乳腺癌组织lncRNA CASC2、miR-532-3p表达水平与患者术后5年内生存的相关性.pdf

【】./.肿瘤防治专题乳腺癌组织 、表达水平与患者术后 年内生存的相关性卜德永赵连周应强刘亮王帅基金项目:山西省卫生健康委科研课题()作者单位:山西省大同市第五人民医院/山西大同大学第一临床医学院普通外科通信作者:周应强:.【摘 要】目的 探究乳腺癌()组织长链非编码 癌易感性候选基因()、微小()表达与患者术后 年内生存的相关性 方法 选择 年 月 年 月大同市第五人民医院普通外科收治 患者 例术中收集 组织及癌旁正常组织荧光定量 法检测 组织和癌旁正常组织中、表达对 患者术后进行为期 年的随访记录患者 年内生存和死亡情况 比较癌旁正常组织和 组织 及 表达 组织中 和 表达在不同临床病理特征中的差异生存组和死亡组临床病理特征和 组织中 及 表达的差异 分析 组织 、表达的相关性 组织中 和 表达与术后 年内生存的关系影响 患者术后 年内生存的因素、对 患者术后 年内生存的预测价值 结果 组织中 表达水平低于癌旁正常组织 表达水平高于癌旁正常组织(/././.)肿瘤直径、分期期、肿瘤低分化、淋巴结转移者比例 低表达组高于高表达组而 低表达组低于高表达组(:/./.、./.、./.、./.:/./.、./.、./.、./.)例 患者术后随访 年生存 例(生存组)死亡 例(死亡组)肿瘤直径、分期期、肿瘤低分化、淋巴结转移者比例及 表达水平死亡组高于生存组而 表达水平死亡组低于生存组()/./.、./.、./.、./.、./.、./.组织中 与 表达呈负相关(/./.)高表达组 患者术后 年内总生存率为.(/)高于 低表达组.(/)(/./.)高表达组 患者术后 年内总生存率为.(/)低于 低表达组.(/)(/./.)肿瘤直径、分期期、肿瘤低分化、有淋巴结转移、低表达、高表达均是影响 患者术后 年内生存的独立危险因素().(.)、.(.)、.(.)、.(.)、.(.)、.(.)、及二者联合预测 患者术后 年内生存的 分别为.、.、.二者联合预测的 大于、各自单独预测的(/./.、./.)结论 组织中 表达下调 表达上调且术后 年内死亡的 患者较存活患者变化更显著二者表达与临床病理特征相关对预测 患者术后 年内生存情况价值较高【关键词】乳腺癌长链非编码 癌易感性候选基因 微小 术后 年内生存相关性【中图分类号】.【文献标识码】./:():.【】To explore the correlation between the expression of long noncoding RNA cancer susceptibility candidate 2(lncRNA CASC2),microRNA5323p(miR5323p)in breast cancer(BC)tissue and the survival of patients疑难病杂志 年 月第 卷第 期 .within 5 years after surgery.A total of 127 BC patients admitted to Department of General Surgery,the Fifth Peoples Hospital of Datong City from January 2015 to June 2018 were selected,BC tissues and paracancer normal tissues werecollected during the operation,and the expressions of lncRNA CASC2 and miR5323p in BC tissues and paracancer normaltissues were detected by fluorescence quantitative PCR;the BC patients were followed up for 5 years after surgery,the survival and death of the patients within 5 years were recorded.The expressions of lncRNA CASC2 and miR5323p in paracancer normal tissues and BC tissues,the expression differences of lncRNA CASC2 and miR5323p in BC tissues in different clinicopathological characteristics,the clinicopathological characteristics and the expressions of lncRNA CASC2 andmiR5323p in BC tissues of survival group and death group were compared.Analyze the correlation between the expressionof lncRNA CASC2 and miR5323p in BC tissue,the relationship between the expression of lncRNA CASC2 and miR5323pin BC tissue and postoperative 5year survival,the factors affecting postoperative 5year survival of BC patients,and thepredictive value of lncRNA CASC2 and miR5323p for postoperative 5year survival of BC patients.The expression level of lncRNA CASC2 in BC tissues was significantly lower than that in paracancer normal tissues,and the expression level of miR5323p in BC tissues was significantly higher than that in paracancer normal tissues(t/P=38.239/0.001,49.406/0.001).The proportion of patients with tumor diameter 2 cm,TNM stage,low differentiation of tumors andlymph node metastasis in lncRNA CASC2 low expression group were higher than in the high expression group,while themiR5323p low expression group was lower than that in the high expression group(lncRNA CASC2:2/P=17.361/0.001,17.052/0.001,14.694/0.001,13.173/0.001,miR5323p:2/P=10.733/0.001,9.813/0.002,10.134/0.001,7.444/0.006).127 BC?patients were followed up for 5 years after surgery,without loss of followup,99 cases survived(survival group),28 casesdied(death group).The proportion of patients with tumor diameter 2 cm,TNM stage,low differentiation of tumors,lymph node metastasis and miR5323p expression level in the death group were higher than in the survival group,while thelncRNA CASC2 expression level in the death group was lower than in the survival group 2(t)/P=5.211/0.022,?27.149/0.001,27.990/0.001,4.590/0.032,19.155/0.001,10.818/0.001.LncRNA CASC2 was negatively correlated withmiR5323p expression in BC tissues(r/P=0.561/0.001).The 5year overall survival rate of BC patients after surgery in?the lncRNA CASC2 high expression group was 89.23%(58/65)higher than that in the lncRNA CASC2 low expression group66.13%(41/62)(2/P=9.854/0.002);the 5year overall survival rate of BC patients after surgery in the miR5323p high ex?pression group was 65.57%(40/61)lower than that in the miR5323p low expression group 89.39%(59/66)(2/P=10.466/?0.001).Tumor diameter 2 cm,TNM stage,low differentiation of tumors,lymph node metastasis,lncRNA CASC2 lowexpression,and miR5323p high expression were all independent risk factors affecting the survival of BC patients within 5years after surgeryHR(95%CI)=2.255(1.192 4.263),2.143(1.252 3.666),3.089(1.386 6.887),2.219(1.223 4.026),2.606?(1.174 5.788),2.855(1.592 5.120).The area under curve(AUC)of lncRNA CASC2,miR5323p,their combined in predicting postoperative 5year survival of BC patients was 0.840,0.852 and 0.908,respectively,AUC predicted by the combinationof the two methods was higher than that predicted by lncRNA CASC2 and miR5323p separately(Z/P=2.246/0.025,?2.033/0.042).The expression of lncRNA CASC2 is downregulated and the expression of miR5323p is upregulated in BC tissues,and the changes in BC patients who died within 5 years after surgery are more significant than thosewho survived.The expressions of both are correlated with clinicopathological characteristics,and are of high value in predicting the survival of BC patients within 5 years after surgery.【】Breast cancer;Long noncoding RNA cancer susceptibility candidate 2;MicroRNA5323p;Survivalwithin 5 years after surgery;Correlation 乳腺癌()是女性常见肿瘤其特点是在分子和临床水平上的异质性 近年来的治疗已取得许多进展但其仍是女性癌症死亡的重要原因 长链非编码 癌易感性候选基因()是一种肿瘤抑制基因能参与调节血管生成及癌细胞增殖和侵袭其在 等多种癌症中下调与癌细胞增殖和诱导细胞凋亡具有密切关联 微小()能参与癌症在内的多种人类疾病 其中 组织中 呈高表达具有致癌作用 报道显示轴在上皮间充质转化和癌症干细胞中发挥关键作用参与癌症进展 研究表明 能通过靶向调节 抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞增殖促进细胞凋亡 但目前、与 患者预后的关系尚未见 研 究 报 道 因 此 现 分 析 、在 组织中的表达及其与患者预后的相疑难病杂志 年 月第 卷第 期 .关性报道如下 资料与方法.临床资料 选择 年 月 年 月大同市第五人民医院普通外科收治女性 患者 例年龄 (.)岁其中 岁 例 岁 例绝经 例未绝经 例肿瘤直径:例 例 分期:期 例期 例肿瘤分化程度:中、高分化 例低分化 例有淋巴结转移 例无淋巴结转移 例分子分型:型 例 型 例 过表达型 例基底样型 例 手术过程中收集患者 组织及癌旁正常组织 本研究已经获得医院伦理委员会批准(临床)患者及家属均知情同意并签署知情同意书.病例选择标准()纳入标准:符合乳腺癌诊疗规范(年版)中的诊断标准且经病理学确诊临床资料完整且接受随访者均是初次确诊患者入组前未进行相关治疗()排除标准:存在其他部位恶性肿瘤自身免疫性疾病或全身感染性疾病脏器功能严重损伤.观测指标与方法.组织和癌旁正常组织中 、表达检测:将 组织及癌旁正常组织制成匀浆采用 抽提试剂盒(广州瑞博公司批号)提取 组织及癌旁正常组织总 反转录合成(试剂盒购自太原市川至生物公司批号)采用 扩增仪(美国赛默飞世尔公司型号)进行扩增 总反应体系 根据 试剂盒(广州瑞博公司批号)配制 反应条件:、共 个循环 法计算 (内参为)、(内参为)相对表达量 所有引物均由深圳子科生物公司合成引物序列见表 表 、引物序列.基因名称上游引物下游引物 .随访:患者术后随访 年(以电话和门诊复查为随访方式)随访开始时间为术后第 日截止时间为 年 月 日或患者死亡 随访频率:前 年每 个月进行 次随访后 年每 个月进行 次随访 记录患者 年内生存和死亡情况.统计学方法采用 .软件处理数据正态分布计量资料以 表示组间比较采用 检验计数资料以频数或率()表示组间比较用 检验 法分析 组织中 与 表达的相关性 回归分析 患者术后 年内生存的影响因素受试者工作特征()曲线评价、对 患者术后 年内生存的预测价值计算曲线下面积()并行 检验进行比较 .为差异有统计学意义 结 果.癌旁正常组织和 组织 、表达比较 组织中 表达水平低于癌旁正常组织 表达水平高于癌旁正常组织(.)见表 表 癌旁正常组织和 组织 、表达比较().组 织例数 癌旁正常组织.组织.值.值.组织中 和 表达在不同临床病理特征中的差异比较 分别以 组织中、表达水平的平均值(.、.)作为临界值将患者分为 高表达组(.)例和低表达组(.)例、高表达组(.)例和低表达组(.)肿瘤直径、分期期、肿瘤分化程度低分化、淋巴结转移者比例 低表达组高于高表达组而 低表达组低于高表达组(均.)肿瘤直径、分期期、肿瘤分化程度低分化、淋巴结转移者比例及 表达水平死亡组高于生存组而 表达水平死亡组低于生存组(.)见表.组织 、表达的相关性分析由 网站预测结果可知 与 之间有 个互补结合位点 可能靶向作用于 表达见图 组织中 与 表达呈负相关(.)表 组织中 和 表达水平在不同临床病理特征患者中差异比较 例().临床病理特征例数 高表达组()低表达组()值 值高表达组()低表达组()值 值年龄 岁(.)(.).(.)(.).岁(.)(.)(.)(.)绝经是(.)(.).(.)(.).否(.)(.)(.)(.)肿瘤直径(.)(.).(.)(.).(.)(.)(.)(.)分期 期(.)(.).(.)(.).期(.)(.)(.)(.)肿瘤分化程度中、高分化(.)(.).(.)(.).低分化(.)(.)(.)(.)淋巴结转移是(.)(.).(.)(.).否(.)(.)(.)(.)分子分型 型(.)(.).(.)(.).型(.)(.)(.)(.)过表达型(.)(.)(.)(.)基底样型(.)(.)(.)(.)表 生存组和死亡组临床病理特征及 组织中 、表达比较.临床病理特征例数生存组()死亡组()/值 值年龄例()岁(.)(.).岁(.)(.)绝经例()是(.)(.).否(.)(.)肿瘤直径例()(.)(.).(.)(.)分期例()期(.)(.).期(.)(.)肿瘤分化程度例()中、高分化(.)(.).低分化(.)(.)淋巴结转移例()是(.)(.).否(.)(.)分子分型例()型(.)(.).型(.)(.)过表达型(.)(.)基底样型(.)(.)().().疑难病杂志 年 月第 卷第 期 .图 靶向 的生物信息学分析.组织中 、表达与患者术后 年内生存的关系 高表达组 患者术后 年内总生存率为.(/)显著高于 低表达组.(/)(.)高表达组 患者术后 年内总生存率为.(/)显著低于 低 表 达 组 的.(/)(.).影响 患者术后 年内生存的多因素 回归分析 以 患者术后 年内生存为因变量(赋值:是为“”否为“”)以上述结果中 .项目为自变量进行多因素 回归分析结果显示:肿瘤直径、分期期、肿瘤低分化、有淋巴结转移、低表达、高表达均是影响 患者术后 年内生存的独立危险因素(.)见表 表 影响 患者术后 年内生存的多因素 回归分析.变 量 值 值 值 值 值肿瘤直径 .分期期.肿瘤分化程度低.淋巴结转移.低.高.、预测 患者术后 年内的生存价值绘制 、预测 患者术后 年内的生存价值 曲线并计算 结果显示:、及二者联合预测 患者术后 年内生存的 分别为.、.、.二者联合预测的 大于各自单独预测(/./.、./.)见表、图 讨 论 是一种高度异质性肿瘤其病因和病理表现因表 、预测 患者术后 年内生存的价值分析.指 标截断值敏感度 特异度约登指数.二者联合.图 、预测 患者术后 年内生存的 曲线.人而异 近年来 发病率逐年上升但由于诊断、治疗及护理的改善病死率有所下降 由复杂的细胞类型组成包括肿瘤、基质和免疫细胞每种细胞都可以呈现不同的表型通过相互作用促进肿瘤进展和治疗耐药性也强烈影响患者病情进展及预后因此寻找预测 进展及预后的指标至关重要 许多 和 能参与乳腺恶性肿瘤的发生和发育过程可能在 的早期诊断、治疗和预后方面提供新的见解 是一种新型基因调节因子不编码蛋白质但以 的形式调节不同水平的基因表达与人类疾病尤其是癌症的进展和预后有关 部分 的异常表达可能与癌细胞过度生长和 预后不良有关 已有研究表明 在 组织和细胞中表达显著降低其过表达能抑制 细胞活力和迁移 等报道 在 组织和细胞系中显著下调其能诱导细胞周期停滞通过调节转化生长因子 信号通路抑制 细胞增殖和转移诱导 的早期凋亡疑难病杂志 年 月第 卷第 期 .还能调控细胞肿瘤抗原 基因表达进而阻断包括乳腺组织在内的多种组织中的癌变过程 在本研究中 组织中 表达水平显著低于癌旁正常组织且 高表达组 患者术后 年内总生存率较 低表 达 组 高 与 等 和 等 研 究 结 果 一致 表明 可能与 的发生及预后有关其高表达提示患者预后生存较好 可能原因是 活性低会导致 细胞增殖和迁移能力增强导致 的进展恶化 通过抑制信使 翻译负调节下游基因表达在生物过程中起着重要作用 有研究表明 在 中表达显著上调是环状()的直接靶标其水平上调能逆转 诱导的抗肿瘤效果进而在 进展中发挥作用 等报道三阴性 组织中 水平升高 可预测三阴性 的恶性肿瘤发生和预后不良 本研究发现 组织中 表达显著高于癌旁正常组织且 高表达组 患者术后 年内总生存率较 低表达组低与 等和 等报道的结果一致 提示 可能参与 的发生和预后其高表达提示患者预后生存较差 可能原因是 高表达会促进 细胞恶性生物学行为进而使 恶性生长 本研究发现 组织中 与 表达呈负相关二者表达与肿瘤直径、分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移相关表明 和 可能存在靶向调控关系影响 患者临床病理特征 进一步研究发现死亡组 组织中 表达水平较生存组低 表达水平较生存组高表明 和 表达与 患者术后 年内生存关系密切可影响 患者预后 回归分析和 曲线发现肿瘤直径、分期期、肿瘤低分化、有淋巴结转移、低表达、高表达均是影响 患者术后 年内生存的独立危险因素 和 二者联合对 患者术后 年内生存具有较高预测效能 提示临床上要重点关注 患者的上述危险因素对于 和 表达异常的 患者临床上给予及时的治疗和干预可延长患者生存期 综上所述 组织中 表达下调 表达上调且术后 年内死亡的 患者较存活患者变化更显著对预测 患者术后 年内生存情况价值较高 但本研究未探究 靶向调控 的具体机制下一步将通过基础细胞实验来加以验证利益冲突:所有作者声明无利益冲突作者贡献声明卜德永:设计研究方案实施研究过程论文撰写赵连:提出研究思路分析试验数据周应强:实施研究过程资料搜集整理论文修改刘亮、王帅:进行统计学分析论文审核参考文献 .:.():.:./.:.():.:./.():.:././.():.:./.():.:./.:.():.:././.():.:./.中华人民共和国国家卫生健康委员会.乳腺癌诊疗规范(年版).肿瘤综合治疗电子杂志():.:./.:.():.:./.():.:./.汪伶俐田武国赵健洁等.靶向 调节乳腺癌细胞化疗耐药性的机制研究.疑难病杂志():.:./.(下转 页)疑难病杂志 年 月第 卷第 期 .():.:././.():.:./.():.:./.王明政金妙妙宋佳璐等.过表达 调控/轴对甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究.广东医学():.:./.():.:./.:.():.:././.():.:./.():.:././.():.:./.刘艳红李虎杨翔等.子宫内膜癌组织、表达及临床意义.疑难病杂志():.:./.王燕翔李彧白王丽伶等.宫颈癌患者血清、的表达水平及其临床意义.疑难病杂志():.:./.():.:./.(收稿日期:)(上接 页).():.:./.刘凡施文瑜刘益飞等.三阴性乳腺癌组织长链非编码、的表达及其临床意义.中国现代医学杂志():.:./.():.:./.:.():.:./.():.:./.():.:./.:.():.:./.曹琳尹红朱静等.靶向调控/信号通路对乳腺癌转移的作用.南昌大学学报:医学版():.:./.汪伶俐田武国赵健洁等.靶向 调节乳腺癌细胞化疗耐药性的机制研究.疑难病杂志():.:./.袁南贵罗雪平胡玉萍等.、在乳腺癌中表达及其与患者预后的关系.疑难病杂志():.:./.().():.:./.():.:./.(收稿日期:)疑难病杂志 年 月第 卷第 期 .