合理、充分图谱解析;d.按要求格式列表和撰写资料按要求格式列表和撰写资料;第52页 资料撰写格式资料撰写格式 仪器仪器 测试条件测试条件 仪器校正和检定仪器校正和检定 数据表数据表 解析解析吸收峰(cm-1)强度振动类型基团第53页 2.2.紫外吸收光谱紫外吸收光谱(UV)(UV)基本原理：电子跃迁基本原理：电子跃迁 主主要要应应用用：推推测测共共轭轭体体系系骨骨架架结结构构（发色团、助色团）（发色团、助色团）紫外光谱紫外光谱定性定性 吸收系数吸收系数定量定量第54页o技术要求技术要求 a.按药典要求方法校正和检定仪器；按药典要求方法校正和检定仪器；b.通常要求三种溶剂：中性、通常要求三种溶剂：中性、0.1N HCl、0.1N NaOH；c.要求定量，准确计算摩尔吸收系数；要求定量，准确计算摩尔吸收系数；d.归属主要吸收谱带；归属主要吸收谱带；e.数据列表说明；数据列表说明；第55页o 资料撰写格式资料撰写格式 仪器仪器 测试条件测试条件 仪器校正和检定仪器校正和检定 数据表数据表解析解析溶剂max值基团和吸收带第56页3.3.核磁共振氢谱核磁共振氢谱(1H-NMR)基本原理：基本原理：利用原子核核自旋现象，经过一定利用原子核核自旋现象，经过一定 振动振动频率电磁波照射时，原子核吸收电频率电磁波照射时，原子核吸收电 磁波从低能态向高能态跃迁，即核磁共振。磁波从低能态向高能态跃迁，即核磁共振。主要应用主要应用 可提供供试品中氢原子数目、周围化学可提供供试品中氢原子数目、周围化学环境、相互间关系、空间排列等信息。环境、相互间关系、空间排列等信息。第57页技术要求技术要求 a.应使用应使用200MHz以上高分辨以上高分辨NMR仪。仪。b.对对各各项项测测试试条条件件应应有有明明确确、详详尽尽说说明明，如如仪仪器型号、规格、溶剂、内标。器型号、规格、溶剂、内标。c.对分子中全部对分子中全部H原子均要有明确解析和归属。原子均要有明确解析和归属。d.对对复复杂杂结结构构化化合合物物，应应考考虑虑采采取取适适当当其其它它技技术加以佐证。术加以佐证。第58页 资料撰写格式资料撰写格式 仪器仪器 溶剂、内标溶剂、内标 给出原子编号分子结构式给出原子编号分子结构式 数据表数据表(如有对照品或文件数据能够对比列入表中)解析解析原子序号化学位移质子数多重性J值o对应质子第59页4.4.核磁共振碳谱核磁共振碳谱(13C-NMR)基本原理基本原理：利用原子核核自旋现象，经过一定利用原子核核自旋现象，经过一定 振动频率电磁波照射时，原子核吸收电振动频率电磁波照射时，原子核吸收电 磁波从低能态向高能态跃迁，即核磁共振。磁波从低能态向高能态跃迁，即核磁共振。主要应用主要应用:可提供供试品中碳原子数目、所处可提供供试品中碳原子数目、所处不一样化学环境信息。不一样化学环境信息。第60页技术要求技术要求a.对各项测试条件应有明确、详尽说明，如对各项测试条件应有明确、详尽说明，如仪器型号、规格、溶剂、内标。仪器型号、规格、溶剂、内标。b.在图谱复杂时，应使用质子噪声去偶或偏共在图谱复杂时，应使用质子噪声去偶或偏共振去偶技术，使图谱简化。振去偶技术，使图谱简化。c.对分子中全部对分子中全部C原子均要有明确解析和归属。原子均要有明确解析和归属。d.对对复复杂杂结结构构化化合合物物，可可与与类类似似结结构构化化合合物物化化学位移进行计算比较，确定合理结构。学位移进行计算比较，确定合理结构。第61页 资料撰写格式资料撰写格式 仪器仪器 溶剂溶剂 给出碳原子编号分子结构式给出碳原子编号分子结构式 数据表数据表(如有对照品或文件数据能够对比列入表中)解析解析碳原子序号化学位移碳原子类型第62页5.其它核磁共振谱其它核磁共振谱 DEPTDEPT谱谱:可区分碳原子类型可区分碳原子类型;1 1H H1 1Hcosy:Hcosy:能能够够显显示示相相隔隔2 23 3键键相相互互之之间间存在偶合质子对信息存在偶合质子对信息;C-C-Hcosy Hcosy(HMQC(HMQC,异异核核多多量量子子相相关关谱谱):):能能够了解分子中够了解分子中C-HC-H联结情况联结情况;第63页 HSQC(HSQC(异核单量子相关谱异核单量子相关谱):):用于测定用于测定1 1H-H-1313C C相关相关信息，能够直接明确信息，能够直接明确C C、H H之间连接关系之间连接关系;HMBC(HMBC(异核多重键相关谱异核多重键相关谱):):能够显示能够显示1 1H H、1313C C 之间之间远程偶合信息，即相隔二键和三键远程偶合信息，即相隔二键和三键1 1H H、1313C C之间相关信之间相关信号号;解析化合物中存在结构单元，推测化合物中各官解析化合物中存在结构单元，推测化合物中各官能团、结构单元之间连接关系能团、结构单元之间连接关系;1919F F、3131P P等等:可提供对应元素种类及数目、在分子可提供对应元素种类及数目、在分子中所处化学环境等信息中所处化学环境等信息;第64页6.质谱(MS)基本原理：基本原理：将将气气体体分分子子经经电电子子流流轰轰击击,使使分分子子中中电电子子成成为为带带正正电电荷荷分分子子离离子子,而而后后裂裂解解成成一一系系列列碎碎片片离离子子,再再经经过过磁磁场场使使不不一一样样质质荷荷比比正正离离子子分分离离并并统统计计其其相相对对强强度度,画出质谱图。画出质谱图。第65页 主要应用：主要应用：提提供供分分子子离离子子峰峰、碎碎片片峰峰、丰丰度度等等信信息息，能能够够确确定定分子量、分子式以及推测部分结构单元。分子量、分子式以及推测部分结构单元。对对含含有有同同位位素素元元素素(如如ClCl、BrBr等等)药药品品,利利用用同同位位素素簇簇丰丰度度比比，可可推推断断药药品品中中部部分分元元素素种种类类、数数量量，乃乃至至分分子子式、裂解方式等。式、裂解方式等。第66页技术要求技术要求:a.应应尽尽可可能能设设法法取取得得化化合合物物分分子子离离子子峰峰。当当用用EI法法不不能能出出现现分分子子离离子子峰峰时时，可可试试用用其其它它电电离离源源，如如CI，FAB，FI，FD等。等。b.所所获获数数据据按按要要求求列列表表，并并对对主主要要碎碎片片离离子子峰峰产产生生进进行解释，提供离子裂解图。行解释，提供离子裂解图。c.高高分分辨辨质质谱谱不不能能反反应应药药品品纯纯度度和和结结晶晶水水，结结晶晶溶溶剂剂，残留溶剂情况。残留溶剂情况。第67页 资料撰写格式资料撰写格式 仪器仪器 测试条件测试条件 数据表数据表裂解图裂解图 解析解析 M/Z 相对丰度相对丰度 碎片离子碎片离子第68页7.元素分析 主要应用：主要应用：确定元素组成、分子式确定元素组成、分子式;除氧元素外，其余各种元素普通均能准确测定除氧元素外，其余各种元素普通均能准确测定其含量。其含量。能够反应结晶水能够反应结晶水/结晶溶剂、成盐化合物酸根结晶溶剂、成盐化合物酸根和碱基等。和碱基等。C C、H H、N N元素可采取自动元素分析仪测定，其元素可采取自动元素分析仪测定，其它元素可采取适宜物理或化学方法测定。它元素可采取适宜物理或化学方法测定。第69页 技术要求：技术要求：a.应应详详细细说说明明使使用用仪仪器器、测测定定方方法法及及条条件件。尤其是对测试样品预处理方法、条件。尤其是对测试样品预处理方法、条件。b.同同一一样样品品测测定定两两次次，两两次次试试验验数数据据同同时时列列出，不取平均值。出，不取平均值。c.应应给给出出计计算算理理论论值值所所依依据据分分子子式式，包包含含结结晶晶水水（或或结结晶晶溶溶剂剂)。列列表表比比较较实实测测值值与与理理论论值值（普普通通要要求求误误差差不不超超出出0.30.3），初初步步判判定定供供试品与目标化合物分子组成是否一致。试品与目标化合物分子组成是否一致。d.d.附测试汇报单复印件。附测试汇报单复印件。第70页8.热分析热分析 基本原理：基本原理：采采取取程程序序控控温温下下，准准确确统统计计待待测测物物质质理理化化性性质质与与温温度度关关系系，研研究究其其受受热热过过程程中中晶晶型型转转变变、熔熔融融、升升华华等等物物理理改改变变和和脱脱水水、热热分分解解、氧氧化化、还原等化学改变。还原等化学改变。第71页 主要应用：主要应用：差差示示扫扫描描量量热热法法（DSC):测测定定熔熔点点、结结晶水晶水/结晶溶剂、考查晶型等。结晶溶剂、考查晶型等。热热重重法法（TGA):测测定定结结晶晶水水、吸吸附附水水和和结晶溶剂、分解温度等。结晶溶剂、分解温度等。第72页 技术要求：技术要求：a.应应说说明明使使用用仪仪器器型型号号、参参数数设设定定值值，包包含含升升温温度速度、样品重量、温度范围。度速度、样品重量、温度范围。b.供供试试品品与与对对照照品品应应在在同同一一仪仪器器、相相同同条条件件下下测测定。定。c.差差热热分分析析曲曲线线表表示示：纵纵坐坐标标为为热热流流率率（dp/dt），恒恒坐坐标标为为温温度度（）。气气体体普普通通为为氮氮气气，流流速速为为40ml/min。热重分析曲线表示：纵坐标为重量（热重分析曲线表示：纵坐标为重量（mg）或重）或重量百分数，横坐标为温度（量百分数，横坐标为温度（），气体普通为氮气，），气体普通为氮气，流速为流速为40ml/min。第73页 资料撰写格式资料撰写格式 仪器仪器 测试条件测试条件 测试结果和讨论测试结果和讨论第74页9.X9.X射线衍射射线衍射 粉末粉末X-X-射线衍射射线衍射 主要应用主要应用:a.a.固体状态下单一化合物判别固体状态下单一化合物判别 b.b.晶型确定晶型确定 c.c.晶态与非晶态物质判断等晶态与非晶态物质判断等 第75页 单晶单晶X射线衍射射线衍射 主要应用主要应用:a.化合物骨架结构信息化合物骨架结构信息 b.化合物相对或绝对构型化合物相对或绝对构型 c.构象及差向异构构象及差向异构 d.盐键及配位键盐键及配位键 f.结晶水结晶水/溶剂溶剂第76页资料撰写格式资料撰写格式 仪器仪器 测试条件测试条件 结构解析结构解析 晶体学参数晶体学参数 结构测定方法结构测定方法 结构数据结构数据 结构图结构图 结论结论第77页10.10.综合解析综合解析 综合解析普通过程综合解析普通过程:a.a.确定化合物分子式确定化合物分子式 元素分析元素分析 质谱法（尤其是高分辨质谱）质谱法（尤其是高分辨质谱）综合各种谱图提供碳、氢等原子数综合各种谱图提供碳、氢等原子数b.b.依据分子式计算不饱和度依据分子式计算不饱和度c.c.确定分子中存在主要官能团和结构单元确定分子中存在主要官能团和结构单元d.d.明确各官能团、结构单元连接方式明确各官能团、结构单元连接方式e.e.对构型、晶型、结晶水对构型、晶型、结晶水/结晶溶剂进行分析结晶溶剂进行分析第78页 技术要求：技术要求：a.a.有对照品有对照品 样品和对照品测试结果是否一致样品和对照品测试结果是否一致 波谱信号归属波谱信号归属 b.b.无对照品无对照品 详细解析、正确归属详细解析、正确归属 参考文件能够作为主要参考资料参考文件能够作为主要参考资料第79页 资料撰写要求：资料撰写要求：简明扼要简明扼要 有机有机 合理合理 深入深入第80页稳定性研究稳定性研究资料撰写资料撰写 基本要求基本要求-申报资料申报资料14第81页申报资料格式和内容申报资料格式和内容 一一.供试品起源及批号供试品起源及批号 二二.试验内容试验内容 1.加速试验加速试验(402、RH755)2.长久试验长久试验(252、RH6010 三三.考查项目考查项目 四四.试验结果试验结果 五五.结论与讨论结论与讨论 六六.附图附图 第82页(一一)稳定性研究基本内容稳定性研究基本内容和特点和特点影响原因试验影响原因试验加速试验加速试验长久留样试验长久留样试验 第83页三种试验比较三种试验比较 时时 间间 条条 件件o目o影响原因试验 10天天o最为猛烈o初步确定药品性质及包装容器和材料，估测加速与长久留样应采取温度和湿度。加速试验加速试验6个月个月o较为猛烈o初步评定正常条件下放置更长时间稳定性。o长久试验o时间最长，贯通研究工作一直o模拟上市产品储存条件o是确定使用期、储存条件和包装材料最终依据。第84页 1.影响原因试验影响原因试验 新药新药:原料药和制剂均提议进行该项试验，制剂稳原料药和制剂均提议进行该项试验，制剂稳定性试验能够在处方筛选和工艺设计过程中进定性试验能够在处方筛选和工艺设计过程中进行行;已经有国家标准品种已经有国家标准品种:暂不要求，但勉励研发企业进行制剂影响原暂不要求，但勉励研发企业进行制剂影响原因考查因考查;第85页(1)(1)试验目标试验目标 a.a.考查药品在极端条件下固有稳定性，了解其降考查药品在极端条件下固有稳定性，了解其降解路径和可能降解产物；同时得到降解产物也可用解路径和可能降解产物；同时得到降解产物也可用于相关杂质检验方法适用性评定。于相关杂质检验方法适用性评定。b.为制剂工艺筛选、包装材料和容器选择、贮存为制剂工艺筛选、包装材料和容器选择、贮存条件确实定等提供依据。条件确实定等提供依据。c.为加速试验和长久试验应采取温度和湿度等条为加速试验和长久试验应采取温度和湿度等条件提供依据。件提供依据。第86页(2)(2)试验普通要求试验普通要求 经典影响原因试验经典影响原因试验:光照光照高温高温高湿高湿其它：氧化、其它：氧化、pH影响等。影响等。第87页原料药原料药:将一批供试品置适宜容器中将一批供试品置适宜容器中(量瓶或培养皿量瓶或培养皿),摊成摊成5mm厚薄层厚薄层(疏疏松原料药摊成松原料药摊成10mm厚薄层厚薄层)进行试验。进行试验。制剂制剂:除去内包装最小制剂单位除去内包装最小制剂单位,分分散为单层置适宜条件下进行。散为单层置适宜条件下进行。如试验结果不明确如试验结果不明确,应加试应加试2个批号样品。个批号样品。第88页 光照试验光照试验 供试品放在装有日光灯光照箱内供试品放在装有日光灯光照箱内,于照度于照度 4500lux500lux下放置下放置10天，于天，于 第第5天和第天和第10 天取样。天取样。ICH Q1B要求样品总照度不低于要求样品总照度不低于 1.2*106Lux.hr，近紫外能量不低于近紫外能量不低于 200w.hr/m2。第89页 高温试验高温试验 60下放置下放置10天，于第天，于第5天和第天和第10天取样，检测天取样，检测评价指标。评价指标。若供试品有显著改变（如含量下降若供试品有显著改变（如含量下降5%），则在），则在40下同法进行试验。下同法进行试验。若若60无显著改变，不再进行无显著改变，不再进行40试验。试验。ICH要求试验温度为要求试验温度为:高于加速试验温度高于加速试验温度10，如如50、60进行。进行。第90页 高湿试验高湿试验 在在25、905RH下放置下放置10天，于第天，于第5天和第天和第10天取样，指标可包含吸湿增重项。天取样，指标可包含吸湿增重项。若吸湿增重若吸湿增重5%以上，则在以上，则在25、75 5RH下同法进行试验；若吸湿增重下同法进行试验；若吸湿增重5%以下，以下，且其它考查项目符合要求，则不再进行此项试且其它考查项目符合要求，则不再进行此项试验。验。ICH要求试验湿度为要求试验湿度为:高于加速试验高于加速试验75%RH湿湿度进行。度进行。第91页 热循环（冻融）试验热循环（冻