物理图绘制省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx

第三章第三章 物理图绘制物理图绘制学习关键点：学习关键点：物理作图方法物理作图方法 各种方法优缺点各种方法优缺点第1页用遗传学技术作图对于指导基因组计划测序用遗传学技术作图对于指导基因组计划测序阶段还是远远不够，因为遗传图谱不足：阶段还是远远不够，因为遗传图谱不足：1.遗传图遗传图分辨率有限分辨率有限：依赖于所得到交换数：依赖于所得到交换数目。目。2.遗传图遗传图准确性较低准确性较低：重组热点存在。：重组热点存在。3.遗传图遗传图准确率有限准确率有限：环境原因和取样误差，：环境原因和取样误差，分子标识排列有时会出现差错。分子标识排列有时会出现差错。第2页物理图谱是以物理图谱是以物理距离物理距离来表示各遗传标识来表示各遗传标识之间或之间或DNA序列两点之间在序列两点之间在DNA分子上位分子上位置，以置，以实际碱基对长度实际碱基对长度来度量其物理距离。来度量其物理距离。第3页1）限制性作图限制性作图（Restriction mapping）：它是将限制它是将限制 性酶切位点标定在性酶切位点标定在DNA分子相对位置。分子相对位置。2）依靠克隆基因组作图依靠克隆基因组作图(Clone-based mapping)：依据克隆依据克隆DNA片段之间重合次序构建重合群片段之间重合次序构建重合群 (Contig),绘制物理连锁图。绘制物理连锁图。3）荧光原位杂交荧光原位杂交（Fluorescent in situ hybridization,FISH）：）：将荧光标识探针与染色将荧光标识探针与染色 体杂交确定分子标识所在位置。体杂交确定分子标识所在位置。4）序列标识位点作图序列标识位点作图（Sequence tagged site,STS）：经过经过PCR或分子杂交将小段或分子杂交将小段DNA序列定位在基因序列定位在基因 组组DNA区段中。区段中。物理图绘制方法第4页3.1 限制性作图限制性作图第5页3.1.1 限制性作图限制性作图-小分子小分子DNA第6页在连续出现在连续出现2个或多个相同酶切位点区段，其排列个或多个相同酶切位点区段，其排列序列可有各种选择，此时采取序列可有各种选择，此时采取部分酶切方法部分酶切方法使该使该区段只发生一次酶切，这称为部分限制作图。区段只发生一次酶切，这称为部分限制作图。第7页第8页部分限制作图为构建完整图谱提供了必须信息。部分限制作图为构建完整图谱提供了必须信息。但假如有多个限制位点，这种方法就显得力不从但假如有多个限制位点，这种方法就显得力不从心。尤其是内部含有大小相同片段时，重合片段心。尤其是内部含有大小相同片段时，重合片段无法区分，使排序变得非常复杂。无法区分，使排序变得非常复杂。一个较简单变通策略使我们能够忽略大量片段。一个较简单变通策略使我们能够忽略大量片段。这种方法是将标识物加到要分析这种方法是将标识物加到要分析DNA分子两端，分子两端，进行部分酶切处理后，很多产物成为进行部分酶切处理后，很多产物成为不可见不可见，我，我们利用们利用可见可见部分大小，确定那些未定位切点与部分大小，确定那些未定位切点与DNA分子末端相对位置。分子末端相对位置。第9页第10页1)制备制备-琼脂糖包埋法琼脂糖包埋法2)酶切酶切-稀有酶切位点限制酶稀有酶切位点限制酶3)分离分离-脉冲电泳分离脉冲电泳分离3.1.2 3.1.2 限制性作图局限限制性作图局限假如基因组较大，切点较多，单、双、部分假如基因组较大，切点较多，单、双、部分酶切片段会很多。酶切片段会很多。限制性作图只能应用于较小限制性作图只能应用于较小DNA分子。分子。大分子大分子DNA研究策略与方法：研究策略与方法：第11页 1.制备制备-琼脂糖包埋法琼脂糖包埋法1)分离纯化细胞核；分离纯化细胞核；2)将搜集细胞核包埋在琼脂糖将搜集细胞核包埋在琼脂糖 凝胶薄片中；凝胶薄片中；3)蛋白酶消化处理细胞核。蛋白酶消化处理细胞核。第12页2.稀有切点限制性内切酶应用稀有切点限制性内切酶应用1)稀有切点限制酶稀有切点限制酶：在基因组在基因组DNA序列中只有极序列中只有极少可识别序列限制酶，少可识别序列限制酶，普通识别位点在普通识别位点在6-8碱基碱基对之间对之间,并含有高并含有高G/C比。比。2)选取稀有切点限制酶注意事项：选取稀有切点限制酶注意事项：a)识别位点非特异序列，识别位点非特异序列，-G ANTC-(HinfI)，-GCCN4 NGCC-(BglI)b)高等生物基因组普通高等生物基因组普通A/T比较高，应选比较高，应选G/C 高百分比限制酶，如高百分比限制酶，如-GC GGCCGC-(NotI)c)基因组甲基化状态，人类基因组基因组甲基化状态，人类基因组DNA中中 5-CG-3序列较少。序列较少。第13页稀有切点限制酶第14页常常规规与与非非常常规规琼琼脂脂糖糖凝凝胶胶电电泳泳 正交变电场凝胶电泳正交变电场凝胶电泳3.脉冲凝胶电泳脉冲凝胶电泳第15页均一脉冲电泳第16页3.2 基于克隆基因组作图基于克隆基因组作图-大分子大分子DNA克隆克隆基于克隆基因组作图：基于克隆基因组作图：依据依据克隆克隆DNA片段片段之间重合序列之间重合序列构建重合群构建重合群(Contig)，绘制物理连锁图绘制物理连锁图。第17页3.2.1 克隆作图载体和方法克隆作图载体和方法常规质粒载体不适合用于大分子常规质粒载体不适合用于大分子DNA克隆。克隆。大分子大分子DNA克隆载体构建克隆载体构建:YAC,BAC,HAC,MAC第18页酵母人工染色体（YAC）端粒端粒：用于保护线状：用于保护线状 DNA 不被细胞内核酸酶降解，不被细胞内核酸酶降解，以形成稳定结构。以形成稳定结构。着丝粒着丝粒：有丝分裂过程中纺锤丝结合位点，：有丝分裂过程中纺锤丝结合位点，使染色使染色体在分裂过程中能正确分配到子细胞中体在分裂过程中能正确分配到子细胞中。在。在 YAC 中中起到确保一个细胞内只有一个人工染色体作用。起到确保一个细胞内只有一个人工染色体作用。自主复制序列：自主复制序列：一段特殊序列，含有酵母菌中一段特殊序列，含有酵母菌中 DNA 进行双向复制所必须信号。进行双向复制所必须信号。第19页YAC文库装载文库装载DNA片段大小普片段大小普通可达通可达 200-200-500kb500kb，有可达，有可达1Mb以上。以上。YAC 载体工作原理载体工作原理第20页YACYAC主要缺点：主要缺点：1 1存在高百分比嵌合体存在高百分比嵌合体，即一个，即一个YACYAC克隆含有两克隆含有两 个原来不相连独立片段；个原来不相连独立片段；2 2部分克隆子不稳定部分克隆子不稳定，在转代培养中可能会发，在转代培养中可能会发 生缺失或重排；生缺失或重排；3 3难与酵母染色体区分开难与酵母染色体区分开，因为，因为YACYAC与酵母染色与酵母染色 体含有相同结构体含有相同结构;4 4转化效率低。转化效率低。第21页细菌人工染色体（细菌人工染色体（BAC）：）：以细菌以细菌F F因子为基础，人因子为基础，人工构建环状工构建环状DNADNA分子。能够携带大于分子。能够携带大于100-350Kb100-350Kb外源外源DNADNA片段。片段。选择标识：氯霉素抗性基因等。选择标识：氯霉素抗性基因等。BACBAC载体优点：载体优点：较为稳定；没有嵌合现象；较为稳定；没有嵌合现象；转化效率高；转化效率高；BACBAC克隆易于操作和克隆易于操作和DNADNA提取；提取；BACBAC文库筛选方便。文库筛选方便。第22页基因组文库：基因组文库：指将基因组指将基因组DNA经过限制性内切经过限制性内切酶部分酶解后所产生基因组酶部分酶解后所产生基因组DNA片段随机片段随机同对应载体重组、克隆，所产生克隆群体同对应载体重组、克隆，所产生克隆群体代表了某种有机体整个基因组。代表了某种有机体整个基因组。1)目标基因组大分子目标基因组大分子DNA制备；制备；2)载体制备；载体制备；3)载体和载体和DNA连接；连接；4)转化；转化；5)转化子判定。转化子判定。YAC和和BAC基因组文库构建基因组文库构建第23页 目标基因组大分子目标基因组大分子DNADNA制备制备 样品样品洗涤吸干水分洗涤吸干水分液氮冷冻液氮冷冻碾碎碾碎离心搜集细胞核离心搜集细胞核低融点琼脂糖包埋低融点琼脂糖包埋蛋白酶消化蛋白酶消化洗涤洗涤限制酶部分酶解限制酶部分酶解第24页插插入入大大分分子子DNADNA分分离离第25页载体制备与插入载体制备与插入DNA连接连接1)YAC载体：载体：制备过程与普通质粒载体相同。制备过程与普通质粒载体相同。2)BAC载体：载体：低拷贝载体，大量制备，超离心纯化。低拷贝载体，大量制备，超离心纯化。3)酶切：酶切：释放接头，接头去磷，降低自连。释放接头，接头去磷，降低自连。4)连接：连接：将含有大分子将含有大分子DNA琼脂糖薄片与载体混合琼脂糖薄片与载体混合,按按重量比重量比1:1，680C保温保温 5 min，降温至，降温至370C，加，加入连接酶过夜。入连接酶过夜。第26页 思索题：思索题：怎样从单条染色体中制备出怎样从单条染色体中制备出DNA克隆文库？克隆文库？第27页染色体步移3.2.2 3.2.2 重合群组建重合群组建相互重合相互重合DNA片段组成物理图称为片段组成物理图称为重合群重合群(contig)。构建重合群：构建重合群：步移法和指纹法步移法和指纹法第28页 3.2.3 3.2.3 指纹作图指纹作图33种指纹种指纹在基因组范围内查找重合克隆，最好方法是克隆指纹排序。在基因组范围内查找重合克隆，最好方法是克隆指纹排序。指纹指克隆指纹指克隆DNA序列所含有特定序列所含有特定DNA片段组成片段组成。第29页限制性片段指纹作图原理第30页限制性片段指纹电泳图第31页指纹重合群构建第32页酵母基因组遗传图与物理图整合第33页3.3 染色体细胞图染色体细胞图细胞图细胞图：经过原位杂交方法将基因或：经过原位杂交方法将基因或DNA 分子分子标识定位在染色体某一区段，由此绘制图称为标识定位在染色体某一区段，由此绘制图称为细胞图。细胞图。最惯用细胞图绘制技术为荧光原位杂交。最惯用细胞图绘制技术为荧光原位杂交。（fluorescent in situ hybridization,FISH）原位杂交是以标识原位杂交是以标识DNA分子为探针，检测完整分子为探针，检测完整染色体一个杂交分析方法，染色体一个杂交分析方法，其必须使染色体其必须使染色体DNA 成为单链成为单链。第34页荧光原位杂交荧光原位杂交第35页一个一个封闭封闭杂交杂交探针探针中重中重复序复序列方列方法法第36页l 限制性作图不能用于大型基因组；l 克隆重合群复杂，费时费力；l FISH难于操作，数据积累慢。l目前最有效物理作图技术，也是能对大型基因l组产生最详尽图谱技术，是STS作图，主要为l辐射杂种作图。3.4 3.4 序列标签位点序列标签位点（Sequence tagged site,STSSequence tagged site,STS）作图作图第37页STS是一段短是一段短DNA序列，其长度通常为序列，其长度通常为100500bp。一段。一段DNA序列要成为序列要成为STS需满足两个需满足两个条件：条件：1.它序列必须是已知，便于它序列必须是已知，便于PCR检测；检测；2.STS必须在拟研究染色体上有唯一定位。必须在拟研究染色体上有唯一定位。第38页寻找寻找STS方法方法1）从）从EST序列中寻找序列中寻找2）SSLP3）随机基因组序列）随机基因组序列第39页1.STS在染色体上位置是确定。在染色体上位置是确定。2.两个不一样两个不一样STS出现在同一片段机会取决出现在同一片段机会取决 于它们在基因组中位置，彼此靠近，同于它们在基因组中位置，彼此靠近，同 时出现在同一片段机会就大，反之则小。时出现在同一片段机会就大，反之则小。辐射杂种辐射杂种作图原理作图原理第40页STS作图与连锁分析是一样，不一样之处仅在作图与连锁分析是一样，不一样之处仅在于两个标识间图距是依据于两个标识间图距是依据分离频率分离频率来计算。来计算。主要采取方法是辐射杂种作图。主要采取方法是辐射杂种作图。第41页辐射杂种（放射杂交体）辐射杂种（放射杂交体）：指含有另一个生物染色体指含有另一个生物染色体片段啮齿类细胞。片段啮齿类细胞。辐射杂种作图程序与方法第42页辐射杂种群辐射杂种群PCR 检测检测STS标识，依据成标识，依据成对对STS出现频率，判断标识出现频率，判断标识是否连锁及连锁程度是否连锁及连锁程度第43页辐射杂种图距单位 辐射杂种作图单位为辐射杂种作图单位为厘镭厘镭(centiRay,cR)：DNA分分子暴露在子暴露在N拉徳拉徳(rad)X射线剂量下两个分子标识之射线剂量下两个分子标识之间发生间发生1%断裂机率。断裂机率。利用类似于遗传重组原理和最大似然性统计学方法来利用类似于遗传重组原理和最大似然性统计学方法来计算存在于计算存在于DNA片段上片段上STS之间断点频率，以此预计标之间断点频率，以此预计标识之间距离。识之间距离。Statistical Methods for Multipoint Radiation Hybrid Mapping第44页人类人类21号染色体辐射杂种图号染色体辐射杂种图第45页人类人类2121号染色体辐射杂种物理图号染色体辐射杂种物理图第46页人类基因组物理图谱人类基因组物理图谱:人类基因组序列开始测定时，已经有人类基因组序列开始测定时，已经有4545万个万个ESTEST，其中有一些重复序列，经计算机分析筛选后，其中有一些重复序列，经计算机分析筛选后得到得到4962549625个。个。再从中筛选出再从中筛选出3 3万个万个ESTEST、2 2个辐射杂个辐射杂交系库（分别有交系库（分别有8383和和9393个细胞株）、个细胞株）、1 1个有个有3 3个克隆个克隆YACYAC文库，用于构建物理图谱。文库，用于构建物理图谱。构建物理图谱密度为每个标识构建物理图谱密度为每个标识183Kb183Kb。ESTEST分布分布结果表明，基因在染色体上排列是不均匀。结果表明，基因在染色体上排列是不均匀。将物理图谱和遗传图谱整合而成愈加完整人类将物理图谱和遗传图谱整合而成愈加完整人类基因组图谱，作为基因组测序框架和分析依据。基因组图谱，作为基因组测序框架和分析依据。第47页第48页 讨论：讨论：遗传图谱和物理图谱哪一个愈加有用？遗传图谱和物理图谱哪一个愈加有用？第49页图谱应用图谱应用-定位克隆（图位克隆）定位克隆（图位克隆）定位克隆定位克隆（positional cloning）：利用遗传连锁或细利用遗传连锁或细胞学定位技术将致病基因定位于染色体特定区带并胞学定位技术将致病基因定位于染色体特定区带并对目标基因进行克隆。对目标基因进行克隆。定位：定位：经过连锁分析找出与目标基因紧密连锁遗传经过连锁分析找出与目标基因紧密连锁遗传标识在染色体上位置。标识在染色体上位置。克隆：克隆：从定位染色体区段内分离克隆所要基因，并从定位染色体区段内分离克隆所要基因，并深入研究其功效。深入研究其功效。第50页第51页定位克隆主要目标之一是将目标基因定位于特定染色体上。A-1型短指（趾）症：法拉比（Farabee）19在他哈佛大学医学院博士毕业论文中首先报道了这一病症，即世界上第一例孟德尔常染色体显性遗传病，以后作为遗传学经典例子被全世界生物学和遗传学教材广泛引用。第52页贺林等利用布依贺林等利用布依族、苗族和汉族族、苗族和汉族三个三个A-1型短指型短指（趾）症大家系，（趾）症大家系，对该病致病基因对该病致病基因进行了准确定位进行了准确定位（位点定在（位点定在2q35-36区）、区）、克隆，并首次发克隆，并首次发觉了人觉了人IHH基因基因和该基因上三个和该基因上三个突变位点是造成突变位点是造成A-1型短指（趾）型短指（趾）症直接原因。症直接原因。第53页番茄抗病基因图位克隆第54页定位候选克隆定位候选克隆l该方法是定位克隆深入发展。该方法是定位克隆深入发展。l将疾病相关基因定位于染色将疾病相关基因定位于染色体相关区域；体相关区域；l该染色体区域得到若干候选该染色体区域得到若干候选基因；基因；l深入分析得到目标深入分析得到目标cDNAcDNA；l蛋白质功效研究。蛋白质功效研究。疾疾病病染色体定位染色体定位若干候选基若干候选基因因确定目基因蛋蛋白白质质功功效效第55页功效克隆功效克隆l克克隆隆（致致病病）基基因因另另一个策略。一个策略。l搜搜集集所所要要克克隆隆基基因因蛋蛋白白质质产产物物及及其其功功效效信信息息，用用以以分分离离基基因因，并对基因进行定位。并对基因进行定位。性状性状（疾病）（疾病）蛋白质产蛋白质产物（生物物（生物学功效）学功效）从氨基酸序列从氨基酸序列出发设计出发设计DNA引物，从引物，从文库调取基因文库调取基因得到基得到基因序列因序列染色体定染色体定位位疾病疾病功效功效基因基因第56页分析异常基因产物（蛋白质），分析异常基因产物（蛋白质），搞清它是如搞清它是如何引发临床症状何引发临床症状：纯化蛋白质，进行氨基酸序列测定，据此纯化蛋白质，进行氨基酸序列测定，据此推测可能核苷酸序列，合成寡核苷酸探针，推测可能核苷酸序列，合成寡核苷酸探针，然后用探针从然后用探针从cDNAcDNA文库或基因组文库中筛选对文库或基因组文库中筛选对应编码基因；应编码基因；绝大部分分子病、遗传性代谢缺点病如白绝大部分分子病、遗传性代谢缺点病如白化病化病（albinismalbinism）、苯丙酮尿症、苯丙酮尿症（PKUPKU）和镰刀形和镰刀形细胞贫血病细胞贫血病（sickle-cell diseasesickle-cell disease）等，都是采等，都是采取这一策略。取这一策略。第57页流式细胞仪计数仪流式细胞仪计数仪荧光染料对染色体荧光染料对染色体染色。染色。荧光探测器确定含荧光探测器确定含有正确染色体液滴有正确染色体液滴发出信号，并将一发出信号，并将一个电荷加到液滴上个电荷加到液滴上第58页Science：发觉新抑癌基因：发觉新抑癌基因SDH5郝淮湘博士从一个功效未知蛋白入手，郝淮湘博士从一个功效未知蛋白入手，发觉了一个疾病基因并说明了其分子发觉了一个疾病基因并说明了其分子功效和致病机理。功效和致病机理。SDH5,a Gene Required for Flavination of Succinate Dehydrogenase,Is Mutated in ParagangliomaHuai-Xiang Hao 1,Oleh Khalimonchuk 2,Margit Schraders 3,Noah Dephoure 4,Jean-Pierre Bayley 5,Henricus Kunst 6,Peter Devilee 7,Cor W.R.J.Cremers 6,Joshua D.Schiffman 8,Brandon G.Bentz 9,Steven P.Gygi 4,Dennis R.Winge 2,Hannie Kremer 3,Jared Rutter 1*第59页郝淮湘，一位在美国诺华生物郝淮湘，一位在美国诺华生物医学研究所接收博后训练医学研究所接收博后训练80后后大男孩，在大男孩，在Science上发表上发表了一篇漂亮研究性文章，文章了一篇漂亮研究性文章，文章被同期被同期Nature杂志推荐为亮点杂志推荐为亮点研究结果。研究结果。郝淮湘1999在厦门大学生命科学学院生物科学专业就读，最终一年在长江学者林圣彩教授试验室完成了本科毕业论文。8月来到美国犹他州盐湖城犹他大学就读，第二年加入医学院生物化学系Jared Rutter教授试验室，在其指导下进行博士论文研究，年5月答辩。年6月至今，在波士顿剑桥诺华生物医学研究所（Novartis Institutes for BioMedical Research）进行博士后训练。第60页生物通：作为一名生物通：作为一名8080后年轻人，您能够说十分年轻，就已经后年轻人，您能够说十分年轻，就已经取得生命科学领域博士学位，能谈谈您出国求学成长历程吗取得生命科学领域博士学位，能谈谈您出国求学成长历程吗？能够给我们青年读者介绍一下在美国学习感受吗？能够给我们青年读者介绍一下在美国学习感受吗？郝淮湘：郝淮湘：其实我拿到博士学位并不算早，花了快要六年（）其实我拿到博士学位并不算早，花了快要六年（），有些人四年多就博士毕业了。来美国后第一年主要是上课，有些人四年多就博士毕业了。来美国后第一年主要是上课和在四个试验室轮转（能够从快要和在四个试验室轮转（能够从快要100100个试验室选择）。这个试验室选择）。这边上课没有教科书，一门课多个教授讲课，很多时候都是直边上课没有教科书，一门课多个教授讲课，很多时候都是直接讲文件，一个部分上完就考一次试，记忆东西不多，主要接讲文件，一个部分上完就考一次试，记忆东西不多，主要是分析能力。第二年时候，我依据自己兴趣和对导师和课题是分析能力。第二年时候，我依据自己兴趣和对导师和课题判断加入了一个新成立试验室，跟年轻导师做研究即使会辛判断加入了一个新成立试验室，跟年轻导师做研究即使会辛劳一点，不过确实能学很多东西，也有机会了解怎样建立试劳一点，不过确实能学很多东西，也有机会了解怎样建立试验室和从头构思课题。在今后验室和从头构思课题。在今后5 5年里，我接触了多个研究项年里，我接触了多个研究项目，一些失败了，最终有两个得以发表，并顺利毕业。总体目，一些失败了，最终有两个得以发表，并顺利毕业。总体而言，我以为美国博士教育制度还是比较有效。而言，我以为美国博士教育制度还是比较有效。第61页生物通：生物通：在在ScienceScience上发表文章很不轻易，除了英语要过上发表文章很不轻易，除了英语要过关外，您还有什么忠言给读者吗？关外，您还有什么忠言给读者吗？郝淮湘：郝淮湘：英语确实很主要，但不是最主要，只要意思表英语确实很主要，但不是最主要，只要意思表示清楚就能够了，文章接收后编辑会帮助修改。我以为示清楚就能够了，文章接收后编辑会帮助修改。我以为最主要是课题创新性和意义，所以设计课题时候就应该最主要是课题创新性和意义，所以设计课题时候就应该多考虑这两个方面，把研究起点抬高。最终写文章时候，多考虑这两个方面，把研究起点抬高。最终写文章时候，也要尽可能突出这两方面，尤其是在投稿说明信（也要尽可能突出这两方面，尤其是在投稿说明信（cover cover letterletter）和文章摘要里。）和文章摘要里。第62页生物通：在您研究过程中，碰到最大难题是什么？您生物通：在您研究过程中，碰到最大难题是什么？您是怎样克服？是怎样克服？郝淮湘：郝淮湘：曾经有一段时间，曾经有一段时间，SDH5课题无法进行下去，课题无法进行下去，因为抑制子筛选（因为抑制子筛选（suppressor screen）只能找到）只能找到SDH5本身，而标识本身，而标识Sdh5蛋白又不溶，不能开展生化研究。蛋白又不溶，不能开展生化研究。我测试了最少十种去垢剂我测试了最少十种去垢剂(detergent)和不一样浓度，和不一样浓度，效果并不好，以后偶然发觉假如使用提纯线粒体，而效果并不好，以后偶然发觉假如使用提纯线粒体，而不是全细胞，不是全细胞，Sdh5蛋白就很易溶。这么终于能两步法蛋白就很易溶。这么终于能两步法提纯蛋白做质谱分析了，结果又发觉提纯蛋白做质谱分析了，结果又发觉Sdh5-TAP不能从不能从抗体珠子上洗脱，最终换成抗体珠子上洗脱，最终换成Sdh5-His-HA，才处理了问，才处理了问题，研究马上就有了突破。题，研究马上就有了突破。第63页生物通：在诺华生物医学研究所接收博后训练后，您对您生物通：在诺华生物医学研究所接收博后训练后，您对您未来职业有什么规划吗？未来职业有什么规划吗？郝淮湘：郝淮湘：我喜欢有应用价值研究，尤其是和疾病相关。我我喜欢有应用价值研究，尤其是和疾病相关。我之前研究之前研究PASKPASK激酶和肥胖与糖尿病相关，这次激酶和肥胖与糖尿病相关，这次SDH5SDH5是抑癌是抑癌基因。两个研究结果我们都申请了专利，希望未来能够成基因。两个研究结果我们都申请了专利，希望未来能够成为药品靶分子。诺华生物医学研究所博士后项目是一个很为药品靶分子。诺华生物医学研究所博士后项目是一个很独特机会，既能做很学术化研究，又能接触药品研发过程，独特机会，既能做很学术化研究，又能接触药品研发过程，和我研究理念很靠近。在这里完成博士后训练之后，我希和我研究理念很靠近。在这里完成博士后训练之后，我希望能到生物制药企业做研发。望能到生物制药企业做研发。第64页