甲醇检验方法汇总.doc

甲醇检测办法
办法一、酒醇仪测定法
　　合用范畴：合用于蒸馏酒（又称白酒或烧酒）中甲醇急性中毒剂量现场迅速测定a既合用于80度如下蒸馏酒中甲醇含量超过1%(O%～60%范畴内)或2%（60%～80%范畴内）时迅速测定。
　　办法原理：在20℃时，不同浓度乙醇具备固有折光率，当甲醇存在时，折光率会随着甲醇浓度增长而减少，下降值与甲醇含量成正比。按照这一现象而设计制造酒醇含量速测仪，可迅速显示出样品中酒醇含量。当这一含量与玻璃浮计（酒精度计）测定出酒醇含量浮现差别时，其差值即为甲醇含量。在20℃时，可直接定量；在非20℃时，采用与样品相称浓度乙醇对照液进行对比定量。
　　检测试材：酒醇速测仪。玻璃浮计。乙醇对照液。
　　在环境温度20℃时操作办法：用玻璃浮计测定样品酒精度数后，再用酒醇仪测定样品酒精度，两者差值即为甲醇浓度。
　　在环境温度非2⑩℃时操作办法：
　　1．一方面用玻璃浮计测试样品酒精度数后，可以依照换算表找到一种在20℃时配制成与其相等乙醇对照液，用玻璃浮计测试这一对照液与否与样品酒精度数相等或相近在±1度以内，如果超过±1度，改用临近度数对照液再测，直至找到一种与样品酒精度数相等或相近在±1度以内乙醇对照溶液。
　　2．用酒醇仪分别测试样品和选中对照液醇含量，如果样品读数低于对照液读数，其差值即为甲醇百分含量。
办法二、速测盒测定法
　　合用范畴：本办法合用于蒸馏酒中微量即0. 02%以上甲醇含量现场迅速测定。
　　操作办法：用滴管取酒样6滴于离心管中，加入5滴A试剂氧化剂，放置5min，加入4滴B试剂还原剂，盖盖后上下振摇20次以上使溶液充分混匀，打开盖子，等溶液完全退色，加入2滴C试剂显色剂后，再加入15滴D试剂，观测管内颜色变化，3min后与对照图谱对比判断酒样中甲醇含量。
办法三：气相色谱测定甲醇含量
【实验目】
学习色谱法分离原理并熟悉色谱仪器操作
掌握色谱法保存时间定性和内标法定量基本原理和办法
理解氢火焰检测器基本原理

【实验原理】
是运用试样中各组份在气相和固定液液相间分派系数不同，当汽化后试样被载气带入色谱柱中运营时，组份就在其中两相间进行重复多次分派，由于固定相对各组份吸附或溶解能力不同， 因而各组份在色谱柱中运营速度就不同，通过一定柱长后，便彼此分离，按顺序离开色谱柱进入检测器，产生离子流讯号经放大后，在记录器上描绘出各组份色谱峰。气相色谱仪构成某些  
（1）载气系统：涉及气源、气体净化、气体流速控制和测量 
（2）进样系统：涉及进样器、汽化室（将液体样品瞬间汽化为蒸气） （3）色谱柱和柱温：涉及恒温控制装置（将多组分样品分离为单个） （4）检测系统：涉及检测器，控温装置 
（5）记录系统：涉及放大器、记录仪、或数据解决装置、工作站

【仪器试剂】
仪器：气相色谱仪（恒信仪器）全套
试剂：甲醇、乙醇混合溶液

【实验内容】
1.打开稳定电源。调节供气装置氢、氮气、空气发生装置；
2.调节分流阀使分流流量为实验所需流量0.1MPa；
3.打开空气、氮气开关阀，调节空气、氮气流量为恰当值0.4MPa；
4.设立柱箱、检测器、注样、辅助为95℃，200℃，200℃,150℃进行实验操作；
5点火。调节空气阀至示数为0.01，点火后来恢复至0.05：
6.打开色谱工作站，设定有关参数；
7.仪器稳定后即可进样分析，取样后迅速注入；
8.峰记录与解决，微机化后自动获得积分面积、高、保存时间等数据；
9.实验结束后关闭氢、氮、空气发生器，待柱温降到室温后关闭色谱仪。

【数据记录与解决】

谱图文献：C:\N\OrgDataxq\某样品\某样品_000154.org
3.1 气相色谱法测定白酒中甲醇
（外标法）
一、 目
1. 理解气相色谱仪（火焰离子化检测器FID）用法。
2. 掌握外标法定量原理。
3. 理解气相色谱法在产品质量控制中应用。
二、 原理
试样被气化后，随同载气进入色谱柱，由于不同组分在流动相（载气）和固定相间分派系数差别，当两相作相对运动时，各组分在两相间经多次分派而被分离。
在酿造白酒过程中，不可避免地有甲醇产生。依照国标（GB10343-89），食用酒精中甲醇含量应低于0.1g•L-1(优级)或0.6 g•L-1（普通级）。
运用气相色谱可分离、检测白酒中甲醇含量。在相似操作条件下，分别将等量试样和含甲醇原则样进行色谱分析，由保存时间可拟定试样中与否具有甲醇，比较试样和原则样中甲醇峰峰面积，可拟定试样中甲醇含量。

三、 仪器和试剂
1. 气相色谱仪
2. 火焰离子化检测器
3. 1μL 微量注射器
4. 甲醇（色谱纯）
5. 无甲醇乙醇 取0.5μL进样无甲醇峰即可。

四、 环节
1. 原则溶液配制：用体积分数为60%乙醇水溶液为溶剂，分别配制浓度为0.1 g•L-1、0.6 g•L-1甲醇原则溶液。
2. 色谱条件：
色谱柱：长1.5m，内径3mm玻璃柱；SE30；
氢气压力：0.5kg/cm2，氮气压力：0.5kg/cm2，空气压力：0.5kg/cm2
进样量：0.5μL；
柱温：50℃；检测器温度：120℃；气化室温度：120℃；
3. 操作
通载气，启动仪器，设定以上温度条件。待温度升至所需值时，打开氢气和空气，点燃FID(点火时，氢气流量可大些)，缓缓调节氮气、氢气及空气流量，至信噪比较佳时为止。待基线平稳后即可进样分析。
在上述色谱条件下进0.5μL原则溶液，得到色谱图，记录甲醇保存时间。在相似条件下进白酒样品0.5μL，得到色谱图，依照保存时间拟定甲醇峰。
五、 成果计算
取浓度为0.1 g•L-1、0.6 g•L-1甲醇原则溶液0.5μL，记录色谱峰面积。在相似条件下进白酒样品0.5μL，记录色谱峰面积。按下式计算白酒样品中甲醇含量：
C=CS•A/AS
式中：C——白酒样品中甲醇质量浓度，单位为g•L-1
CS——原则溶液中甲醇质量浓度，单位为g•L-1
A——白酒样品中甲醇峰面积
AS——原则溶液中甲醇峰面积

六、实验成果图

甲醇1
峰号 保存时间 峰高 峰面积 含量
1 0.873 157350.156 601655.313 100.0000

甲醇2
峰号 保存时间 峰高 峰面积 含量
1 0.873 177206.953 714171.375 100.0000

3.2 白酒中甲醇含量测定
（内标法）
当前，食品类工业和酿酒发酵类工业是国内重要经济产业之一，随着人民生活水平逐渐提高，人们对白酒质量和品质有着更高规定。国家轻工局颁发了严格白酒质量原则，其中气相色谱仪检测白酒中甲醇等已经成为白酒生产公司中产品质量控制必备仪器。当今色谱技术普及与发展，以它高敏捷度，高分离效能，高选取性和迅速分析等多项长处，在诸多行业中得到了极其广泛应用，起到了不可忽视作用。
1. 原理
依照甲醇组分在DNP填充柱等温分离分析中，可以在乙醇峰前流出一种尖峰，其峰面积与甲醇含量具备线性关系，因而可用内标法予以定量分析。
2. 仪器
气相色谱仪，配氢火焰离子化检测器（FID）；
3、试剂
3.1 无水甲醇 。
3.2 60%乙醇溶液，应采用毛细管气相色谱法检查，确认所含甲醇低于1mg/L方可使用。
3.3 甲醇原则溶液，3.9g/L 。以色谱纯试剂甲醇，用60%乙醇溶液精确配成体积比为0.5%标样溶液，浓度为3.9g/L。
3.4 乙酸正丁酯内标溶液，17.6g/L。以分析纯试剂乙酸正丁酯（含量不低于99.0%），用60%乙醇溶液配成体积比为2%内标溶液。浓度为17.6g/L。
5.操作环节
5.1 色谱条件
使甲醇峰形成一种单一尖峰，内标峰和异戊醇两峰峰高分离度达到100%，色谱柱柱温以100℃为宜。
5.2 校正因子f值测定
精确吸取1.00mL甲醇原则溶液（3.9g/L）于10mL容量瓶中，用60％乙醇稀释至刻度，加入0.20mL乙酸正丁酯内标溶液（17.6g/L），待色谱仪基线稳定后，用微量进样器进样1.0µL，记录甲醇色谱峰保存时间及其峰面积。以其峰面积与内标峰面积之比，计算出甲醇相对质量校正因子f值。
5.3 样品测定
于10mL容量瓶中倒入酒样至刻度，精确加入0.20mL乙酸正丁酯内标溶液（17.6g/L），混匀。在与f值测定相似条件下进样，依照保存时间拟定甲醇峰位置，并记录甲醇峰峰面积与内标峰面积。分析成果由BF-色谱工作站直接计算得出。
3. 成果与讨论
实验表白，该办法操作简朴具备较好重复性，同同样品两次测定值之差，不超过5％。
该办法可同步实现白酒中甲醇、杂醇油、乙酸乙酯、丁酸乙酯、乳酸乙酯等组分定性、定量分析。
3.3 气相色谱法测定白酒中甲醇含量
（定性测试）
一、实验目
1．理解气相色谱仪(火焰离子化检测器FID)用法。
2． 掌握外标法定量原理。
3．理解气相色谱法在产品质量控制中应用。

二、实验原理
气相色谱法(gas chromatography)是一种分离效果好、分析速度快、敏捷度高、操作简朴、应用范畴广分析办法。它是以气体为流动相(又称载气)，当气体携带着欲分离混合物流经色谱柱中固定相时，由于混合物中各组分性质不同，它们与固定相作用力大小不同，因此组分在流动相与固定相之间分派系数不同，通过多次重复分派之后，各组分在固定相中滞留时间长短不同，与固定相作用力小组分先流出众谱柱，与固定相作用力大组分后流出众谱柱，从而实现了各组分分离。色谱柱后接一检测器，它将各化学组分转换成电信号，用记录装置记录下来，便得到色谱图。每一种组分相应一种色谱峰。依照组分出峰时间(保存值)可以进行定性分析，峰面积或峰高大小与组分含量成正比，可以依照峰面积或峰高大小进行定量分析。
在酿造白酒过程中，不可避免地有甲醇产生。依照国标(GB 10343—89)，食用酒精中甲醇含量应低于0．1 g/L(优级)或0．6 g/L(普通级)。运用气相色谱可分离、检测白酒中甲醇含量。
外标法，也称原则校正法，是色谱分析中应用最广、易于操作、计算简朴定量办法。它是通过配制一系列构成与试样相近原则溶液，按原则溶液谱图，可求出每个组分浓度或量与相应峰面积或峰高校准曲线。按相似色谱条件试样色谱图相应组分峰面积或峰高，依照校准曲线可求出其浓度或量。但它是一种绝对定量校正法，标样与测定组分为同一化合物，分离、检测条件稳定性对定量成果影响很大。为获得高定量精确性，定量校准曲线经常重复校正是必要。在实际分析中，可采用单点校正。只需配制一种与测定组分浓度相近标样，依照物质含量与峰面积成线性关系，当测定试样与标样体积相等时：

式中：为试样和标样中测定化合物质量（或浓度），为相应峰面积（也可用峰高代替）。单点校正操作规定定量进样或已知进样体积。
本实验中白酒中甲醇含量测定采用单点校正法，即在相似操作条件下，分别将等量试样和含甲醇原则样进行色谱分析，由保存时间可拟定试样中与否具有甲醇，比较试样和原则样中甲醇峰峰高，可拟定试样中甲醇含量。

三、仪器与试剂
1．4890气相色谱仪
2．火焰离子化检测器
3．1 mL微量注射器
4．甲醇(色谱纯)
5．无甲醇乙醇 取0.5mL进样无甲醇峰即可。

四、实验环节
1．原则溶液配制：用体积分数为60％乙醇水溶液为溶剂，分别配制浓度为0．1 g/L～0．6 g/L甲醇原则溶液。
2．色谱条件：
色谱柱：HP-5石英毛细管柱（30 m×0.25 mm×0.25mm）；
载气(N2)流速：40 mL/min， 氢气(H2)流速：40 mL/min，空气流速：450 mL/min。
进样量：0.5 mL；
柱温：100℃；
检测器温度：150℃；气化室温度：150℃；
3．操作：
通载气，启动仪器，设定以上温度条件。待温度升至所需值时，打开氢气和空气，点燃FID(点火时，H2流量可大些)，缓缓调节N2、H2及空气流量，至信噪比较佳时为止。待基线平稳后即可进样分析。
在上述色谱条件下进0．5mL原则溶液，得到色谱图，记录甲醇保存时间。在相似条件下进白酒样品0.5mL，得到色谱图，依照保存时间拟定甲醇峰。

五、成果计算
1．拟定样品中测定组分色谱峰位置。
2．按下式计算白酒样品中甲醇含量：

　　式中：Ｗ为白酒样品中甲醇质量浓度，单位为g/L;
Ws为原则溶液中甲醇质量浓度，单位为g/L;
h为 白酒样品中甲醇峰高;
hs为原则溶液中甲醇峰高。
比较h和hs大小即可判断白酒中甲醇与否超标。

六、注意事项
1、必要先通入载气，再开电源，实验结束时应先关掉电源，再关载气。
2、色谱峰过大过小，应运用“衰减”键调节。
3、注意气瓶温度不要超过40℃，在2m以内不得有明火。使用完毕，及时关闭氢气钢瓶气阀。

七、思考题
1．外标法定量特点是什么？它重要误差来源有哪些？
2．如何检查FID与否点燃？分析结束后，应如何关气、关机？

附录
4890气相色谱仪操作规程：
1．打开载气(使钢瓶输出压力为0.2MPa)，通气10min左右，并检查系统与否漏气，若漏气，需更换出封垫和重接气路管道接头。
2．按先后顺序，打开仪器和计算机，确信GC通过了自检。
3．在计算机程序“HP3398A”中打开“instrument”，找出恰当汽化室、检测器与柱箱温度以及升温速率等，设立完后发送至GC，使其达到预备状态。
4．若检测器为FID，打开氢气与空气钢瓶，通气几分钟后，按动面板上点火按钮。当听到氢气爆鸣声后，用小镜或光亮金属器件检查有无水蒸气生成，若有，则点火成功；若无水蒸气，再次点火，直至点火成功。
5．在计算机运营界面中，设定实验者文献页面页码、运营办法等，发送信号，让计算机做好工作准备。
6．用微量进样器进样0.5mL，进样同步按下“Start”键，直至本次运营结束。
7．测试完毕，先将仪器降温至接近室温(50°C如下)后，再关主机，关气，盖上防尘罩。

微量注射器使用：
气相色谱中液体进样普通用微量注射器。微量注射器是很精密进样工具，容量精度高，误差不大于5％，气密性达2 kg／cm。，由玻璃和不锈钢制成；有芯子、垫圈、针头、玻璃管、顶盖等构成；微量注射器使用时应当注意如下几点：
1、它是易碎器械，使用时应当多加小心。不用时要放人盒内，不要来回空抽，特别是在未干状况下来回拉动，否则会严重磨损，破坏其气密性。
2、当试样中高沸点样品沾污注射器时，普通可以用下述溶液依次清洗：5％氢氧化钠水溶液，蒸馏水，丙酮，氯仿，最后抽干，不适当使用强碱溶液洗涤。
3、如果注射器针头堵塞，应当用直径为0.5 mm细钢丝耐心地穿通。不能用火烧，防止针尖退火而失去穿刺能力。
4、若不慎将注射器芯子所有拉出，应当依照其构造小心装配，不可强行推回。
5、进样操作环节
用微量注射器进液体样品分为三步：①洗针。用少量试样溶液将注射器润洗几次。②取样。将注射器针头插入试样液面如下，慢慢提高芯子并稍多于需要量。如注射器内有气泡，则将针头朝上，使气泡排出，再将过量试样排出。用吸水纸擦拭针头外所沾试液，注意勿擦针头尖，以免将针头内试液吸出。③进样。取好样后应当及时进样。进样时注射器应当与进样样口垂直，一手拿注射器，另一只手扶住针头，协助进样，以防针头弯曲。针头穿过硅橡胶垫圈，将针头插究竟，紧接着迅速注入试样。注入试样同步，按下起始键。切忌针头插进后停留而不立即推入试样。推针完后立即将注射器拔出。整个进样动作要稳当、连贯、迅速。针头在进样器中位置、插入速度、停留时间和拔出速度都会影响进样重现性,操作中应予以注意。

办法四：甲醇测定（化学分析法）
品红-亚硫酸比色法
(1)原理
甲醇经氧化成甲醛后，与品红-亚硫酸作用生成蓝紫色化合物，依照颜色深浅与原则系列比较定量。最低检出浓度0.02g/100ml。
（2）试剂
1、高锰酸钾-磷酸溶液：称取3g高锰酸钾，加入15 ML 85%磷酸与70 ML水混合液中，溶解后加水至100ml。贮于棕色瓶中，防止氧化力下降，保存时间不适当过长。
2、草酸-硫酸溶液：称取5g无水草酸（H2C2O4）或7g H2C2O4·2H2O溶于硫酸（1+1） 中至100ml。
3、品红—亚硫酸溶液：称取0.1g碱性品红，研细，分次加入共60 ML80度水中，边加水边研磨使其溶解，用滴管吸取上层溶液滤于100 ML 容量瓶中，冷却后加入10ML 100 g/L亚硫酸钠溶液、1ML盐酸，再加水至刻度，充分混匀，放置过夜。如溶液有颜色，可加入少量活性炭，搅拌后过滤，贮于棕色瓶中，置暗处保存，溶液呈红色时就弃去重新配制。
4、甲醇原则溶液：称取1.000g甲醇，置于100ML容量瓶中，加水至刻度。置低温保存。此溶液含10mg/ML。
5、甲醇原则使用液：吸取10.0ML甲醇原则溶液，置于100ML容量瓶中，加水稀释至刻度。
6、无甲醇乙醇水溶液{CH3CH2OH=60%}：取300ML无水乙醇，加水稀释至500ML，吸取1ML此溶液按操作办法检查不应显色，否则需抄下法进行制备。
7、100g/L亚硫酸钠溶液，存于冰箱中，一周内可用。
（3）操作办法
依照样品中乙醇浓度吸取适量蒸馏后酒样或原料置于25ML具塞比色管中；吸取0.4ML 甲醇原则使用液置于25ML具塞比色管中，并加入1ML 60%无甲醇乙醇水溶液。于样品管及原则管中各加水至5ML，依次加入２ML高锰酸钾—磷酸溶液、混匀，放置10MIN后加入2ML草酸-硫酸溶液，混匀使之褪色，再各加入5ML品红-亚硫酸溶液，混匀。于20~30度静默30MIN，与原则色列目视比较定量。

注释：值中实际甲醇=60/酒精度*实测值