荧光分光光度计验证专项方案.doc

RF-5301PC荧光分光光度计验证方案
（编号： ）

起 草 人：
部 门：
起草日期： 年 月 日

审 核 人： 、 、
（验证领导小组）
部 门： 、 、
审核日期： 年 月 日

批 准 人：
部 门：
批准日期： 年 月 日

**公司
03月
验证目录
01.验证项目
02.概述
03.验证目
04.验证条件
05.验证合格原则
06.验证范畴
07.验证人员
08.验证内容与办法
09.验证数据分析
10.验证结论与偏差阐明
11.再验证
12.验证时间安排
13.附件

1.验证项目
RF-5301PC荧光分光光度计验证方案
2.概述：
2.1 RF-5301PC荧光分光光度计：设备编号：QC-016
某些物质受到光照射而被激发之后，会发射出比照射波长稍长光，这种光称为荧光。对于给定物质来说，当激发光波长和强度固定、液层厚度固定、溶液浓度较低时，荧光强度与荧光物质浓度c有如下关系：F=kc
荧光分光光度计就是依照上述原理，对可发射荧光物质进行定性、定量测量分析仪器。
我公司荧光分光光度计是于7月购买，其生产厂为日本岛津公司，重要用于铝检测。
2.3技术参数：
型号：RF-5301PC
电源电压：220V，50HZ
体积：长667×宽530×高270mm
工作时间：持续
工作环境条件：环境温度：15～35℃
相对温度：40%～80%
电压波动：220V±10%
无影响仪器使用振动和电磁干扰
生产厂家：日本岛津公司。
3.验证目
按照GMP规定，需要对该仪器进行安装确认、运营确认、性能确认，以拟定当前实验室环境能否满足该仪器正常操作和使用，仪器与否具备良好检测性能，能否满足验证可接受原则和寻常分析测试工作需要。
4.验证条件
4.1验证前必要对设备所用仪表进行校验，且在有效期内。
4.2验证明验过程中所用原则溶液、空白溶液在使用前必要符合规定。
4.3验证明验所用清洁器具和玻璃容器应按SOP程序清洁并符合规定。
5验证合格原则
5.1仪器外观及工作环境满足规定
5.2波长示值误差限与重复性
5.2.1波长示值误差限：优于±2.0nm
5.2.2波长重复性：≤1.0nm
5.3检出极限：5×10-10g/ml
5.4测量线性：r≥0.995
5.5荧光光谱峰值强度重复性：≤1.5%
5.6稳定性
5.6.1在10分钟内零线漂移≤1.5%
5.6.2荧光强度示值上限在10分钟内漂移不超过±1.5%
5.7仪器性能满足规定
6.验证范畴
本方案合用于RF-5301PC荧光分光光度计验证
7.验证人员
7.1验证人员职责、分工
7.1.1确认与验证委员会
·负责验证方案审批；
·负责验证数据及成果审批；
·负责验证报告审批；
·负责发放验证证书；
·负责再验证周期确认。
7.1.2验证工作小组组长
·负责验证方案制定并组织实行；
·负责收集验证、实验记录，并对成果进行分析，起草验证报告,上报确认与验证委员会。
7.1.3工程设备部：
·负责验证所需仪器、设备安装、调试及校正；
·负责量具检查及校正。
7.1.4质量管理部
·负责监督验证详细实行。
7.1.5质量控制实验室
·负责验证准备工作；
·负责依照本验证方案详细实行。
7.2 验证方案实行单位负责人
实行部门
负责人
签名
确认与验证委员会

验证工作小组组长

工程设备部

质量保证室

质量控制实验室

7.3 验证工作小组人员
部门
姓名
部门
姓名
质量控制实验室

质量保证室

质量控制实验室

工程设备部

8.验证内容与办法
8.1安装确认
8.1.1文献资料确认
下列文献资料与否齐全，与否符合规定
序号
文献资料
存储地
1
仪器采购订单

2
原版操作阐明书

3
仪器操作SOP

4
仪器维护保养SOP

5
仪器使用记录

6
仪器维护保养、检修记录

结论： 检查人： 日期：
8.1.2售后服务
维修单位：
联系电话：
地址：
传真：
联系人：
结论： 检查人： 日期：
8.1.3核心设备及消耗备品
仪器名称
荧光分光光度计
仪器型号
RF-6301PC
制造厂商

仪器编号

使用科室
质量控制实验室
放置地点

核心设备
设备名称
型号
生产厂家

备品
名称
生产厂家和型号
数量
存储处

结论： 检查人： 日期：
8.1.4安装检查
对照使用阐明书规定安装，确认仪器外观，环境、电源等符合规定。
检查内容
规定
办法
成果
外观
标记齐全，固件紧固良好，各旋钮、按键和开关均能正常工作，
目测

环境
室内不得存储与实验室无关易燃、易爆和强腐蚀物质，无强烈机械振动和电磁干扰。
目测

环境温度
15℃～35℃
温湿度表测

环境相对湿度
40%～80%
温湿度表测

安装位置
仪器应平稳而牢固地安顿在工作台上
按规定安装

电源线
与插孔吻合
按规定安装

结论： 检查人： 日期：
8.1.5软件安装状况检查
项目
安装状况检查
安装软件

文献格式

安装位置

数据文献保存位置

工作站安装

结论： 检查人： 日期：
8.1.6安装确认结论
所有物品与检查清单相符，仪器外观符合规定，实验室电设计安装合理，实验室环境良好，软件安装对的无误。
结论： 检查人： 日期：
复核人： 日期：
8.2运营确认
8.2.1确认所需材料
8.2.1.1玻璃仪器
计量玻璃仪器需彻底清洗并经检定，普通玻璃仪器要保证干净。
8.2.1.2原则物质：硫酸奎宁荧光原则物质
8.2.1.3工作原则溶液
8.2.1.3.1 0.05mol/L硫酸溶液：1000ml容量瓶中加入适量蒸馏水，用移液管移取浓硫酸2.7ml，注入容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，并混合均匀后放置备用。
8.2.1.3.2硫酸奎宁原则溶液（1×10-5g/ml）：将硫酸奎宁固体试剂在干燥器中放置24h以上。在分析天平上精确称取5.00mg硫酸奎宁原则物质于500ml容量瓶中，用适量硫酸溶液溶解，然后用0.05mol/L硫酸溶液稀释至刻度，混合均匀。
8.2.1.3.3硫酸奎宁原则溶液（1×10-6g/ml）：用移液管移取1×10-5g/ml硫酸奎宁溶液25ml，倾入250ml容量瓶中加入0.05mol/L硫酸溶液稀释至刻度，混合均匀。
8.2.1.3.4以此类推4×10-7g/ml硫酸奎宁原则溶液，8×10-7g/ml硫酸奎宁原则溶液，1×10-9g/ml硫酸奎宁原则溶液按下表配制

欲配原则溶液
所取原则母液
质量浓度/(g/ml)
配备体积/ml
质量浓度/(g/ml)
配备体积/ml
1×10-6
250
1×10-5
25
1×10-7
100
1×10-6
10
4×10-7
100
1×10-5
4
8×10-7
100
1×10-5
8
1×10-6
100
1×10-7
1
8.2.2波长示值误差与波长重复性
8.2.2.1激发侧单色器波长示值误差与波长重复性
将发射侧单色器置零级位置，将漫反射板（或无荧光白色滤纸条）放入样品室，仪器响应时间设立为“快”，扫描速度设立为“中”或采用手动方式，使用实际可行最窄狭缝宽度，对激发侧单色器在（350～550）nm波长范畴进行扫描，在所得到谱图上寻找450.1nm附近光谱峰，并拟定其峰位置。持续测量三次，按公式（1）和（2）分别计算波长示值误差和重复性。
波长示值误差：
（1）
式中：—波长测量值；
—参照波长值（450.1nm）。
波长重复性
（2）
8.2.2.2发射侧单色器波长示值误差与波长重复性
将激发侧单色器置零级位置，将漫反射板（或无荧光白色滤纸条）放入样品室，仪器响应时间设立为“快”，扫描速度设立为“中”或采用手动方式，使用实际可行最窄狭缝宽度，对激发侧单色器在（350～550）nm波长范畴进行扫描，在所得到谱图上寻找450.1nm附近光谱峰，并拟定其峰位置。持续测量三次，按公式（1）和（2）分别计算波长示值误差和重复性。
波长示值误差及波长重复性成果
激发单色器

测量值

发射单色器

测量值

结论： 检查人： 日期：
8.2.3检出极限
用0.05mol/L硫酸溶液做空白溶液，选用质量浓度为1×10-9g/ml硫酸奎宁原则溶液，敏捷度置最高档，选取恰当狭缝宽度，依照激发波长在350nm、发射波长在450nm左右原则，设定两侧波长。对空白溶液与原则溶液进行持续交替11次测量。如果在测量中，有一次数据确认是由外界干扰或操作引起较大误差，应将该次数据剔除。
由下式计算每次测量荧光强度：

式中：—原则溶液荧光强度；
—空白溶液荧光强度
荧光强度测量值平均值为

式中：—测量次数
检出极限指二倍于原则偏差读数物质浓度，用符号DL来表达：

式中：—11次测量平均荧光强度
—原则溶液质量浓度
—单次测量原则偏差

检出极限成果

1

7

2

8

3

9

4

10

5

11

6

=
=
=
=
结论： 检查人： 日期：
8.2.4测量线性
用0.05mol/L硫酸溶液作空白溶液，恰当选取敏捷度挡和狭缝，依次测量下表各质量浓度硫酸奎宁原则溶液。依照激发波长在350nm、发射波长在450nm左右原则，设定两侧波长
硫酸奎宁原则溶液
原则溶液编号
1
2
3
4
原则溶液质量浓度
1×10-7
4×10-7
8×10-7
1×10-6
测量线性成果
质量浓度

1×10-7

4×10-7

8×10-7

1×10-6

线性有关系数r=
结论： 检查人： 日期：
8.2.5光谱峰值强度重复性
依照激发波长在350nm、发射波长在450nm左右原则，设定两侧波长。用1×10-7g/ml硫酸奎宁溶液，见光3min后，对发射波长从365nm至500nm重复扫描三次。
光谱峰值强度重复性按下式计算

式中：—光谱峰强度读数
光谱峰值强度重复性成果
测量次数
1
2
3

荧光强度/%

结论： 检查人： 日期：
8.2.6稳定性
8.2.6.1调节敏捷度中档限度。关闭闸门，记录10min内漂移。
8.2.6.2置激发波长和发射波长为450nm。置激发和发射狭缝宽度为10nm。漫反射板放入样品室，调节敏捷度，使示值为90%，见光3min后，观测10min内示值变化。
稳定性成果
项目
零线
示值上限
稳定性/%
10min

结论： 检查人： 日期：
8.2.7运营确认结论
仪器波长示值误差与波长重复性，检出极限，测量线性，稳定性，重复性各项数据精确无误，操作符合原则操作规程，各项均应符合验证原则，
结论： 检查人： 日期：
复核人： 日期：
8.3性能确认
使用供试品确认仪器性能符合使用规定，对公司使用该仪器不同品种各三批进行检测，以保证仪器满足实验规定。
性能确认检测成果
产品名称

产品批号

产品代码

检查日期

检查根据

检测项目
原则规定
检查成果

结论： 检查人： 日期：
8.4采用文献
8.4.1《RF-5301PC荧光分光光度计原则操作规程》（SOP-ZL1019-02-00）
8.4.2《RF-5301PC荧光分光光度计维护保养原则操作规程》（SOP-ZL1109-02-00）
8.4.3《RF-5301PC荧光分光光度计使用阐明书》
8.4.4《荧光分光光度计检定规程》（JJG537-）
9.验证数据分析
仪器工作环境，波长精确度与波长重复性，辨别率，基线稳定性，敏捷度，检出限均重复性，仪器外观应符合验证合格原则。如有少量数据超过上述原则，则应由质量控制实验室、质量管理部共同进行分析，找出不合格因素，修订验证方案，再实行，直至符合验证原则。
10.验证成果与结论（对验证成果评价和建议）
质量控制实验室部负责收集各项验证、实验成果记录，依照验证、实验成果起草验证报告，报验证委员会。验证委员会负责对验证成果进行综合评审，作出验证结论，发放验证证书，确认RF-5301PC荧光分光光度计验证周期，对验证成果评审应涉及：
10.1验证明验与否有漏掉？
10.2验证明行过程中对验证方案有无修改？修改因素、根据以及与否通过批准？
10.3验证记录与否完整？
10.4验证明验成果与否符合原则规定？偏差及对偏差阐明与否合理？与否需要进一步补充实验？
11再验证
11.1根据验证成果，拟定再验证周期，报验证委员会审批；
11.2如RF-5301PC荧光分光光度计重要部件更换后，必要进行再验证。
12.验证时间安排
由验证工作小组**负责实行。
详细时间为
待验证明行结束，写出验证报告，报验证委员会审批。
13.附件
《检查原始记录》