三氯蔗糖成品的检验方法.docx

物料名称
三氯蔗糖
测试项目
色泽、组织状态、气味、含量、比旋光、水分、灼烧残渣、水解物、相关物、甲醇、砷、重金属、判别、PH、颗粒度、堆积密度、三苯氧磷、细菌总数、霉菌酵母菌、铅、溶液颜色和澄清度、口感
1 色泽、组织状态
1.1仪器
洁净白搪瓷托盘
1.2试剂
无
1.3试验步骤
取20g样品置于清洁、干燥白瓷盘中，在相同自然或照明光线下，观察其色泽和组织状态。
1.4注意事项
确保使用取样签、取样袋洁净无污染，取完样后立即扎紧袋口。
2 气味
2.1仪器
留样瓶
2.2试剂
无
2.3试验步骤
三氯蔗糖倒入留样瓶中，在塑料留样瓶中嗅其味。
2.4注意事项
确保使用取样签、取样袋洁净无污染，留样瓶无污染。
3 含量
3.1 仪器和设备
高效液相色谱仪（配置示差折光检测器）、电子天平
3.2试剂
色谱纯乙腈、三氯蔗糖标准品。
3.3试验步骤
参考色谱条件
a) 色谱柱：SUPELCOSILTMLC-18 4.6*250 5μm。或其它等效色谱柱。
b) 流动相：将150mL 乙腈和850mL 水混合均匀后，用0.45μm 滤膜过滤，超声脱气后备用。
c) 柱温：30℃。
d) 流动相流速：1.0 mL/min。
e) 进样量：60 μL。
f) 三氯蔗糖保留时间：9min 左右，为确保取得所需保留时间，必需时能够调整流动相百分比。
注：系统适用性为反复注入标准溶液两次，所得响应面积RSD小于2.0％。
分析步骤
标准溶液制备：称取0.1500g 三氯蔗糖标准品（正确至0.0001g），溶于预先正确称取49.0000g纯水中，所得溶液用0.45μm 滤膜过滤，滤液备用。
试样液制备：称取约0.1500试样（正确至0.0001g），溶于预先正确称取49.0000g纯水中，所得溶液用0.45μm 滤膜过滤，滤液备用。
测定
在3.3 参考色谱条件下，分别对标准溶液和试样液进行测定，进样量为60 μL，反复进样一次，计算出其主峰面积平均值。
计算结果
X1=AU*MS*P/（AS*MU）*100
式中：
X1——试样中三氯蔗糖含量，%；
AU——试样液色谱主峰面积平均值；
MS——称取三氯蔗糖标准品质量，g；
P——三氯蔗糖标准品含量，%；
AS——标准溶液色谱主峰面积平均值；
MU——称取试样质量，g；
试验结果以平行测定结果算术平均值为准。
3.4注意事项
a)系统适应性为反复注入标准溶液两次，所得响应面积RSD小于2.0％。
b)进样时不得有气泡，而且进样速度保持匀稳推进。
4 比旋光°
4.1仪器
旋光仪、容量瓶、电子天平
4.2试剂
纯水
4.3试验步骤
正确称取1g（正确至0.0001g）待测样品，用纯水溶解，定容至50ml同时做空白。先将装有空白液试管放入样品室，将测量示数清零。然后将待测样品注入试管，同方向放入样品室，测量其旋光度。
计算公式：
【α】=50*α/(2*m)+0.1*(T-20)
其中：α—所测得旋光度；
m—样品质量
T—测定条件下温度
两次平行测定结果不超出0.5%，取两次平行测定结果算术平均值为测定结果。
4.4注意事项
a) 使用前调试仪器先要开电源开关，预热约30分钟；
b) 样品测试温度要控制在室温20℃±0.5℃；
c) 从溶解样品到测试整个过程时间要短，预防样品因温度和容积改变带来测试偏差；
d) 测试过程中试液不能滴漏到仪器上，测量时旋光管中气泡要赶到球中。
5 水分
5.1仪器
水分测定仪、注射器、天平
5.2试剂
无水甲醇、卡尔费休试剂、纯水
5.3试验步骤
在卡尔费休滴定池内先注入约20ml左右无水甲醇，用卡尔费休试剂滴定至终点，然后用10μl进样针抽取10μl纯水样，注入滴定池，再用卡尔费休试剂滴定，记下读数V1,紧接着称取1g左右三氯蔗糖试样，正确至0.0001g，记下读数m,注入滴定池，用卡尔费休试剂再次滴定，记下读数V2，最终按下式计算：
W=(V2/V1*m*100)*100%
其中： V1—滴定纯水时消耗卡尔费休试剂体积，ml
V2—滴定试样时消耗卡尔费休试剂体积，ml
m—试样质量，g
w—一水精制水分
取两次平行测定结果算术平均值为测定结果。两次平行测定结果之差值小于0.03%。
5.4注意事项
a)确保所使用试剂在使用期内；
b)称量、计算必需正确无误。
6 灼烧残渣
6.1仪器
电子天平、马弗炉、干燥器
6.2试剂
试剂硫酸
6.3试验步骤
正确称取1.0000g样品于恒重坩埚中，放电炉上烧至无烟，冷却10分钟后加1ml硫酸，继续烧至无烟放置于800℃马弗炉中，3小时后取出置于电炉上稍冷却数秒钟，再置于干燥器中冷却至室温称量。
计算公式：
w=m1-m2m*100%
其中：
m1为坩埚+试样灼烧前质量，g；
m2为坩埚+试样灼烧后质量，g；
m为样品质量，g。
6.4注意事项
a) 称样量必需正确；
b) 加硫酸时一定要等冷却10分钟后才加，以防坩埚爆裂；
c) 确保使用坩埚是恒重，而且一定要放在干燥器中冷却。
7 PH
7.1仪器
酸度计、温度计
7.2试剂
pH=4.00，6.86, 9.18缓冲溶液
7.3试验步骤
样品制备：正确称取10g（正确至0.0002g）样品于100ml小烧杯中，加90ml纯水溶解。
开机预热30min，测量前用PH=4.00，6.86，9.18缓冲溶液进行仪器校准，再用卷纸擦拭干，将电极插入样品，按读数键，当出现根号后，记下读数。
7.4注意事项
a) 测量前一定要开机预热，并进行3点校正；
b) 使用完电极要放在饱和氯化钾溶液中。
8 相关物
8.1仪器
薄层层析板：涂有0.2mm 厚度C18 烷基修饰硅胶或其它等效物质。
8.2试剂
三氯蔗糖标准品：质量分数≥98.0%、乙腈、硫酸、无水甲醇、氯化钠溶液：50g/L。
8.3试验步骤
展开剂制备：氯化钠溶液∶乙腈=70∶30（体积比）
显色剂制备：配制15%硫酸甲醇溶液（体积分数）。
标准溶液制备：称取0.5g 三氯蔗糖标准品（正确至0.001g），溶解于5.0mL 甲醇中，此为溶液C。吸收0.5mL溶液C，用无水甲醇定容至100mL，此为溶液D。 试样液制备：称取1.0g 试样（正确至0.001g），溶解于10.0mL 甲醇中。
取溶液C、溶液D 和试样液各5μL，点于薄层层析板底部，将层析板置于盛有展开剂层析缸中，待展开溶剂前沿移至15cm 时后取出薄层层析板，放置，待展开剂挥发洁净后用显色剂喷雾，然后于125℃±2℃烘箱中加热10min。试样液主色斑Rf值应和溶液C 主色斑Rf值相同，且试样液中其它色斑呈色应不深于溶液D 主色斑呈色。
Rf 值——试样展开后斑点到原点距离和溶剂前沿到原点距离比值。
8.4注意事项
a)全部试剂全部在使用期内；
b)手拿薄层层析板时，不要碰到涂有0.2mm 厚度C18 烷基修饰硅胶一面；
c)在点板时，戴上口罩，预防薄层层析板被污染；
d)展开缸内一定要洁净无污染；
e)原点不要浸在展开剂里
9 水解物
9.1仪器和设备
薄层层析板：涂有0.25mm 厚度Merk 硅胶60 或其它等效物质。
9.2试剂
对氨基苯甲醚、邻苯二甲酸、甲醇、甘露糖醇、果糖。
9.3试验步骤
显色剂制备：将1.23g对氨基苯甲醚（有毒害性）和1.66 g 邻苯二甲酸溶于100 mL 甲醇中。将溶液存放在暗处并冷藏，假如溶液退色则已失效。
标准溶液A制备：称取10g 甘露糖醇（正确至0.001g），用水溶解后，移入100mL 容量瓶中，用水定容至刻度。
标准溶液B制备：分别称取10g 甘露糖醇（正确至0.001g）和0.04g 果糖（正确至0.0001g），移入100mL 容量瓶中，用水定容至刻度。
试样液制备：称取2.5g 试样（正确至0.001g），用5mL 甲醇溶解后，转移至10mL 容量瓶中，用甲醇定容至刻度。
取标准溶液A、标准溶液B 和试样液各5μL，分别在同一块薄层层析板不一样位置进行点样，将每份溶液分5 次(每次1μL) 点于板上，每次点样之间要待样点干燥后再继续点，3 份样点面积要基础相同，点样完成后用显色剂喷雾后于100℃±2℃烘箱中加热15min，加热后立即在阴暗背下观察层析板，试样液色斑呈色不应深于标准溶液B 色斑呈色。
9.4注意事项
a) 假如标准溶液A 点样点变黑，说明层析板加热时间过长，需重新制备；
b) 对氨基苯甲醚是有毒物质，操作时注意不要和皮肤接触；
10 甲醇
10.1 仪器和设备
气相色谱仪：配有氢火焰离子化检测器。
10.2 试剂
甲醇标准品（色谱纯）、色谱纯正丙醇、色谱纯吡啶。
10.3试验步骤
参考色谱条件
a) 色谱柱：2.1m×4mm（内径）玻璃柱，内填充0.2mm~0.15mm 聚苯乙烯型色谱固定相；或其它等效色谱柱。
b) 载气：氮气或氦气。
c) 柱温：150℃。
d) 进样口温度：200℃。
e) 检测器温度：250℃。
f) 流速：20mL/min。
g) 进样量：0.2μL。
注：系统适用性为反复注入标准溶液两次，所得响应面积相对误差小于2.0％。
试验步骤
内标溶液制备：正确吸收1.0mL正丙醇，置于100mL 容量瓶中，用吡啶定容至刻度，摇匀。移取5mL 该溶液，置于500mL容量瓶中，用吡啶定容至刻度，摇匀。
标准溶液制备：正确吸收2.0mL甲醇，置于100mL容量瓶中，用内标溶液定容至刻度，摇匀。移取1.0mL该溶液，置于100mL容量瓶中，用内标溶液定容至刻度，摇匀。
试样液制备：称取约2g试样（正确至0.001g），用内标溶液溶解，移入10mL容量瓶中，用内标溶液定容至刻度，摇匀。
在10.3参考色谱条件下，分别对标准溶液和试样液进行测定，进样量为0.2μL，反复进样一次，计算出每次进样甲醇峰面积和内标物峰面积比值。
结果公式：
x=RU*0.00158RS*MU*100%
式中：
X——试样中甲醇含量，%；
RU——两次进样试样液中甲醇和内标物(正丙醇)峰面积之比平均值；
0.00158——标准溶液中甲醇浓度×甲醇密度×试样液体积（2×10-4×0.79×10）
RS——两次进样标准溶液中甲醇和内标物(正丙醇)峰面积之比平均值；
MU——称取试样质量，单位为克（g）。
试验结果以平行测定结果算术平均值为准。在反复性条件下取得两次独立测定结果绝对差值小于算术平均值10%。
10.4注意事项
a) 样品一定要称得正确；
b) 所使用烧杯、进样瓶、注射器等一定要洁净无污染。
11 重金属
11.1仪器
50mL纳氏比色管
11.2试剂
硝酸、硫酸、6mol/L盐酸、1mol/L盐酸、6mol/L氨水、1mol/L氨水、PH3.5乙酸盐缓冲液、酚酞指示液、饱和硫化氢水、铅标准溶液、1%硝酸
11.3试验步骤
试剂配制：
6mol/L盐酸：量取50mL盐酸，用水稀释至100mL。
1mol/L盐酸：量取8.3mL盐酸，用水稀释至100mL。
PH3.5乙酸盐缓冲液：称取25.0g乙酸铵溶于25mL水中，加入45mL6mol/L盐酸，用稀盐酸或稀氨水调整PH值至3.5，用水稀释至100mL。
酚酞指示液：1%乙醇溶液。
饱和硫化氢水：将硫化氢气体通入不含二氧化碳水中，至饱和为止（此溶液临用前制备）。
铅标准溶液：称取0.1598g高纯硝酸铅，溶于10mL1% 硝酸中，中定量移入100mL容量瓶中，用水稀释至刻度。此溶液1mL相当于1.0mg铅。临用前用水稀释至100倍，使成1.0mL相当于10ug铅（能够外购之）。
1%硝酸：取1mL硝酸加水稀释至100mL。
试样处理：
称取试样5.0g置于坩埚中，加入适量硫酸浸润试样，小火碳化后，加2mL硝酸和5滴硫酸，小心加热，直到白色烟雾挥尽，移入高温中，于550℃灰化完全，冷却后取出，加2mL 6mol/L盐酸浸润残渣，于水浴上慢慢蒸发至干。用1滴浓盐酸浸润残渣，并加10mL水，于水浴上再次加热2min ，将溶液移入50mL容量瓶中，，如有必需须过滤，用少许水洗涤坩埚和滤器，洗涤液一并移入容量瓶中，混匀，每10mL该溶液相当于1.0g试样。在试样灰化同时，另取一坩埚，按上述方法座试剂空白试验。
A管：吸收含铅量相当于指定种金属限量铅标准溶液（不低于10ug铅）于50mL纳氏比色管中（如试样经处理，须同时吸收和试样液等量试剂空白液），加水至25mL，混匀，加1滴酚酞指示液，用6mol/L稀盐酸或1mol/L稀氨水调整pH至中性（酚酞红色刚褪去），加入pH3.5乙酸盐缓冲液5mL，混匀，备用。
B管：取一支和A管所配套纳氏比色管，加入10mL-20mL（或适量）试样液，加水至25mL，混匀，加1滴1% 酚酞指示液，用6mol/L稀盐酸或1mol/L稀氨水调整pH至中性（酚酞红色刚褪去），加入pH3.5乙酸盐缓冲液5mL，混匀，备用。
C管：取一支和A、B所配套纳氏比色管，加入和B管等量相同试样液，再加入和A管等量铅标准溶液，加水至25mL，混匀，加1滴1% 酚酞指示液，用稀盐酸或稀氨水（6mol/L或1mol/L）调整pH至中性（酚酞红色刚褪去），加入pH3.5乙酸盐缓冲液5mL，混匀，备用。
向各管中加入10mL新鲜备制硫化氢饱和液，并加水至50mL刻度，混匀，于暗处放置5min后，在白色背景下观察，B管色度不得深于A管色度，C管色度应和A管色度相当或深于A管色度。
11.4注意事项：
a) 全部试剂全部在使用期内；
b) 所用玻璃仪器全部要用10%-20%硝酸浸泡24h以上，用自来水反复冲洗，最终用纯水冲洗；
c) 试验中利用强腐蚀实际时，注意安全，做好防护工作。
12 砷
12.1仪器
测砷装置
12.2试剂
5%溴化汞乙醇溶液、溴化汞试纸、硝酸、1+1硫酸、1mol/L硫酸、盐酸、20%氢氧化钠溶液、氧化镁、15%硝酸镁、15%碘化钾、40%氯化亚锡、无砷金属锌、酚酞指示液、10%乙酸铅、脱脂棉
12.3试验步骤
试剂配制：
溴化汞试纸：将剪成直径2cm圆形滤纸片，在5%溴化汞乙醇溶液中浸泡1h以上，保留于冰箱中，临用前取出置暗处阴干备用。
乙酸铅棉花：将脱脂棉浸于10%乙酸铅溶液中，2h后取出晾干。
40%氯化亚锡溶液：称取20g氯化亚锡，溶于50mL盐酸。
1+1硫酸：将1体积浓硫酸慢慢加入1体积水中，冷却后使用。
1mol/L硫酸：量取28mL浓硫酸，慢慢加入水中，用水稀释至500mL。
酚酞指示液：1%乙醇溶液。
砷标准溶液：称取0.1320g于硫酸干燥器中干燥至恒重三氧化二砷，溶于5mL20%氢氧化钠溶液中，溶解后，加入25mL1mol/L硫酸，移入1000mL容量瓶中，加新煮沸冷却水稀释至刻度。此溶液1.00mL相当于0.100g砷。临用前取1.0mL，加1.0mL1mol/L硫酸和100mL容量瓶中，加新煮沸冷却水稀释至刻度，此溶液1.0mL相当于1.0ug砷（能够外购之）。
试样处理：取5.0g试样于瓷坩埚中，加10mL15%硝酸镁溶液，加入1g氧化镁溶液，混匀，浸泡4h，于低温或水浴上蒸干，用小火加热至炭化完全，将坩埚移至高温炉中，在550℃以下灼烧至灰化完全，冷却后取出，加适量水湿润灰分，加入酚酞溶液数滴，再缓缓加入盐酸（1+1）溶液至酚酞红色褪去，然后将溶液移入50mL容量瓶中（必需时过滤），用少许水洗涤坩埚3次，洗涤并容量瓶中，加水至刻度，混匀。每10mL试样液相当于1.0g试样。取相同量氧化镁、硝酸镁、按上述方法做空白试验。
吸收一定量试样液和砷限量标准液（含砷1.0ug或2.0ug），分别置于锥形瓶中，加5mL盐酸（试样液中如含硫酸或盐酸，则要减去试样液中所含酸毫升数），加水至30mL，再加5mL15%碘化钾溶液，5滴40%氯化亚锡溶液，混匀，室温放置10min。
向上述锥形瓶中，各加入3g无砷金属锌，并立即塞上预先装有乙酸铅棉花及溴化汞试纸测砷装置，于25℃放置1h ,取出砷斑进行比较，试样砷斑不得深于砷限量标准砷斑。
12.4注意事项：
a) 全部试剂全部在使用期内；
b) 所用玻璃仪器全部要用10%-20%硝酸浸泡24h以上，用自来水反复冲洗，最终用纯水冲洗；
c) 试验中利用强腐蚀实际时，注意安全，做好防护工作。
13 颗粒度
13.1仪器
振筛仪、电子天平
13.2试剂
无
13.3试验步骤
称取10.0g样品，依据样品规格选择对应目数筛网，将样品倒置筛网上，盖好盖子。放置振筛仪上，并设置振筛时间为5分钟。振完后，依据样品规格分别称量筛网上、筛网下样品质量m。
计算公式：
m/10 *100%
13.4注意事项
依据样品规格要求，筛网上、筛网下样品质量不能弄混淆。

14 堆积密度
14.1仪器
10ml容量瓶、电子天平
14.2试剂
无
14.3试验步骤
将10ml容量瓶放置天平上，清零，然后将样品放置称量纸上倒入容量瓶中，力度均匀地摇摆40-50下，直至样品到容量瓶刻度线。放置天平称量，记下读数m。
计算公式：
m/10
14.4注意事项
一定要力度均匀慢慢地摇摆。
15 判别
在检测三氯蔗糖含量试验中，试样液在液相色谱图中主峰保留时间应和标准溶液中三氯蔗糖保留时间相同。
16 三苯氧磷
16.1 仪器和设备
高效液相色谱仪（配置紫外检测器）、天平
16.2试剂
色谱纯乙腈、三苯氧磷标准品。
16.3试验步骤
参考色谱条件
a) 色谱柱：C18 反相色谱柱，8mm×10cm，粒度5μm。
b) 流动相：将670mL 乙腈和330mL 水混合均匀后，用0.45μm 滤膜过滤，超声脱气后备用。
c) 柱温：室温。
d) 流动相流速: 1.5 mL/min。
e) 进样量：25μL。
f) 三苯氧磷保留时间：6min 左右，为确保取得所需保留时间，必需时能够调整流动相百分比。
标准溶液制备：正确称取0.1000g 三苯氧磷准品（正确至0.0001g），用流动性定溶到10mL容量瓶中，再从中移取1.0mL溶液用流动相定溶到100mL容量瓶，再把该溶液稀释100倍，所得溶液用0.45μm 滤膜过滤，滤液备用。
试样液制备：称取约0.1000试样（正确至0.0001g），统计下样品重量。用流动性定容到10mL容量瓶中，所得溶液用0.45μm 滤膜过滤，滤液备用。
在17.3 参考色谱条件下，分别对标准溶液和试样液进行测定，进样量为25 μL，反复进样一次，计算出其主峰面积平均值
计算公式：
x=At*10000AS*Wt
式中：
X—三苯氧磷含量；
At—三苯氧磷峰面积；
AS—样品峰面积；
Wt—样品称样量；mg。
16.4注意事项
a)系统适应性为反复注入标准溶液两次，所得对应面积相对误差小于2.0%；
b)进样时不得有气泡，而且进样速度保持匀稳推进。
17 细菌总数
17.1仪器
培养箱、电子天平、放大镜、无菌均质杯、无菌平皿、无菌吸管（无菌移液枪）
17.2试剂
磷酸盐缓冲液、营养琼脂
17.3试验步骤
17.3.1样品稀释和培养
称取10g样品置盛有90ml磷酸盐缓冲液无菌均质杯中，制成1：10样品匀液。
吸收1ml样品匀液于无菌平皿内，做平行样。同时，分别吸收1ml空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。立即将15ml-20ml冷却至46℃平板计数琼脂培养基倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。待琼脂凝固后，将平板翻转，36℃±1℃培养48小时±1小时。
17.3.2菌落计数：
可用肉眼观察，必需时用放大镜或菌落计数器，统计稀释倍数和对应菌落数量。菌落计数以菌落形成单位（CFU）表示。
a) 选择菌落数在30~300CFU之间、无蔓延菌落生长平板计数菌落总数。低于30CFU平板计录具体菌落数，大于300CFU可统计为多不可计。每个稀释度菌落数应采取两个平板平均数。
b) 其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采取，而应以无片状菌落生长平板作为该稀释度菌落数；若片状菌落不到平板二分之一，而其它二分之一中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2，代表一个平板菌落数。
c) 当平板上出现菌落间无显著界限链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数。
17.3.3菌落计数计算方法
平板上菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数平均值，再将平均值乘以对应稀释倍数，作为每g(ml)样品中菌落总数结果。
17.4注意事项
若空白对照上有菌落生长，则此次检验结果无效。
18 霉菌酵母菌
18.1仪器
培养箱、电子天平、放大镜、无菌均质杯、无菌平皿、无菌吸管（无菌移液枪）
18.2试剂
孟加拉红培养基
18.3试验步骤
18.3.1样品稀释和培养
称取10g样品置盛有90ml蒸馏水无菌均质杯中，制成1:10样品匀液。
吸收1ml样品匀液于无菌平皿内，做平行样。同时，分别吸收1ml空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。立即将15ml-20ml冷却至46℃孟加拉红培养基倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。待琼脂凝固后，将平板翻转，28℃±1℃培养5d，观察并统计。
18.3.2菌落计数：
可用肉眼观察，必需时用放大镜，统计各稀释倍数和对应霉菌和酵母菌数。以菌落形成单位（CFU）表示。
选择菌落数在10-150cfu平板，依据菌落形态分别计数霉菌和酵母菌。霉菌蔓延生长覆盖整个平板可统计为多不可计。菌落数应采取两个平板平均数。
18.3.3菌落计数计算方法
计算两个平板菌落数平均值，再将平均值乘以对应稀释倍数，作为每g(ml)样品中菌落总数结果。
18.4注意事项
若空白对照上有菌落生长，则此次检验结果无效。
19 铅
参考GB/T5009.75
20 溶液颜色和澄清度
20.1仪器
烧杯
20.2试剂
纯水
20.3试验步骤
样品制备：正确称取10g（正确至0.0002g）样品于100ml小烧杯中，加90ml纯水溶解。
溶液颜色和澄清度判别方法：在室内正常光线下，肉眼判别溶液颜色；在黑色背景下，肉眼判别澄清度；将溶液加热至80-100℃，还能够进行有没有絮状物生成检验。
20.4注意事项
a) 烧杯、纯水、操作过程要避免外界污染；
b) 1人判定不了时可组织多人参与判别。
21 口感
21.1仪器
万分之一电子天平、称量用匙和纸、磁力搅拌器和搅拌子、1000ML容量瓶多个
21.2试剂
三氯蔗糖样品和对照品（用户前期收到而且经过测试三氯蔗糖标准样）、蒸馏水或去离子水
21.3试验步骤
方法一
(1) 称取1.0g样品，溶解在1000mL净化水中。标为样品。
(2) 称取1.0g三氯蔗糖标准样，溶解在1000mL净化水中。标为标准品。
(3) 最少3个有经验品尝员去对比样品和标准品之间任何不良口感或气味差异。
方法二
对照品、样品制备和稀释
浓度：0.03g 三氯蔗糖溶于1000ml水。
样品制备和稀释
a)将称量纸放在天平上去皮
b)用一小匙，加样在称量纸上
c)将称量样品加到1000ML容量瓶
d)用蒸馏水或去离子水稀释至刻度并加搅拌子
e)在搅拌器上搅拌至全溶
f)得到30mg/L三氯蔗糖水溶液。
21.4注意事项
a)所取样品相对于物料要含有代表性。
b) 全部对照和试样宜新鲜配制立即品尝。
c)在反复品尝甜味后，因为对甜度适应，舌头敏感度很轻易降低，所以，口感
小组一次品尝溶液数不应该超出5个。假如有超出5个以上溶液要被评定，在批次之间应该有充足休息时间（3分钟或更长并用水漱口和吃饼干、胡桃仁）。
d)口感：纯品不尤其描述，稀释后有显著甜味和甜回味；缺点：纯品有苦味，显著金属味，低甜度，稀释后是苦味